현호색(Corydalis tuber) 중 주요 성분인 8가지 isoquinoline alkaloid의 동시 분리 분석을 위한 HPLC-UV 분석법을 확립하였다. Corydalis species (C. ternata, C. yanhusuo 및 C. decumbens)의 품질 관리를 위해 2종 aporphine alkaloid (isocorydine 및 glaucine), 그리고 6종 protoberberine alkaloid (coptisine, palmatine, ...
현호색(Corydalis tuber) 중 주요 성분인 8가지 isoquinoline alkaloid의 동시 분리 분석을 위한 HPLC-UV 분석법을 확립하였다. Corydalis species (C. ternata, C. yanhusuo 및 C. decumbens)의 품질 관리를 위해 2종 aporphine alkaloid (isocorydine 및 glaucine), 그리고 6종 protoberberine alkaloid (coptisine, palmatine, berberine, canadine, corydaline 및 tetrahydrocoptisine)을 지표 물질로 선정하였다. 한약의 품질 평가를 위한 이들 alkaloid를 분리 분석 하기 위해 HPLC를 이용해서 역상 C18 컬럼과 이동상의 pH 변화에 따른 LC상의 분리를 수행하였다. 이들 alkaloid의 분리는 기울기 용리 조건에서 이동상의 조성에 상당히 큰 영향을 받는다는 것을 확인하였다. 특히, C. yanhusuo 추출물의 경우, 이동상의 acetonitrile과 완충 용액의 조성에 따라 berberine은 이와 비슷한 소수성 성질(hydrophobic property)을 가진 다른 alkaloid와 분리가 되지 않을 수 있다는 것을 확인하였다. 그 결과, 이 화합물은 기울기 용리 조건에서 이동상 10 mM ammonium acetate 용액에 0.2% triethylamine 을 첨가하여 초산으로 pH 5.0로 맞춘 용액을 사용하였을 때, 28분 이내에 성공적으로 분리되는 것을 확인하였다. 현호색 시료를 추출하여 HPLC로 각 지표 물질을 검출하여 정량 분석 및 비교 분석을 하였다. 시중에 유통되는 23종의 현호색을 구입하여 이들의 alkaloid함량을 개발된 분석법에 의해 분석하였다. 이 때 얻어진 크로마토그래픽 데이터를 기반으로 주성분 분석법(principal component analysis, PCA)과 군집계통수(Hierarchical clustering analysis, HCA)의 통계분석을 이용하여 기원, 산지에 따른 한약재 분별 판정을 수행하였다. 또한 ESI-MS/MS를 이용하여 각 지표성분의 구조 분석을 수행하였다. 화합물의 구조 규명 연구는 alkaloid의 구조적 특성에 따라 미지의 alkaloid류의 구조분석에 활용될 수 있다.
현호색(Corydalis tuber) 중 주요 성분인 8가지 isoquinoline alkaloid의 동시 분리 분석을 위한 HPLC-UV 분석법을 확립하였다. Corydalis species (C. ternata, C. yanhusuo 및 C. decumbens)의 품질 관리를 위해 2종 aporphine alkaloid (isocorydine 및 glaucine), 그리고 6종 protoberberine alkaloid (coptisine, palmatine, berberine, canadine, corydaline 및 tetrahydrocoptisine)을 지표 물질로 선정하였다. 한약의 품질 평가를 위한 이들 alkaloid를 분리 분석 하기 위해 HPLC를 이용해서 역상 C18 컬럼과 이동상의 pH 변화에 따른 LC상의 분리를 수행하였다. 이들 alkaloid의 분리는 기울기 용리 조건에서 이동상의 조성에 상당히 큰 영향을 받는다는 것을 확인하였다. 특히, C. yanhusuo 추출물의 경우, 이동상의 acetonitrile과 완충 용액의 조성에 따라 berberine은 이와 비슷한 소수성 성질(hydrophobic property)을 가진 다른 alkaloid와 분리가 되지 않을 수 있다는 것을 확인하였다. 그 결과, 이 화합물은 기울기 용리 조건에서 이동상 10 mM ammonium acetate 용액에 0.2% triethylamine 을 첨가하여 초산으로 pH 5.0로 맞춘 용액을 사용하였을 때, 28분 이내에 성공적으로 분리되는 것을 확인하였다. 현호색 시료를 추출하여 HPLC로 각 지표 물질을 검출하여 정량 분석 및 비교 분석을 하였다. 시중에 유통되는 23종의 현호색을 구입하여 이들의 alkaloid함량을 개발된 분석법에 의해 분석하였다. 이 때 얻어진 크로마토그래픽 데이터를 기반으로 주성분 분석법(principal component analysis, PCA)과 군집계통수(Hierarchical clustering analysis, HCA)의 통계분석을 이용하여 기원, 산지에 따른 한약재 분별 판정을 수행하였다. 또한 ESI-MS/MS를 이용하여 각 지표성분의 구조 분석을 수행하였다. 화합물의 구조 규명 연구는 alkaloid의 구조적 특성에 따라 미지의 alkaloid류의 구조분석에 활용될 수 있다.
