선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 이에 본 연구자들은 MMP-2, MMP-3, MMP-10, MMP-13을 구강내 종양 중 예후가 가장 좋지 않은 혀의 편평상피세포암 증례에 적용하여 면역 조직화학검사를 시행함으로써 그 발현 양상과 종양의 임상 병기, 종양의 크기, 림프절 전이, 조직학적 분화도 간의 관계를 살펴보고자 하였다.
제안 방법
- 1) 임상 정보 : 환자의 병리 진단지와 임상 기록지를 검토하여 환자의 연령, 성별, 임상 병기, 종양의 크기, 림프절 전이 유무를 조사하였다. 임상 병기는 TNM 분류법을 이용하였으며, 종양의 크기는 종양의 직경을 측정하였다.
- 조직을 Tris-buffer로 2분씩 2회 처리한 후 3% 과산화수소수로 10분간 처리하였다. 일차 항체는 생쥐의 단일 클론성 항교원섬유효소 IV/ gelatinase A Ab-4 (MMP-2, mouse monoclonal anti-human gelatinase A, clone A-Gel VC2, Neomarkers, CA, USA), stromelysin-1 / Transin Ab-2 (MMP-3, clone SL-1 IID4, Neomarkers), stromelysin-2 / Transin-2 Ab-2(MMP-10, clone IVC5, Neomarkers), collagenase-3 Ab-1 (MMP13, clone VIIIA2, Neomarkers) 로서 각각 1 : 25, 1 : 10, 1 : 100, 1 : 10으로 희석하여 60분간 적용시켰다. 2차 항체를 10분간 적용시킨 후 Streptoavidine-HRP를 10분간 적용시켰다.
- 3) 면역 조직화학적 염색 : 파라핀 포매 조직에서 정상 상피 조직을 포함하여 4μm 두께의 절편을 얻어 ProbeOn plus 슬라이드 (Fisher scientific, Pittsburgh, PA, USA)에 부착하였다. 조직을 탈파라핀화하기 위해서 60℃ 오븐에서 1시간, Xylene에서 2분씩 4회 처리하였다. Xylene을 제거하기 위해 95% 알콜에서 2분씩 4회 처리하였다.
- 2) 병리 조직학적 검색 : H&E 염색을 시행한 슬라이드를 검색하여 조직학적 분화도, 림프절 전이 유무를 재확인하였다. 조직학적 분화도는 H&E 염색 절편을 이용하여 세포와 핵의 비정형성이 없으면서 많은 양의 케라틴을 함유하고 세포간교를 쉽게 관찰할 수 있는 예는 고분화로, 세포와 핵이 비정형성이 높으면서 케라틴과 세포간교를 관찰할 수 없는 예를 저분화로, 고분화와 저분화 사이의 조직학적 소견을 보이는 예를 중등도 분화로 각각 분류하였다.
대상 데이터
- 1994년부터 2000년까지 가톨릭대학교 의과대학 부속 강남성모병원과 성모병원에서 혀의 편평상피세포암으로 진단된 증례 중 수술 전에 화학요법이나 방사선 조사를 받지 않은 32예를 대상으로 하였다.
데이터처리
- 5) 통계학적 분석 : 림프절 전이 유무에 따른 MMP-2, -3, -10, 13의 발현 정도의 차이를 카이제곱 검정법과 Fisher의 정확 검정법으로 그 유의성을 평가하였으며, 유의 수준 α는 0.05로 하였다. 임상 병기, 종양의 크기, 조직학적 분화도의 변화에 따른 MMP-2, -3, -10, -13의 발현 강도의 차이는 MantelHaenszel 카이제곱 검정법으로 그 유의성을 평가하였으며, 유의수준 α는 0.
- 05로 하였다. 임상 병기, 종양의 크기, 조직학적 분화도의 변화에 따른 MMP-2, -3, -10, -13의 발현 강도의 차이는 MantelHaenszel 카이제곱 검정법으로 그 유의성을 평가하였으며, 유의수준 α는 0.05로 하였다. 통계 분석은 Window 98용 SAS version 8.
이론/모형
- 1) 임상 정보 : 환자의 병리 진단지와 임상 기록지를 검토하여 환자의 연령, 성별, 임상 병기, 종양의 크기, 림프절 전이 유무를 조사하였다. 임상 병기는 TNM 분류법을 이용하였으며, 종양의 크기는 종양의 직경을 측정하였다.
