$\require{mediawiki-texvc}$

연합인증

연합인증 가입 기관의 연구자들은 소속기관의 인증정보(ID와 암호)를 이용해 다른 대학, 연구기관, 서비스 공급자의 다양한 온라인 자원과 연구 데이터를 이용할 수 있습니다.

이는 여행자가 자국에서 발행 받은 여권으로 세계 각국을 자유롭게 여행할 수 있는 것과 같습니다.

연합인증으로 이용이 가능한 서비스는 NTIS, DataON, Edison, Kafe, Webinar 등이 있습니다.

한번의 인증절차만으로 연합인증 가입 서비스에 추가 로그인 없이 이용이 가능합니다.

다만, 연합인증을 위해서는 최초 1회만 인증 절차가 필요합니다. (회원이 아닐 경우 회원 가입이 필요합니다.)

연합인증 절차는 다음과 같습니다.

최초이용시에는
ScienceON에 로그인 → 연합인증 서비스 접속 → 로그인 (본인 확인 또는 회원가입) → 서비스 이용

그 이후에는
ScienceON 로그인 → 연합인증 서비스 접속 → 서비스 이용

연합인증을 활용하시면 KISTI가 제공하는 다양한 서비스를 편리하게 이용하실 수 있습니다.

대극과식물 등대풀로부터 분리한 가수분해형 탄닌의 tyrosinase 활성 억제효과
Inhibitory Effect of Hydrolysable Tannins Isolated from the Euphorbia helioscopia on Mushroom Tyrosinase Activity in vitro 원문보기

약학회지 = Yakhak hoeji, v.45 no.2, 2001년, pp.214 - 219  

김진준 (영남대학교 약학대학) ,  이주상 (영남대학교 약학대학) ,  김소영 (영남대학교 약학대학) ,  김정아 (영남대학교 약학대학) ,  정시련 (영남대학교 약학대학)

Abstract ▼ AI-Helper 아이콘AI-Helper

Nineteen hydrolysable tannins isolated from the Euphorbia helioscopia (Euphorbiaceae) were tested for the inhibitory effect on mushroom tyrosinase activity in vitro. Inhibitory effect of gallotannin group exhibited more potent than that of phenolcarboxylic acid and ellagitannin groups against the en...

주제어

#Euphorbia helioscapia   #hydrolysable tannins   #mushroom tyrosinase activity   #pentagalloyl glucose  

AI 본문요약
AI-Helper 아이콘 AI-Helper

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

제안 방법

  • 용출액은 1% ethanolic FeCl3 solutione 발색시약으로 하여 TLC로 monitoring 하면서 분획하였다. 각각의 분획은 MCI-gel CHP 20P(75-150 μ, Mitsubishi Chemical Co. Ltd, H2O-MeOH), Fujigel ODS G3(43-65 μ, Fujig이 Hanbai Co. Ltd, H2O-MeOH), Bondapak C18/Porasil B(37-75|丄, Wers Associates, Inc, H2O- MeOH), Prep 円k 500/C 18(37-75g, Tbsoh Co., H2O- MeOH), TSK gel Phenyl-lbyopearl 650M(88 μ, Tbsoh Co., H2O-MeOH), Avicel cellulose(Funakoshi, 2% AcOH)등의 reverse phase column chroma-tography를 반복 실시하여 화합물을 단리하였다. 단리된 화합물은 'H- 및 13C-NMR, MS등의 spectral data를 검토하여 기지물질인 경우에는 spectral data를 표품의 문헌치와 비교하거나 직접 co-TLC를 실시하여 동정하였고, new compound의 경우에는 각종 spectral data의 검토, 가수분해 및 유도체합성 등을 통하여 구조를 구명하였다.
  • assay 방법도 두 가지가 있다. 그러나 tyrosine hydroxylase의 assay는 3H-labeled tyrosine을 이용하므로 실험에 제약이 따르기 때문에 본 연구에서는 dopa oxidase의 방법을 채택하였다「°)Dopa oxidase 의 활성측정은 dopa를 기질로 하여 tyrosinases 의하여 생성되는 반응산물인 dopachrome이 475 nm에서 흡광도를 나타내는 점을 이용하여 시행한다. 즉, 일정한 반응조건에서 생성된 dopachrome의 양을 A475로 정량해서 tyrosinase의 활성을 측정하며 시료의 첨가에 의한 activity의 변화를 관찰하여 효소 활성저해 정도를 평가하였다.
  • , H2O-MeOH), Avicel cellulose(Funakoshi, 2% AcOH)등의 reverse phase column chroma-tography를 반복 실시하여 화합물을 단리하였다. 단리된 화합물은 'H- 및 13C-NMR, MS등의 spectral data를 검토하여 기지물질인 경우에는 spectral data를 표품의 문헌치와 비교하거나 직접 co-TLC를 실시하여 동정하였고, new compound의 경우에는 각종 spectral data의 검토, 가수분해 및 유도체합성 등을 통하여 구조를 구명하였다.
  • 시료식물은 잘게 썰어 80% acetone으로 실온에서 일주일간 2회 반복 추출하였다. 추출액은 한데 모아 감압하에서 acetone을 중발 농축하였다.
  • 탄닌이 in 沅打。에서 mushroom tyrosinase 의 활성에 미치는 효과를 kojic acid를 비교물질로 하여 검토하였다(Eble 1).
  • 여액을 재차 농축하여 Sephadex LH-20 column°l] loading 한 후 water-methanol-acetone gradient로 하여 순차적으로 용출시켰다. 용출액은 1% ethanolic FeCl3 solutione 발색시약으로 하여 TLC로 monitoring 하면서 분획하였다. 각각의 분획은 MCI-gel CHP 20P(75-150 μ, Mitsubishi Chemical Co.
  • 그러나 tyrosine hydroxylase의 assay는 3H-labeled tyrosine을 이용하므로 실험에 제약이 따르기 때문에 본 연구에서는 dopa oxidase의 방법을 채택하였다「°)Dopa oxidase 의 활성측정은 dopa를 기질로 하여 tyrosinases 의하여 생성되는 반응산물인 dopachrome이 475 nm에서 흡광도를 나타내는 점을 이용하여 시행한다. 즉, 일정한 반응조건에서 생성된 dopachrome의 양을 A475로 정량해서 tyrosinase의 활성을 측정하며 시료의 첨가에 의한 activity의 변화를 관찰하여 효소 활성저해 정도를 평가하였다. 즉 반응액에 L-tyrosine 900 叫 L-dopa 90 叫 시료용액(0, 10, 20, 50, 100, 200 μ을 가한다.