A simple and rapid analytical method was developed for the determination of eight isoquinoline
alkaloids in Corydalis species. Eight isoquinoline alkaloids, including 2 aporphine alkaloids
(isocorydine and glaucine) and 6 protoberberine alkaloids (coptisine, palmatine, berberine,
canadine, corydalin...
A simple and rapid analytical method was developed for the determination of eight isoquinoline
alkaloids in Corydalis species. Eight isoquinoline alkaloids, including 2 aporphine alkaloids
(isocorydine and glaucine) and 6 protoberberine alkaloids (coptisine, palmatine, berberine,
canadine, corydaline, and tetrahydrocoptisine) were used as chemical markers which have a
various biological activity and determined for quality control of Corydalis (C.) species (C.
ternata, C. yanhusuo and C. decumbens). To evaluate the quality of these herbal medicines, LC
chromatographic separation of alkaloids were preferentially investigated on reversed-phase C18
column with pH variation of mobile phase. In addition, the separation of these alkaloids in
herbal extracts was significantly affected on mobile phase composition using gradient elution.
Especially for C. yanhusuo extract, berberine can be overlapped with other alkaloid due to their
similar hydrophobicities according to portion of acetonitrile on mobile phase composition. As
results, these compounds were successfully separated within 28 min using 10mM ammonium
acetate containing 0.2% triethylamine (pH 5.0) as a mobile phase with gradient elution. On the
basis of optimized chromatographic conditions, the extracts of Corydalis species were analyzed
for the determination of alkaloid levels to differentiate C. species according to geographic
origins.
A simple and rapid analytical method was developed for the determination of eight isoquinoline
alkaloids in Corydalis species. Eight isoquinoline alkaloids, including 2 aporphine alkaloids
(isocorydine and glaucine) and 6 protoberberine alkaloids (coptisine, palmatine, berberine,
canadine, corydaline, and tetrahydrocoptisine) were used as chemical markers which have a
various biological activity and determined for quality control of Corydalis (C.) species (C.
ternata, C. yanhusuo and C. decumbens). To evaluate the quality of these herbal medicines, LC
chromatographic separation of alkaloids were preferentially investigated on reversed-phase C18
column with pH variation of mobile phase. In addition, the separation of these alkaloids in
herbal extracts was significantly affected on mobile phase composition using gradient elution.
Especially for C. yanhusuo extract, berberine can be overlapped with other alkaloid due to their
similar hydrophobicities according to portion of acetonitrile on mobile phase composition. As
results, these compounds were successfully separated within 28 min using 10mM ammonium
acetate containing 0.2% triethylamine (pH 5.0) as a mobile phase with gradient elution. On the
basis of optimized chromatographic conditions, the extracts of Corydalis species were analyzed
for the determination of alkaloid levels to differentiate C. species according to geographic
origins.
Keyword
#현호색
#한약재
#알카로이드
#고성능 액체 크로마토그래피
#함량 모니터링
#품질 관리
#구조 분석
학위논문 정보
저자
김은경
학위수여기관
경희대학교 대학원
학위구분
국내석사
학과
나노의약생명과학과
지도교수
홍종기
발행연도
2011
총페이지
37 p.
키워드
현호색,
한약재,
알카로이드,
고성능 액체 크로마토그래피,
함량 모니터링,
품질 관리,
구조 분석
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