[논문]팽나무버섯 polyphenol oxidase의 정제 및 특성

표한종; 손대열; 이찬

[국내논문] 팽나무버섯 polyphenol oxidase의 정제 및 특성
Purification and Characterization of Polyphenol Oxidase from Flammulina velutipes 원문보기

한국식품과학회지 = Korean journal of food science and technology, v.34 no.4 = no.164, 2002년, pp.552 - 558

표한종 (중앙대학교 산업과학대학 식품공학과) , 손대열 (성균관대학교 의과대학) , 이찬 (중앙대학교 산업과학대학 식품공학과)

초록
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팽나무버섯(Flammulina velutipes)에서 polyphenol oxidase가 황산암모늄 침전법, Superdex G-75 겔여과크로마토그래피, Phenyl superose 친화크로마토그래피, Mono-Q 이온교환수지 크로마토그래피, 그리고 Superdex S-200 겔크로마토그래피 등의 과정으로 정제되었으며, 특성화 되었다. 정제된 효소의 비활성도는 199.1 units/mg으로 나타났으며, 이 효소는 40 kDa의 단일폴리펩티드 사슬로 구성되어 있음이 밝혀졌다. 효소반응의 최적 pH와 온도는 각각 6.0과 $25^{\circ}C$,이었으며, pH 3과 5 사이의 산성조건과, pH 8과 10 사이의 알카리 조건에서는 활성이 감소되거나 상실되었다. 이 효소는 L-DOPA와 caffeic acid 등의 o-diphenols류에 대하여 높은 효소활성을 나타내었으며, L-DOPA와 caffeic acid에 대한 Km 값은 각각 3.97mM과 1.78mM로 계산되었다. 2-mercaptoethanol, L-ascorbic acid, sodium bisulfite, EDTA와 $Mg^{2+}$은 팽나무버섯 pholyphenol oxidase의 효소활성을 감소시켰으며, $Cu^{2+}$, $Fe^{2+}$, $Zn^{2+}$ and $Ni^{2+}$ 등은 효소의 활성을 촉진하는 인자로 밝혀졌다. 정제된 효소는 $-70^{\circ}C$에서 3개월, 그리고 $-20^{\circ}C$에서 1개월간 활성의 손실 없이 저장이 가능하였다.

Abstract ▼ AI-Helper

Polyphenol oxidase from Flammulina velutipes was purified and characterized. Purification of polyphenol oxidase was achieved by ammonium sulfate precipitation, Superdex G-200 gel filtration chromatography, Phenyl superose affinity chromatography, Mono-Q anion exchange chromatography and Superdex S-200 gel filtration chromatography on FPLC. After these purification steps specific activity of purified polyphenol oxidase increased to 199.1 units/mg. Polyphenol oxidase from F. velutipes was composed of a single polypeptide with molecular weight of about 40 kDa. Optimum pH and temperature for the enzyme reaction were found to be 6.0 and $25^{\circ}C$, respectively. The activity of the enzyme gradually decreased at acidic pH between 3 and 5, and the enzyme lost its activity at alkaline pH between 8 and 10. This enzyme exhibited high substrate specificity to o-diphenols. Km-values for L-DOPA and caffeic acid were found to be 3.97 mM and 1.78 mM, respectively. 2-mercaptoethanol, L-ascorbic acid, sodium bisulfite, EDTA and $Mg^{2+}$ inhibited the activity of pholyphenol oxidase and $Cu^{2+}$, $Fe^{2+}$, $Zn^{2+}$ and $Ni^{2+}$ increased enzyme activity. The activity of enzyme was well maintained at $-70^{\circ}C$ for over 4 months, and at $-20^{\circ}C$ for 1 months.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

본 연구에서는 팽나무버섯의 갈변을 촉매하는 system을 규명하기 위한 기초연구로서 팽나무버섯 내에서 polyphenol류의 산화를 촉매하는 효소를 정제하고 그 특성을 밝혀 갈변의 주요 원인을 알아보고자 하였다.

