C. albicans는 인체에 존재하는 피부 상재균이지만 면역력 약화, 또는 환경적인 요인에 의하여 구강 캔디다증, 캔디다성 질염, 심한 경우에는 혈류감염을 일으키는 것으로 알려져 있다. C. albicans를 치료하기 위한 항진균제로 fluconazole 또는 amphotericin B를 사용하는 것으로 알려져 있는데, 최근 항진균제에 내성을 갖는 균주가 보고되고 있다. 그로 인해 안전한 항진균 대체제로서 식물 소재를 이용한 연구가 활발히 이루어지고 있다. 본 연구에서는 C. albicans에 대하여 항진균 효과를 갖는 추출물을 선별하고, 이들의 조합을 통해 항진균 ...
C. albicans는 인체에 존재하는 피부 상재균이지만 면역력 약화, 또는 환경적인 요인에 의하여 구강 캔디다증, 캔디다성 질염, 심한 경우에는 혈류감염을 일으키는 것으로 알려져 있다. C. albicans를 치료하기 위한 항진균제로 fluconazole 또는 amphotericin B를 사용하는 것으로 알려져 있는데, 최근 항진균제에 내성을 갖는 균주가 보고되고 있다. 그로 인해 안전한 항진균 대체제로서 식물 소재를 이용한 연구가 활발히 이루어지고 있다. 본 연구에서는 C. albicans에 대하여 항진균 효과를 갖는 추출물을 선별하고, 이들의 조합을 통해 항진균 시너지 효과를 갖는 추출물 조합을 제시하고자 한다. 또한 선별된 여러 조합 중에서 가장 낮은 농도를 사용하면서 큰 생장 억제 효과를 갖는 가장 효과적인 추출물 조합을 선정하여, 그 추출물의 주요 단일 화합물에 대한 성분 분석과 함께 이들 단일 화합물간의 시너지 효과 확인을 통해 추출물간의 시너지 효과의 원인을 규명하였다. 항진균 효과를 갖는 천연 식물 소재를 선별하기 위해 280 여개의 한약재를 메탄올로 추출물을 제작하였다. Paper disk diffusion method을 이용하여 추출물 처리에 따른 생육억제환 (clear zone)을 확인한 결과, 총 15개 추출물 (계지, 계피, 육계, 정향, 황금, 고본, 급성자, 목단피, 석창포, 장미꽃, 지유, 천궁, 초과, 황백, 후박)이 Candida albicans, Malassezia pachydermatis, 그리고 Staphylococcus aureus에 대하여 항미생물 활성을 나타내었다. 15개 추출물을 액체 배양을 통해 C. albicans에 대한 농도별 생장 억제효과를 확인하여 시너지 효과 실험을 위한 추출물 혼합 농도를 선정하였다. 액체 배양에서 추출물에 의해 혼탁도가 관찰되지 않는 농도 내에서 실험하였으며, 장미꽃, 지유, 천궁, 초과 4가지 추출물은 혼탁도 때문에 균의 생장과 구분할 수 없어 시너지 실험에서는 제외되었다. 11개 추출물 (계지, 계피, 육계, 정향, 황금, 고본, 급성자, 목단피, 석창포, 황백, 후박)을 2개씩 혼합하여 총 55개 조합에 대해 시너지 효과를 실험한 결과, GI(Growth inhibition)값을 이용한 판단 기준에 의하여 정향 0.12 g/L + 황백 0.13 g/L, 정향 0.12 g/L + 후박 0.06 g/L, 황백 0.13 g/L + 후박 0.06 g/L, 고본 0.89 g/L + 후박 0.06 g/L, 석창포 0.99 g/L + 후박 0.06 g/L이 시너지 효과를, 석창포 0.99 g/L + 황백 0.13 g/L이 부분 시너지 효과를 갖는 조합으로 선별되었다. 이 조합 중에서 낮은 농도의 사용에 비해 높은 생장 억제 효과를 갖는 정향 + 후박 조합이 주요 조합으로 선정되었다. HPLC 분석은 YMC-Triart C18 column (4.6 mm I.D × 250 mm)을 사용하여 정향 추출물은 Eugenol, 후박 추출물은 Magnolol의 함량을 각각 분석하였다. 그 결과, 정향 메탄올 추출물에 Eugenol은 56.7%, 후박 메탄올 추출물에 Magnolol은 6.4% 함유된 것을 확인하였다. 단일 물질간의 시너지 효과를 규명하기 위하여 checkerboard assay를 적용시켜 Eugenol과 Magnolol의 혼합에 의한 시너지 효과를 평가한 결과, Eugenol 0.250 ~ 0.300 g/L + Magnolol 0.08 ~ 0.016 g/L 구간에서 시너지 효과가 있음을 확인하였다. 최종적으로 단일물질간의 시너지 효과는 추출물 조합에서 나타내는 시너지 효과 중 약 25%를 차지하는 것으로 확인되었다. 본 연구를 통해 진균류 C. albicans의 생장을 효율적으로 억제할 수 있는 6개의 천연 추출물 시너지 조합을 제시하였으며, 그 중에서 정향 + 후박 조합은 주요 단일화합물간의 시너지 효과 확인을 통해 항진균 살균 효과의 원인 물질을 제안하였다. 확인된 추출물 조합은 새로운 항진균 소재로 사용될 수 있음을 제안한다.
