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IPTG의 첨가 시간이 대장균(Escherichia coli)에서 순무 모자이크 바이러스(TuMV)의 외피단백질 발현에 미치는 영향
Effect of Timing of IPTG Addition on Expression of Turnip Mosaic Virus Coat Protein Gene in Escherichia Coli 원문보기

한국식물병리학회지 = Korean journal of plant pathology, v.13 no.4, 1997년, pp.248 - 254  

김수중 (고려대학교 자연자원대학 농생물학과) ,  박원목 (고려대학교 생명공학원) ,  류기현 ,  이상선 (고려대학교 자연자원대학 농생물학과) ,  이세영 (고려대학교 생명공학원)

초록
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순무우 모자이크 바이러스 Ca 계통(TuMV-Ca)의 외피 단백질을 대장균 NM522 strain에서 발현시켰다. 발현된 바이러스 단백질은 한천젤 이중확산법, ELISA와 Western blotting을 이용하여 확인하였다. 외피단백질 발현 벡터(pGEX-Tu)의 구축은 IPTG induction site를 지니는 pGEX-KG에 TuMV-Ca 외피단백질 유전자를 결합하였다. 최적 단백질 발현 조건은 pGEX-Tu를 지니는 대장균을 액체 배지 1 ml당 $A_{595}$=0.1/ml의 농도로 접종한 후 2시간 뒤에 IPTG를 최종 농도를 1 mM로 조절하여 induction 시키는 경우였다. 합성된 목적 단백질은 발현 벡터의 특성상 GST (Glutathion S-Transferase) 단백질과 결합된 형태로 약 59 kDa의 단백질이었다. (uMV CP 33 kDa + GST 26 kDa.)

Abstract ▼ AI-Helper 아이콘AI-Helper

Expression vector (pGEX-Tu) for the coat protein (CP) gene of turnip mosaic virus Ca strain (TuMV-Ca) was constructed by incorporation of TuMV CP gene into pGEX-KG vector which had ${\beta}$-galactosidase gene and IPTG (isopropylthio-${\beta}$-D-galactoside) induction site. Th...

주제어

#coat protein (CP)   #GST (Glutathion S-Transferase)   #protein expression   #turnip mosaic virus (TuMV)  

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