닭 콕시듐증(Avian coccidiosis)은 첨복포자충문(Apicomplexia)에 속하는 Eimeria spp.가 닭에 감염되는 가장 일반적인 질병이다. 닭에 감염되는 Eimeria 는 자연계에 약 9종이 알려져 있으며 닭 콕시듐증은 분변에 존재하는 Eimeria 의 원충(oocysts)을 섭취하여 감염된다. 닭 Eimeira 는 종에 따라서 소장과 대장의 상피세포에 침입하여 증식함으로써 장관내의 조직손상을 일으켜 설사와 장염을 유발하며, 특히 육계농장에서 사료효율저하, 면역저하, 장 점막의 손상 및 심하면 폐사를 일으키는 등 경제적인 피해를 야기하는 원충성 질병이다. 때로는 면역 억제성 질병(감보로, ...
닭 콕시듐증(Avian coccidiosis)은 첨복포자충문(Apicomplexia)에 속하는 Eimeria spp.가 닭에 감염되는 가장 일반적인 질병이다. 닭에 감염되는 Eimeria 는 자연계에 약 9종이 알려져 있으며 닭 콕시듐증은 분변에 존재하는 Eimeria 의 원충(oocysts)을 섭취하여 감염된다. 닭 Eimeira 는 종에 따라서 소장과 대장의 상피세포에 침입하여 증식함으로써 장관내의 조직손상을 일으켜 설사와 장염을 유발하며, 특히 육계농장에서 사료효율저하, 면역저하, 장 점막의 손상 및 심하면 폐사를 일으키는 등 경제적인 피해를 야기하는 원충성 질병이다. 때로는 면역 억제성 질병(감보로, 레오바이러스, 마렉병 등) 및 세균성 질병과 동시에 감염되어 큰 손실을 일으켜 전세계적으로 양계산업에 심각한 피해를 초래한다. 국내에서는 콕시듐증 감염의 예방과 치료를 위해 외국백신의 사용과 항콕시듐제의 첨가로 경제적 피해를 유발하고 있다. 또한 2020년에는 국내에서 항콕시듐제 사용이 전면 금지 될 예정이다. 그러나 국내에서는 아직까지 콕시듐 생 백신을 제조하지 못하고 있어 국내 콕시듐 생 백신 개발이 절실하게 필요할 때이다. 콕시듐 생 백신을 사용하기 위해서는 한 종류의 순수 분리된 Eimeria 가 필요하다. 그 이유는 각각의 Eimeira 종은 서로 교차면역을 형성하지 않기 때문이다. 일반적으로 닭에는 동시에 2종 이상의 Eimeria 가 감염되어 있기 때문에 한 종류의 Eimeria 를 확보하는 것이 쉽지 않다. 그래서 한 종류의 순수 분리된 Eimeria 를 확보하기 위해 Eimeria 를 한계 희석한 다음 현미경 미세 조작법으로 Eimeria 를 개별적으로 순수 분리 하였다. 이 간단한 방법은 아주 빠르고 신뢰할 만하여, 다양한 Eimeria 종의 증식 혹은, 다른 기생충 종류들에 의한 샘플들의 오염으로부터 개별적으로 증식된 원충을 직접적으로 분리할 수 있는 방법이다. 9종의 Eimeira 중에서 가장 병원성이 큰 4종의 Eimeria 원충 E. acervulina, E. tenella, E. maxima, E. necatrix 를 순수 분리하였고, 생 백신을 제조하기 위해 닭에 계대 배양하여 각각 증폭시켰으며, 증폭시킨 4종의 Eimeria 원충은 타 Eimeira 가 오염이 되지 않도록 동결하여 보관하였다. 증폭시킨 Eimeria 원충은 2.5% Potassium dichromate 를 사용하여 생 백신을 제조하였으며, 제조된 백신은 10일령 닭에 접종하여 방어면역효과 시험, 증체율, 생존율, 장병변율을 확인하였다. 그 결과 87.5%의 방어면역효과를 보였으며, 증체율, 생존율, 장병변율은 무접종 대조군과 유사한 결과를 얻을 수 있었다. 따라서 본 연구는 Eimeria 의 생 백신을 제조하기 위해 간편한 Eiemria 의 분리 방법의 개발과 항콕시듐제를 대신할 생 백신을 제조하여 유효성 평가를 구축하고 향후 항콕시듐제 대체를 위한 기초를 연구하였다.
