선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- SPF지수와 피부자극시험의 피부자극지수와의 상관성을 연구하였다. 상관계수는 SPF 지수를 독립변수로 두고, 종속변수를 피부자극지수로 놓고 산출하였다.
- 2002). 따라서 본 연구에서는 물질특성에 따른 SPF지수와 안전성과의 상관성을 연구하기 위하여 UVB, UVA 유기 차단제 및 무기 치-단제로 실험을 수행하였다.
- 피부감작성의 평가 기준을 간략히 설명하면, 감작율 0%(등급 -)은 무반응, 1-8%(등급 I)는 매우 약함, 9-28%(등급 II)는 약함, 25-64%(등급 Ⅲ)는 보통, 65-80%(등급 IV)은 강함, 81- 100%(등급 V)는 매우 강함으로 분류된다. 또한 느리게 반응이 진행되고 있는지를 알아보기 위하여 국소야기 48 시 간 후에 더 평 가하였다.
- 본 연구에서는 개발의 증가가 예상되는 기능성화장품중 자외선차단제의 안전성 평가에 초점을 맞추었다. 자외선 차단제로 사용되는 성분은 화학적인 작용에 의한 것인 UVB, UVA 유기차단제와 물리적인 작용에 의하여 자외선 차단작용을 나타내는 성분인 무기차단제로 분류할 수 있다(Gasparro 등, 1998).
제안 방법
- 20 시료는 10%, 30%, 50%에 대한 토끼를 이용한 피부 자극시험을 수행하였다. 24시긴-, 72시간 경과 후의 피부 자극성을 판독한 결과, 피부자극을 나타내지 않았다(Table 2).
- 5 cm?)를 부착하여 24시간 폐색첩포하였다. 24시간 및 72시간이 지난 후 패취를 제거하고 증류수로 가볍게 씻어낸 후 관찰하여 피부의 홍반, 가피 및 부종 등을 관찰하여 국립독성 연구원 표준작업지침서에 따라 측정하여 피부반응평점표을 작성하였다.
- BP3 시료는 1%, 3%, 5%에 대한 토끼를 이용한 피부 자극시험을 수행하였다. BP 시료에 대한 24시간, 72시간경과 후의 피부자극성을 판독한 결과, 1, 3, 5%의 BP 시료의 경우 24시간의 경우 각각 2.
- BP3, BMDM, ZO의 경우 표준기제에 용해되지 않아, 기허가 자외선 차단화장품의 일반조성에 따라 조제하였다 (데 이타 생 략).
- FDA 및 식품의약품안전청에서 제시하는 자외선차단 효과측정 방법 및 기준제정고시(식품의약품안전청고시 제 2001-72호)에서 SPF시험방법의 낮은 SPF 표준시료로서 제시하는 8% homosalate를 제조하는 기제의 조성을 따라서 HS, OMC, OS, OC, TD는 아래와 같이 제조하였다. Preparation A와 B를 분리하여 77~82℃까지 가열하면서 각각의 성분이 완전히 용해될 때까지 교반을 지속하면서 상온(30℃)까지 냉각시 Preparation A를 천천히 Preparation B 에 넣으면서 유화가 형성될 때까지 교반 시켜 크림형태의 기제를 제조하였다.
- OC, TD 시료는 10%, 30%, 50%에 대한 토끼를 이용한 피부자극시험을 수행하였다. 24시긴-, 72시간 경과 후의 피부자극성을 판독한 결과, 피부자극을 나타내지 않았다(Table 2).
- 제조하였다. Preparation A와 B를 분리하여 77~82℃까지 가열하면서 각각의 성분이 완전히 용해될 때까지 교반을 지속하면서 상온(30℃)까지 냉각시 Preparation A를 천천히 Preparation B 에 넣으면서 유화가 형성될 때까지 교반 시켜 크림형태의 기제를 제조하였다.
- 1 ml 씩을 피내주사하였다. 각 농도별로 2마리씩 사용하며 24 시간 후에 주사부위를 관찰하여 2마리 기니픽에서 모두 다 피부괴사가 나타나지 않은 최고농도를 선택하여본 시험 감작항원량으로 결정하였다. 시험물질을 제모한기니픽의 측복부에 단계 별 0.
