레티노이드산은 비타민A의 구조적 및 기능적 유사체이다. 최근 레티노이드산의 역할에 주목하여 다양한 영역에서 치료 목적의 연구가 진행되고 있으며, 창상 치유 영역에서도 활용되고 있는데, 레티노이드산의 상처 치유 과정에서의 기전 및 효과에 대해서는 아직 정확히 밝혀지지 않은 상태이다. 기존의 많은 연구들이 있지만 서로 상반된 결과를 보이고 있는 가운데, 본 연구에서는 창상 치유 과정 중 신생 혈관 형성에 중요한 역할을 담당하는 혈관 내피세포와 레티노이드산과의 작용 관계를 ...
레티노이드산은 비타민A의 구조적 및 기능적 유사체이다. 최근 레티노이드산의 역할에 주목하여 다양한 영역에서 치료 목적의 연구가 진행되고 있으며, 창상 치유 영역에서도 활용되고 있는데, 레티노이드산의 상처 치유 과정에서의 기전 및 효과에 대해서는 아직 정확히 밝혀지지 않은 상태이다. 기존의 많은 연구들이 있지만 서로 상반된 결과를 보이고 있는 가운데, 본 연구에서는 창상 치유 과정 중 신생 혈관 형성에 중요한 역할을 담당하는 혈관 내피세포와 레티노이드산과의 작용 관계를 생체외 (in vitro) 환경에서 알아보았다. 인체 제대정맥으로부터 분리 배양된 내피세포 HUVECs(Human umbilical vein endothelial cells)을 다양한 농도의 트랜스레티노이드산(all-trans-retinoic acid)으로 처리한 후 세포의 증식여부를 확인하였다. In vitro에서의 세포증식 실험을 위해 all-trans-retinoic acid의 처리 농도는 103 ng/mL부터 1/10씩 희석시켜 1 ng/mL까지 4가지의 농도로 각각 처리하여 대조군과 4가지 실험군을 동일한 조건으로 만든 후, 매일 1% FBS 배지를 교체하며 all-trans-retinoic acid 실험군에서 all-trans-retinoic acid의 농도별, 실험 후 시간별로 각각 흡광도를 측정하여 all-trans-retinoic acid에 의한 HUVECs의 증식 여부를 확인하였다. 또한 103 ng/mL의 all-trans-retinoic acid와 함께 창상 치유 촉진제인 PDRN (Polydeoxyribonucleotide)을 각각 100μg/mL 및 1000μg/mL의 농도로 배지에 투여한 후 흡광도를 측정하여 HUVECs의 증식 여부도 확인하였다. 같은 실험과정을 7회 시행하여 결과를 평균한 후 통계적으로 분석하였다. 대조군과 1, 10, 102, 103 ng/mL의 농도로 all-trans-retinoic acid을 처리한 군에서 0, 1, 2, 3, 7, 8, 9일째에 측정된 흡광도를 평균한 결과 모든 군은 2일째에 가장 높은 흡광도를 보였고 이 후 흡광도의 감소 추세를 보였다. 각 시점에서 대조군과 실험군 간 비교에서 모든 실험군은 2일째부터 실험을 마친 9일째까지 대조군에 비하여 낮은 흡광도를 보였고, 각 실험군 간을 비교했을 때 all-trans-retinoic acid의 농도가 높을수록 흡광도는 낮게 측정되어 all-trans-retinoic acid의 농도와 혈관 내피세포 활성은 반비례하는 것을 알 수 있었다.(p < 0.05) 이러한 all-trans-retinoic acid의 혈관 내피세포 활성 억제효과는 창상 치유 촉진제인 PDRN을 각각 100μg/mL 및 1000μg/mL 씩 투여한 후 시행한 흡광도 측정에서도 확인할 수 있었다.(p < 0.05) 결론적으로, all-trans-retinoic acid은 혈관 내피세포의 증식을 억제하는 효과를 가지며, 그 농도가 증가함에 따라 억제 효과는 큰 것으로 나타났다. 혈관 내피세포는 증식과 이동 등의 기전을 통해 창상 치유 과정에서 응고, 지혈 및 신생혈관 형성 등에 중요하게 관여하기 때문에 이러한 결과는 레티노이드산이 창상 치유를 지연시킬 수 있음을 시사한다.
