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문제 정의
- HDA), 즉 환원력을 측정하였다. 또한 각 갈색화 반응액의 항산화 효과를 측정하여 갈색 도와 환원력 및 항산화 효과 사이에는 어떤 관계가 있는지를 비교 연구하고자 하였다.
- 하였다. 이와 같이 갈색도와 환원력, 항산화 효과 사이의 관계는 상반되는 보고들이 있으므로 갈색화 반응생성물의 항산화력은 갈색 색소의 함량과 뚜렷한 상관관계가 있는 것인지, 또한 수소공여능에 의한 환원력은 갈색 색소의 함량과 뚜렷한 상관관계가 있는 것인지, 또한 수소공여능에 의한 환원력은 갈색 도와 항산화 효과와의 사이에 어떤 관계가 있는지를 비교하고자 하였다.
제안 방법
- Caramel형 갈색화 반응액을 얻기 위해서 0.1M의 xylose (XY), glucose (GL), sucrose (SU) 와 0.1M의 glucose에 0.02M의 citric acid(GLCA), sodium citrate(GLSC)를 각각 동량씩 혼합하여 200ml 의 평 바닥 flask에 100ml씩 나누어 넣은 후 80, 120, 140℃로 유지된 oil bath상에서 24시간 가열하면서 갈색화 반응을 진행시켰다.
- Table 2. The hydrogen donating ability (HDA) of the caramel type browning react on products heated at 80, 120 and 140 for 0, 12 anc 24 hrs, respectively.
- Table 9. The relationships between the hydrogen donating ability and relative antioxidant effectiveness of the caramel type browning reaction mixtures heated at 80, 120 and 1401 for 24 hrs, respectively.
- 갈색화 반응 시료액의 수소공여능(hydrogen donating ability, HDA)은 Yamaguchi 와 F* ujimaki' 의 방법을 일부 수정하여 다음과 같이 측정하였다.
- 갈색화 반응이 진행되는 동안 각 온도별로 12시간 간격으로 채취한 갈색화 반응액을 여과지(Whatman No. 40)로 여과하여 적절한 농도로 희석한 후 UV-VIS spectro-photometer(Pharmacia Biotech Ultrospec 2000, Cambridge England)# 사용하여 490nm에서의 흡광도를 측정하였다. 이 흡광도에 희석배수를 곱하여 나타난 수치를 색깔의 강도 즉, 갈색도의 척도로 삼았다.
- 당 단독, 당과 유기산 또는 유기산 염의 caramel 갈색화 반응의 갈색도와 항산화 효과와의 관계를 비교하고자 0.1M의 xylose(XY), glucose(GL), sucrose (SU)를 단독으로, 0.1M의 glucose에 0.02M의 citric acid를 혼합한 glucose-citric acid(GLCA), 0.02 M의 sodium citrate를 혼합한 glucose-sodium citrate(GLSC) 를 80, 120 및 140℃에서 12 및 24시간 가열하여 얻은 갈색화 반응 생성물의 갈색도와 환원력 및 항산화 효과의 관계를 고찰한 결과는 다음과 같았다.
- 또한 각 갈색화 반응액의 무수 ethanol 추출물에 대한 항산화 효과를 상호 비교하기 위하여 Ahn(3)이사용 한 방법에 따라 상대적 항산화 효과를 산출하였다, 즉, 기질 옥배유의 과산화물값이 40meq/kg oil 에 도달 될 때까지의 소요기간을 유도기간으로 임의적으로 설정한 다음, 대조구의 유도기간에 대한각 무수 ethanol 추출물이 첨가된 옥배유의 유도구간으로부터 다음 식에 의해서 상대적으로 항산화 효과(RAE)를 산출하였다.
- 등의 라디칼에 수소(또는 전자)를 주는 능력인 수소 공여 능(또는 전자공여능), 즉 환원력이 중요한 작용을 한다. 만약 갈색화 물질의 항산화 작용이 환원성에 기인된다면, 환원력과 항산화 효과는 밀접한 관계가 있을 것이므로 갈색화 반응 중간 생성물의 수소공여능을 측정하였다.
- 상기 갈색화 반응의 여러 단계에서 얻어진 반응액을 각각 20mm씩 취하여 rotary vacuum evaporator (Tokyo Rikakikai Co., Japan)상에서 45.0±1.0℃ 에서 감압 농축시 킨 후 남은 잔사에 무수 ethanol 20ml 와 무수 황산나트륨을 가하여 1일간 냉장 방치한 후탈수 여과하였다. 이때 얻어진 추출액을 냉장 보관하면서 항산화 효과 측정 실험에 사용하였다.
