선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 따라서 본 연구는 연을 취급하는 근로자들에서의 공기중 연노출 정도를 측정하면서 동시에 이들 근로자들의 ALAD gene type을 검사하여, 연 노출 정도에 따라 이유전자 형질의 분포가 어떠한 가를 확인하며, 이 두 가지 대립 유전자 형이 근로자들의 연 노출에 의해 어떤 자각증상에 어떻게 영향을 주는가를 확인하며, 특히 만성적 연 노출 근로자들의 신기능 영향을 추적하는 아주 중요한 지표가 될 수 있는 가를 확인하고자 한다.
제안 방법
- 7) 연노출 관련 자각증상; 자기기입식 설문지로 15개 연노출관련 문항을 기록 하게 한 후 의사가 응답 기록에 따른 증상을 확인하여 최종 응답으로 하였다(표 1).
- QIAamp spin column에서 AW(elution) buffer 200㎕를 넣고 70℃에서 incubation 한 후 실온에서 1분간 방치하고 filter를 부착하여 8,000rpm에서 1분간 원심분리하여 추출된 DNA가 포함된 시료를 중합효소 연쇄반응(polymerase chain reaction: PCR)용으로 사용하였다.
- 5㎖ centrifuge tube에 넣고 25㎕ QIAgen protease K와 200㎕ AL (prepare) buffer를 넣고 잘 섞은 후 70℃ 항온수조에서 10분간 방치하였다. isopropanol(96-100%) 210㎕를 첨가하여 5초간 진탕 후, 8,000rpm에서 수초간 원심분리하였다. 2㎖ 용량의 collection tube에 QIAamp spin column을 넣고 시료를 전량 옮긴 후, 8,000rpm에서 원심분리하였다.
- ② 중합효소 연쇄반응(PCR); 중합효소연쇄반응은 Bio RAD사의 Thermal Gene Cycler(Serial No. 10596)를 이용하였다. 중합효소 연쇄반응을 위한 primer는 OPERON(Operon Inc.
- 공기중 농도를 구분한 대상자들의 경우 전원 측정이불가능하여 단위작업장 별로 근로자수를 확인한 후 노동부의 “작업환경측정 및 정도관리규정(노동부 고시 제2001-20호)”에제 19조에 의거하여 측정한 후 개별로 측정된 근로자들의 측정치는 그대로인 반면, 나머지 근로자들은 개별로 측정된 측정치를 산술평균하여 그 평균치를 개별 대상자에 대하여 각각의 노출농도로 정하였다.
- 전기영동한 gel은 UV-trans-illuminator 를 이용하여 139-473 염기쌍 범위 내에서 염색된 DNA 절편을 확인하였다. 시료 DNA의 절편위치는 표준 DNA를 동시에 전기영동하여 비교 확인하였다.
- 본 연구는 축전지 제조업, 연분 제조 및 플라스틱 안정제 제조, 그리고 2차제련 업체를 포함한 사업장으로부터 사무직 근로자 144명과 생산직 근로자 598명, 계 742명을 연구대상으로 하였다. 이들 연구대상들에서 연 노출정도에 따른 이 두 가지 유전자의 분포를 알아보고, 연 노출지표들이 이 두 가지 유전자형별로 어떤 변화를 나타내는지를 확인하며, 연 노출 근로자들의 자각증상에는 어떤 특성이 있는 가를 확인하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
- 002M)상에서 150V로 40분간 전기영동을 하였다. 전기영동한 gel은 UV-trans-illuminator 를 이용하여 139-473 염기쌍 범위 내에서 염색된 DNA 절편을 확인하였다. 시료 DNA의 절편위치는 표준 DNA를 동시에 전기영동하여 비교 확인하였다.
- 전처리 용액에 primer A 1㎕(200㎍/㎕)와 primer B 1㎕/200㎍/㎕)를 넣은 후 template DNA 3㎕(<1㎍/100㎕ 105-106 copies)를 넣은 후 증류수로 총 50㎕로 하였다.
- 중합효소 연쇄반응 전처리는 10배 농축된 PCR buffer 5㎕, 0.2mM-dNTP 1㎕, 그리고 1-5u/100㎕ Taq DNA polymerase 0.3㎕(5unit/㎕)를 포함한 용액을 이용하였다. 전처리 용액에 primer A 1㎕(200㎍/㎕)와 primer B 1㎕/200㎍/㎕)를 넣은 후 template DNA 3㎕(<1㎍/100㎕ 105-106 copies)를 넣은 후 증류수로 총 50㎕로 하였다.