C. albicans는 인체에 존재하는 피부 상재균이지만 면역력 약화, 또는 환경적인 요인에 의하여 구강 캔디다증, 캔디다성 질염, 심한 경우에는 혈류감염을 일으키는 것으로 알려져 있다. C. albicans를 치료하기 위한 항진균제로 fluconazole 또는 amphotericin B를 사용하는 것으로 알려져 있는데, 최근 항진균제에 내성을 갖는 균주가 보고되고 있다. 그로 인해 안전한 항진균 대체제로서 식물 소재를 이용한 연구가 활발히 이루어지고 있다. 본 연구에서는 C. albicans에 대하여 항진균 효과를 갖는 추출물을 선별하고, 이들의 조합을 통해 항진균 시너지 효과를 갖는 추출물 조합을 제시하고자 한다. 또한 선별된 여러 조합 중에서 가장 낮은 농도를 사용하면서 큰 생장 억제 효과를 갖는 가장 효과적인 추출물 조합을 선정하여, 그 추출물의 주요 단일 화합물에 대한 성분 분석과 함께 이들 단일 화합물간의 시너지 효과 확인을 통해 추출물간의 시너지 효과의 원인을 규명하였다. 항진균 효과를 갖는 천연 식물 소재를 선별하기 위해 280 여개의 한약재를 메탄올로 추출물을 제작하였다. Paper disk diffusion method을 이용하여 추출물 처리에 따른 생육억제환 (clear zone)을 확인한 결과, 총 15개 추출물 (계지, 계피, 육계, 정향, 황금, 고본, 급성자, 목단피, 석창포, 장미꽃, 지유, 천궁, 초과, 황백, 후박)이 Candida albicans, Malassezia pachydermatis, 그리고 Staphylococcus aureus에 대하여 항미생물 활성을 나타내었다. 15개 추출물을 액체 배양을 통해 C. albicans에 대한 농도별 생장 억제효과를 확인하여 시너지 효과 실험을 위한 추출물 혼합 농도를 선정하였다. 액체 배양에서 추출물에 의해 혼탁도가 관찰되지 않는 농도 내에서 실험하였으며, 장미꽃, 지유, 천궁, 초과 4가지 추출물은 혼탁도 때문에 균의 생장과 구분할 수 없어 시너지 실험에서는 제외되었다. 11개 추출물 (계지, 계피, 육계, 정향, 황금, 고본, 급성자, 목단피, 석창포, 황백, 후박)을 2개씩 혼합하여 총 55개 조합에 대해 시너지 효과를 실험한 결과, GI(Growth inhibition)값을 이용한 판단 기준에 의하여 정향 0.12 g/L + 황백 0.13 g/L, 정향 0.12 g/L + 후박 0.06 g/L, 황백 0.13 g/L + 후박 0.06 g/L, 고본 0.89 g/L + 후박 0.06 g/L, 석창포 0.99 g/L + 후박 0.06 g/L이 시너지 효과를, 석창포 0.99 g/L + 황백 0.13 g/L이 부분 시너지 효과를 갖는 조합으로 선별되었다. 이 조합 중에서 낮은 농도의 사용에 비해 높은 생장 억제 효과를 갖는 정향 + 후박 조합이 주요 조합으로 선정되었다. HPLC 분석은 YMC-Triart C18 column (4.6 mm I.D × 250 mm)을 사용하여 정향 추출물은 Eugenol, 후박 추출물은 Magnolol의 함량을 각각 분석하였다. 그 결과, 정향 메탄올 추출물에 Eugenol은 56.7%, 후박 메탄올 추출물에 Magnolol은 6.4% 함유된 것을 확인하였다. 단일 물질간의 시너지 효과를 규명하기 위하여 checkerboard assay를 적용시켜 Eugenol과 Magnolol의 혼합에 의한 시너지 효과를 평가한 결과, Eugenol 0.250 ~ 0.300 g/L + Magnolol 0.08 ~ 0.016 g/L 구간에서 시너지 효과가 있음을 확인하였다. 최종적으로 단일물질간의 시너지 효과는 추출물 조합에서 나타내는 시너지 효과 중 약 25%를 차지하는 것으로 확인되었다. 본 연구를 통해 진균류 C. albicans의 생장을 효율적으로 억제할 수 있는 6개의 천연 추출물 시너지 조합을 제시하였으며, 그 중에서 정향 + 후박 조합은 주요 단일화합물간의 시너지 효과 확인을 통해 항진균 살균 효과의 원인 물질을 제안하였다. 확인된 추출물 조합은 새로운 항진균 소재로 사용될 수 있음을 제안한다.