- 40)로 여과하여 적절한 농도로 희석한 후 UV-VIS spectro-photometer(Pharmacia Biotech Ultrospec 2000, Cambridge England)# 사용하여 490nm에서의 흡광도를 측정하였다. 이 흡광도에 희석배수를 곱하여 나타난 수치를 색깔의 강도 즉, 갈색도의 척도로 삼았다.
- 이에 본 연구에서는 xylose, glucose, sucrose 등의 당류와 glucose에 citric acid와 scxlium citrate를 혼합하여 caramel형 갈색화 반응을 진행시켜 반응 생성물들의 갈색도를 측정하고, 항산화성에서의 중요한 작용 기능 중의 하나인 수소공여능(hydrogen donating ability, HDA), 즉 환원력을 측정하였다. 또한 각 갈색화 반응액의 항산화 효과를 측정하여 갈색 도와 환원력 및 항산화 효과 사이에는 어떤 관계가 있는지를 비교 연구하고자 하였다.
- 즉, DPPH(1, l-phenyl-2 piciyl hydrazyl)의 환원성을 이용하여 99.5% ethan이에 용해시킨 1.5X10-4M DPPH 4ml, 0.2M 인산완충액(pH 6.6) 4ml 와 12배 희석한 갈색화 반응액 1ml 를 vortex mixer로 잘 혼합하여 30분간 방치시킨 후 525nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 수소공여능은 대조구에 대한 홉 광도의 감소 비율로서 나타내었다.
데이터처리
- 본 실험의 결과는 SPSS Package 을 이용하여 Duncan의 다범위 검정을 통하여 P<0.05에서 유의적인 차이를 검정하였으며, caramel갈색화 반응액의 갈색도, 환원력 및 항산화 효과와의 상관관계는 희귀방정식으로 산출하여 검토하였다.
이론/모형
- 옥배유를 60±l.(TC로 유지된 항온기내에서 30 일간 저장하면서 각 기간별로 옥배유를 채취하여 A.O.C.S방법''에 의하여 과산화물값(peroxide value, POV)을 측정하였다
성능/효과
- 이상과 같은 결과에서 볼 때 모든 갈색화 반응물의 수소공여능은 대체적으로 갈색화 반응온도 및 반응시간이 증가함에 따라 증가하였으므로 반응온도가 높을수록 수소공여능이 크다고 하는 연구 결과들이"'*과 일치하는 경향이었다.
- 1. 80, 120 및 140℃ 에서 24시간 반응 후의 갈색도 는 GLSC > XY > GL > SU > GLCA 순으로 GLSC가 가장 높았고 GLCA가 가장 낮았다.
- 120 ℃ 에서 24시간 반응 후는 XY와 GL의 갈색화 반응액의 갈색도는 유사한 경향으로 증가하였으며, SU의 갈색도는 여전히 낮았고, GLCA는 반응온도와 반응시간이 증가하여도 갈색도가 크게 증가하지 않아 GL 단독인 때의 0.22배로 낮은 반면에 GLSC는 GL의 1.53배 정도나 높았다. 갈색도의 크기는 GLSC > XY > GL > SU > GLCAS.
- 2. Caramel화 반응 생성물의 수소공여능(HDA)에 의한 환원력은 갈색화 반응온도 및 시간의 경과에 따라 증가되었으며 갈색도가 큰 GLSC는 환원력이 크게 나타났다.
- 3. 80℃에서는 갈색화 반응 증간생성물들 모두가 항산화 효과를 나타내었으며, 120 및 140℃에서는 SU, GLCA만 항산화 효과를 보여 갈색화 반응생성물의 항산화성은 80℃ 에서 가장 좋은 것으로 나타났다.
- 4. 갈색화 반응온도가 상승함에 따라 환원력은 증가되었으며, 갈색도와 환원력은 부상관 관계를 보이며 상관계수는 0.92~0.99이었다.
- 5. 갈색도와 항산화 효과 사이에는 SU 외에 비례관계가 보이지 않아 갈색도는 항산화성의 발현에 필수적이 아닌 것으로 보였다. 갈색도와 항산화 효과와도 부상관 관계로 상관계수는 0.
