본 연구는 고지방식이 섭취시 RS섭취가 장기능 및 혈액지방성분에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 생후 4주된 실험동물을 구입하여 6주간 고지방식이로 사육하여 성장 시킨 후 RS함량이 다른 실험식이로 4주간 더 사육한 후 실험한 결과는 다음과 같다. 4주간의 실험식이를 섭취하였을 때 식이 섭취량과 식이효율은 실험군간의 차 가 없었고, 대조군에 비해 RS30군에서 체중과 부고환지방무게가 유의적이지는 않으나 감소하는 경향이었다. 소장과 대장의 길이, 맹장의 무게는 실험군간의 유의적인 차이가 없었다. 분변내 수분함량을 보면 RS를 30%섭취한 군에서 유의적이지는 않으나 증가하였고, 실험식이 섭취후 3주째 측정한 장통과시간은 RS 30군에서 감소하는 경향을 보였다. 대장세포의 증식은 RS30 군에서 유의적이지는 않으나 증가하는 경향을 보였다. RS섭취량에 따라 총지방량, 중성지방량은 유의적으로 감소하였으나 콜레스테롤과 HDL-콜레스테롤량은 실험군간에 차이가 없었다. 이상의 결과에서 고지방을 섭취한 성장이후의 쥐에서 RS섭취는 유의적 이지는 않으나 체중과 체내 저장지방, 장통과시간을 감소시키는 경향을 보였으며 , 혈액 내 총지방량과 중성지방량을 유의적으로 감소시켰다. 그러므로 난소화성전분의 섭취는 저열량원으로의 가능성을 보여주고 있으며 , 고지방식이시 혈액내 총지방량과 중성지방을 낮추는 효과가 있는 것으로 사료된다 그러나 이러한 효과는 dose dependent 하지는 않았으며 난소화성 전분을 식이무게의 30%로 섭취할 경우에 유의적으로 나타났다.
본 연구는 고지방식이 섭취시 RS섭취가 장기능 및 혈액지방성분에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 생후 4주된 실험동물을 구입하여 6주간 고지방식이로 사육하여 성장 시킨 후 RS함량이 다른 실험식이로 4주간 더 사육한 후 실험한 결과는 다음과 같다. 4주간의 실험식이를 섭취하였을 때 식이 섭취량과 식이효율은 실험군간의 차 가 없었고, 대조군에 비해 RS30군에서 체중과 부고환지방무게가 유의적이지는 않으나 감소하는 경향이었다. 소장과 대장의 길이, 맹장의 무게는 실험군간의 유의적인 차이가 없었다. 분변내 수분함량을 보면 RS를 30%섭취한 군에서 유의적이지는 않으나 증가하였고, 실험식이 섭취후 3주째 측정한 장통과시간은 RS 30군에서 감소하는 경향을 보였다. 대장세포의 증식은 RS30 군에서 유의적이지는 않으나 증가하는 경향을 보였다. RS섭취량에 따라 총지방량, 중성지방량은 유의적으로 감소하였으나 콜레스테롤과 HDL-콜레스테롤량은 실험군간에 차이가 없었다. 이상의 결과에서 고지방을 섭취한 성장이후의 쥐에서 RS섭취는 유의적 이지는 않으나 체중과 체내 저장지방, 장통과시간을 감소시키는 경향을 보였으며 , 혈액 내 총지방량과 중성지방량을 유의적으로 감소시켰다. 그러므로 난소화성전분의 섭취는 저열량원으로의 가능성을 보여주고 있으며 , 고지방식이시 혈액내 총지방량과 중성지방을 낮추는 효과가 있는 것으로 사료된다 그러나 이러한 효과는 dose dependent 하지는 않았으며 난소화성 전분을 식이무게의 30%로 섭취할 경우에 유의적으로 나타났다.
We have investigated the intestinal functions and hypolipidemic effects of resistant starch (RS) in rats. Experimental groups were CON (cooked starch 45% + RS 7%), RSIO (cooked starch 35% +RS 10%), RS20 (cooked starch 25%+RS20%), and RS30 (cooked starch 15%+RS 30%). The weight gains during experimen...
We have investigated the intestinal functions and hypolipidemic effects of resistant starch (RS) in rats. Experimental groups were CON (cooked starch 45% + RS 7%), RSIO (cooked starch 35% +RS 10%), RS20 (cooked starch 25%+RS20%), and RS30 (cooked starch 15%+RS 30%). The weight gains during experimental period were slightly decreased by intake of resistant starch and the weights of epididymal fat pad were lower in resistant starch intake groups than in CON, although the difference was not significant. In intestinal functions, water contents of fecal, transit time and colon cell proliferation were affected by resistant starch. Plasma total lipid and triglyceride concentrations were significantly decreased, dose-dependently, by resistant starch intake. Conclusively, it is important to intake resistant starch in order to decrease plasma lipids and to improve intestinal functions.