- 2 ml을 포함하는 패취(Whatman #3 filter paper, 2X4cm)를 부착하여 24시간 폐색첩포하였다. 각 농도별로 2마리의 기니픽을 사용하며, 2 마리 모두에서 홍반이 나타나지 않는 용량을 2차감작항원량으로 하였으며, 야기 항원량은 홍반이 나타나지 않은 최대농도로 결정하였다.
- 관찰결과의 판정은 각각의 판정일 각 마리 총점[0T10 점 범위, The Individual Index of Ocular Imtation (I.I.O.I.)]의 합을 마리수로 나눈 평균 값인 Mean Index of Ocular Irritation (M.I.O.I.), 관찰기 간 중 M.I.O.I.의 최대값인 The Index of Acute Ocular Irritation (I.A.O.I.)및 Day-7 I.O.L(Individual ocular imtation index: 7일째의 각각 동물의 득점)등의 값으로 안점막자극성의 강도를 안점막자극표에 의해 구분하여 평 가하며 , 평 가치 의 조건 이 표에 만족되지 아니 하면, 평가구분에 1단계 약하게 한다. 안점막 자극 판정을 간략히 설명하면 무자극물의 M.
- 1 ml을 한쪽눈의 하안검을 안구로부터 당겨서 결막낭내에 투여하고 상하안검을 약 1초간 서로 맞준다. 다른쪽 눈을 미처치 그대로 두어 무처 치 대조안으로 하였다.
- 본 연구에서는 물질특성에 따른 SPF지수와 피부 자극지수와의 상관성을 연구하기 위해 시험물질로서는 UVB 유기차단제로서 HS, OS, OC를, UVA 유기차단제로서 BP3, BMDM, 무기차단제로서 TD, Z0를 선정하였으며,자외선차단제품안에 포함되어있는 기타 성분의 영향을 배제하기 위하여, 식품의약품안전청고시에서 권하는 표준시료의 조성에 따라 사용하였으며, in vitro SPF 지수를 측정하였고, 표준기제에 용해되지 않았던 BP3, BMDM, ZO의 경우 기허가 자외선차단화장품의 일반조성 에 따라 조제하였다.
- 본시험의 경우 일차감작은 피내주사를 하기 위해 제모 된 등 부위의 기능한 한 투여면적을 2X4cm 부위를 주사기를 사용하여 좌우대칭의 3부분 (상부, 중부, 하부) 에시험물질 및 양성대조물질 0.1 ml 피내주사하여 일주일간경과하였다. 2차감작은 1차 감작 1주 후 시험물질을 피내주사했 던 동일 부위 를 제 모하였다.
- 연구하였다. 상관계수는 SPF 지수를 독립변수로 두고, 종속변수를 피부자극지수로 놓고 산출하였다.
- 시험기간 중 매일 1회 일반증상을 관찰하였으며, 시험 기간 중 투여개시전, 투여 후 7, 14, 21일에 총 4회 체중을 측정하였다. 검사 항목 중 체중변화와 관하여서는 비모수적방법의 다중비교법으로서 Kruskal-Wallis test를 이용하여 유의수준 0.
- 나누어 실시하였다. 시험물질을 제모한 기니픽의 등에 주사기(주사바늘 261/2 Gauge)를 사용하여 0.1 ml 씩을 피내주사하였다. 각 농도별로 2마리씩 사용하며 24 시간 후에 주사부위를 관찰하여 2마리 기니픽에서 모두 다 피부괴사가 나타나지 않은 최고농도를 선택하여본 시험 감작항원량으로 결정하였다.
- 측정하였다. 시험물질을 투여하지 않은 다른 쪽 눈을 대조로 하여, 시험물질 투여후 1, 24, 48, 72시간 후에 눈을 관찰하여 각막의 혼탁 및 혼탁된 각막의 범위, 홍채의 반응, 결막의 발적, 부종 및 비출물 유무 등의 변화를 관찰하거나 확대경 및 손전등을 이용하여관찰하였다.
- 시험물질을 표준시료를 사용하여 농도별로 현탁시켜transpore tape (1527-3.3 M)예 균일하게 도포하고 15분 후 blanl< tape를 먼저 넣고, reference tape를 측정한 다음시 험물질을 도포하여 자외선 차단지수를 측정하였다.