대상 데이터
- 본 연구는 축전지 제조업, 연분 제조 및 플라스틱 안정제 제조, 그리고 2차 제련업체를 포함한 3개 사업장으로부터 사무직 근로자 144명과 생산직 근로자 598명, 계 742명을 연구대상으로 하였다.
- 이 유전자 형태는 ALAD1-1과 ALAD1-2의 두 가지 형으로 구분되며 이유전자 형태에 따라 연 노출이 인체에 미치는 영향이 달라진다고 알려져 왔다. 본 연구는 축전지 제조업, 연분 제조 및 플라스틱 안정제 제조, 그리고 2차제련 업체를 포함한 사업장으로부터 사무직 근로자 144명과 생산직 근로자 598명, 계 742명을 연구대상으로 하였다. 이들 연구대상들에서 연 노출정도에 따른 이 두 가지 유전자의 분포를 알아보고, 연 노출지표들이 이 두 가지 유전자형별로 어떤 변화를 나타내는지를 확인하며, 연 노출 근로자들의 자각증상에는 어떤 특성이 있는 가를 확인하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
- 10596)를 이용하였다. 중합효소 연쇄반응을 위한 primer는 OPERON(Operon Inc., CA U.S.A)에서 합성한 oligonucleotide primer를 사용하였다. 실험에 이용한 최종 농도는 증류수로 희석하여 4㎍/㎕되게 하였다.
이론/모형
- 4) 혈중연; 전혈 0.5㎖를 2.5㎖의 1%- Triton X-100으로 희석하여 비불꽃 원자흡광도계(Hitachi Z-8100, Polarized Zeeman effect AAS, Japan)로 분석하고 표준 곡선은 standard addition법으로 작성하였다(Fernandez, 1975).
- 6) 요중 δ-amino levulinic acid(ALAU); spot urine을 채취하여 HPLC법에 의하여 분석하였다(안규동 등, 1996).
성능/효과
- 1) 근로자의 연노출 조사; 조사대상 사업장에 대하여 근로자들의 공기중 연 농도 측정은 정기적인 연 2회 작업환경측정에서의 결과를 부서별로 평균하여 해당 부서별 근로자들의 노출 농도로 하였다. 그러나 사무직 근로자에 대한 작업환경측정을 하지 못하였다.
- 1. 전체 대상자 742명중에서 ALAD1-1유전형질을 가진 근로자는 656명(88.4%) 이었으며, ALAD1-2는 86명(11.6%)로 나타났다.
- 2. 조사된 변수들 중에서 혈중 ZPP와 요중 ALA는 ALAD1-2 형질에서 낮았으며 통계학적으로도 유의하였으나(p<0.05), 나머지 변수들 즉 혈중연과 연령 및 근속 년수 등에서는 유의한 차이가 없었다.
- 3. ALAD1-2 유전자형을 가진 근로자들의 작업장 공기중 농도별 분포는 허용농도 1/2 이하의 수준에서 14.0%로 가장 높았으며, 그 다음이 사무직 근로자들에서 13.2%, 다음이 0.05-0.099㎎/㎥의 수준에서 11.8%, 다음은 0.025-0.049㎎/㎥ 수준에서 10.4%였으며, 허용기준 2배 이상의 노출군에서는 9.4%로 가장 낮았으나 통계적 유의성은 없었다.
- 4. 15개의 연노출 관련 자각증상 호소율을 혈중연, 근속년수, 흡연, 음주 등의 변수를 통제한 후 ALAD1-1 유전자형을 기준으로, ALAD1-2 유전자형의 증상호소율 비차비(odds ratio)를 구한 logistic 분석의 결과는 근골격계 증상 중에서 S7 "관절이 아프거나 쑤시는 듯하다“가 ALAD1 -1유전자형 집단에 비하여 OR=0.481, 95% CI=0.248-0.932로서 유의하게 낮았으며, 일반증상 중에서 S11 "조그만 일에도 민감하고 신경이 쓰인다”는 ALAD1-2 유전자형에서 OR=1.636, 95% CI=1.035-2.586로서 통계적으로 유의하게 높았다.