We have investigated the intestinal functions and hypolipidemic effects of resistant starch (RS) in rats. Experimental groups were CON (cooked starch 45% + RS 7%), RSIO (cooked starch 35% +RS 10%), RS20 (cooked starch 25%+RS20%), and RS30 (cooked starch 15%+RS 30%). The weight gains during experimental period were slightly decreased by intake of resistant starch and the weights of epididymal fat pad were lower in resistant starch intake groups than in CON, although the difference was not significant. In intestinal functions, water contents of fecal, transit time and colon cell proliferation were affected by resistant starch. Plasma total lipid and triglyceride concentrations were significantly decreased, dose-dependently, by resistant starch intake. Conclusively, it is important to intake resistant starch in order to decrease plasma lipids and to improve intestinal functions.
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문제 정의
본 연구는 고지방식이 섭취시 RS섭취가 장기능 및 혈액 지방 성분에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 생후 4주된 실험 동물을 구입하여 6주간 고지 방식 이 로 사육하여 성장 시 킨 후 RS함량이 다른 실험식이로 4주간 더 사육한 후 실험한 결과는 다음과 같다.
또한 RS의 섭취는 대장에서의 short chain fatty acid(SCFA)의 생산을 촉진하는데 그 중에서도 butyrate는 antineoplastic effect를 가지고 있어서 대장암 발생에서 보호적인 역할을 하는 것으로 보고하고 있다(10). 본 연구에서는 RS가 저열량탄수화물급원과 체내 생리적 기능을 부여하는 소재로서 가능성이 있는지 알아보기 위한 목적으로 고지방식이를 섭취한 실험동물에게 RS를 농도별로 섭취시켜 RS가 장기능과 체내 지방성분에 미치는 영향을 살펴보았다.
본연구에서는 성장기 이후 고지방식이를 섭취할 때 난소 화성 전분의 섭취가 생리적인 기능에 영향을 미치는 지를 알아보는 것으로 실험식이를 시작할 때의 실험동물의 평균 체중은 약 460 g였다. 4주간 실험식이를 섭취하였을 때 식이 섭취량과 식이 효율은 실험군간의 차이가 없었고, RS 섭취군의 체중증가는 유의적이지는 않으나 대조군에 비해 낮아 최종 무게는 RS30군에서 감소하는 경향을 보였다.
가설 설정
2)NS： not significant.
2)NS： not significant.
2)NS： not significant.
제안 방법
C00 rpm 에서 30분간 원심분리하여 혈장을 분리하였다. 간, 신장, 부고환 지방과 맹장은 채취하여 생리 식 염수로 세척하고 여과지로 물기를 제거하고 중량을 측정하였다. 소장과 대장은 채취한 후 길이를 측정하였고 대장의 일부분은 대장 세포증식실험에 사용하였다.
혈장의 중성지방 함량과 HDL-cholesterol 함량은 분석 kit(아산제약)을 사용하여 효소 비색법으로 분석하였다. 간내 지 방성 분은 Folch 등의 방법(16)을 변형하여 추출하였으며 지방성분의 분석은 혈장에서와 같은 방법을 사용하였다.
대장 조직을 현미경 (X400)으로 관찰하였으며 개체당 정상적인 모양을 갖춘 20 개의 crypt를 선택하여 관찰한 후 평균을 내었다. 대장 상피세포의 kinetic indices로 ① crypt length와 crypt circum ference ② total cell number ③ labeled cell의 수 ④ labeling index ⑤ proliferation zone을 구하였다.
실험동물을 희 생하여 대장을 distal부분에서 2 cm 잘라 내어 통싱■적인 paraffin block을 만들었고, monoclonal anti-BrdU antibody, peroxidase 를 붙인 anti-mouse antibody와 diaminobenzidine을 이 용한 면역조직학적 방법으로 염색하였다. 대장 조직을 현미경 (X400)으로 관찰하였으며 개체당 정상적인 모양을 갖춘 20 개의 crypt를 선택하여 관찰한 후 평균을 내었다. 대장 상피세포의 kinetic indices로 ① crypt length와 crypt circum ference ② total cell number ③ labeled cell의 수 ④ labeling index ⑤ proliferation zone을 구하였다.
