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문제 정의
- 이에 본 연구에서는 고정식 교정 장치를 장착한 환자를 대상으로 chlorhexidine varnish 처치 후의 치태내 균주의 변화 양상을 장기간 관찰, 연구하여 그 결과를 보고하는 바이다.
제안 방법
- 25 “ 1/mg protein 의 fluorescin isothiocyanate (Isomer I. B.B.L., Microbiology systems, U.S.A.) 로 conjugate된 goat anti-rabbit IgG (Meloy Lab., Inc., Springfield, Va„ U.S.A.) 로 각기 1 : 50 및 1 : 600 으로 희석한 후 용액 20“1를 slide에 떨어뜨려 37℃에서 30분간 반응시켰다.
- Streptococcus mutans, Streptococcus sanguis, Streptococcus mitis, Actinomyces viscosus, Actionomyces naeslundii에 대한 항혈청액을 인산 완충용액에 4 % bovine serum albumin을 넣은 희석용액으로 각 1 : 80, 1 : 160, 1 : 320, 1 : 640, 1 : 1280 으로 각 균주 slide 상에 희석된 항혈청액을 20“1씩 떨어뜨린 후 37℃에서 30분간 반응시킨 후 인산 완충용액으로 세척하였다.
- chlorhexidine varnish 도포를 시작하기 전, 도포 후 4, 8, 20, 32주에 실험군과 대조군 모두에서 치태를 채취하였다. 교정 장치는 실험군에서는 약물도 포가 끝난 후, 대조군에서는 바로 장착하였다.
- chlorhexidine varnish 처치시 장기간의 효과를 확인하기 위하여 32주까지 follow-up 하였다. 실험 시작 시에는 실험군 50명(남자 11명, 여자 39명), 대조군 50 명(남자 16명, 여자 34명)이었으나 치료중단, 불규칙적인 내원 간격 등을 비롯한 여러가지 요인에 의하여 실험 종료 시에는 실험군 12명 (남자 3명, 여자 9명), 대조군 9명 (남자 4명, 여자 5명) 만이 남게되었다.
- 않고 고정식 교정장치를 부착하였다. 그리고 실험군에서는 20주 째에 chlorhexidine vamish를 1회 처치하였다.
- 이후 30분 간 양치를 금하고 24 시간 동안 잇솔질을 금지시켰다. 그리고 실험군에서는 20주 째에 chlorhexidine varnish를 1회 처치하였다.
- 두 군에서 고정식 교정장치 부착 직전과 부착 후 4, 8, 20, 32주의 치태내 균주 변화 양상을 간접 면역 형광 현미경법으로 분석하고 SAS 통계프로그램을 사용하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
- 04) 을 이용하여 전체 균주 중 각 균주의 비율의 평균과 표준편차를 구하였고, 약물 치료전과 후의 변화를 paired t-test를 통해 검증하였다. 또한 실험군을 대조군과 비교 분석했다.
- 서울대학교 병원 치과진료부 교정과에 내원하였던 영구치열기 환자들 중 고정식 교정장치로 치료 예정인 환자 100명을 대상으로 하여 이들을 무작위로 실험군 (50명) 과 대조군 (50명) 으로 분류하였다.
- 실험군 (12명 ) 은 chlorhexidine vamish를 1주일 간격으로 4회 도포한 후 고정식 교정장치를 부착하였고, 대 조군 (9명) 은 chlorhexidine vamish 처 치 를 하지 않고 고정식 교정장치를 부착하였다. 그리고 실험군에서는 20주 째에 chlorhexidine vamish를 1회 처치하였다.
- 교정 장치는 실험군에서는 약물도 포가 끝난 후, 대조군에서는 바로 장착하였다. 연구에 의해 알려진 chlorhexidine varnish의 약효 지속시간인 약 6개월을 고려해 20주 째에는 실험군에 1회 시약 도포를 추가로 실시했다.