- ALAD 1-1, 1-2, 2-2 각각의 경우 염색상이 나타나는 절편의 위치가 전기영동상 이동한 위치에 따라 서로 다른 양상을 나타내어 ALAD1-1은 473, 271, 158, 139 염기쌍 절편을 보이고 ALAD1-2는 473, 402, 271, 158, 139 염기쌍의 절편을, 그리고 ALAD2-2는 402, 271, 158, 139 염기쌍의 절편을 보여 이 유전인자의 다형성을 결정하였다.
- 10㎎/㎥ 이상의 5개로 구분 하였다. 그 결과 대상자들의 분포가 가장 높은 노출농도는 0.05-0.10㎎/㎥으로서 296명(39.9%)이 포함되고 있으며, 저농도 노출 대상자는 57명(7.7%)인 것으로 나타났으며, 공기중 농도를 측정을 하지 못한 사무직은 19.5%였다. 이러한 노출농도에 따른 대상자들의 ALAD1-2형 유전자형 분포는 허용기준 1/2이하의 노출수준에서 14.
- 2%로 역시 통계적 유의성은 없었다. 대체적으로 근골격계 증상은 ALAD1-2 유전자형에서 호소율이 낮은 반면, 일반증상 호소율은 ALAD1-1 유전자형에서 낮은 것으로 나타났다. 한편 ALAD1-1 유전자형에 대하여 ALAD1-2 유전자형의 증상호소율은 근골격계 증상 중에서 S7 "관절이 아프거나 쑤시는 듯하다“가 ALAD1-1 유전자형 집단에 비하여 OR=0.
- 두 유전자형에 대한 단순비교에서 호소율이 가장 높은 증상은 S9 "온 몸이 나른하고 피곤하다“로 ALAD1-1에서 51.7%, ALAD1- 2에서 53.5%로서 두 집단간에 유의한 차는 없었고, 가장 적은 호소율을 나타낸 증상은 S4 "갑자기 배꼽주위가 아플 때가 있다”로 5.5%와 1.2%로 역시 통계적 유의성은 없었다.
- Schwartz 등(1995)은 한국의 3개 축전지 공장을 대상으로 290명의 유전형질을 조사한 바 유전자형 구분에 따른 혈중 연의 차이는 없으나 40㎍/㎗ 이하 및 이상을 종속변수로한 logistic 분석에서 유전형질 구분이 유의한 교차비를 나타내었고, 이들 이형 유전자형의 근로자들의 근속년수가 유의하게 길어 이형 유전자를 가진 근로자들의 건강보호 효과를 보고하였다. 본 연구에서는 유전자형 구분에서 연노출 지표들에서 혈중 ZPP와 요중 ALA 농도는 이형 유전자인 ALAD1-2에서 유의하게 낮은 것으로 확인되었으며, 혈중 연, 연령과 근속년수 등에서는 유의한 차이가 없었다. Lee 등(2000)은 혈중 연, ZPP 요중 ALA, DMSA-cheletable lead 등의 변수를 각각의 median값의 이하, 이상으로 구분하여 logistic 분석을 한 결과 신경근육계의 증상에 영향을 나타내는 유의한 변수는 DMSA-cheletable lead이었고, 나머지 연노출 지표들은 통계적인 유의성을 나타내지 못하였다고 보고하였다.
- Alexander 등(1998)은 납 및 아연제련소 근로자 134명을 대상으로 이 유전자들의 분포와 연 노출관련 지표들과의 관련성에 관한 단면적 연구에서 ALAD1-1은 85%, ALAD1-2 유전자형은 15%인 것으로 나타났으며, 혈중 연의 경우 ALAD1-2형에서 다소 높은 것으로 나타났으나 통계적 유의성은 없었으며, 혈중 ZPP는 그 반대 현상이 나타나 저자들은 ALAD1-2형의 경우 연의 과도한 노출에 대한 연에 의한 영향을 적게 받는 것으로 추정하였다. 본 조사에서는 ALAD1-2형이 11.6%로 이들의 조사보다는 다소 낮은 빈도인 것으로 확인되었다. Benkmann 등 (1983)은 독일, 일본, 라이베리아의 사람들을 대상으로 이들 유전자의 분포를 확인한 결과 독일은 88.
- 05), 나머지 변수들 즉 혈중연과 연령 및 근속년수에서는 유의한 차이가 없었다. 이들 대상자들의 성비도 유의하지 않았으며, 흡연과 음주에서도 유전형질에 따른 유의한 차이는 없었다.