- Kligman, 1969)에 따라 실시하였다. 시험은 크게 예비시험과 본시험으로 나누며 각각 감작단계와 야기 단계로 나누어 실 시 하였다.
- 실험개시 24시간 전에 토끼의 등 중앙을 중심으로 15 X20 enF의 넓이로 제모하고, 24시간 후 0MC 표준시료를 5, 10, 30 및 50%의 농도가 되도록 현탁시킨다. 일차 피부 자극 시 험에서는 제모한 토끼 의 등에 0.
- 안구병변은 각막, 홍채 및 결막을 관찰하여 평점하고 안 점막 자극 평점표를 작성하였다. 관찰 결과의 판정 은총 점수 합계의 평균 점 범우])으로부터 각 개체별 합계 평점의 합을 마리수로 나눈 값 평균안구자극지수(Mean Index of Ocular Initation, M.
- 0 Kg)를 수령 하여 1주일간 순화기 간을 두었다. 알루미 늄 합금제 로된 455 mm X 630 mm X 335 mm의 사육 상자에 한 마리씩 수용하였으며, 실내온도 23 + 2℃, 상대습도 50± 20%, 명암교대 12시긴-(조명시간 06:00- 18:00)의 조건으로 사육하였으며, 사료는 토끼용 고형사료를, 음수는 상수도수로 매일 제공하여 자유롭게 섭취하도록 하였다. 안점막자극시험의 겅우 육안적인 검사로 불충분한 상태라고 판단될 경우에는 확대경 또는 Slit lamp로 검사를 하거나 0.
- 4 cm폭)로 동물의 행동에 지장이 없도록 단단히 폐색첩포하여 48시간 동안 경과하였다. 야기단계는 폐색첩포에 의한 2차 감작 2주 후 등 부위 또는 측복부(감작부위와는 다른 부위)를 2X4cm로 제모한 후 시험물질을 포함하는 패취 (Wliatman #3 filter paper, 2X4 cm)를 부착하여 24시간 폐색첩포하였다.
- 예비시험은 시험물질의 피내주사에 의한 감작시 감작항원량과 폐색첩포에 의한 감작 및 야기시의 항원량 결정단계로 나누어 실시하였다. 시험물질을 제모한 기니픽의 등에 주사기(주사바늘 261/2 Gauge)를 사용하여 0.
- 임상증상, 사료섭취 및 음수상태 등에 대하여 매일 관찰하였으며, 체중측정은 점안개시 직전 및 점안후 7 일째에 측정하였다. 시험물질을 투여하지 않은 다른 쪽 눈을 대조로 하여, 시험물질 투여후 1, 24, 48, 72시간 후에 눈을 관찰하여 각막의 혼탁 및 혼탁된 각막의 범위, 홍채의 반응, 결막의 발적, 부종 및 비출물 유무 등의 변화를 관찰하거나 확대경 및 손전등을 이용하여관찰하였다.
- 2차감작은 1차 감작 1주 후 시험물질을 피내주사했 던 동일 부위 를 제 모하였다. 피 내 주사부위에 10% Sodium Lauiyl Sulfate (SLS)를 조제하여 도포한 후 유리 막대로 맛사지하여 약한 피부자극을 유발하였다. 24시간후 시험물질 1 ml를 포함하는 패취 (Whatman #3 filter paper, 2X4cm)를 부착하고, 불침투성의 플라스틱반창고 (4 cm 3 M bander)로 시료가 홀러나오지 않게 잘 덮고 몸통을 둘러쌀 수 있는 탄력붕대 (6.
- 피부 반응을 평점화 한것을 이용하여 약물투여 후 24 시간과 72시간 때의 홍반 평점과 부종 평점을 더해서 평균치를 산출하고, 이 수치를 P.LI (Primary Irritation Index:일차자극지수)라하고 이 값을 구하였으며, P.LI값에 의해 일차 자극성의 강도를 다음 피부일차 자극표에 의해 구분하여 평가한다. 간략히 설명하면, 피부자극지수가 0.