대상 데이터

  • 추출 및 column chromatography용 용매는 시약용 1급을 사용하였고, TLC plate는 Kieselgel 60F254(Merck) 및 RP-18(Whatman)< 사용하였다. Column chromatography용 고정상은 silicagel(70-230 mesh, Merck), Sephadex LH-20(25-100 μ, Sigma), MCI-gel CHP 20P(75-150 |i, Mitsubishi Chemical Co), RP-18(40-63 μ, Merck), Tbyopearl HW-40F CIbso)등을 사용하였다. 발색시약으로는 1% ethanolic ferric chloride 용액, anisaldehyde 황산 용액, vanillin 황산 용액, 10% 황산 용액 등을 사용하였다.
  • UV는 Pharmacia의 Ultro-spec HI를 사용하였고, HPLC는 Shimadzu의 LC- 10A를 사용하였다. Fraction collector는 Advantec SFJ60을 사용하였으며, JH- 및 I3C-NMR spectrum 은 Broker ARX 300(300 MHz)> 사용하였고, chemical shift value는 tetramethylsilane(TMS) 를 내부표준물질로 하여 part per million(ppm) 단위로 나타내었다. 추출 및 column chromatography용 용매는 시약용 1급을 사용하였고, TLC plate는 Kieselgel 60F254(Merck) 및 RP-18(Whatman)< 사용하였다.
  • 발색시약으로는 1% ethanolic ferric chloride 용액, anisaldehyde 황산 용액, vanillin 황산 용액, 10% 황산 용액 등을 사용하였다. Tyrosinase 활성시험에 사용된 시약은 mushroom tyrosinase (ECI.14.18.1, Sigma), L-tyrosine(Sigma), 3, 4-dihy-droxyphenyl alanine(DOPA., Sigma) 등이며, buffer로는 NaH2PO4 buffer를 사용하였다.
  • 선광도는 JASCO의 DIP-100(digital polarimeter)# 사용하였다. UV는 Pharmacia의 Ultro-spec HI를 사용하였고, HPLC는 Shimadzu의 LC- 10A를 사용하였다. Fraction collector는 Advantec SFJ60을 사용하였으며, JH- 및 I3C-NMR spectrum 은 Broker ARX 300(300 MHz)> 사용하였고, chemical shift value는 tetramethylsilane(TMS) 를 내부표준물질로 하여 part per million(ppm) 단위로 나타내었다.
  • Column chromatography용 고정상은 silicagel(70-230 mesh, Merck), Sephadex LH-20(25-100 μ, Sigma), MCI-gel CHP 20P(75-150 |i, Mitsubishi Chemical Co), RP-18(40-63 μ, Merck), Tbyopearl HW-40F CIbso)등을 사용하였다. 발색시약으로는 1% ethanolic ferric chloride 용액, anisaldehyde 황산 용액, vanillin 황산 용액, 10% 황산 용액 등을 사용하였다. Tyrosinase 활성시험에 사용된 시약은 mushroom tyrosinase (ECI.
  • 시료물질의 분리 및 구조결정-실험에 사용된 등대풀은 전북 고창에서 채집하여 전문가의 감정을 받아 사용하였다. 시료식물은 잘게 썰어 80% acetone으로 실온에서 일주일간 2회 반복 추출하였다.

이론/모형

  • 기기 및 시약 - 융점은 Fisher-Johns사의 Melting Point Apparatus를 사용하여 측정하였으며, 온도는 보정하지 않았다. 선광도는 JASCO의 DIP-100(digital polarimeter)# 사용하였다.
본문요약 정보가 도움이 되었나요?

저자의 다른 논문 :

관련 콘텐츠

이 논문과 함께 이용한 콘텐츠

저작권 관리 안내
섹션별 컨텐츠 바로가기

AI-Helper ※ AI-Helper는 오픈소스 모델을 사용합니다.

AI-Helper 아이콘
AI-Helper
안녕하세요, AI-Helper입니다. 좌측 "선택된 텍스트"에서 텍스트를 선택하여 요약, 번역, 용어설명을 실행하세요.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.

선택된 텍스트

맨위로