[논문]인체 질상피세포와 반응시킨 질편모충의 주사전자현미경적 관찰

김승룡; 류재숙

인체 질상피세포와 반응시킨 질편모충의 주사전자현미경적 관찰
Scanning Electron Microscopic Observation of Trichomonas vaginalis Contacted with Human Vaginal Epithelial Cells 원문보기

여성의 질에서 분리한 질편모충을 생리주기 $5\sim10$일 사이의 인체 질상피세포와 10 : 1의 비율로 $37^{\circ}C$ 항온기에서 30분 반응시킨 후 주사전자현미경으로 질편모충의 형해를 관찰하였다. 정상 질편모충은 난원형 모양인데 비해 인체 질상피세포와 반응시킨 충체는 위족을 길게 내밀고 몸이 얇게 퍼져 아메바모양으로 변화하면서 질상피세포에 강하게 부착하는 것이 관찰되었다. 반면 HeLa세포에 부착된 질편모충은 난원형모양을 유지하면서 부착하는 것이 관찰되었다. 이 결과를 종합할 때 질편모충은 질상피세포에 부착할 때 질편모충의 생존에 유리한 아메바모양으로 변하는 것을 알 수 있었다.

The aim of this study was to observe morphological changes of Trichomonas vaginalis after contact with human vaginal epithelial cells, by scanning electron microscope. The vaginal epithelial cells (VEC) (menstrual, days $5\sim10$) from normal women were mixed with T. vaginalis (VEC/trichomonads ratio of 1 : 10), and incubated for 30 min. The parasitic body was changed to a more elongated shape with pseudopodia or was flattened to ameboid transformation showing highly adherence to VEC.

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

가설 설정

3) 하에서 3시간 전고정하였다. 인산완충액으로 세척한 다음 1% osmium tetraoxide로 1시간 20분 후고정하였다. 인산완충액으로 세척한 다음 50% ethan이로부터 농도 상승순으로 완전 탈수시키고 치환은 isoamyl acetate로 3회 실시하고 임계점 건조기 (critical point dryer, HCP-2)로 건조시킨 후 시료를 제물대(stube)에 부착시켰다.

제안 방법

이때 사용된 무균 배양배지의 처방은 다음과 같다. TYM 배지의 처방은 1차 증류수 435 ml에 Trypticase 10.0 g, Yeast extract 5.0 g, Maltose 2.5 g, L-cystein HCl 0.5 g, Ascorbic acid 0.5 g, K2HPO4 0.5 g, KH2PO4 0.5 g, FeSO4.7H2O 0.05 g, TC medium 0.25 g를 넣고 녹인 후 0.2(im 크기의 소공이 있는 여과지를 통과시켜 무균상태를 만든 후 말혈청 50ml를 섞어 만들고 15ml 배양 시험관에 5 ml씩 분주하여 사용하였다. 배 양액은 15 ml 배양시험관에 5 ml씩 넣 어 37℃ 항온기에서 배양하였으며 24시간 마다 계대 배양하였다 (Ryu et al, 2001).
질상피세포의 생존을 높게 유지하기 위해서는 질상피세포를 부유할 때 사용하는 완충액이 중요할 것으로 생각되어 pH가 다른 2가지 . 완충액을 비교하였다. 인체질 점막의 pH는 산성으로 알려져 있으므로 pH 4.
이 연구에서는 인체 질상피세포를 분리한 후 질편 모충을 넣어 반응시키고 질편모충의 변화를 주사전 자현미경으로 관찰하였다.
이 연구에서는 인체 질상피세포에 질편모충을 넣고 30분 후 부착되는 과정을 주사전자현미경으로 관 찰하였는데 질편모충의 둥근모양이 몸체를 얇게 펴서 질상피세포와의 접촉면적을 늘리면서 질상피세포에 강력하게 부착됨을 관찰하였다.
인산완충액으로 세척한 다음 1% osmium tetraoxide로 1시간 20분 후고정하였다. 인산완충액으로 세척한 다음 50% ethan이로부터 농도 상승순으로 완전 탈수시키고 치환은 isoamyl acetate로 3회 실시하고 임계점 건조기 (critical point dryer, HCP-2)로 건조시킨 후 시료를 제물대(stube)에 부착시켰다. 금속증착은 ion sputter (E-1010)를 사용하여 약 20nm 두께로 금 (Au)도금하였다.
금속증착은 ion sputter (E-1010)를 사용하여 약 20nm 두께로 금 (Au)도금하였다. 주사전자 현미경 (S-2380N)으로 가속전압 25kV에서 관찰하였다 (Minetal, 1994).
배 양액은 15 ml 배양시험관에 5 ml씩 넣 어 37℃ 항온기에서 배양하였으며 24시간 마다 계대 배양하였다 (Ryu et al, 2001). 질편모 충의 주사전자현미경적 관찰을 위해서는 0.1% polyAsin 으로 코팅한 덮개유리 (cover glass)에 세척한 질편모충을 퍼뜨리고 상온에서 3~5분간 방치하여 건조시킨 후 3% glutaraldehyde에 고정하였다 (Min et al., 1994).
4)7]- 들어있는 시험관에 넣고 잘 흔든다. 채취된 상피세포는 바로 실험실로 바로 보내서 trypan blue 로 생존율을 측정 하고 주사전자현미경적 관찰을 위하여 Alderete et al. (1995)의 방법을 수정하여 준비하였다. 먼저 질상피세포 부유액을 60μm 구멍의 nylon filter (Millipore NY60, Bedford, Massachusetts)<- 먼저 통과시켜 조직파편 및 다른 숙주세포를 제거한 다음 여과물을 다시 11 μm 구멍의 nylon filter (Millipore NY11)를 통과시켜 여과지 위에 있는 상피세포를 사용하였다.