제안 방법

각 완충용액으로 pH가 조정된 효소 용액과 L-DOPA 기질용액을 사용하여 효소활성을 측정하고 효소반응의 최적 pH를 결정하였다. 4°C에서 각 pH별 효소안정성을 측정하기 위하여 완충액과 정제된 효소액을 1:1의 비율로 혼합한 다음, 4°C에서 24시간 저장한 후 효소액의 상대 활성을 측정하였다. 반응의 최적 온도를 측정하기 위하여 정제된 효소액과 기질 용액을 각각 4°C에서 40°C 범위에서 일정시간 항온처리 후 혼합하여 반응속도를 측정하였다.
FPLC(Gilson, USA), Superdex G-200, Superdex S-200, Phenyl Superose와 Mono-Q(Pharmacia biotech, Sweden) 컬럼 크로마토그래피가 정제를 위하여 사용되었으며, 효소 활성은 micro plate reader(Bio-Rad, USA)를 사용하여 측정하였다.
Monophenol류인 vanillic acid와 o-diphenol류인 L-DOPA, catechol, chlorogenic acid, caffeic acid 및 m-diphenol류인 resorcinol, p-diphenol류인 hydroquinone, 그리고 triphenol류인 pyrogallol 등을 10mM의 농도로 용해시킨 후 각 기질용액에 대한 효소시료의 상대적 활성도를 측정하였다.
PPO의 저해제로 알려진 sodium dodecylsulfate, ethylenedi aminetetraacetic acid(EDTA), L-cysteine, sodium bisulfite 및 sodium chloride 등을 각각 10mM 인산완충용액(pH 6.0)에 0.1, 1, 10, 100, 1000 mM 농도로 용해시켰다. 정제된 효소액 100μL에 저해제 2OμL를 혼합하여 4°C에서 10분간 항온처리 후, 기질용액 20μL를 첨가하여 25°C에서 활성을 측정하였다.
pH 3에서 6까지는 아세트산완충용액, pH 6에서 8은 인산완충용액, 그리고 pH 8에서 10은 Tris/HCl 완충용액을 사용하였다. 각 완충용액으로 pH가 조정된 효소 용액과 L-DOPA 기질용액을 사용하여 효소활성을 측정하고 효소반응의 최적 pH를 결정하였다. 4°C에서 각 pH별 효소안정성을 측정하기 위하여 완충액과 정제된 효소액을 1:1의 비율로 혼합한 다음, 4°C에서 24시간 저장한 후 효소액의 상대 활성을 측정하였다.
반응의 최적 온도를 측정하기 위하여 정제된 효소액과 기질 용액을 각각 4°C에서 40°C 범위에서 일정시간 항온처리 후 혼합하여 반응속도를 측정하였다. 그리고 효소의 온도별 안정성을 측정하기 위하여 정제된 효소용액을 각 온도에서 항온 방치시키면서 5분 간격으로 효소용액을 취하여 25°C에서 잔존 활성을 측정하였다.
금속이온이 효소활성에 미치는 영향을 살펴보기 위하여 FeSO_⁴, MgSO_⁴, CuSO₄, CoSO₄, NiSO₄, ZnSO₄, MnCl₂, ZnCl₂, 및 CaCl₂를 각각 1mM이 되게 10mM 인산완충용액(pH 6.0)에 용해시켰다. 이용액을 효소용액에 첨가하여 10분간 처리 후 효소활성을 측정하였다.
기질 농도의 영향을 살펴보기 위하여 주 기질인 L-DOPA를 1mM에서 10mM까지 각 농도별로 조제하여, 정제된 효소 시료에 대한 기질농도의 영향을 조사하였다. Michaelis 상수인 Km값과는 Lineweaver-Burka⁽¹⁰⁾의 방법을 이용 도식하여 구하였다.
4°C에서 각 pH별 효소안정성을 측정하기 위하여 완충액과 정제된 효소액을 1:1의 비율로 혼합한 다음, 4°C에서 24시간 저장한 후 효소액의 상대 활성을 측정하였다. 반응의 최적 온도를 측정하기 위하여 정제된 효소액과 기질 용액을 각각 4°C에서 40°C 범위에서 일정시간 항온처리 후 혼합하여 반응속도를 측정하였다. 그리고 효소의 온도별 안정성을 측정하기 위하여 정제된 효소용액을 각 온도에서 항온 방치시키면서 5분 간격으로 효소용액을 취하여 25°C에서 잔존 활성을 측정하였다.
0)에 용해시켰다. 이용액을 효소용액에 첨가하여 10분간 처리 후 효소활성을 측정하였다.
정제된 팽나무버섯 PPO의 저장 중 효소활성 변화를 측정하기 위하여 -70, -20, 4°C 그리고 25°C에서 일정기간 저장하면서 효소활성 변화를 측정하였다.
pH 변화에 따라 단백질의 4차 구조가 달라지므로, pH 안정성과 최적 pH는 그 값이 일치하지 않는 경우가 많다. 정제된 효소를 각각의 pH에서(4°C) 저장하며 시간별로 효소액을 취하여 pH 6으로 조정한 후 효소의 잔존활성을 측정하였다. 이 실험에서 4°C의 경우 팽나무버섯 PPO는 인산완충용액(pH 6.
분자량 측정