- 형광염색에 대한 판정은 no response는 partial identity는 -(+), +(-), weak response는 +, strong response 는 ++로 결정하였고, 이 중 ++이상을 counting하여 전체 균주내 비율을 산정하였다.
- 환자에게 24시간 동안 잇솔질을 금지시킨 뒤 상악제 1 대구치 협면에서 water spray로 묻어 있는 타액을 씻어 낸 후 멸균된 나무 wedge를 사용해 치태를 채취했다. chlorhexidine varnish 도포를 시작하기 전, 도포 후 4, 8, 20, 32주에 실험군과 대조군 모두에서 치태를 채취하였다.
대상 데이터
- 서울대학교병원 치과진료부 교정과에서 고정식 교정 장치 로 치료하기로 하였던 환자 100명 중에서 32주까지 장기간 follow-up 되었던 21명을 최종 연구대상으로 선정하였다.
- 위하여 32주까지 follow-up 하였다. 실험 시작 시에는 실험군 50명(남자 11명, 여자 39명), 대조군 50 명(남자 16명, 여자 34명)이었으나 치료중단, 불규칙적인 내원 간격 등을 비롯한 여러가지 요인에 의하여 실험 종료 시에는 실험군 12명 (남자 3명, 여자 9명), 대조군 9명 (남자 4명, 여자 5명) 만이 남게되었다.
- 실험에 사용된 약물은 chlorhexidine varnish로 시약 1은 10 % chlorhexidine acetate 와 Sumatra benzoin으로 이루어졌고 시약 2는 polyurethane sealant로 시약 1을 덮어 chlorhexidine0] 치면에 작용하는 시간을 증가시키는 역할을 한다.
- 하에서 관찰했다. 이때 사용된 현미경은 BHI-RFL microscope (Olympus optical Co., LTD., Tokyo, Japan) 이며, Exciter filter(UGT), Dichroic mirror DM-400 1-420, additional barrier filter L-435 를 사용하였다.
데이터처리
- SAS 프로그램 (version 6.04) 을 이용하여 전체 균주 중 각 균주의 비율의 평균과 표준편차를 구하였고, 약물 치료전과 후의 변화를 paired t-test를 통해 검증하였다. 또한 실험군을 대조군과 비교 분석했다.
성능/효과
- 1. Streptococcus mutans는 실험군에서 전 실험 기간 동안 통계학적으로 유의성 있게 억제되었고 (p<0.01), 대조군에서 전 실험기간동안 통계학적으로 유의성 있게 증가하였다 (p<0.05).
- 2. Streptococcus sanguis, Streptococcus mitis, Actinomyces viscosus, Actinomyces naeslundii는 실험군과 대조군에서 통계학적으로 유의성 있는 변화를 보이지 않았다.
- 17, 咯21-物 Chlorhexidine을 치면에서 장기간 방출하는 송달 체계의 개발을 위해 Friedman 등은 polymeric film을 이용해 chlorhexidine을 전달하여 수개월 간 지속적으로 방출되는 것을 확인했고尸 Addy 등은 acrylic strip을 이용한 방법을 제시했다.23)Balanyk 와 Sandhame Sumatra benzoin을 vehicle로 사용해서 10 % chlorhexidine acetate를 varnish 형태로 송달하는 방법을 개발하여 실험한 결과 in vitro에서 12일 이상 bactericidal level 로 지속적으로 방출되는 것을 확인해 chlorhexidine varnish 가 Streptococcus mutans 제거에 있어 간단하고 효과적인 방법이라고 했다r⑼ 또한 Sandham 등은 chlorhexidine varnish를 polyurethane sealant로 피복하여 약효 지속 시간을 증가시켰는데 일련의 실험을 통해 그는 이런 송달 체계를 통한 chlorhexidine varnish 도포에 의해 Streptococcus mutans를 장기간이 라 할 수 있는 평 균 6개월 가량 치아우식증 유발 수준 이하로 감소시킬 수 있다고 했다.27洌 국내에서도 장 등은 교정 환자를 대상으로 20명의 실험군에 10 % chlorhexidine varnish를 도포하여 polyurethane sealant로 피복하였을 때 Streptococcus mutans를 20주 이상 억제하는 것으로 나타나 이 방법이 Streptococcus mutans 억 제에 효과적이라고 했다.
