[논문]Crystallization and Preliminary X-ray Crystallographic Studies of HslU Mutant in Escherichia coli

Crystallization and Preliminary X-ray Crystallographic Studies of HslU Mutant in Escherichia coli 원문보기

송지준 , 김윤식 , 이철순 , 김정진 , 임영준 , 김현희 , 유순지 , 성인식 , 정진하 , 엄수현

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^6,9 Site-directed mutations were created by the PCR method, which consists of two sequential PCRs, using pGEM-T/HslVU for HslU mutant as the templates. The primary PCR was carried out using mutagenic primers, which were designed to replace Cys²⁶¹ of HslU with Vai, and then the second PCR was performed. After the secondary PCR, the mutated fragments were ligated into pGEM-T vector.
This work is the initial step toward revealing not only the structure of HslU mutant and its complex with HslV complex but also the mechanism of oligomerization. A search for better-diffracting crystals is continuing by varying the crystallizing conditions.

It has been suggested that Cys261 is involved in oligomerization and that Cys287 is related to the ATPase function.⁸ In order to reveal the three-dimensional structure, and the mechanism of oligomerization between HslUs, and between HslU and HsFV, the HslU_c26iv was crystallized and studied with X-ray crystallographic method.

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용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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