정제된 효소의 순도 분석 및 분자량 측정을 위하여 SDS-PAGE와 겔여과트로마토그래피를 수행하였다. Fig.
측정하였다. 표준물질로 bovine serum albumin(BSA)을 사용하였고, 590nm에서 흡광도를 측정한 후 검량선에 의해서 단백질의 양을 구하였다.
효소용액을 각각의 온도에서 항온처리하며 5분 간격으로 잔존 활성을 측정하였다(Fig. 4, b). 그림에서처럼 35°C에서는 20분에 25%, 40°C에서는 58%, 45°C에서는 75% 그리고 50°C에서 95%의 활성이 감소하였다.
0)에 L-DOPA를 10mM 되도록 용해시킨 기질 용액 2OμL에 효소용액 100μL를 가하였다. 효소의 1unit은 25°C, 490nm에서 1분당 0.001의 흡광도 변화를 나타내는 양으로 정하였다.
1과 같은 결과를 얻었다. 효소활성을 나타내는 분획들을 모아 방법에서처럼 Phenyl superose 친화성 흡착 크로마토그래피, Mono-Q 이온교환 크로마토그래피 과정을 수행하였다. 두 과정에서 효소는 모두 컬럼에 결합되지 않았으며, 통과된 효소 시료를 모아 농축 후 Superdex S-200 겔여과크로마토그래피를 수행한 결과 24에서 26번까지의 분획들이 순수하게 정제된 PPO를 포함하고 있는 것으로 확인되었다(Fig.

대상 데이터

The starting material was 100 g of Flammulina velutipes stromata.
사용하였다. 겔여과크로마토그래피를 위한 분자량 표준물질로 β-amylase(200kDa), alcohol dehydrogenase(150kDa), bovine serum albumin(66kDa), carbonic anhydrase(29kDa), cytochrome C(12.4kDa), aprotinin(6.5kDa)을 사용하였다.
(USA) 제품을 사용하였다. 기질인 catechol, resorcinol은 Junsei chemical company(Japan)에서 구입하였다. 그 밖의 시약은 일급 또는 특급 시약을 사용하였다.
본 실험에서는 1998년 7월 경기도 화성에 소재한 경기농산(주)에서 재배된 성숙하고(생육 55일) 신선한 팽나무버섯을 재료로 사용하였다. Chlorogenic acid, catechin, L-3,4-dihydroxy phenyl alanine(L-DOPA), pyrogallol, caffeic acid, hydroquinine, vanillic acid, 분자량 측정용 표준단백질 시약 등은 Sigma chemical Co.