대상 데이터
- 사료는 신촌사료회사에서 실험동물사료를 구입하여 고압증기 멸균기에서 12FC, 15분간 멸균한 다음, 사료와 물은 자유롭게 섭 취하도록 하였다.
- 시험 물질 은 homosalate (HS), octyl metlioxycinnamate (OMC), octyl salicylate (OS), octocrylene (OC), benzo- phenone-3 (BP-3), butyl methoxy dibenzoil methane (BMDM), titanium dioxide (TD), zinc oxide (ZO)은 H&R Co. (Germany)에서 구입하였으며, stearic acid, methylparaben, lanolin, propyl 4-hydroxybenzoate, lauryl sulfate sodium, propylene glycol, triethanolamine, EDTA 등의 시약은 Sigma Chemical Co. (MO, USA)에서 구입하였으며, 그외의 시약은 특급 이상의 것을 사용하였다.
- 알루미 늄 합금제 로된 455 mm X 630 mm X 335 mm의 사육 상자에 한 마리씩 수용하였으며, 실내온도 23 + 2℃, 상대습도 50± 20%, 명암교대 12시긴-(조명시간 06:00- 18:00)의 조건으로 사육하였으며, 사료는 토끼용 고형사료를, 음수는 상수도수로 매일 제공하여 자유롭게 섭취하도록 하였다. 안점막자극시험의 겅우 육안적인 검사로 불충분한 상태라고 판단될 경우에는 확대경 또는 Slit lamp로 검사를 하거나 0.5% sodium fluorescein 용액을 점안 후 검안하여 건강한 좌우 양안을 갖는 토끼를 시험에 사용하였다.
- 일 차피 부자극시험 , 안점 막자극시험 을 위한 시험 동물은 5주령의 New Zealand White계 토끼(체중 2.0~ 3.0 Kg)를 수령 하여 1주일간 순화기 간을 두었다. 알루미 늄 합금제 로된 455 mm X 630 mm X 335 mm의 사육 상자에 한 마리씩 수용하였으며, 실내온도 23 + 2℃, 상대습도 50± 20%, 명암교대 12시긴-(조명시간 06:00- 18:00)의 조건으로 사육하였으며, 사료는 토끼용 고형사료를, 음수는 상수도수로 매일 제공하여 자유롭게 섭취하도록 하였다.
- 피부감작성 시험을 이용한 실험 동물은 식품의약품안전청의 barrier 시실내에서 생산사육된 수컷 Hartley계 기니픽을 동물사육조건(온도 23 + FC, 습도 55 + 5%, 배기 10-18회 /hr, 형 광등 명 암 12 hr cycle, 조도 300-500 Lux) 의사육환경 에서 폴리 카보네 이 트 사육상자(275 mm X 420 mm X 190 mm)에 2마리씩 사육하였으며, 1주일 간의 순화사육기간동안에 관찰하여 체중이 평균이상이며, 특이한 외형상의 문제점이 나타나지 않는 동물만 시험에 사용하였다. 사료는 신촌사료회사에서 실험동물사료를 구입하여 고압증기 멸균기에서 12FC, 15분간 멸균한 다음, 사료와 물은 자유롭게 섭 취하도록 하였다.
데이터처리
- 측정하였다. 검사 항목 중 체중변화와 관하여서는 비모수적방법의 다중비교법으로서 Kruskal-Wallis test를 이용하여 유의수준 0.05 혹은 0.01에서 실시하였다.
- 평점표를 작성하였다. 관찰 결과의 판정 은총 점수 합계의 평균 점 범우])으로부터 각 개체별 합계 평점의 합을 마리수로 나눈 값 평균안구자극지수(Mean Index of Ocular Initation, M.I.O.I)를 구하였다.
이론/모형
- 관찰 3시간 전에 시험부위에 남아있는 시험물질을 미온수로 깨끗이 닦아낸 후에 홍반 및 부종이 있는지의 여부를 확인하고 정도를 Magnusson과 Kligman (1969)의 평가기준에 의하여 평가하였다. 피부반응의 평가 기준을 간략히 설명하면, 점수 0은 무반응, 점수 1은 홍반이 적용 부위에 흩어져 나타난 경우, 첨수 2는 홍반이 적용부 위 전체에 나타난 경우, 점수 3은 전체적으로 강한 홍반 및 부종이 나타난 경우로 구분하였다.