콜레스테롤식이로 6주간 성장 시킨 후 난괴 법에 의해 4군으로 나누어 난소 화성 전분 함량이 다른 실험식이로 4주간을 더 사육하였다. 본 실험에서 사용한 실험식이는 AIN-93M식이(11)를 기준으로 하였고, 대조군(CON)은 호화전분을, 실험군인 RS10, RS20, RS30은 RS를 식이 무게의 각기 10%, 20%, 30%을 첨 가하였다. 실험에 사용한 RS는 일반 옥수수전분을 호화시 킨 후에 121°C에서 autoclave를 1시간하고 4°C에서 overnight하여 노화를 촉진시키는 과정을 4회 반복한 후 a-amylase를 이 용하여 순수한 RS만을 얻은 것이다.
간, 신장, 부고환 지방과 맹장은 채취하여 생리 식 염수로 세척하고 여과지로 물기를 제거하고 중량을 측정하였다. 소장과 대장은 채취한 후 길이를 측정하였고 대장의 일부분은 대장 세포증식실험에 사용하였다. 혈장과 간은 생화학적인 분석 전 까지 -70°C에서 냉동보관 하였다.
하였다. 수집된 분변은 105°C에서 항량에 달할 때까지 건조시킨 후에 dry weight 측정하였고, wet weight에서 dry weight를 뺀 것을 수분 함량으로 하였다.
실험 동물은 한 마리씩 stainless steel cage에서 물과 식이 를 자유롭게 섭취하도록 하였으며, 식이섭취량은 일주일에 2회, 체중은 일주일에 1 회 일정한 시간에 측정하였다. 식이 효율(food ef ficiency ratio: FER)은 사육기간동안의 체중증가량을 같은 기간 동안 섭취한 식이량으로 나누어 산출하였다.
실험 식이 의 자세한 성 분조성 은 Table 1 과 같다. 실험 동물은 한 마리씩 stainless steel cage에서 물과 식이 를 자유롭게 섭취하도록 하였으며, 식이섭취량은 일주일에 2회, 체중은 일주일에 1 회 일정한 시간에 측정하였다. 식이 효율(food ef ficiency ratio: FER)은 사육기간동안의 체중증가량을 같은 기간 동안 섭취한 식이량으로 나누어 산출하였다.
4)에 녹여 복강주사하였다(13). 실험동물을 희 생하여 대장을 distal부분에서 2 cm 잘라 내어 통싱■적인 paraffin block을 만들었고, monoclonal anti-BrdU antibody, peroxidase 를 붙인 anti-mouse antibody와 diaminobenzidine을 이 용한 면역조직학적 방법으로 염색하였다. 대장 조직을 현미경 (X400)으로 관찰하였으며 개체당 정상적인 모양을 갖춘 20 개의 crypt를 선택하여 관찰한 후 평균을 내었다.
실험동물을 희생하기 1시간 전에 체중 kg당 5mg의 5- bromo-2'-deoxyuridine (BrdU)을 phosphate buffer saline (PBS, pH 7.4)에 녹여 복강주사하였다(13). 실험동물을 희 생하여 대장을 distal부분에서 2 cm 잘라 내어 통싱■적인 paraffin block을 만들었고, monoclonal anti-BrdU antibody, peroxidase 를 붙인 anti-mouse antibody와 diaminobenzidine을 이 용한 면역조직학적 방법으로 염색하였다.
실험동물을 희생하기전 48시간 동안 배설되는 대변을 하루에 2회씩 수집하여 수집 즉시 wet weight를 측정 하였다. 수집된 분변은 105°C에서 항량에 달할 때까지 건조시킨 후에 dry weight 측정하였고, wet weight에서 dry weight를 뺀 것을 수분 함량으로 하였다.
고지방.콜레스테롤식이로 6주간 성장 시킨 후 난괴 법에 의해 4군으로 나누어 난소 화성 전분 함량이 다른 실험식이로 4주간을 더 사육하였다. 본 실험에서 사용한 실험식이는 AIN-93M식이(11)를 기준으로 하였고, 대조군(CON)은 호화전분을, 실험군인 RS10, RS20, RS30은 RS를 식이 무게의 각기 10%, 20%, 30%을 첨 가하였다.