- 6. XY, GLe 환원력이 증가함에 따라 항산화 효과는 오히려 감소하는 경향이었으며 SU는 환원력이 증가함에 따라 항산화도 증가하여 비례관계를 보였다. GLCA는 반응 온도가 상승할수록 환원력은 오히려 감소하였고 항산화 효과도 비례하여 감소하였으며, GLSC는 갈색화 반응액 중 환원력이 가장 컸지만 항산화 효과는 환원력 크기만큼 크지 않았다.
- 80℃에서 24시간 반응 후의 XY의 갈색도는 GL보다 조금 높았으며 SU와 GLCA 갈색도는 GL보다 2~ 2.5배정도 낮았다. 반면에 GLSC는 GL의 갈색도 보다 13.
- 80℃에서 24시간 반응한 생성물의 수소공여능은 GLSC > GLCA > GL > XY > SU의 크기이었으며 120℃에서 24시간 반응시는 GLSC > SU > GL > XY > GLCA 순으로 80℃일 때와는 전혀 다른 크기였다. 또한 140℃ 에서 24시간 반응시켰을 때도 GLSC > SU > GL > XY > GLCA로 120℃ 에서 24시간 반응시켰을 때와 같았다.
- 있었다. GLCA는 80, 120 및 140℃ 에서 대조 구보다 RAE가 높아 항산화 효과가 있었으나 반응온도가 높아질수록 항산화 효과는 점점 감소하였으며, GLSC는 80℃에서 가열된 반응 추출물만이 항산화 효과가 있었고 120 및 140℃에서는 항산화 효과가 없었다.
- GLCA는 각각의 온도에서 반응시간이 증가할수록 수소 공여 능이 중가하였지만 반응온도가 80℃ 에서 120 및 140℃ 로 상승됨에 따라 수소공여능은 오히려 감소하여 당류 단독인 XY, GL, SU와는 다른 현상을 보였다. GLSC는 수소공여능이 최초에는 가장 낮았는데 계속적으로 반응온도가 상승함에 따라 가장 크게 증가하였다.
- GLCA는 갈색화 반응온도가 상승할수록 환원력은 감소하였고 항산화 효과도 비례하여 감소하였으나 80℃에서는 갈색화 반응액 증 항산화 효과가 가장 컸으며 120 및 140℃에서도 항산화 효과는 있었다. GLSC는 반응온도가 상승할수록 환원력은 점점 증가하여 120 및 14CTC에서 환원력이 가장 컸지만 항산화 효과는 환원력의 크기만큼 크지 않고 오히려 감소하여 80℃에서만 항산화 효과가 있었다.
- XY, GLe 환원력이 증가함에 따라 항산화 효과는 오히려 감소하는 경향이었으며 SU는 환원력이 증가함에 따라 항산화도 증가하여 비례관계를 보였다. GLCA는 반응 온도가 상승할수록 환원력은 오히려 감소하였고 항산화 효과도 비례하여 감소하였으며, GLSC는 갈색화 반응액 중 환원력이 가장 컸지만 항산화 효과는 환원력 크기만큼 크지 않았다.
- GLCA의 경우 80, 120 및 140℃ 에서 24시간 가열한 반응 추출물을 첨가한 옥배유의 POV를 저장 20 일 후 대조구와 비교해볼 때 대조구의 POV보다 각각 낮아 항산화 효과가 있음을 알 수 있었다. 또한 caramel 반응시 citric acid의 첨가에 의해 항산화 효과가 상승되었다는 보고와 일치하였다.
- 있었다. GLSC는 반응온도가 상승할수록 환원력은 점점 증가하여 120 및 14CTC에서 환원력이 가장 컸지만 항산화 효과는 환원력의 크기만큼 크지 않고 오히려 감소하여 80℃에서만 항산화 효과가 있었다. 따라서 GLCA는 반응온도가 상승함에 따라 환원력은 낮았지만 항산화 효과는 높았으므로 항산화 효과는 환원력에만 의한 것이 아님을 알 수 있었다.
- GLSC의 경우는 20일 후 대조구와 비교하엿을 때 80℃ 인 때는 대조구보다 낮은 반면 120 및 140℃ 인 경우는 대조구보다 높아 80℃에서만 항산화 효과가 있음을 알 수 있었다.