- 기능성화장품의 심사에 관한 규정(식품의약품안전청고시 제 2000-33호)에 따라 수헹하였으며, 적용한 동물 수는 OECD 국소독성시험기준(OECD, 1987)에서 제시하는 농도당 3마리씩을 사용하였고, 비세척군2로 하여 한쪽 안구에 파이펫을 이용하여 0.1 ml을 한쪽눈의 하안검을 안구로부터 당겨서 결막낭내에 투여하고 상하안검을 약 1초간 서로 맞준다. 다른쪽 눈을 미처치 그대로 두어 무처 치 대조안으로 하였다.
- 시험방법은 전통적인 기니픽을 이용한 Maximization법 (Magusson과 Kligman, 1969)에 따라 실시하였다. 시험은 크게 예비시험과 본시험으로 나누며 각각 감작단계와 야기 단계로 나누어 실 시 하였다.
- 안구병변의 판정은 Draize 방법 및 “의약품등의 독성 시 험 기 준(식 품의 약품안전 청 고시 제 1999-61 호)”의 제 9조 국소 독성시험의 안구병변 등급표 및 “기능성화장품의 심사에 관한 규정(식품의약품안전청고시 제2000-33호)”에 따라 각 항목의 점수를 부여하였다.
성능/효과
- 수행하였다. BP 시료에 대한 24시간, 72시간경과 후의 피부자극성을 판독한 결과, 1, 3, 5%의 BP 시료의 경우 24시간의 경우 각각 2.45점, 2.75점, 2.85점의 홍반과 1.55점, 1.65점, 2.00짐의 부종을 보였으며, 72시간의 경우 킥-각 1.85점, 1.25점, 2.40점의 홍반과 1.00점, L35점 , 1.55점의 부종을 나타내 었다(Table 2).
- BP3, BMDM의 함량에 대한 in vitro SPF지수를 독립변수로 하였으며, 피부자극지수를 종속변수로 하여 상관성을 확인한 결과 SPF 지수에 대헤서 피부 자극지수가 일정하게 증가되는 양상을 볼 수 있었다(Fig. 3, 4).
- HS, OMC, OS, OC, BP3, BMDM, TD, Z0 표준시로-의 In vitro SPF 지수를 측정한 결과 자외선차단제의 함량을 증가시킴 으로서 SPF 지수가 증가하여 용량 의존적인 증가 양상을 보여주었다.
- HS, OMC, OS의 상관계수는 각각 0.996, 0.986, 0.931의 높은 상관성을 나타내었다. 이상과 같은 연구결과에서 SPF 지수와 유기차단제의 피부자극과의 상관성 이 있었으며, 자외선차단제의 안전성을 평가함에 있어, 피부 자극시험 이 가장 민감한 시험법 임을 시사한다.
- Homosalate의 함량에 대한 in vitro SPF지수를 독립변수로 하였으며, 피부자극지수를 종속변수로 하여 상관성을 확인한 결과 SPF 지수에 대해서 피부자극지수가 일정하게 증가되는 양상을 볼 수 있었으며, 상관계수는 r2=0996으로 산출되 었다(Fig. 1).
- In vitro SPF 지수를 측정한 결과, 시험된 모든 자외선차단제는 무기, 유기, UVB, UVA에 상관없이 함량이 증가함에 따라, SPF지수도 증가하였다.
- 67점의 부종을 나타내었다. OMC 시료에 대한 24시간, 72시간 경과 후의 피부자극성을 판독한 결과, 음성대조군은 자극이 없었으며, 10, 30, 50%의 0MC 시료의 경우 24시간의 경우 각각 L08점, 2.17점, 2.83점의 홍반과 0.00점, 0.92점, 1.58점의 부종을 보였으며, 72시간의 경우 각각 0.50점, 1.25점, 1.5 8점의 홍반과 0.00점, 0.42점, 0.92점의 부종을 나타내었다. OS 시료에 대한 24시간, 72시간 경과 후의 피부 자극성을 판독한 결과, 음성대조군은 자극이 없었으며, 10, 30, 50%의 OS 시료의 경우 24시간의 경우 각각 1.