대상 데이터
미치는 영향을 알아보고자 하였다. 생후 4주된 실험 동물을 구입하여 6주간 고지 방식 이 로 사육하여 성장 시 킨 후 RS함량이 다른 실험식이로 4주간 더 사육한 후 실험한 결과는 다음과 같다. 4주간의 실험식이를 섭취하였을 때 식이 섭취량과 식이효율은 실험군간의 차이가 없었고, 대조군에 비해 RS30군에서 체중과 부고환지방무게가 유의적이지는 않으나 감소하는 경향이었다.
실험동물은 생후 4주된 Sprague-Dawley계 수컷 흰쥐로, 40마리를 구입하여 식이 지방이 식 이 무게의 20%, 콜레스테롤이 식이 무게의 1%로 첨가된 고지방.콜레스테롤식이로 6주간 성장 시킨 후 난괴 법에 의해 4군으로 나누어 난소 화성 전분 함량이 다른 실험식이로 4주간을 더 사육하였다.
데이터처리
Effects of resistant starch on plasma total lipid. Values with different alphabet are significantly different at a = 0.05 by Duncan's multiple range test.
Effects of resistant starch on plasma total lipid. Values with different alphabet are significantly different at a = 0.05 by Duncan's multiple range test.
이용하여 분석하였다. 각 실험군의 결과는 평균치와 표준오차로 나타내었고 각 실험군간의 비교는 ANOVA로 분석 후 유의적인 차이가 있는 항목에 대해서만 Duncan's multiple range test에 의해 실험군간의 차이를 검정하였다.
본 연구의 결과는 SAS(statistical analysis system) pro- gram을 이용하여 분석하였다. 각 실험군의 결과는 평균치와 표준오차로 나타내었고 각 실험군간의 비교는 ANOVA로 분석 후 유의적인 차이가 있는 항목에 대해서만 Duncan's multiple range test에 의해 실험군간의 차이를 검정하였다.
이론/모형
혈장의 중성지방 함량과 HDL-cholesterol 함량은 분석 kit(아산제약)을 사용하여 효소 비색법으로 분석하였다. 간내 지 방성 분은 Folch 등의 방법(16)을 변형하여 추출하였으며 지방성분의 분석은 혈장에서와 같은 방법을 사용하였다.
혈장의 총 지질함량은 Frings와 Dunn의 방법(14)에 의하여 측정하였고, 총 콜레스테롤 함량은 Zak법(15)에 의해 측정하였다. 혈장의 중성지방 함량과 HDL-cholesterol 함량은 분석 kit(아산제약)을 사용하여 효소 비색법으로 분석하였다.
본연구에서는 성장기 이후 고지방식이를 섭취할 때 난소 화성 전분의 섭취가 생리적인 기능에 영향을 미치는 지를 알아보는 것으로 실험식이를 시작할 때의 실험동물의 평균 체중은 약 460 g였다. 4주간 실험식이를 섭취하였을 때 식이 섭취량과 식이 효율은 실험군간의 차이가 없었고, RS 섭취군의 체중증가는 유의적이지는 않으나 대조군에 비해 낮아 최종 무게는 RS30군에서 감소하는 경향을 보였다. 장기 무게를 보면 신장과 간 무게는 실험식이간에 차이가 없었으나 체내 저장지방을 대표하는 부고환지방무게는 RS20, RS30군에서 대조군에 비해 유의적이지는 않으나 감소하는 경향이 었다(Table 3).
생후 4주된 실험 동물을 구입하여 6주간 고지 방식 이 로 사육하여 성장 시 킨 후 RS함량이 다른 실험식이로 4주간 더 사육한 후 실험한 결과는 다음과 같다. 4주간의 실험식이를 섭취하였을 때 식이 섭취량과 식이효율은 실험군간의 차이가 없었고, 대조군에 비해 RS30군에서 체중과 부고환지방무게가 유의적이지는 않으나 감소하는 경향이었다. 소장과 대장의 길이, 맹장의무게는 실험군간의 유의적인 차이가 없었다.
그러므로 난소 화성 전분의 섭취는 저열량원으로의 가능성을 보여주고 있으며, 고지방식이시 혈액내 총지방량과 중성지방을 낮추는 효과가 있는 것으로 사료된다. 그러나 이러 한 효과는 dose de pendent 하지 는 않았으며 난소화성 전분을 식이 무게의 30% 로 섭취할 경우에 유의적으로 나타났다.
대장세포의 증식은 crypt의 길이나 둘레, 이로부터 계산한 총 세포수, BrdU로 증식하는 세포를 염색하였을 때 염색된 세포의 수와 proliferation zone에서 RS30군에서 약간 증가하는 경향을 보였으나 유의적이지는 않았다(Table 6).