- Table 1에서 보는 바와 같이 반응시간이 길어질수록, 반응온도가 높아질수록 갈색도는 급격히 증가되는 경향을 보였으나 SU와 GLCA의 갈색도는 140℃ 까지 갈색화 반응이 진행되는 동안 갈색도 변화의 폭이 매우 적었다.
- XY, GL, SU 등의 당류 단독 갈색화 반응액 중에서 XY, GL, SU는 반응온도가 상승함에 따라 환원력은 중가하였지만 XY, GL의 항산화 효과는 오히려 감소하여 &TC에서만 항산화 효과가 있었다. 그러나 SU는 120 및 140C 로 반응온도가 상승할 수록환원력은 증가하고 따라서 항산화 효과도 점점 커져서 14CTC에서는 항산화 효과가 가장 컸으므로 항산화 효과는 환원력과 관련성이 있는 것으로 생각되었다.
- XY, GLe 반응온도가 80℃ 이상으로 상승함에 따라 갈색도의 크기는 증가하였으나 항산화 효과의 크기는 비례적으로 감소하는 경향을 보였지만 SU는반응온도가 80E 이상으로 상승함에 따라 항산화 효과는 계속 증가하여 갈색도와 항산화 효과는 다 같이 갈색화 반응온도가 증가함에 따라 증가하는 경향을 보였다. 그러므로 당류 중에서도 오탄당인 XY 가 육탄당인 GL보다, GLe 이당류인 SU보다 갈색화 반응속도가 빠른 반면, 항산화 효과는 각기 다르게 보여 각 온도에서 당류들은 서로 다른 반응 mechanism과 반응 중간 생성물을 형성한다는 것을 알 수 있었다.
- > GL의 순이었다. XY는 다른 당류에 비해 갈색화는 빨리 시작되었으나 항산화 효과는 낮게 나타났으며, SU는 이당류로 계속 가수분해하여 환원당의 형태로 되어가고 있으므로 단당류인 XY, GL 에 비해 갈색화 반응 속도가 느린 것으로 갈색 도의 크기는 가장 작았으나 항산화 효과는 가장 컸다
- 65배나 낮았다. XY의 갈색 도는 여전히 GL보다는 높았으며, GLSC는 GL 단독인 때보다 1.41 배 정도 더 높았다. 갈색도는 GLSC > XY > GL > SU > GLCA 순으로 80 및 120℃ 의 24시간 반응 후의 갈색도 크기와 같았다.
- XY의 반응온도 및 시간별 반응생성물의 수소공여능은 반응온도가 상승하면서 서서히 증가하였으며, GL과 SU는 계속적으로 반응온도가 상승함에 따라 각각 증가되었다. 또한 GLCA는 반응온도가 증가됨에 따라 오히려 감소하는 경향이었으나 갈색 도가 가장 큰 GLSC는 반응 온도가 증가함에 따라 환원력도 크게 증가하는 경향으로 환원력이 다른 것보다 월등히 크게 나타나 환원성 물질의 형성이 용이한 것으로 보였다.
- 각각의 온도에서 24시간 반응시킨 SU의 POV를저장 20일 후 각각 대조구와 비교하였을 때 낮은 수치를 보여 항산화 효과가 있다는 것을 알 수 있었다. 이는 sucrose를 130 및 150℃ 에서 반응시킨 경우 항산화 효과가 있었다는 보고와 일치하는 경향이었다.
- 갈색도와 항산화 효과 사이에는 SU 외에 비례관계가 보이지 않아 갈색도는 항산화성의 발현에 필수적이 아닌 것으로 보였다. 갈색도와 항산화 효과와도 부상관 관계로 상관계수는 0.76 ~ 0.93으로 SU가 가장 높았다.
- 갈색화 반웅물의 반응온도에 따른 갈색도와 수소 공여 능, 즉 환원력과 사이의 관계를 비교한 결과는 Table 5와 같이 대체로 갈색화 반응 생성물의 환원력은 반응온도가 상승함에 따라 증가되었으며, 갈색 도가 큰 반응액일수록 환원력이 큰 것으로 나타났다.
