[학위논문]담배거세미나방 (Spodoptera litura) Ornithine Decarboxylase (ODC) 발현에 대한 RNA 간섭 RNA interference to expression of Ornithine Decarboxylase (ODC) from the Tobacco Cutworm, Spodoptera litura원문보기
담배거세미나방 (Spodoptera litura)의 ornithine decarboxylase (ODC) 발현에 대한 RNA interference (RNAi)를 확인하고자, ODC 유전자의 5′URT 및 3′URT (untranslated region) 부위를 배제한 protein coding 부위 목적 서열에 상보적인 서로 다른 네 가지 서열의 siRNA (19 nt)들을 각각 포함하는 60 nt의 shRNA molecule (SlshRNA-1)들을 발현시킬 수 있는 ...
담배거세미나방 (Spodoptera litura)의 ornithine decarboxylase (ODC) 발현에 대한 RNA interference (RNAi)를 확인하고자, ODC 유전자의 5′URT 및 3′URT (untranslated region) 부위를 배제한 protein coding 부위 목적 서열에 상보적인 서로 다른 네 가지 서열의 siRNA (19 nt)들을 각각 포함하는 60 nt의 shRNA molecule (SlshRNA-1)들을 발현시킬 수 있는 viral vector를 제작하였고, 이를 곤충 세포 주 (Sf9 cell, Spodoptera frugiperda) 및 담배거세미나방 유충에 감염시켜 증식률과 치사율을 분석하였다. Viral vector들에 감염된 Sf9 cell에 대한 증식억제 효과는 pSINsi-hH1 / SlshRNA-1 vector에서 71.4 % 수준 (배양 72 시간)으로 가장 높았고, 담배거세미나방 유충에 대한 치사 효과도 viral injection 후 10일차에서 66.7 %, 20일차에서 73.3 %로서 가장 크게 나타나, ODC gene-corresponding siRNA 도입에 따른 RNAi 유도 효과가 명확히 높은 수준으로 확인되었다.
담배거세미나방 (Spodoptera litura)의 ornithine decarboxylase (ODC) 발현에 대한 RNA interference (RNAi)를 확인하고자, ODC 유전자의 5′URT 및 3′URT (untranslated region) 부위를 배제한 protein coding 부위 목적 서열에 상보적인 서로 다른 네 가지 서열의 siRNA (19 nt)들을 각각 포함하는 60 nt의 shRNA molecule (SlshRNA-1)들을 발현시킬 수 있는 viral vector를 제작하였고, 이를 곤충 세포 주 (Sf9 cell, Spodoptera frugiperda) 및 담배거세미나방 유충에 감염시켜 증식률과 치사율을 분석하였다. Viral vector들에 감염된 Sf9 cell에 대한 증식억제 효과는 pSINsi-hH1 / SlshRNA-1 vector에서 71.4 % 수준 (배양 72 시간)으로 가장 높았고, 담배거세미나방 유충에 대한 치사 효과도 viral injection 후 10일차에서 66.7 %, 20일차에서 73.3 %로서 가장 크게 나타나, ODC gene-corresponding siRNA 도입에 따른 RNAi 유도 효과가 명확히 높은 수준으로 확인되었다.
To confirm a RNA interference (RNAi) to the expression of ornithine decarboxylase (ODC) from Spodoptera litura, the expression viral vectors contained each of shRNA molecules (60 nt) including four different sequences of siRNAs (19 nt) complementary to a target sequence of the protein-coding domain ...
To confirm a RNA interference (RNAi) to the expression of ornithine decarboxylase (ODC) from Spodoptera litura, the expression viral vectors contained each of shRNA molecules (60 nt) including four different sequences of siRNAs (19 nt) complementary to a target sequence of the protein-coding domain excluding the 5′URT and 3′URT (untranslated regions) of the ODC gene was constructed, and the insect cell lines (Sf9 cell, Spodoptera frugiperda) and S. litura larvae were infected with the vectors to analyze their proliferation and mortality rates, respectively. The highest suppressive effect (71.4 %) on the proliferation rate of infected Sf9 cells was revealed by pSINsi-hH1/SlshRNA-1 vector at 72 hrs of cultivation, and also, the vector showed the highest mortality in the infected S. litua larvae as 66.7 % at the 10th day and 73.3 % at the 20th day after the viral injection, confirming a comparatively higher level of RNAi-inducing effect of the introduced ODC gene-corresponding siRNA molecule.
To confirm a RNA interference (RNAi) to the expression of ornithine decarboxylase (ODC) from Spodoptera litura, the expression viral vectors contained each of shRNA molecules (60 nt) including four different sequences of siRNAs (19 nt) complementary to a target sequence of the protein-coding domain excluding the 5′URT and 3′URT (untranslated regions) of the ODC gene was constructed, and the insect cell lines (Sf9 cell, Spodoptera frugiperda) and S. litura larvae were infected with the vectors to analyze their proliferation and mortality rates, respectively. The highest suppressive effect (71.4 %) on the proliferation rate of infected Sf9 cells was revealed by pSINsi-hH1/SlshRNA-1 vector at 72 hrs of cultivation, and also, the vector showed the highest mortality in the infected S. litua larvae as 66.7 % at the 10th day and 73.3 % at the 20th day after the viral injection, confirming a comparatively higher level of RNAi-inducing effect of the introduced ODC gene-corresponding siRNA molecule.
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