황화수소는 (H2S)는 유독가스이지만, 일산화탄소나 일산화질소와 같이 여러 질병에서 기체신호전달물질 중 하나로 알려져있다. 그래서, 생체 내 발생되는 미량의 황화수소에 응답속도가 빠른, 고도의 민감성과 ...
황화수소는 (H2S)는 유독가스이지만, 일산화탄소나 일산화질소와 같이 여러 질병에서 기체신호전달물질 중 하나로 알려져있다. 그래서, 생체 내 발생되는 미량의 황화수소에 응답속도가 빠른, 고도의 민감성과 특이성이 있는 프로브를 개발하는 것은 중요한 목표이다. 황화수소 탐지의 여러 기술 중에서, 형광프로브 기법은 비칩습성이고, 민감도 및 선택성이 뛰어나고, 세포수준에서도 빠르게 반응한다. 구리사이클린덴실은 여러 다양한 바이오-시올종, 활성산소종 및 반응성질소종들에 반하여, 황화수소를 탐지하는데 높은 선택성을 보여주었다. 형광현미경으로 살아있는 세포들에서 황화수소 검출을 시각화하기 위해, 다양한 농도의 외인성 황화수소 생성을 위해 황화수소나트륨, 또는 내인성 황화수소 생성을 위해 L-시스틴을 첨가하여 헬라세포와 이엠티6세포를 배양하였다. 구리사이클린덴실의 형광강도는 황화수소 농도에 따라 증강되었다. 추가적으로, 종양 저산소증과 황화수소 생성의 관계성을 탐구하기 위해 헬라세포에 세포수준의 저산소증을 유도하였다. 저산소상태에서 헬라세포는 황화수소와 저산소유도인자-1알파를 생성하는 것을 형광현미경으로 관찰하였다. 내인성 황화수소 생성은 저산소유도인자-1알파의 발현과 상관관계 있을 것으로 보인다. 그러므로, 종양세포의 내인성 황화수소 생성을 특이적으로 탐지하는 것은 병태생리적 또는 저산소증 상태에서 황화수소가 고형종양조직의 신혈관생성 및 성장에 어떤 영향을 미치는지 탐구하는데 중추적 인자가 될 것으로 생각한다.
황화수소는 (H2S)는 유독가스이지만, 일산화탄소나 일산화질소와 같이 여러 질병에서 기체신호전달물질 중 하나로 알려져있다. 그래서, 생체 내 발생되는 미량의 황화수소에 응답속도가 빠른, 고도의 민감성과 특이성이 있는 프로브를 개발하는 것은 중요한 목표이다. 황화수소 탐지의 여러 기술 중에서, 형광프로브 기법은 비칩습성이고, 민감도 및 선택성이 뛰어나고, 세포수준에서도 빠르게 반응한다. 구리사이클린덴실은 여러 다양한 바이오-시올종, 활성산소종 및 반응성질소종들에 반하여, 황화수소를 탐지하는데 높은 선택성을 보여주었다. 형광현미경으로 살아있는 세포들에서 황화수소 검출을 시각화하기 위해, 다양한 농도의 외인성 황화수소 생성을 위해 황화수소나트륨, 또는 내인성 황화수소 생성을 위해 L-시스틴을 첨가하여 헬라세포와 이엠티6세포를 배양하였다. 구리사이클린덴실의 형광강도는 황화수소 농도에 따라 증강되었다. 추가적으로, 종양 저산소증과 황화수소 생성의 관계성을 탐구하기 위해 헬라세포에 세포수준의 저산소증을 유도하였다. 저산소상태에서 헬라세포는 황화수소와 저산소유도인자-1알파를 생성하는 것을 형광현미경으로 관찰하였다. 내인성 황화수소 생성은 저산소유도인자-1알파의 발현과 상관관계 있을 것으로 보인다. 그러므로, 종양세포의 내인성 황화수소 생성을 특이적으로 탐지하는 것은 병태생리적 또는 저산소증 상태에서 황화수소가 고형종양조직의 신혈관생성 및 성장에 어떤 영향을 미치는지 탐구하는데 중추적 인자가 될 것으로 생각한다.
Although hydrogen sulfide (H2S) is a noxious gas, was demonstrated to be one of the gaseous signaling molecule the same as carbon monoxide or nitric oxide in many diseases. Then, it is an important target to develop high sensitive and selective probe for rapid detection of H2S at very low concentrat...
Although hydrogen sulfide (H2S) is a noxious gas, was demonstrated to be one of the gaseous signaling molecule the same as carbon monoxide or nitric oxide in many diseases. Then, it is an important target to develop high sensitive and selective probe for rapid detection of H2S at very low concentration in bio-environment. Among the various techniques of detecting H2S, fluorescent probe was non-invasive, excellent in sensitivity and selectivity, and revealed quick response in the cellular level. Cu-cyclen-dansyl showed high selectivity to detect H2S against various biological thiols, reactive nitrogen species (RNS), and reactive oxygen species (ROS). To visualize H2S in living cells by fluorescence microscopy, HeLa cell and EMT6 cells were incubated in various concentrations of NaHS for exogenous production of H2S and L-cystine (L-cys) for endogenous production of H2S. The fluorescence intensity of Cu-cyclen-dansyl was enhanced in proportion to increased H2S concentration. In addition, hypoxia condition was conducted in cellular level to explore the relationship between tumor hypoxia and H2S production in living HeLa cells. Hypoxia condition induced HeLa cells to generate H2S and hypoxia inducible factor (HIF-1α) by fluorescence microscopy. The endogenous production of H2S seemed to be related to expression of HIF-1α in hypoxia condition. Therefore, selective detection of endogenous production of H2S in tumor cells will be a key factor to explore how H2S contributes to neovascularization and growth of solid tumor tissues in pathophysiological or hypoxia condition.
Although hydrogen sulfide (H2S) is a noxious gas, was demonstrated to be one of the gaseous signaling molecule the same as carbon monoxide or nitric oxide in many diseases. Then, it is an important target to develop high sensitive and selective probe for rapid detection of H2S at very low concentration in bio-environment. Among the various techniques of detecting H2S, fluorescent probe was non-invasive, excellent in sensitivity and selectivity, and revealed quick response in the cellular level. Cu-cyclen-dansyl showed high selectivity to detect H2S against various biological thiols, reactive nitrogen species (RNS), and reactive oxygen species (ROS). To visualize H2S in living cells by fluorescence microscopy, HeLa cell and EMT6 cells were incubated in various concentrations of NaHS for exogenous production of H2S and L-cystine (L-cys) for endogenous production of H2S. The fluorescence intensity of Cu-cyclen-dansyl was enhanced in proportion to increased H2S concentration. In addition, hypoxia condition was conducted in cellular level to explore the relationship between tumor hypoxia and H2S production in living HeLa cells. Hypoxia condition induced HeLa cells to generate H2S and hypoxia inducible factor (HIF-1α) by fluorescence microscopy. The endogenous production of H2S seemed to be related to expression of HIF-1α in hypoxia condition. Therefore, selective detection of endogenous production of H2S in tumor cells will be a key factor to explore how H2S contributes to neovascularization and growth of solid tumor tissues in pathophysiological or hypoxia condition.
Keyword
#Fluorescenct probe Living cells Fluorescent Imaging Hypoxia
학위논문 정보
저자
김지영
학위수여기관
경북대학교 대학원
학위구분
국내석사
학과
의과학과
발행연도
2019
총페이지
iv, 30 p.
키워드
Fluorescenct probe Living cells Fluorescent Imaging Hypoxia
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