레티노이드산은 비타민A의 구조적 및 기능적 유사체이다. 최근 레티노이드산의 역할에 주목하여 다양한 영역에서 치료 목적의 연구가 진행되고 있으며, 창상 치유 영역에서도 활용되고 있는데, 레티노이드산의 상처 치유 과정에서의 기전 및 효과에 대해서는 아직 정확히 밝혀지지 않은 상태이다. 기존의 많은 연구들이 있지만 서로 상반된 결과를 보이고 있는 가운데, 본 연구에서는 창상 치유 과정 중 신생 혈관 형성에 중요한 역할을 담당하는 혈관 내피세포와 레티노이드산과의 작용 관계를 생체외 (in vitro) 환경에서 알아보았다. 인체 제대정맥으로부터 분리 배양된 내피세포 HUVECs(Human umbilical vein endothelial cells)을 다양한 농도의 트랜스레티노이드산(all-trans-retinoic acid)으로 처리한 후 세포의 증식여부를 확인하였다. In vitro에서의 세포증식 실험을 위해 all-trans-retinoic acid의 처리 농도는 103 ng/mL부터 1/10씩 희석시켜 1 ng/mL까지 4가지의 농도로 각각 처리하여 대조군과 4가지 실험군을 동일한 조건으로 만든 후, 매일 1% FBS 배지를 교체하며 all-trans-retinoic acid 실험군에서 all-trans-retinoic acid의 농도별, 실험 후 시간별로 각각 흡광도를 측정하여 all-trans-retinoic acid에 의한 HUVECs의 증식 여부를 확인하였다. 또한 103 ng/mL의 all-trans-retinoic acid와 함께 창상 치유 촉진제인 PDRN (Polydeoxyribonucleotide)을 각각 100μg/mL 및 1000μg/mL의 농도로 배지에 투여한 후 흡광도를 측정하여 HUVECs의 증식 여부도 확인하였다. 같은 실험과정을 7회 시행하여 결과를 평균한 후 통계적으로 분석하였다. 대조군과 1, 10, 102, 103 ng/mL의 농도로 all-trans-retinoic acid을 처리한 군에서 0, 1, 2, 3, 7, 8, 9일째에 측정된 흡광도를 평균한 결과 모든 군은 2일째에 가장 높은 흡광도를 보였고 이 후 흡광도의 감소 추세를 보였다. 각 시점에서 대조군과 실험군 간 비교에서 모든 실험군은 2일째부터 실험을 마친 9일째까지 대조군에 비하여 낮은 흡광도를 보였고, 각 실험군 간을 비교했을 때 all-trans-retinoic acid의 농도가 높을수록 흡광도는 낮게 측정되어 all-trans-retinoic acid의 농도와 혈관 내피세포 활성은 반비례하는 것을 알 수 있었다.(p < 0.05) 이러한 all-trans-retinoic acid의 혈관 내피세포 활성 억제효과는 창상 치유 촉진제인 PDRN을 각각 100μg/mL 및 1000μg/mL 씩 투여한 후 시행한 흡광도 측정에서도 확인할 수 있었다.(p < 0.05) 결론적으로, all-trans-retinoic acid은 혈관 내피세포의 증식을 억제하는 효과를 가지며, 그 농도가 증가함에 따라 억제 효과는 큰 것으로 나타났다. 혈관 내피세포는 증식과 이동 등의 기전을 통해 창상 치유 과정에서 응고, 지혈 및 신생혈관 형성 등에 중요하게 관여하기 때문에 이러한 결과는 레티노이드산이 창상 치유를 지연시킬 수 있음을 시사한다.
