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문제 정의
- 바 있다. 그러나 야생 너구리에 대한 개 심 장사 상충의 감염 발생 보고가 현재까지 없으므로 본 연구에서는 야생너구리에 발생한 개심장사상충의 감염 예를 보고 하고자 한다.
제안 방법
- 즉, 혈액을 슬라이드 그라스에 도말 하여 고정액과 증류수에 각각 1분씩 담근 다음 염색액에 담가서 실온의 암소에서 2시간 반응시킨 후 Mayer's Haemalum 용액으로 대조염색하여 흐르는 수돗물에 세척한 다음 건조시킨 후 광학현미경으로 검경하였다. 개심장사상충의 성충을 확인하기 위해 Pentobartrital sodium (Nembutal Sodium, Abbott Lab., U.S.A.)를 60 mg/kg으로 정맥주사하여 안락사 시켰다.
- 외복 재정맥으로부터 5 祖를 채혈하여 2 I也는 EDTA 용기에 담고 나머지 3 靦는 시험관에 담아 실온에서 30 분간 방치시켜 응고시킨 후 원심분리 (700 X g, 15분) 하여 혈청을 분리하였다
- 사용하였다. 즉, 혈액 1 ml를 2 % 포르말린 용액 9 ml와 섞은 다음 300 X g로 원심분리한 후 new methylene blue로 염색하여 광학현미경 하에서 검경하였다. 말초혈액에 순환하는 개심장사상충 항원을 확인하기 위해 EUSA 검사법을 실시하였으며 사용된 EUSA kit는 FASTest® HW Antigen (Diagnostik Nfega Cor, Austria) 으로 제조회사의 검사 방법에 따라 실시하였다.
- 말초혈액에 순환하는 개심장사상충 항원을 확인하기 위해 EUSA 검사법을 실시하였으며 사용된 EUSA kit는 FASTest® HW Antigen (Diagnostik Nfega Cor, Austria) 으로 제조회사의 검사 방법에 따라 실시하였다. 즉, 혈액 한 방울을 검사용 카셋트에 떨어뜨린 후 희석액 두 방울을 첨가한 다음 검사 부위에 분홍색 실선이 나타나면 양성으로 판정하였다. 자충의 감별 진단을 위해 acid phosphatase 염색법을 실시하였으며 사용된 kit는 Leucognost-SPkit (Diagnostica MERCK, Germany)3로 제조회사의 검사 방법에 따라 실시하였다.
- 자충의 감별 진단을 위해 acid phosphatase 염색법을 실시하였으며 사용된 kit는 Leucognost-SPkit (Diagnostica MERCK, Germany)3로 제조회사의 검사 방법에 따라 실시하였다.즉, 혈액을 슬라이드 그라스에 도말 하여 고정액과 증류수에 각각 1분씩 담근 다음 염색액에 담가서 실온의 암소에서 2시간 반응시킨 후 Mayer's Haemalum 용액으로 대조염색하여 흐르는 수돗물에 세척한 다음 건조시킨 후 광학현미경으로 검경하였다. 개심장사상충의 성충을 확인하기 위해 Pentobartrital sodium (Nembutal Sodium, Abbott Lab.
- 혈액검사는 자동혈액 분석기 (Hemavet 800, CDC tech noises, U.S.A.)를 사용하였으며 혈청 내 각종 효소의 측정에는 자동혈액화학 측정 기(SM-4000, B.S. Biochemical systems, Italy)를 사용하였다.
대상 데이터
- 2002년 7월과 8월에 개심장사상충증 진단을 위해 충남대학교 부속동물병원에 내원한 연령이 4세로 추정 (치아상태로 판단)되는 체중 7.1 kg의 야생 너구리 암컷 1 두(너구리 1)와 연령이 4세로 추정(치아상태로 판단) 되는 체중 8.1 kg의 수컷 야생 너구리 1두 (너구리 2).
이론/모형
- 즉, 혈액 1 ml를 2 % 포르말린 용액 9 ml와 섞은 다음 300 X g로 원심분리한 후 new methylene blue로 염색하여 광학현미경 하에서 검경하였다. 말초혈액에 순환하는 개심장사상충 항원을 확인하기 위해 EUSA 검사법을 실시하였으며 사용된 EUSA kit는 FASTest® HW Antigen (Diagnostik Nfega Cor, Austria) 으로 제조회사의 검사 방법에 따라 실시하였다. 즉, 혈액 한 방울을 검사용 카셋트에 떨어뜨린 후 희석액 두 방울을 첨가한 다음 검사 부위에 분홍색 실선이 나타나면 양성으로 판정하였다.
- 말초혈액에서 자충을 확인하기 위해 modified Knott's test'를 사용하였다. 즉, 혈액 1 ml를 2 % 포르말린 용액 9 ml와 섞은 다음 300 X g로 원심분리한 후 new methylene blue로 염색하여 광학현미경 하에서 검경하였다.