이론/모형

2%로 낮게 나타났다. Bolwell⁽⁷⁾, Hurkey⁽¹¹⁾, Benjamine⁽¹²⁾ 및 Rivas 등⁽¹³⁾이 비슷한 방법을 사용하여 감자, 녹두잎, 체리 그리고 배에서 각각 PPO를 분리 정제하였다. Pari⁽¹⁴⁾은 키위에서 PPO를 12배 정제하였으며, 바나나^(¹⁵)와 아보카도⁽¹⁶⁾에서 각각 24.
대한 기질농도의 영향을 조사하였다. Michaelis 상수인 Km값과는 Lineweaver-Burka⁽¹⁰⁾의 방법을 이용 도식하여 구하였다.
단백질량은 Bradford 등⁽⁸⁾의 방법을 응용하여 측정하였다. 표준물질로 bovine serum albumin(BSA)을 사용하였고, 590nm에서 흡광도를 측정한 후 검량선에 의해서 단백질의 양을 구하였다.
분자량 측정

정제된 효소의 순도 및 분자량을 측정하기 위하여, SDS-PAGE 전기영동법⁽⁹⁾과 겔여과크로마토그래피(gel permeation chromatography)를 사용하였다. 겔여과크로마토그래피를 위한 분자량 표준물질로 β-amylase(200kDa), alcohol dehydrogenase(150kDa), bovine serum albumin(66kDa), carbonic anhydrase(29kDa), cytochrome C(12.
팽나무버섯 PPO의 L-DOPA와 caffeic acid에 대한 Km값이 Lineweaver-Burk⁽¹⁰⁾의 방법에 의하여 plot되었으며(Data not shown), 이 plot에 의하여 caffeic acid와 L-DORA의 Km값은 각각 1.78mM과 3.97mM로 확인되었다. Avocado⁽¹⁶⁾ PPO는 DL-DOPA에 대하여 특이성을 나타내었으며 (Km=3.