Retinoids are structural and functional analogues of vitamin A. Although many recent studies are focusing on the role of retinoids as a treatment option in various medical fields, especially in wound healing, the exact principle and effect of retinoids in wound healing process remains unclear. The p...
Retinoids are structural and functional analogues of vitamin A. Although many recent studies are focusing on the role of retinoids as a treatment option in various medical fields, especially in wound healing, the exact principle and effect of retinoids in wound healing process remains unclear. The purpose of this study was to examine the in vitro effect of retinoids on vascular endothelial cell, that playing an important role in angiogenesis of wound healing process. We have investigated the proliferative activiy of human umbilical vein endothelial cells(HUVECs) in various concentrations of all-trans-retinoic acids in culture. The cells were treated with 4 different concentrations of all-trans-retinoic acids from 1 to 103 ng/mL in 1% fetal bovine serum(FBS) medium. The proliferation activiy of HUVECs was assessed by directly counting the cell population using Cell Counting Kit-8(CCK-8) and measuring the absorbance at 450nm. We have also assessed the proliferation activiy of HUVECs after adding 100μg/mL and 1000μg/mL of PDRN (Polydeoxyribonucleotide) with 103 ng/mL of all-trans-retinoic acid in the medium. The statistical analysis was done after 7 times of repeated experiments. The absorbances in each group were measured at the time of 0, 1, 2, 3, 7, 8, and 9 days after all-trans-retinoic acid treatment and showed the highest at day 2 followed by decreasing tendency. Every group with all-trans-retinoic acid showed lower absorbance than the control group from day 2 through day 9 and cell proliferation decreased with increasing concentrations of all-trans-retinoic acid.(p < 0.05) The decreased proliferation activity was also showed in the medium treated with all-trans-retinoic acid and PDRN, a wound healing promoter.(p < 0.05) Consequently, all-trans-retinoic acid inhibits the proliferation of endothelial cells, and is concentration dependent. As vascular endothelial cells play key role in coagulation, hemostasis and angiogenesis of wound healing process, the retinoic acid may delay the wound healing.
Retinoids are structural and functional analogues of vitamin A. Although many recent studies are focusing on the role of retinoids as a treatment option in various medical fields, especially in wound healing, the exact principle and effect of retinoids in wound healing process remains unclear. The purpose of this study was to examine the in vitro effect of retinoids on vascular endothelial cell, that playing an important role in angiogenesis of wound healing process. We have investigated the proliferative activiy of human umbilical vein endothelial cells(HUVECs) in various concentrations of all-trans-retinoic acids in culture. The cells were treated with 4 different concentrations of all-trans-retinoic acids from 1 to 103 ng/mL in 1% fetal bovine serum(FBS) medium. The proliferation activiy of HUVECs was assessed by directly counting the cell population using Cell Counting Kit-8(CCK-8) and measuring the absorbance at 450nm. We have also assessed the proliferation activiy of HUVECs after adding 100μg/mL and 1000μg/mL of PDRN (Polydeoxyribonucleotide) with 103 ng/mL of all-trans-retinoic acid in the medium. The statistical analysis was done after 7 times of repeated experiments. The absorbances in each group were measured at the time of 0, 1, 2, 3, 7, 8, and 9 days after all-trans-retinoic acid treatment and showed the highest at day 2 followed by decreasing tendency. Every group with all-trans-retinoic acid showed lower absorbance than the control group from day 2 through day 9 and cell proliferation decreased with increasing concentrations of all-trans-retinoic acid.(p < 0.05) The decreased proliferation activity was also showed in the medium treated with all-trans-retinoic acid and PDRN, a wound healing promoter.(p < 0.05) Consequently, all-trans-retinoic acid inhibits the proliferation of endothelial cells, and is concentration dependent. As vascular endothelial cells play key role in coagulation, hemostasis and angiogenesis of wound healing process, the retinoic acid may delay the wound healing.
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