닭 콕시듐증(Avian coccidiosis)은 첨복포자충문(Apicomplexia)에 속하는 Eimeria spp.가 닭에 감염되는 가장 일반적인 질병이다. 닭에 감염되는 Eimeria 는 자연계에 약 9종이 알려져 있으며 닭 콕시듐증은 분변에 존재하는 Eimeria 의 원충(oocysts)을 섭취하여 감염된다. 닭 Eimeira 는 종에 따라서 소장과 대장의 상피세포에 침입하여 증식함으로써 장관내의 조직손상을 일으켜 설사와 장염을 유발하며, 특히 육계농장에서 사료효율저하, 면역저하, 장 점막의 손상 및 심하면 폐사를 일으키는 등 경제적인 피해를 야기하는 원충성 질병이다. 때로는 면역 억제성 질병(감보로, 레오바이러스, 마렉병 등) 및 세균성 질병과 동시에 감염되어 큰 손실을 일으켜 전세계적으로 양계산업에 심각한 피해를 초래한다. 국내에서는 콕시듐증 감염의 예방과 치료를 위해 외국백신의 사용과 항콕시듐제의 첨가로 경제적 피해를 유발하고 있다. 또한 2020년에는 국내에서 항콕시듐제 사용이 전면 금지 될 예정이다. 그러나 국내에서는 아직까지 콕시듐 생 백신을 제조하지 못하고 있어 국내 콕시듐 생 백신 개발이 절실하게 필요할 때이다. 콕시듐 생 백신을 사용하기 위해서는 한 종류의 순수 분리된 Eimeria 가 필요하다. 그 이유는 각각의 Eimeira 종은 서로 교차면역을 형성하지 않기 때문이다. 일반적으로 닭에는 동시에 2종 이상의 Eimeria 가 감염되어 있기 때문에 한 종류의 Eimeria 를 확보하는 것이 쉽지 않다. 그래서 한 종류의 순수 분리된 Eimeria 를 확보하기 위해 Eimeria 를 한계 희석한 다음 현미경 미세 조작법으로 Eimeria 를 개별적으로 순수 분리 하였다. 이 간단한 방법은 아주 빠르고 신뢰할 만하여, 다양한 Eimeria 종의 증식 혹은, 다른 기생충 종류들에 의한 샘플들의 오염으로부터 개별적으로 증식된 원충을 직접적으로 분리할 수 있는 방법이다. 9종의 Eimeira 중에서 가장 병원성이 큰 4종의 Eimeria 원충 E. acervulina, E. tenella, E. maxima, E. necatrix 를 순수 분리하였고, 생 백신을 제조하기 위해 닭에 계대 배양하여 각각 증폭시켰으며, 증폭시킨 4종의 Eimeria 원충은 타 Eimeira 가 오염이 되지 않도록 동결하여 보관하였다. 증폭시킨 Eimeria 원충은 2.5% Potassium dichromate 를 사용하여 생 백신을 제조하였으며, 제조된 백신은 10일령 닭에 접종하여 방어면역효과 시험, 증체율, 생존율, 장병변율을 확인하였다. 그 결과 87.5%의 방어면역효과를 보였으며, 증체율, 생존율, 장병변율은 무접종 대조군과 유사한 결과를 얻을 수 있었다. 따라서 본 연구는 Eimeria 의 생 백신을 제조하기 위해 간편한 Eiemria 의 분리 방법의 개발과 항콕시듐제를 대신할 생 백신을 제조하여 유효성 평가를 구축하고 향후 항콕시듐제 대체를 위한 기초를 연구하였다.
Avian coccidiosis is the most general disease, in which a chicken is infected with Eimeria spp. belonging to Apicomplexia. There are about 9 species of Eimeria, which infects a chicken, in the natural world, and a chicken is infected with Avian coccidiosis by taking in the oocysts of Eimeria existin...