성능/효과
- 1. 임상 정보 및 병리 조직학적 정보 : 대상 환자의 연령은 34세에서 77세로 평균 연령은 54.5세였다. 성별로는 남자가 20예, 여자가 12예였다.
- 2) 병리 조직학적 검색 : H&E 염색을 시행한 슬라이드를 검색하여 조직학적 분화도, 림프절 전이 유무를 재확인하였다. 조직학적 분화도는 H&E 염색 절편을 이용하여 세포와 핵의 비정형성이 없으면서 많은 양의 케라틴을 함유하고 세포간교를 쉽게 관찰할 수 있는 예는 고분화로, 세포와 핵이 비정형성이 높으면서 케라틴과 세포간교를 관찰할 수 없는 예를 저분화로, 고분화와 저분화 사이의 조직학적 소견을 보이는 예를 중등도 분화로 각각 분류하였다.
- 2. 면역 조직화학적 소견 : MMP-2는 일부 정상 상피, 혈관 내피 세포, 혈관의 평활근 섬유, 종양 세포에서 발현되었다. 정상 상피의 경우 기저 세포층에서 주로 발현되었으며, 일부 극피 세포층에서도 발현되었다 (Fig.
- 3. 림프절 전이와 MMP-2, -3, -10, -13의 발현 양상 비교 : MMP-2는 림프절 전이 소견을 보이는 10예 중 7예 (70.0%)에서 발현되었으며, 림프절 전이 소견을 보이지 않는 22예 중 5예 (22.7%)에서 발현되어 림프절 전이에 따른 발현 정도가 통계적으로 유의한 차이를 보였다. 그러나, MMP-3, -10, -13은 유의한 차이를 보이지 않았다 (Table 1).
- 4) 면역조직화학검사의 판독 : 정상 상피세포와 비교하여 염색성이 감소하거나 발현이 없으면 0등급, 같은 정도로 염색되면 1등급, 약간 강하게 염색되면 2등급, 중등도 이상으로 염색되면 3등급으로 하였고, 0등급과 1등급을 (-)군으로, 2등급과 3등급을 (+)군으로 분류하였다.
- 4. 임상 병기에 따른 MMP-2, MMP-3, MMP-10, MMP-13의 발현 양상 비교 : MMP-2는 병기 I 16예 중 2예 (12.5%)에서 발현되었으며, 병기 II 에서는 6례 중 3예 (50.0%), 병기 III에서는 3예 중 2예 (66.7%), 병기 IV에서는 7예 중 5예 (71.4%)에서 발현되어 임상 병기가 진행될수록 그 발현율이 증가하는 양상을 보였으며, 통계적으로도 유의한 차이를 보였다. 그러나, MMP-3, -10, -13은 임상 병기에 따른 MMP의 발현율이 통계적으로 유의한차이를 보이지 않았다 (Table 2).
- 5. 종양의 크기에 따른 MMP-2, MMP-3, MMP-10, MMP-13의 발현 양상 비교 : MMP-3는 T1 18예 중 11예 (61.1%), T2 10예 중 10예 (100.0%), T3 3예 중 3예 (100.0%), T4 1예 중 1예 (100.0%)에서 발현되어 종양의 크기가 증가할수록 발현율이 증가하는 양상을 보였으며, 통계적으로도 유의한 차이를 보였다. MMP-13은 T1 18예 중 11예 (61.
- 6. 조직학적 분화도에 따른 MMP-2, MMP-3, MMP-10, MMP-13의 발현 양상 비교 : MMP-2, -3, -10, -13 모두 조직 분화도에 따른 발현율의 차이는 통계적으로 유의한 차이를 보이지 않았다(Table 4)
- 0%)에서 발현되어 종양의 크기가 증가할수록 발현율이 증가하는 양상을 보였으며, 통계적으로도 유의한 차이를 보였다. MMP-13은 T1 18예 중 11예 (61.1%), T2 10예 중 4예 (40.0%), T3 3예 중 2예 (66.7%), T4 1예 중 1예 (100.0%)에서 발현되었으며, 종양의 크기 증가에 따른 MMP-13의 발현율 증가는 통계적으로 유의한 차이를 보였다. 그러나, MMP-2와 MMP-10은 종양 크기 증가에 따른 발현율 차이가 통계적으로 유의한 차이를 보이지 않았다 (Table 3).