- 갈색화 반응물의 반응온도에 대한 갈색도와 항산화 효과 사이의 관계를 비교한 결과는 Table 7과 같이 반응온도가 상승함에 따라 갈색도는 증가하였지만 항산화 효과는 80℃ 에서 가장 컸으며 온도가 120 및 140℃ 로 상승함에 따라 오히려 감소하는 경향을 보였다. 이것은 저온에서는 caramel형 갈색화 반응 초기에 생성되는 물질 중에서 항산화 효과가 있는 reductone류들의 형성이 느린 반면 고온인 100 ℃이상에서는 형성된 reductone류와 같은 항산화 효과가 있는 물질의 반응이 계속 진행되어 갈색 물질을 만들므로서 항산화 효과가 있는 물질들의 양이감소되나 80℃에서는 reductone 류들이 계속 생성되면서 상당한 기간동안 잘 보존되기 때문인 것으로 생각된다'"
- 그러나 SU는 120 및 140C 로 반응온도가 상승할 수록환원력은 증가하고 따라서 항산화 효과도 점점 커져서 14CTC에서는 항산화 효과가 가장 컸으므로 항산화 효과는 환원력과 관련성이 있는 것으로 생각되었다.
- 보였다. 그러므로 갈색화 반응 생성물의 갈색 도와 환원력 사이에는 밀접한 관계가 있으며, 항산화 효과와의 사이에는 어느 정도의 연관성을 생각할 수 있었으나, 반드시 항산화 효과가 갈색도와 환원력에만 의존된다고 생각되지 않았다.
- 대체로 감소하는 경향을 보였다. 그러므로 갈색화 반응생성물의 갈색도와 환원력 사이에는 밀접한 관계가 있으며, 항산화 효과와의 사이에는 어느 정도의 연관성을 생각할 수 있었으나, 반드시 항산화 효과가 갈색도와 환원력에만 의존한다고 생각되지는 않았다.
- 보였다. 그러므로 당류 중에서도 오탄당인 XY 가 육탄당인 GL보다, GLe 이당류인 SU보다 갈색화 반응속도가 빠른 반면, 항산화 효과는 각기 다르게 보여 각 온도에서 당류들은 서로 다른 반응 mechanism과 반응 중간 생성물을 형성한다는 것을 알 수 있었다.
- 당류 단독의 caramel 갈색화 반응 생성물인 XY, GL, SU는 갈색도가 증가함에 따라 환원력도 증가하였는데, SU는 갈색도는 낮았지만 환원력은 컸다. 혼합형인 GLCA는 반응온도가 상승함에따라 환원력은 감소하는 경향이었지만 GLSC는 갈색도가 커짐에 따라 환원력은 크게 증가하였고다른 반응액에 비하여 환원력이 크게 나타나 더 많은 환원성 물질이 형성되는 것으로 보였다.
- 대조구의 RAE를 100으로 할 때 XY, GL 갈색화 반응 추출물만이 80℃에서 항산화 효과가 있으며, SU의 경우에는 80, 120 및 140℃ 에서 항산화 효과가 있었다. GLCA는 80, 120 및 140℃ 에서 대조 구보다 RAE가 높아 항산화 효과가 있었으나 반응온도가 높아질수록 항산화 효과는 점점 감소하였으며, GLSC는 80℃에서 가열된 반응 추출물만이 항산화 효과가 있었고 120 및 140℃에서는 항산화 효과가 없었다.
- GLSC는 반응온도가 상승할수록 환원력은 점점 증가하여 120 및 14CTC에서 환원력이 가장 컸지만 항산화 효과는 환원력의 크기만큼 크지 않고 오히려 감소하여 80℃에서만 항산화 효과가 있었다. 따라서 GLCA는 반응온도가 상승함에 따라 환원력은 낮았지만 항산화 효과는 높았으므로 항산화 효과는 환원력에만 의한 것이 아님을 알 수 있었다. 그러므로 환원력과 항산화 효과는 손의 연구처럼 어떤 상관관계를 보이지 않았다.
- 따라서 갈색화 반응온도가 증가함에 따라, 또는 갈색 도가 중가됨에 비례하여 반드시 항산화 효과가증가되는 것이 아님을 알 수 있었다. 이러한 결과는 Rhee들이 보고한 caramel형 갈색화 반응시에 형성되는 항산화 물질들은 반응 후기에 형성되는 물질들 외에도 반응 초기에 형성되는 amino-reductone이나 aminohydroxy reductone이라고 시사한 결과와 잘 일치하는 것 같았다.