Avian coccidiosis is the most general disease, in which a chicken is infected with Eimeria spp. belonging to Apicomplexia. There are about 9 species of Eimeria, which infects a chicken, in the natural world, and a chicken is infected with Avian coccidiosis by taking in the oocysts of Eimeria existing in feces. Avian Eimeria arouses diarrhea and enteritis by doing damage to the intestinal tissue through multiplication by infiltrating into the epithelial cell of small & large intestines; particularly, Avian coccidiosis is the oocyst-borne disease which causes the economic damage, such as feed efficiency decline, immunity deterioration, damage to intestinal mucous membrane and in severe cases, causing a perish of chickens, etc. at a broiler farm. Sometimes, Avian coccidiosis causes concurrent infection of immuno-suppressive diseases (Gumboro, reovirus, Marek's disease, etc.) and bacterial diseases, which incur serious damage to poultry farming around the globe. In the nation, the use of foreign vaccine and addition of anticoccidial drug for prevention of coccidiosis and its treatment are arousing economic damage. Moreover, in 2020, the use of anticoccidial drug will be under overall prohibition in the nation. However, a live vaccine against coccidiosis has not been developed as yet in the nation, and thus, now is the urgent time for us to develop a domestic live vaccine against coccidiosis. In order to use a live vaccine against coccidiosis, there is the need for Eimeria which is purely isolated in one sort. It's because individual Eimeria species don't form cross-immunity with each other. Generally, a chicken is infected with more than 2 species of Eimeria, so it's not easy to secure one sort of Eimeria. That's why this study did individual isolation of Eimeria using the micro manipulation of the microscope after doing limiting dilution of Eimeria in a bid to secure one sort of isolated Eimeria. This simple method is fast and reliable, and this method makes it possible to directly isolate the individually multiplied oocyst from proliferation of Eimeria species, or the samples polluted by other types of parasite. This study isolated 4 types of Eimeria oocyst, i.e. E. acervulina, E. tenella, E. maxima, E. necatrix ,whose pathogenicity was the biggest, among 9 types of Eimeria; in addition, this study, in order to manufacture a live vaccine, amplified them individually by doing subculture of them into a chicken, and put the amplified 4 types of Eimeria oocyst in frozen storage lest other Eimeria should be contaminated. Then, this study manufactured the amplified Eimeria oocysts into a live vaccine using 2.5% Potassium dichromate, and innoculated 10-day-old chickens with the manufactured vaccine to confirm its protective immunity effect test, rate of gain, survival rate, and intestinal lesion rate. As a result, it showed 87.5% protective immunity effect, and this study was able to obtain the similar results to the non-inoculation control group in case of the rate of gain, survival rate, and intestinal lesion rate. Accordingly, it can be safely said that this study developed the method of Eimeria isolation in order to manufacture a live vaccine against Eimeria, constructed effectiveness evaluation by manufacturing a live vaccine that would replace an anticoccidial drug, and arranged the basis for substitution for an anticoccidial drug for the time to come.
Avian coccidiosis is the most general disease, in which a chicken is infected with Eimeria spp. belonging to Apicomplexia. There are about 9 species of Eimeria, which infects a chicken, in the natural world, and a chicken is infected with Avian coccidiosis by taking in the oocysts of Eimeria existing in feces. Avian Eimeria arouses diarrhea and enteritis by doing damage to the intestinal tissue through multiplication by infiltrating into the epithelial cell of small & large intestines; particularly, Avian coccidiosis is the oocyst-borne disease which causes the economic damage, such as feed efficiency decline, immunity deterioration, damage to intestinal mucous membrane and in severe cases, causing a perish of chickens, etc. at a broiler farm. Sometimes, Avian coccidiosis causes concurrent infection of immuno-suppressive diseases (Gumboro, reovirus, Marek's disease, etc.) and bacterial diseases, which incur serious damage to poultry farming around the globe. In the nation, the use of foreign vaccine and addition of anticoccidial drug for prevention of coccidiosis and its treatment are arousing economic damage. Moreover, in 2020, the use of anticoccidial drug will be under overall prohibition in the nation. However, a live vaccine against coccidiosis has not been developed as yet in the nation, and thus, now is the urgent time for us to develop a domestic live vaccine against coccidiosis. In order to use a live vaccine against coccidiosis, there is the need for Eimeria which is purely isolated in one sort. It's because individual Eimeria species don't form cross-immunity with each other. Generally, a chicken is infected with more than 2 species of Eimeria, so it's not easy to secure one sort of Eimeria. That's why this study did individual isolation of Eimeria using the micro manipulation of the microscope after doing limiting dilution of Eimeria in a bid to secure one sort of isolated Eimeria. This simple method is fast and reliable, and this method makes it possible to directly isolate the individually multiplied oocyst from proliferation of Eimeria species, or the samples polluted by other types of parasite. This study isolated 4 types of Eimeria oocyst, i.e. E. acervulina, E. tenella, E. maxima, E. necatrix ,whose pathogenicity was the biggest, among 9 types of Eimeria; in addition, this study, in order to manufacture a live vaccine, amplified them individually by doing subculture of them into a chicken, and put the amplified 4 types of Eimeria oocyst in frozen storage lest other Eimeria should be contaminated. Then, this study manufactured the amplified Eimeria oocysts into a live vaccine using 2.5% Potassium dichromate, and innoculated 10-day-old chickens with the manufactured vaccine to confirm its protective immunity effect test, rate of gain, survival rate, and intestinal lesion rate. As a result, it showed 87.5% protective immunity effect, and this study was able to obtain the similar results to the non-inoculation control group in case of the rate of gain, survival rate, and intestinal lesion rate. Accordingly, it can be safely said that this study developed the method of Eimeria isolation in order to manufacture a live vaccine against Eimeria, constructed effectiveness evaluation by manufacturing a live vaccine that would replace an anticoccidial drug, and arranged the basis for substitution for an anticoccidial drug for the time to come.
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