- OMC의 함량에 대한 in vitro SPF지수를 독립 변수로 하였으며, 피부자극지수를 종속변수로 하여 상관성을 확인한 결과 SPF 지수에 대해서 피부자극지수가 일정하게증가되는 양상을 볼 수 있었으며, 상관계수는 r2=0.986으로 산출되었다(Suh 등, 2002).
- 92점의 부종을 나타내었다. OS 시료에 대한 24시간, 72시간 경과 후의 피부 자극성을 판독한 결과, 음성대조군은 자극이 없었으며, 10, 30, 50%의 OS 시료의 경우 24시간의 경우 각각 1.67점, 2.00점, 2.33점의 홍반과 0.33점, 1.00점, 1.33점의 부종을 보였으며, 72시간의 경우 각각 1.17점, 1.50점, L83점의 홍반과 0.17점, 0.50점, 0.67점의 부종을 나타내었다 (Table 1).
- OS의 함량에 대한 in vitiv SPF지수를 독립변수로 하였으며, 피부자극지수를 종속변수로 하여 상관성을 확인한 결과 SPF 지수에 대해서 피부자극지수가 일정하게 증가되는 양상을 볼 수 있었으며, 상관계수는 r2=0.931 으로 산출되었다(Fig. 2).
- SPF지수에 따른 피부자극지수를 측정한 결과, HS, OS, BP3, BMDM의 경우는 SPF지수가 증가함에 따라 피부 자극지수도 증가하였다, . 그러나, OC, TD, ZO의 경우에는 SPF가 증가와 상관없이 피부자극을 유발하지 않았다.
- 또한 토끼를 이용한 안점막자극시험 및 기니픽을 이용한 피부감작성시험에서 모든 자외선차단제는 무기, 유기, UVB, UVA에 상관없이 안점막 및 피부감작을 유발하지않았다.
- 시험기간동안에 시험물질에 기인한 체중변화, 임상 증상, 폐사 등은 관찰되지 않았으며, HS 시료에 대한 24시 깐, 72시간 경과 후의 피부자극성을 판독한 결과, 음성대조군은 자극이 없었으며, 30, 40, 50%의 24시간의 경우 각각 1.33점, 1.83점, 2.17점의 홍반과 0.33점, 067점, 0.83점의 부종을 보였으며, 72시간의 경우 각각 0.83점, 1.50점, 1.83점의 홍반과 0.33점, 0.33점, 0.67점의 부종을 나타내었다. OMC 시료에 대한 24시간, 72시간 경과 후의 피부자극성을 판독한 결과, 음성대조군은 자극이 없었으며, 10, 30, 50%의 0MC 시료의 경우 24시간의 경우 각각 L08점, 2.
- 시험기간동안에 시험물질에 기인한 체중변화, 임상 증상, 폐사 등은 관찰되지 않았으며, 피부감작성 시험 결과시험 된 모든 자외선차단제 및 대조물질 처치군의 경우 모든 동물에서 홍반, 가피, 부종 등의 증상은 전혀 관찰되지 않았다(Tabic 4). 양성데조군(DNCB)에서는 모든 동물에서 24, 48, 72시간에 명백한 홍반(양성률: 100%) 이관찰되었다.
- 931의 높은 상관성을 나타내었다. 이상과 같은 연구결과에서 SPF 지수와 유기차단제의 피부자극과의 상관성 이 있었으며, 자외선차단제의 안전성을 평가함에 있어, 피부 자극시험 이 가장 민감한 시험법 임을 시사한다.
후속연구
- 또한 그로 인한 자외선차단제의 부작용으로서 자극, 피부염, 알레르기성 접촉피부염, 광알레르기성 접촉피부염 등의 부작용사례들이 보고(Nohynek 등, 2001; Gasparro 등, 1998; Difley 등, 2000)되고 있어 독성학적 측면에서 자외선 차단제의 안전성에 대한 심도있는 연구가 필요할 것으로 생각된다. 한편 일반적으로 일반인에게 공개되는 정보는 SPF지수에 불과하여 SPF 지수와 자외선차단제의 안전성과의 상관관계를 규명하면 일반인들도 쉽게 부작용예측이 가능할 것으로 보인다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.