- 따라서 본 실험에서 .20℃ 이상에서 가열하여 얻어진 갈색화 반응액의 항산화 효과가 80℃의 경우보다 저하되는 것은 Yamagucii와 Fujiamki가 보고한 것처럼 갈색화 반응 속도가 급격히 증가됨에 따라 갈색화 반응계에서 저분자 갈산 물질이 고분자 갈색 물질로 변화되는 양이 많아지며 이들 고분자 갈색 물질 중에는 산화 촉진 작용을 나타내는 물질도 존재한다는 것과 같이 상당량의 고분자 갈색 색소와 갈색 침전 물이 형성되었기 때문인 것으로 사료되었다.
- 효과는 가장 낮았다. 또한 GLCA는 GL이 유기산에 의해 갈색화가 크게 촉진되지 않았으며 오히려 저하되는 것으호 나타났으나 항산화 효과는 가장 컸다. 이러한 현상은 Wolfrom과 Cavalieri", 이보고 한 바와 같이 산성쪽에서 당류의 중간 활성 물질인 furan 화합물이 중합되기 때문에 갈색 물질의 생성이 저하되어 갈색도가 낮으며, 황산화 효과가 큰 것은 Kato들의 설명과 같이 유기산이 당의 enol화를 촉진 시킴에 의한다고 본다.
- 각각 증가되었다. 또한 GLCA는 반응온도가 증가됨에 따라 오히려 감소하는 경향이었으나 갈색 도가 가장 큰 GLSC는 반응 온도가 증가함에 따라 환원력도 크게 증가하는 경향으로 환원력이 다른 것보다 월등히 크게 나타나 환원성 물질의 형성이 용이한 것으로 보였다.
- 또한 갈색화 반응액2 반응온도에 대한 갈색 도와 항산화 효과의 회귀방정식과 이들의 상관계수도 Table 8과 같이 XY, GL이 각각 -0.79, -0.76이었고, SU는 -0.93으로 부의 상관관계로 가장' 높았으며, GLCA, GLSC는 -0.80, ・0.81로 나타나 XY, GL보다는 다소 높은 것으로 보였다.
- 8배 정도나 높았다. 색깔의 강도는 GLSC > XY > GL > SU > GLCA의 순으로 GLSC가 가장 높았고 GLCA가 가장 낮았다.
- 또한 caramel 반응시 citric acid의 첨가에 의해 항산화 효과가 상승되었다는 보고와 일치하였다. 이러한 효과는 80℃ 에서 가열한 반응 추출물이 항산화 효과가 가장 좋으며 가열온도가 상승함에 따라 항산화 효과가 다소 감소하는 것을 알 수 있었다.
- 이상과 같이 갈색화 반응액의 갈색도, 수소 공여 능에 의한 환원력 및 항산화 효과 사이의 관계를 종합하여 볼 때 반웅온도가 상승함에 따라 대체적으로 갈색도 및 환원력은 증가하였으나 항산화 효과는 대체로 감소하는 경향을 보였다. 그러므로 갈색화 반응생성물의 갈색도와 환원력 사이에는 밀접한 관계가 있으며, 항산화 효과와의 사이에는 어느 정도의 연관성을 생각할 수 있었으나, 반드시 항산화 효과가 갈색도와 환원력에만 의존한다고 생각되지는 않았다.
- 이상과 같이 갈색화 반응액의 갈색도, 수소공여능에 의한 환원력 및 항산화 효과 사이의 관계를 종합하여 볼 때 반응온도가 상승함에 따라 대체적으로 갈색도 및 환원력은 증가하였으나 항산화 효과는 증가하는 것도 있었으나 대체로 감소하는 경향을 보였다. 그러므로 갈색화 반응 생성물의 갈색 도와 환원력 사이에는 밀접한 관계가 있으며, 항산화 효과와의 사이에는 어느 정도의 연관성을 생각할 수 있었으나, 반드시 항산화 효과가 갈색도와 환원력에만 의존된다고 생각되지 않았다.
- GLSC는 수소공여능이 최초에는 가장 낮았는데 계속적으로 반응온도가 상승함에 따라 가장 크게 증가하였다. 즉, 갈색도가 증가함에 따라수소공여능도 증가하는 경향이었다.
- 혼합형인 GLCA는 반응온도가 상승함에따라 환원력은 감소하는 경향이었지만 GLSC는 갈색도가 커짐에 따라 환원력은 크게 증가하였고다른 반응액에 비하여 환원력이 크게 나타나 더 많은 환원성 물질이 형성되는 것으로 보였다. 이와 같은 결과는 반응온도가 높아질수록 전자공여능이 우수하였다는 연구 결과들 1016, 22, 23)과 일치하는 경향이었다.
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