대상 데이터

HeLa세포는 10% 우태아혈청을 포함하는 MEM배지에서 배양하였다. 11 X 11 mm 크기의 덮개 유리 (cover glass)를 24well 배양기에 넣고 HeLa세 포 3 x 105을 넣고 하룻밤 배양하였다(Minetai.
실험에 사용된 질편모충 KT4 분리주는 질염환자의 질분비액을 면봉으로 채취하여 Diamond의 TYM 배 지(1957)에 분리 배양한 것이다. 이때 사용된 무균 배양배지의 처방은 다음과 같다.
실험에 사용한 생리주기 5~10일 사이의 질상피세 포는 세포표면이 2가지 모양이었는데 세포끼리 연결 부위가 ridge로 솟아있는 세포와 furrow로 낮은 고랑이 파여 있는 세포가 관찰되었다. Centola (1978)는 백서의 질상피세포의 주사전자현미경적 관찰에서 ridge를 보이는 상피세포는 위쪽 층의 상피세포와 연결할 때 ridge가 접촉되는 곳이라고 하였다.
실험에 사용한 질상피세포는 생리주기 5~10일 사이의 질상피세포로 생존율은 34~42%범위이었다. 질 상피세 포는 상피세포와 상피세포사이의 경계부위 가 솟아나온 ridge로 연결되어 있거나(Fig.
이 실험에서 10여명의 질상피세포의 생존율을 조 사하니 생리주기 12~21일에 채취한 상피세포는 생 존율이 10% 내외이었고 생리주기 5~10일 사이의 질 상피세포는 생존율이 35% 이상을 보였으므로 생리주 기 10일 이전의 질상피세포를 사용하였다.
질염이 없는 여성으로 생리주기 5~10일 사이인 30대 여성 5명의 질내벽 상피세포를 다음과 같은 방법으로 채취하였다. 먼저 소독된 질경을 사용하여 질을 개대시킨 뒤, 질 세포진 검사에 이용되는 cyto- brush의 brush쪽을 이용하여 질내벽 양측을 수회 긁은 뒤, 이 brush를 5 ml의 인산완충액 (pH 7.
질편모충은 장축이 10jxm 내외의 크기의 타원형으로 4개의 길다란 앞편모를 가지고 있는데 이 편모는 세포내의 운동원기로부터 나올 때 두 부분으로 갈라져서 나온다. 두 개의 편모가 붙어서 나오다가 다시 한 개씩 갈라진다.

성능/효과

상피세포의 상태가 좋지않아 microridge나 미세융 모를 관찰하기 어려운 경우에도 질편모충가 질상피 세포에 단단히 부착되어 질편모충과 질상피세포의 구분이 어려운데 질편모충의 편모가 표면으로 나와 있어 구분되었다(Fig. 9). 이분열하는 질편모충은 2벌 의 편모가 충체의 앞, 뒤로 관찰되며 뱀 모양으로 관찰되었다 (Fig.
어떤 원충에서는 파동막도 보였다. 질 편모충 표면에 구멍이 관찰되었으며 불규칙한 완만한 주름도 관찰되었다(Fig. 12).

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증

인체 질상피세포와 반응시킨 질편모충의 주사전자현미경적 관찰
Scanning Electron Microscopic Observation of Trichomonas vaginalis Contacted with Human Vaginal Epithelial Cells 원문보기

초록
AI-Helper

Abstract ▼ AI-Helper

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

가설 설정

제안 방법

대상 데이터

성능/효과

이 논문을 인용한 문헌

저자의 다른 논문 :

관련 콘텐츠

원문 보기

이 논문과 함께 이용한 콘텐츠

AI-Helper ※ AI-Helper는 오픈소스 모델을 사용합니다.

선택된 텍스트

연합인증

인체 질상피세포와 반응시킨 질편모충의 주사전자현미경적 관찰 Scanning Electron Microscopic Observation of Trichomonas vaginalis Contacted with Human Vaginal Epithelial Cells 원문보기

초록 용어보기논문에서 용어와 풀이말을 자동 추출한 결과로, 시범 서비스 중입니다. AI-Helper

Abstract ▼ AI-Helper

주제어

AI 본문요약 엑셀 다운로드 AI-Helper

가설 설정

제안 방법

대상 데이터

성능/효과

이 논문을 인용한 문헌

저자의 다른 논문 :

김승룡 (1) 류재숙 (10)

관련 콘텐츠

원문 보기

이 논문과 함께 이용한 콘텐츠

AI-Helper ※ AI-Helper는 오픈소스 모델을 사용합니다.

선택된 텍스트

인체 질상피세포와 반응시킨 질편모충의 주사전자현미경적 관찰
Scanning Electron Microscopic Observation of Trichomonas vaginalis Contacted with Human Vaginal Epithelial Cells 원문보기

초록
AI-Helper

AI 본문요약
AI-Helper