성능/효과

Fig. 1, b)의 lane 1은 Superdex G-200 겔여과 크로마토그래피, lane 2는 Phenyl superose 친화성 흡착 크로마토그래피, 그리고 lane 3은 마지막 정제 단계인 Superdex S-200 겔여과 크로마토그래피의 결과를 나타내고 있으며, 전기영동 후 silver staining시 단일 band를 나타내어 효소가 순수하게 정제되었음을 확인하였다. Fig.
있다. 다섯 단계의 정제과정을 통하여 팽나무버섯 PPg 황산암모늄 염석처리 침전물로부터 17.9배 정제되었으며 효소의 회수율은 2.2%로 낮게 나타났다. Bolwell⁽⁷⁾, Hurkey⁽¹¹⁾, Benjamine⁽¹²⁾ 및 Rivas 등⁽¹³⁾이 비슷한 방법을 사용하여 감자, 녹두잎, 체리 그리고 배에서 각각 PPO를 분리 정제하였다.
효소활성을 나타내는 분획들을 모아 방법에서처럼 Phenyl superose 친화성 흡착 크로마토그래피, Mono-Q 이온교환 크로마토그래피 과정을 수행하였다. 두 과정에서 효소는 모두 컬럼에 결합되지 않았으며, 통과된 효소 시료를 모아 농축 후 Superdex S-200 겔여과크로마토그래피를 수행한 결과 24에서 26번까지의 분획들이 순수하게 정제된 PPO를 포함하고 있는 것으로 확인되었다(Fig. 1. a, b).
그러나 -20°C에서는 저장 2개월만에 PPO의 활성이 40%까지 감소됨을 보였다. 또한 4°C 에서 24시간 저장으로 PPO의 활성이 75%로 감소하고, 30°C에서는 저장 24시간 만에 효소활성이 45%의 급격한 감소를 보였다. 이 같은 결과로 판단시 팽나무버섯 PPO의 활성을 유지하는 가장 좋은 저장 조건은 -70°C임을 알 수 있었다.
일반적으로 PPO는 특정온도에서 최적의 활성을 가지고 있다. 보고된 버섯류에서는 최적온도가 25~55°C 의 넓은 범위를 가지고 있는 것으로 나타났으나, 연구 결과 팽나무버섯 ppo는 25°C에서 최적의 활성을 보였다.
또한 4°C 에서 24시간 저장으로 PPO의 활성이 75%로 감소하고, 30°C에서는 저장 24시간 만에 효소활성이 45%의 급격한 감소를 보였다. 이 같은 결과로 판단시 팽나무버섯 PPO의 활성을 유지하는 가장 좋은 저장 조건은 -70°C임을 알 수 있었다.
송이버섯 효소(23)의 활성은 70°C에서 2분간 가열로 완전히 소실되었다고 보고되었으며, 배의 PPO⁽¹⁶⁾는 55°C에서 1시간 이상 안정하였다. 이 연구에서 팽나무버섯 PPO는 55°C에서 5분간 가열로 활성을 잃고 불활성화 되었으며, 송이버섯, 마늘, 배에서 보고된 PPO에 비하여 열 안정성이 약한 것으로 나타났다.
각 금속이온들의 농도를 1mM로 하여 25°C에서 효소활성 을 측정한 결과는 Table 4와 같다. 이 표에서와 같이 Cu²⁺, Fe²⁺, Zn²⁺, 및 Ni²⁺가 효소활성을 증가시키고, Mg²⁺은 활성을 저해시키는 것으로 나타났다.
0과 25°C이었으며, pH 3과 5 사이의 산성조건과, pH 8과 10 사이의 알카리 조건에서는 활성이 감소되거나 상실되었다. 이 효소는 L-DOFA와 caffeic acid 등의 o-diphenols류에 대하여 높은 효소활성을 나타내었으며, LDOPA 와 caffeic acid에 대한 Km 값은 각각 3.97mM과 1.78mM로 계산되었다. 2-mercaptoethanol, Lascorbic acid, sodium bisulfite, EDTA와 Mg²⁺은 팽나무버섯 pholyphenol oxidase의 효소활성을 감소시켰으며, Cu²⁺, Fe²⁺, Zn²⁺ and Ni²⁺ 등은 효소의 활성을 촉진하는 인자로 밝혀졌다.
4kDa, 32에서 130kDa이라 밝혀졌으며 시금치⁽²¹⁾, 바나나⁽¹⁵⁾그리고 올리브⁽²²⁾ PPO의 분자량은 각각 40kDa, 31~62kDa, 및 32kDaW로 발표되었다. 이와 같이 여러 식물에서 발표된 PPg 매우 다양한 분자량을 나타내고 있으며 팽나무버섯 PPO의 분자량은 시금치 PPO의 분자량과 유사한 것으로 나타났다.
정제된 PPO는 25°C에서 최적의 활성을 나타내었으며, 30°C 이상에서는 활성이 완만히 감소(15%)하였고, 40°C 이상부터는 활성을 측정할 수 없었다(Fig. 4, a). Niagara grapes PPO의 경우 최적온도는 25°C이며, 25°C 이하의 온도에서 활성이 완만히 감소하였다고 보고되었다⁽²⁶⁾.
2-mercaptoethanol, Lascorbic acid, sodium bisulfite, EDTA와 Mg²⁺은 팽나무버섯 pholyphenol oxidase의 효소활성을 감소시켰으며, Cu²⁺, Fe²⁺, Zn²⁺ and Ni²⁺ 등은 효소의 활성을 촉진하는 인자로 밝혀졌다. 정제된 효소는 -70°C에서 3개월, 그리고 -20°C에서 1개월간 활성의 손실 없이 저장이 가능하였다.
정제된 효소의 최적 pH를 알아보기 위하여 pH 3에서 10까지의 효소활성을 측정한 결과 효소는 pH 6.0에서 최대의 활성을 나타내었으며 강산으로 갈수록 활성이 감소하고 알칼리에서는 거의 활성이 나타내지 않았다(Fig. 3, a).
팽나무버섯(Flammulina velutipes)에서 polyphenol oxidase가 황산암모늄 침전법, Superdex G-75 겔여과크로마토그래피, Phenyl superose 친화크로마토그래피, Mono-Q 이온교환수지크로마토그래피, 그리고 Superdex S-200 겔크로마토그래피 등의 과정으로 정제되었으며, 특성화 되었다. 정제된 효소의 비활성도는 199.
팽나무버섯의 PPCfe o-diphenol류 중 L-DOPA에 대해 높은 활성을 나타내었으며, w-diphenol, p-diphenol, 및 monophenol류, triphenol류에 대해서는 활성이 없었으며 이는 다른 보고된 PPO와 구별되는 특성으로 나타났다
Bolwell 등⁽⁷⁾은 감자 PPO는 분자량이 60kDa과 69kDa인 두 개의 단위로 구성된 단백질임을 보고하였다. 포도 PPO와 사탕수수 PPO는^(19,20), 그 그분자량이 isozyme에 따라 각각 20에서 58.4kDa, 32에서 130kDa이라 밝혀졌으며 시금치⁽²¹⁾, 바나나⁽¹⁵⁾그리고 올리브⁽²²⁾ PPO의 분자량은 각각 40kDa, 31~62kDa, 및 32kDaW로 발표되었다. 이와 같이 여러 식물에서 발표된 PPg 매우 다양한 분자량을 나타내고 있으며 팽나무버섯 PPO의 분자량은 시금치 PPO의 분자량과 유사한 것으로 나타났다.
1 units/mg으로 나타났으며, 이 효소는 40kDa의 단일폴리펩티드 사슬로 구성되어 있음이 밝혀졌다. 효소 반응의 최적 pH와 온도는 각각 6.0과 25°C이었으며, pH 3과 5 사이의 산성조건과, pH 8과 10 사이의 알카리 조건에서는 활성이 감소되거나 상실되었다. 이 효소는 L-DOFA와 caffeic acid 등의 o-diphenols류에 대하여 높은 효소활성을 나타내었으며, LDOPA 와 caffeic acid에 대한 Km 값은 각각 3.