Candida albicans is a microorganism present in the human body. It is known to cause oral candidiasis, vulvovaginal candidiasis, and, in severe cases, bloodstream infections due to weakened immunity or environmental factors. Fluconazole and amphotericin B are used as an antifungal agent for C. albica...
Candida albicans is a microorganism present in the human body. It is known to cause oral candidiasis, vulvovaginal candidiasis, and, in severe cases, bloodstream infections due to weakened immunity or environmental factors. Fluconazole and amphotericin B are used as an antifungal agent for C. albicans. Recently, resistant strains against fluconazole and amphotericin B have been reported. As a result, studies have been conducted using plant materials as safe antifungal substitutes. In this study, plant extracts with antifungal effect against C. albicans were selected, and suggested combinational extracts for antifungal synergistic effect. Of the combinations tested, the most effective extract combination was suggested to have the strongest growth inhibitory effect at the smallest concentrations. The main single compound of the combination extract was identified for investigating the antifungal synergistic effect of the extract combination. In order to screen natural plants having an antifungal effect, about 280 plant extracts were made using methanol as an extract solvent. As a result of the paper disk diffusion method, 15 extracts (Cinnamomi Ramulus, Cinnamomum Verum, Cinnamomi Cortex, Syzygii Flos, Scutellariae Radix, Angelicae Tenuissimae Radix, Impatientis Semen, Moutan Cortex Radicis, Acori Gramineri Rhizoma, Rosa hybrid, Sanguisorbae Radix, Cnidii Rhizoma, Amomi Tsao-ko Fructus, Phelodendri Cortex, Magnoliae Cortex) showed antimicrobial activity against Candida albicans, Malassezia pachydermatis, and Staphylococcus aureus. 15 extracts were tested growth inhibitory effects on C. albicans in a liquid culture and growth inhibition was observed according to the concentration of the extract. In liquid culture, experiments were carried out at concentrations that showed no turbidity by extracts. Rosa hybrid, Sanguisorbae Radix, Cnidii Rhizoma, Amomi Tsao-ko Fructusextracts were excluded from the synergy experiment because of their turbidity in the culture media. Synergistic effects were tested with 55 combinations of 11 extracts (Cinnamomi Ramulus, Cinnamomum Verum, Cinnamomi Cortex, Syzygii Flos, Scutellariae Radix, Angelicae Tenuissimae Radix, Impatientis Semen, Moutan Cortex Radicis, Acori Gramineri Rhizoma, Phelodendri Cortex, Magnoliae Cortex). Five combinations of Syzygii Flos 0.12 g/L + Phelodendri Cortex 0.13 g/L, Syzygii Flos 0.12 g/L + Magnoliae Cortex 0.06 g/L, Phelodendri Cortex 0.13 g/L + Magnoliae Cortex 0.06 g/L, Angelicae Tenuissimae Radix 0.89 g/L + Magnoliae Cortex 0.06 g/L, Acori Gramineri Rhizoma 0.99 g/L + Magnoliae Cortex 0.06 g/L showed a synergistic effect. The combinational of Acori Gramineri Rhizoma 0.99 g/L + Phelodendri Cortex 0.13 g/L showed a partial synergistic inhibitory effect. Among 6 combinations, the Syzygii Flos + Magnoliae Cortex combination, which has a strong growth inhibitory effect with a low concentration, was selected for the further study. The HPLC analysis with YMC-Triart C18 column (4.6 mm I.D × 250 mm) analyzed the contents of Eugenol in the Syzygii Flos extract, and Magnolol in the Magnoliae Cortex extract. The Syzygii Flos extract contained 56.7% of Eugenol and the Magnoliae Cortex extract contained 6.4% of Magnolol. In order to investigate the synergistic effect between identified compounds, the synergistic effect of Eugenol and Magnolol was assessed by a checkerboard assay. It was found that a strong synergistic effect was found with 0.250 ~ 0.300 g/L Eugenol + 0.08 ~ 0.016 g/L Magnolol. This synergistic effect between compounds account for about 25% of the synergistic effects of the original extract combinations. This study presented 6 natural extract synergistic combinations that can effectively inhibit the growth of fungi C. albicans. Among them, the strong antifungal activity of Syzygii Flos extract + Magnoliae Cortex extract combination was explained by a combinational synergistic antifungal activity of identified major single compound from each extract. The identified extract combinations can be used as a new antifungal materials.
