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문제 정의
- campestris pv. pruni 이외에 E. nigrifluens가 분리되었기에 그 결과를 보고한다.
제안 방법
- campestris pv. pruni 에 의한 복숭아와 자두의 세균병을 각각 "복숭아, 자두의 세균성구멍병"로 명명할 것을 제안한다.
- 건전한 복숭아나무, 자두나무, 살구나무의 잎 또는 열매의 표면에 침접종하여 습실에 두고 발병 유무를 조사하였다. 접종원은 NA 배지에서 3~4일 배양한 병원세균을 108 cells/ml 희석하여 사용하였다.
- 혐기적 증식을 하는 균주들은 Lelliott과 Dickey (1984)의 방법에 따라 pectin 분해, gelatin 액화, nitrate 환원반응, 36℃ 에서 증식, cysteine으로부터 HS 생산, urease 생산, indole 생산, casein 분해, sucrose로부터 환원물질 생산 유무를 조사하였다. 또한 melibiose, lactose, trehalose, maltose, inositol, L- ai'abinose, cellobiose, methyl a-d glucoside, salicin으로부터 산의 생성 유무를 조사하였다 (Table 2, 3).
- 35% NaOCl로 표면 소독한 후 nutiient agar(NA) 배지에 올려놓고 실온에 두어 세균을 증식시켰다. 병반으로부터 증식된 세균을 NA 배지에서 수 차례의 획선 배양하여 순수 분리한 다음, 20% glycerol로 현탁하여 -80℃의 초저온냉동고에 보존하면서 병원성 및 세균학적 특성을 조사하였다
- 증식 유무를 조사하였다 (Table 1). 앞의 실험에서 노란 콜로니를 형성하는 균주들은 Dye (1980)의 방법에 따라 oxidase 활성, 질산염 환원, gelatin 액화, catalase 활성, protein digestion, urease 생산, hydrolyse tween 80, indole test, H2S생산, mucoid 생산, 36℃에서 증식, 당 이용성 등을 조사하였다. 혐기적 증식을 하는 균주들은 Lelliott과 Dickey (1984)의 방법에 따라 pectin 분해, gelatin 액화, nitrate 환원반응, 36℃ 에서 증식, cysteine으로부터 HS 생산, urease 생산, indole 생산, casein 분해, sucrose로부터 환원물질 생산 유무를 조사하였다.
대상 데이터
- 1998년 전북 나주와 경남 밀양 지역에서 재배되고 있는 복숭아나무와 자두나무의 잎과 열매로부터 수집한 병반을 70% 에칠알코올과 0.35% NaOCl로 표면 소독한 후 nutiient agar(NA) 배지에 올려놓고 실온에 두어 세균을 증식시켰다. 병반으로부터 증식된 세균을 NA 배지에서 수 차례의 획선 배양하여 순수 분리한 다음, 20% glycerol로 현탁하여 -80℃의 초저온냉동고에 보존하면서 병원성 및 세균학적 특성을 조사하였다
- hydrolyse tween 80, indole test, H2S 생산, mucoid growth, 36℃에서 증식은 양성반응을 보였다. 당 이용성에 있어서는 glucose, mannose를 이용하였다. 그러나 당이용성에는 차이가 있었다.
이론/모형
- 병원성이 확인된 병원세균의 세균학적 특성은 Schaad (1988)의 방법에 따라 Gram 염색, 콜로니 색, 혐기적 증식 유무를 조사하였다 (Table 1). 앞의 실험에서 노란 콜로니를 형성하는 균주들은 Dye (1980)의 방법에 따라 oxidase 활성, 질산염 환원, gelatin 액화, catalase 활성, protein digestion, urease 생산, hydrolyse tween 80, indole test, H2S생산, mucoid 생산, 36℃에서 증식, 당 이용성 등을 조사하였다.
- 앞의 실험에서 노란 콜로니를 형성하는 균주들은 Dye (1980)의 방법에 따라 oxidase 활성, 질산염 환원, gelatin 액화, catalase 활성, protein digestion, urease 생산, hydrolyse tween 80, indole test, H2S생산, mucoid 생산, 36℃에서 증식, 당 이용성 등을 조사하였다. 혐기적 증식을 하는 균주들은 Lelliott과 Dickey (1984)의 방법에 따라 pectin 분해, gelatin 액화, nitrate 환원반응, 36℃ 에서 증식, cysteine으로부터 HS 생산, urease 생산, indole 생산, casein 분해, sucrose로부터 환원물질 생산 유무를 조사하였다. 또한 melibiose, lactose, trehalose, maltose, inositol, L- ai'abinose, cellobiose, methyl a-d glucoside, salicin으로부터 산의 생성 유무를 조사하였다 (Table 2, 3).
성능/효과
- CB981805, CB2309, CB2310 균주는 모두 Gram 음성반응을 나타냈으며, 혐기적으로 증식하였다. 또한 세균의 형태는 막대모양이고 4개 이상의 주모를 갖고 있었다.
- 이 균주는X cam pestris pv. pnmi에 의한 병징과 구분하기가 곤란하고 2종류의 병원세균이 동시에 침입하여 발병하는 것으로 관찰되었다. 이와 같은 이유로 E.
- 이 균주들은 모두 Gram 음성반응을 나타냈으며 혐기적 증식을 하였다. 또한, 세균의 형태를 전자현미경으로 관찰한 결과 막대모양이고 4개 이상의 주모를 갖고 있었다 (Table 1).
- 복숭아에서 분리한 CB981805 균주와 자두에서 분리한 CB982309, CB2310 균주는 H2S 생산, urease 생산, 질산염 환원에서는 양성반응을 나타냈으며, 36C에서 증식하였으나,sucrose로부터 환원물질생산, pectin 분해, casein 분해, indole 생산에서는 음성반응을 나타냈다. melibiose, inositol, salicin, trehalose 에서 산을 생성하였으나 lactose, cellobiose, methyl a-d glucoside에서는 산을 생성하지 않았다.
- 이러한 특성을 Schaad^] 방법 (1988)에 따라 구분한 결과 Envinia 속 세균으로 동정되었다(Table 1). 복숭아에서 분리한 균주중에서 Erwinia 속으로 동정된 CB981805 균주의 세균학적 특성을 LelHott and Dickey (1984)가 보고한 E. nigrijhiens의 특성을 비교한 결과 질산염 환원을 제외하면 모두 일치하므로 E. nigrifluens로 동정하였다. 자두에서 분리한 CB2309, CB2310 균주의 세균학적 특성을 Lelliott과 Dickey (1984)가 보고한 E.
- 분리된 균주를 건전한 복숭아나무, 자두나무, 살구나무의 잎과 열매에 접종하여 습실 처리 후 4일 내지 7일후 병징을 관찰 한 결과 자연병징과 동일한 병반이 나타났다.
- nigrifluens로 동정하였다. 자두에서 분리한 CB2309, CB2310 균주의 세균학적 특성을 Lelliott과 Dickey (1984)가 보고한 E. nigrifluens의특성과 비교한 결과 질산염 환원, maltose 이용성을 제외하면 모두 일치하므로 E. nigrifluens로 동정하였다.
후속연구
- nigrifluens에 의한 세균병이 보고되지 않았다. 따라서 복숭아와 자두의 세균성 구멍병은 "X. campestris pv. pmn와 E. nigrifluens에 세균성 구멍병"으로 명명할 것을 제안한다.
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