참고문헌 (39)

Iwate, K.N. Method of mold cultivation. Chikyu Press, Tokyo(1961)
Komatsu, J.H. Terekawa, K.N. and Watanabe, Y. Flammulina velutipes with antitumor activities. J. Antibiot. 16: 139-143 (1963)
Yun, J.K. On the fruit bodies formation of Collybia velutipes (Curt.ex fr.) in the various artificial sawdust media. Theses collec-tion of Chung-Buk College. 4: 227-237 (1970)
Schwimmer, S. Source book of food enzymology. pp. 265-283.The AVI publishing company. Westport (1981)
Joslyn, M.A. Methods in food analysis. 2nd ed. pp. 734-736. Academic press. New York (1976)
Davies, D.D. The biochemistry of plants. 2nd ed. pp. 81-123. Academic press. New York (1980)
Bolwell, G.P. and Partington, J.C. Puhfication of polyphenol oxi-dase free of the storage protein patatin from Potato Tuber. Phy-tochem. 42: 1499-1502 (1996)
Bradford, M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantides of protein utilizing the principle of pro-tein-dye binding Anal. Biochem. 72: 248-254 (1976)

상세보기
Sambrook, J., Fritsch, E.F. and Maniatis, T. Molecular Cloning. 3,18.47-18.88. Cold Spring Harbor Laboratory press. New York(1989)
Lineweaver, H. and Burk, D. The determinadon of enzyme disso-ciation constants. J. Am. Chem. Soci. 56: 658-666 (1934)

상세보기
Flurkey, W.H., Froderman, T. and Shin, R. Isoladon and charac-terization of a Mung Bean Leaf polyphenol oxidase. Phytochem.45: 15-21 (1997)

상세보기
Benjamine, N.D. and Montgomery, M.W. Polyphenol oxidase royal ann cherries: Purification and characterization. J. Food Sci.38: 799-806 (1973)

상세보기
Rivas, N.D.J. and Whitaker, J.R.L. PuriScation and properties of two polyphenol oxidase from bartlett pears. Plant physiol. 52:501-507 (1973)

상세보기
Park, E.Y. and Luh, B.S. Polyphenol oxidase of Kiwifruit. J. Food Sci. 50: 678-684. 1985

상세보기
Galeazzi, M.A.M., Sagarbien, V.C. and Constrantinides, S.M. Iso-lation, Purification physicochemical characterization of polyphenol oxidase from a dwarf variety of banana. J. Food Sci. 46: 150-155(1981)

상세보기
Kahn, V. Polyphenol oxidase Isoenzymes in avocado. Phytochem.15: 267-272 (1976)

상세보기
Sato, M. and Hasegawa, M. The latency of spinach chloroplast phenolase. Phytochem. 15: 61-65 (1976)