Candida albicans is a microorganism present in the human body. It is known to cause oral candidiasis, vulvovaginal candidiasis, and, in severe cases, bloodstream infections due to weakened immunity or environmental factors. Fluconazole and amphotericin B are used as an antifungal agent for C. albicans. Recently, resistant strains against fluconazole and amphotericin B have been reported. As a result, studies have been conducted using plant materials as safe antifungal substitutes. In this study, plant extracts with antifungal effect against C. albicans were selected, and suggested combinational extracts for antifungal synergistic effect. Of the combinations tested, the most effective extract combination was suggested to have the strongest growth inhibitory effect at the smallest concentrations. The main single compound of the combination extract was identified for investigating the antifungal synergistic effect of the extract combination. In order to screen natural plants having an antifungal effect, about 280 plant extracts were made using methanol as an extract solvent. As a result of the paper disk diffusion method, 15 extracts (Cinnamomi Ramulus, Cinnamomum Verum, Cinnamomi Cortex, Syzygii Flos, Scutellariae Radix, Angelicae Tenuissimae Radix, Impatientis Semen, Moutan Cortex Radicis, Acori Gramineri Rhizoma, Rosa hybrid, Sanguisorbae Radix, Cnidii Rhizoma, Amomi Tsao-ko Fructus, Phelodendri Cortex, Magnoliae Cortex) showed antimicrobial activity against Candida albicans, Malassezia pachydermatis, and Staphylococcus aureus. 15 extracts were tested growth inhibitory effects on C. albicans in a liquid culture and growth inhibition was observed according to the concentration of the extract. In liquid culture, experiments were carried out at concentrations that showed no turbidity by extracts. Rosa hybrid, Sanguisorbae Radix, Cnidii Rhizoma, Amomi Tsao-ko Fructusextracts were excluded from the synergy experiment because of their turbidity in the culture media. Synergistic effects were tested with 55 combinations of 11 extracts (Cinnamomi Ramulus, Cinnamomum Verum, Cinnamomi Cortex, Syzygii Flos, Scutellariae Radix, Angelicae Tenuissimae Radix, Impatientis Semen, Moutan Cortex Radicis, Acori Gramineri Rhizoma, Phelodendri Cortex, Magnoliae Cortex). Five combinations of Syzygii Flos 0.12 g/L + Phelodendri Cortex 0.13 g/L, Syzygii Flos 0.12 g/L + Magnoliae Cortex 0.06 g/L, Phelodendri Cortex 0.13 g/L + Magnoliae Cortex 0.06 g/L, Angelicae Tenuissimae Radix 0.89 g/L + Magnoliae Cortex 0.06 g/L, Acori Gramineri Rhizoma 0.99 g/L + Magnoliae Cortex 0.06 g/L showed a synergistic effect. The combinational of Acori Gramineri Rhizoma 0.99 g/L + Phelodendri Cortex 0.13 g/L showed a partial synergistic inhibitory effect. Among 6 combinations, the Syzygii Flos + Magnoliae Cortex combination, which has a strong growth inhibitory effect with a low concentration, was selected for the further study. The HPLC analysis with YMC-Triart C18 column (4.6 mm I.D × 250 mm) analyzed the contents of Eugenol in the Syzygii Flos extract, and Magnolol in the Magnoliae Cortex extract. The Syzygii Flos extract contained 56.7% of Eugenol and the Magnoliae Cortex extract contained 6.4% of Magnolol. In order to investigate the synergistic effect between identified compounds, the synergistic effect of Eugenol and Magnolol was assessed by a checkerboard assay. It was found that a strong synergistic effect was found with 0.250 ~ 0.300 g/L Eugenol + 0.08 ~ 0.016 g/L Magnolol. This synergistic effect between compounds account for about 25% of the synergistic effects of the original extract combinations. This study presented 6 natural extract synergistic combinations that can effectively inhibit the growth of fungi C. albicans. Among them, the strong antifungal activity of Syzygii Flos extract + Magnoliae Cortex extract combination was explained by a combinational synergistic antifungal activity of identified major single compound from each extract. The identified extract combinations can be used as a new antifungal materials.
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