- MMP-3는 림프절 전이가 있는 경우 90.0%에서 양성 발현을 보였으나, 림프절 전이가 없는 경우에서도 72.7%에서 양성 발현을 보여 림프절 전이에 따른 발현율에서 유의한 차이를 보이지 않았다. 이것은 Kusukawa 들9)이 병기 I, II의 구강 내 편평상피세포암에서 시행한 실험 결과와 다르게 나타났다.
- 이것은 Kusukawa 들9)이 병기 I, II의 구강 내 편평상피세포암에서 시행한 실험 결과와 다르게 나타났다. 그러나, 종양의 크기가 증가함에 따라 MMP-3의 발현율이 통계적으로 유의하게 증가하였다 (P=0.026). 이상의 결과만으로 볼 때 MMP-3는 종양의 전이보다는 종양의 성장에 관여하는 것으로 생각되며, 이것은 MMP-3가 기저막의 주성분보다는 세포외 기질의 주 성분을 분해하는 역할을 하기 때문이라고 생각된다.
- 이것은 원발성 편평상피세포암의 크기와 MMP-2의 발현 사이에는 연관성이 없다는 Kusukawa 들16)의 보고와 일치하였다. 림프절 전이가 있는 경우 MMP-2의 양성 발현율이 70.0%, 림프절 전이가 없는 경우 22.7%로 나타나 림프절 전이가 있는 경우 발현율이 유의하게 증가하였다 (P=0.018). 또한 임상 병기가 진행될수록 MMP-2의 발현 율이 증가하였다 (P=0.
- MMP-2는 종양 주변 조직의 섬유아 세포에서 생산되어 종양 세포의 표면으로 이동하는 것으로 알려져있다18). 본 연구에서는 MMP-2가 종양 세포에서 더 강하게 발현되는 양상을 보였다.
- 본 연구에서는 MMP-2의 발현율이 종양의 크기나 종양 세포의 분화도에 따라 유의한 차이를 보이지 않았다. 이것은 원발성 편평상피세포암의 크기와 MMP-2의 발현 사이에는 연관성이 없다는 Kusukawa 들16)의 보고와 일치하였다.
- 026). 이상의 결과만으로 볼 때 MMP-3는 종양의 전이보다는 종양의 성장에 관여하는 것으로 생각되며, 이것은 MMP-3가 기저막의 주성분보다는 세포외 기질의 주 성분을 분해하는 역할을 하기 때문이라고 생각된다.
- MMP-13은 상피 세포, 종양 세포, 근 섬유와 림프구 등의 염증 세포에서 발현되었다. 정상 상피에서는 극피세포층이 가장 잘 염색되었고, 기저세포층과 상피의 상층 부분은 잘 염색되지 않았다 (Fig. 1D).
- 혀의 편평상피세포암에서 MMP-2는 임상 병기와 림프절 전이에 따라 발현율이 유의한 차이를 보였다. 그러므로, 혀의 편평상피세포암에서 MMP-2의 발현 정도가 진단과 치료 계획 수립에 보조적인 역할을 할 수 있을 것으로 생각된다.
후속연구
- 실제로 동물 실험에서 Batimastat, Marimastat, AG 3340와 같은 MMP 억제제를 사용한 경우 다양한 용량에서 MMP-2의 작용이 억제되었다는 보고가 있다18). MMP-3과 MMP-13도 치료 계획 수립과 예후 판정에 도움을 줄 수 있을 것으로 생각된다.
- 혀의 편평상피세포암에서 MMP-2는 임상 병기와 림프절 전이에 따라 발현율이 유의한 차이를 보였다. 그러므로, 혀의 편평상피세포암에서 MMP-2의 발현 정도가 진단과 치료 계획 수립에 보조적인 역할을 할 수 있을 것으로 생각된다. 실제로 동물 실험에서 Batimastat, Marimastat, AG 3340와 같은 MMP 억제제를 사용한 경우 다양한 용량에서 MMP-2의 작용이 억제되었다는 보고가 있다18).
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.