감소하였다고 보고하였다. 본 연구에서도 유의적인 차이는 없으나 대조군에 비해 RS30군에서 콜레스테롤량이 30%정도의 감소를 보이고 있어 RS의 섭취가 혈액내 콜레스테롤량을 낮추어 줄 수 있는 가능성은 제 시 하고 있다고 생각한다. RS는 수용성 식 이 섬유소에 비해 gel forming capacity 가 낮아서 식 이 섬유에 비해 hypocholesterolemic effect가 낮다는 보고가 있다(30).
소장과 대장의 길이, 맹장의무게는 실험군간의 유의적인 차이가 없었다. 분변내 수분함량을 보면 RS를 30%섭취한 군에서 유의적이지는 않으나 증가하였고, 실험식 이 섭 취후 3주째 측정한 장통과시 간은 RS 30군에서 감소하는 경향을 보였다. 대 장세 포의 증식은 RS30 군에서 유의적 이 지는 않으나 증가하는 경향을 보였다.
대장길이 및 맹장의 무게에서 실험군간의 유의적인 차이가 없었다. 분변량과 건조무게에는 유의적인 차이가 없었고, 분변내 수분함량은 유의 적 이 지 는 않으나 RS을 30%섭 취 한 군에서 증가하는 경향을 보였다(Table 5). 실험식 이 섭 취 후 3주째 측정한 장통과시 간을 보면 대조군이 849.
분변량과 건조무게에는 유의적인 차이가 없었고, 분변내 수분함량은 유의 적 이 지 는 않으나 RS을 30%섭 취 한 군에서 증가하는 경향을 보였다(Table 5). 실험식 이 섭 취 후 3주째 측정한 장통과시 간을 보면 대조군이 849.2분이 었고, RS30 군에서 유의적이지는 않으나 791.7분으로 감소하였다.
RS섭취 량에 따라 총지방량, 중성지방량은 유의적으로 감소하였으나 콜레스테롤과 HDL-콜레스테롤량은 실험군간에 차이가 없었다. 이상의 결과에서 고지방을 섭취한 성장이후의 쥐에서 RS섭취는 유의적이지는 않으나 체중과 체내 저장지방, 장통과시간을 감소시키는 경향을 보였으며, 혈액 내 총지방량과 중성지방량을 유의적으로 감소시켰다. 그러므로 난소 화성 전분의 섭취는 저열량원으로의 가능성을 보여주고 있으며, 고지방식이시 혈액내 총지방량과 중성지방을 낮추는 효과가 있는 것으로 사료된다.
4주간 실험식이를 섭취하였을 때 식이 섭취량과 식이 효율은 실험군간의 차이가 없었고, RS 섭취군의 체중증가는 유의적이지는 않으나 대조군에 비해 낮아 최종 무게는 RS30군에서 감소하는 경향을 보였다. 장기 무게를 보면 신장과 간 무게는 실험식이간에 차이가 없었으나 체내 저장지방을 대표하는 부고환지방무게는 RS20, RS30군에서 대조군에 비해 유의적이지는 않으나 감소하는 경향이 었다(Table 3).
2). 총 콜레스테롤량은 RS의 섭 취에 의해 유의적이지는 않으나 감소하는 경향을 보여주고, HDL-콜레스테롤에서는 실험군간의 차이가 없었다(Fig. 3, 4). 간내 지 방성 분을 보면 총지 방량, 콜레스테롤량, 중성 지 방량모두 RS섭취에 의한 영향을 받지 않았다(Table 7).
혈장내 지 방성 분을 보면 총지 방량은 대조군에 비해 RS를 30% 섭취한 군이 유의적으로 감소하였다(Fig. 1). 혈액내 중성지방량도 RS섭 취 에 의 해 영향을 받아 RS30군에서는 유의적 인 감소를 보였다(Fig.
후속연구
RS 는 대장에서 butyrate의 생산을 증가시키며, 이것이 대장벽의 hypertrophy와 관련이 있다고 한다(25). 본 연구결과에서 RS30군에서 대장세포의 증식이 약간 증가하는 경 향이었고, 이것이 대장내 발효증가로 인한 butyrate의 생산과 관련이 있을 것으로 보아지나 이에 대한 연구는 더 이루어져야 할 것으로 생각된다.
하였다. 본 연구에서도 유의적이지는 않으나 RS의 섭취에 의해 변내수분함량은 증가하고, 장통과 시간은 감소하였으나 개체 간의 차이가 많아 확실한 결론은 내리기 어려우며 이에 대한 많은 연구가 필요하다고 사료된다.
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