- 용이한 환경을 만든다.I) 법랑질 탈회와 치아우식증은 교정치료 중 발생하는 심각한 부작용 중의 하나로서 많은 교정의와 환자들이 이로 인한 고통을 겪고 있다.®, 6)
- Streptococcus mutans는 실험군에서 전 실험 기간 동안 통계학적으로 유의성있게 억제되었고 (p<0.01) (Table 1, 그림 1), 대조군에서 전 실험기간동안 비율이 baseline 보다 통계학적으로 유의성 있게 증가하였고 이후 계속 증가된 상태로 유지되었다 (P<0.05) (Table 1, 그림 2). 시간에 따른 대조군과 실험군의 비교는 그림 3에 제시하였다.
- 도포했다. 그 결과 Streptococcus mutans의 억제는 농도가 높을수록 강하게 나타났고, 40 % varnish의 경우는 22 주 후에 Streptococcus mutans 의 수가 도포전 보다 22 % 이하였다. 따라서 높은 농도의 chlorhexidine varnish in Sandrac base는 Streptococcus mutans를 장기간 성공적으로 억제시킨다고 했다.
- 대조군에서는 Streptococcus mutans를 제외한 본연구의 대상이 된 기타 균주에는 변화가 나타나지 않아 교정 장치 장착에 의해 주로 Streptococcus mutans가 증가하는 것으로 나타났다.
- 반면 대조군에서는 교정 장치 장착 4주 후부터 Streptococcus mutans의 비율이 유의한 수준으로 증가했고 연구 기간 동안 지속되었다 (그림 2). 이는 기존의 연구 결과制와 일치하며 이는 교정 장치에 의해 음식 물 잔사가 축적 되는 retention site 의 증가 및 구강 위생 관리의 어려움 때문이라고 생각된다.
- 감소한 것으로 나타났다 (그림 1). 본 연구에서 20주 째에 chlorhexidine varnish 도포를 1회 추가하였는데 이는 기존의 연구들에 나타난 chlorhexidine varnish의 평균 유효기간이 대략 6 개월이었음을 고려 한 것이었고 그 결과로 32주 째에도 Streptococcus mutans 수준이 계속 낮아진 채로 유지된 것으로 생각된다.
- 본 연구에서도 동일한 결과가 나타나 chlorhexidine varnish 도포에 의해 치태내 Sreptococcus mutans 비율이 처치 32주 후까지 유의할 만한 수준으로 감소한 것으로 나타났다 (그림 1). 본 연구에서 20주 째에 chlorhexidine varnish 도포를 1회 추가하였는데 이는 기존의 연구들에 나타난 chlorhexidine varnish의 평균 유효기간이 대략 6 개월이었음을 고려 한 것이었고 그 결과로 32주 째에도 Streptococcus mutans 수준이 계속 낮아진 채로 유지된 것으로 생각된다.
후속연구
- 29r32)Sandham의 연구에서는 chlorhexidine 처치 이후에 Streptococcus sanguis의 일시적인 증가가 있었다.27) 본 연구에서는 chlorhexidine varnish 처치에 의해 Streptococcus mutans를 제외한 기타 균주에는 별 변화가 없는 것으로 나타났으며, Schaeken의 연구와 같이 4주 이하의 기간에서 변화가 있었는지는 확인하지 못했다.
- 이상을 토대로 고려해볼 때 치료 특성상 장기간 장치를 장착해야 하는 교정 환자에 있어 이와 같은 방법 즉 장치 장착 전에 chlorhexidine varnish를 반복 도포하고 6개월마다 추가 도포를 실시한다면 교정 치료 기간 중의 치아우식증의 발생을 효과적으로 억제시킬 수 있다고 판단된다.
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