상세보기
Alberghina, F.A.M. Chlorogenic acid oxidase from potato tuber slice, Partial purification and properdes. Phytochem. 3: 65-72(1964)

상세보기
Harel, E. and Mayer, A.M. Partial purification of catechol oxidase in grapes. Phytochem. 10: 17-22 (1971)

상세보기
Coombs, J., Boldry, C., Buck, C. and Long, S.P. o-Diphenol oxy-gen oxidoreductase from leaves of sugar cane. Phytochem. 13:2703-2708 (1974)

상세보기
Vaughan, P.F.T., Eason, R. and Paton, J. Molecular weight and amino acid composition of purified spinach beet phenolase. Phy-tochem. 14: 2383-2386 (1975)
Ben-Shalom, N., Kahn, V., Harel, E and Mayer, A.M. Catechol oxidase from green olives: Properties and partial purification. Phytochem. 16: 1153-1158 (1977)

상세보기
Hong, J.S. and Yang, H.C. Studies on Polyphenol oxidase of Tri-choloma matsutake. J. Korean Agr. Chem. Soci. 26: 1-10 (1983)

상세보기
Paulson, A.T., Vanderstoep, J. and Porritt, S.W. Enzymadc browning of peaches. Effect of gibberellic acid and ethephon on phenolic compounds and polyphenol oxidase activity. J. Pood Sci. 45: 341-345 (1980)
Ban-Loon, L.C. Tobacco polyphenol oxidase. A specific staining method indicating nonidentity with peroxidase. Phytochem. 10:503-509(1966)
Wissemann, K.W. and Lee, C.Y. Characterization of polyphenol oxidase from Ravat 51 and Niagara Grapes. J. Food Sci. 46:506-508 (1981)

상세보기
Park, E.B., Lee, J.S. and Choi, E.H. Isolation and characteristic of polyphenol oxidase from Jerusalem Artichoke Tuber. Korean J. Food Sci. Technol. 23: 414-419 (1991)

원문보기 상세보기
Louis, J., Van, L., Gerrish, C. and Dixon, R.A. Enzyme activities and polyphenols related to mesocarp discolouration of avocado fruit. Phytochem. 23: 1531-1534 (1984)

상세보기
Partill, S.S. and Zucker, M. Potato phenolase: Purification and properties, J. Biol. Chem. 240: 3938-3943 (1965)
Meyer, H.U. and Biehl. B. Activities and multiplicity of pheno-lase from spinach chloroplasts dunng leaf ageing. Phytochem. 19:2267-2272(1980)

상세보기
Smith, J.L. and Krueger, R.C. Separation and purification of the phenolases of the common mushroom. J. Biol. chem. 237: 1121-1128(1962)
Zenin, C.T. and Park, Y.K. Isoenzyme of polyphenol oxidase from hieh L-DOPA containing velvet bean. J. Food Sci. 43: 646-651(1978)

상세보기
Halim, D.H. and Montgomery, M.W. Polyphenol oxidase of d'Anjou pears (Pyrus comunis L.). J. Food Sci. 43: 603-610(1978)

상세보기
Park, Y.K., Sato, H.A., Almeida, T.D. and Moretti, R.H. Polyphe-nol oxidase of mango (Mangifera indica var, Haden). J. Food Sci.45: 1619-1625 (1980)

상세보기
Walter, W.M.Jr. and Purcell, A.E. Effect of substrate levels and polyphenol oxidase activity on darkening in sweet potato culti-vars. J. Agr. Food Chem. 28: 941-946 (1980)

상세보기
Mongomery, M.W. and Sysebieri, V.C. Isoenzymes of banana polyphenol oxidase. Phytochem. 14: 1245-1250(1975)

상세보기
Maerae, A. R. and Duggleby. N. Substrates and inhibitors of potato tuber phenolase. Phytochem. 7: 853-861 (1968)
Michele, T. and Joseph, G.B. Isolation and characterization of the polyphenol oxidase from senescent leaves of black popular. Phy-tochem. 23: 501-505 (1984)
Martin, F.C. Preparation and properties of an o-diphenol; O_2 ,-oxi-doreductase from cocoa husk. Phytochem. 17: 1897-1899 (1978)

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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