- 5%였다. 이러한 노출농도에 따른 대상자들의 ALAD1-2형 유전자형 분포는 허용기준 1/2이하의 노출수준에서 14.0%로 빈도가 가장 높았으며, 고농도 노출군인 허용기준 2배 이상 고농도 노출 군에서는 9.4%로 낮은 것으로 나타났으나 각 노출군별로 통계학적인 유의한 차는 없었다.
- 조사된 변수들 중에서 혈중 ZPP와 요중 ALA는 ALAD1-2 형질에서 낮았으며 통계학적으로도 유의하였으나 (p<0.05), 나머지 변수들 즉 혈중연과 연령 및 근속년수에서는 유의한 차이가 없었다.
- 표 1에서 전체 742명의 대상자들 유전형질은 ALAD1-1이 656명으로 88.4%였으며, ALAD1-2는 86명으로 11.6%를 나타내었다. 단 ALAD2-2 유전자를 가진 대상자가 1명이 있어 이는 ALAD1-2 유전자형에포함시켰다.
- 한편 ALAD1-1 유전자형에 대하여 ALAD1-2 유전자형의 증상호소율은 근골격계 증상 중에서 S7 "관절이 아프거나 쑤시는 듯하다“가 ALAD1-1 유전자형 집단에 비하여 OR=0.481, 95% CI=0.248-0.932로서 유의하게 낮았으며, 일반증상 중에서 S11 "조그만 일에도 민감하고 신경이 쓰인다”는 ALAD1-2 유전자형에서 OR=1.636, 95% CI=1.035-2.586로서 통계적으로 유의하게 높았다.
- 한편 본 연구에서 조사한 자각증상은 대부분 두 유전자형에서 유의한 차이를 확인할 수 없었으나 신경근육계 증상인 S7 "관절이 아프거나 쑤시는 듯하다“는 ALAD1-2 유전자형 집단에서 유의하게 낮았으며, 반면 일반증상 중에서 S11 "조그만 일에도 민감하고 신경이 쓰인다”는 ALAD1-2 유전자형에서 자각증상 호소율이 유의하게 높은 것으로 나타나 앞의 연구들과는 다소 상이한 결과를 나타내었다.
- 0%로서 앞의 연구에서 황인종인 일본의 경우보다는 높고 백인종인 독일인보다는 낮은 빈도를 나타내고 있었다. 한편 본 연구에서는 ALAD1-2의 빈도가 앞의 연구에서의 독일의 경우와 유사한 것으로 나타났고, 특히 사무직의 경우 대상자들에서 높은 빈도를 보이고 있고, 김우형 등의 연구보다 본 연구에서는 2배 이상 높은 빈도를 나타내었다. Schwartz 등(1995)은 우리나라의 3개 축전지제조 공장의 308명을 대상으로 한 조사에서 ALAD1-2의 유전자형이 각 회사별로 8.
후속연구
- 김화성(1999)은 “혈중 연 및 골중 연(tibial lead)과 조혈기능 검사지표 사이의 관련성에 ALAD 다 형질성이 미치는 영향”이라는 연구에서 이형의 ALAD 유전형질을 가진 근로자들의 혈중 ZPP 농도와 요중 ALA 배설량이 낮게 나타났으며 이러한 결과는 이형 유전형질의 근로자는 연에 대한 보호효과가 있다고 주장한 바 본 연구에서도 이형 유전자의 대상자들에서 동일한 결과를 나타내었다고 할 수 있다. 다만 이상의 결과는 제한된 지역과 제한된 제조업에서의 결과인 만큼 앞으로 더 광범한 조사연구가 이루어져 우리나라 사람들의 ALAD 유전자형의 분포가 확실하게 밝혀져야 할 것으로 생각된다.
- 한편 김병기 등(2000)은 우리나라의 모 축전지 공장을 대상으로 263명의 ALAD 유전자형을 확인한 연구에서 ALAD1-1은 85.9%, ALAD1-2는 14.1%인 것으로 보고하였는바 본 연구의 결과와 다소 상이한 분포를 나타내었고 앞에서 고찰한 연구결과와도 다소 차이가 있는 결과를 나타낸바 아직까지 우리나라 근로자들의 이들 유전자형의 분포를 확정하기는 어렵다고 생각되어 앞으로 이들 유전자형에 대한 조사가 더 광범하게 이루어져야 할 것으로 생각된다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.