- 즉, 혈액 한 방울을 검사용 카셋트에 떨어뜨린 후 희석액 두 방울을 첨가한 다음 검사 부위에 분홍색 실선이 나타나면 양성으로 판정하였다. 자충의 감별 진단을 위해 acid phosphatase 염색법을 실시하였으며 사용된 kit는 Leucognost-SPkit (Diagnostica MERCK, Germany)3로 제조회사의 검사 방법에 따라 실시하였다.즉, 혈액을 슬라이드 그라스에 도말 하여 고정액과 증류수에 각각 1분씩 담근 다음 염색액에 담가서 실온의 암소에서 2시간 반응시킨 후 Mayer's Haemalum 용액으로 대조염색하여 흐르는 수돗물에 세척한 다음 건조시킨 후 광학현미경으로 검경하였다.
성능/효과
- 아직 국내에서는 보고된 바 없다. 개 심장사상충증의 진단을 위해 충남대학교 부속동물병원에 내원한 야생너구리 2두를 대상으로 modified Knott's test, acid phosphatase staining, ELISA 검사 및 부검을 각각 실시한 결과 개심장사상충 감염으로 진단되었다. 내원 당시 임상병리학적 검사 결과 Nareaho's parameter와 비교할 때 너구리 1의 경우 단핵구, 총단백질 량 (TP), 평균 적혈구 혈색소량 (MCH) 및 평균적혈구 혈색소 농도 (MCH가낮고 백혈구는 높게 나타났으며 너구리 2에서는 호중구 및 ALT (alanine aminotransferase)는 높은 수치를 나타낸 반면 호산구, 평균적혈구용적 (MCV) 및 평균 적혈구 혈색소량 (MCH)은 낮은 수치를 나타냈다.
- 개 심장사상충증의 진단을 위해 충남대학교 부속동물병원에 내원한 야생너구리 2두를 대상으로 modified Knott's test, acid phosphatase staining, ELISA 검사 및 부검을 각각 실시한 결과 개심장사상충 감염으로 진단되었다. 내원 당시 임상병리학적 검사 결과 Nareaho's parameter와 비교할 때 너구리 1의 경우 단핵구, 총단백질 량 (TP), 평균 적혈구 혈색소량 (MCH) 및 평균적혈구 혈색소 농도 (MCH가낮고 백혈구는 높게 나타났으며 너구리 2에서는 호중구 및 ALT (alanine aminotransferase)는 높은 수치를 나타낸 반면 호산구, 평균적혈구용적 (MCV) 및 평균 적혈구 혈색소량 (MCH)은 낮은 수치를 나타냈다. 또한 두 마리모두 각각 modified Knott's test에서 개심장사상충의 자충을 확인하였고 다른 사상충의 자충들과의 감별을 위해 acid phosjrfiatase 염색을 실시한 결과 분비공 및 항문공이 적색으로 염색되어 개심장사상충의 자충을 관찰하였으며 ELISA항원검사 결과에서 양성반응을 나타내었다.
- 두 마리 모두에서 modified Knott, s test를 실시한 결과 말초혈액에서 자충을 확인하였으며, 다른 사상충의 자충과 감별 진단을 하기 위해 acid phosphatase 염색을 실시한 결과 개심장사상충의 자충으로 확인되었다 (Fig. 1). 또한 EUSal 검사에서는 개심장사상충 항원에 대한 양성반응을 나타내었다.
- 내원 당시 임상병리학적 검사 결과 Nareaho's parameter와 비교할 때 너구리 1의 경우 단핵구, 총단백질 량 (TP), 평균 적혈구 혈색소량 (MCH) 및 평균적혈구 혈색소 농도 (MCH가낮고 백혈구는 높게 나타났으며 너구리 2에서는 호중구 및 ALT (alanine aminotransferase)는 높은 수치를 나타낸 반면 호산구, 평균적혈구용적 (MCV) 및 평균 적혈구 혈색소량 (MCH)은 낮은 수치를 나타냈다. 또한 두 마리모두 각각 modified Knott's test에서 개심장사상충의 자충을 확인하였고 다른 사상충의 자충들과의 감별을 위해 acid phosjrfiatase 염색을 실시한 결과 분비공 및 항문공이 적색으로 염색되어 개심장사상충의 자충을 관찰하였으며 ELISA항원검사 결과에서 양성반응을 나타내었다. 부검 소견에서는 너구리 1의 경우 폐동맥에서 길이 9.
- 이는 너구리에서도 개와 마찬가지로 말초혈액에 자충이 출현한다는 사실을 의미하는 것으로 판단된다. 또한 부검 결과 너구리 1에서는 폐동맥에서 길이 9.0 cm의 수컷 성충 1마리가, 너구리 2에서는 우심실과 폐동맥에서 길이 11.0 cm의 수컷 1마리와 길이 25.0 cm 암컷 1마리의 성충이 각각 확인되었다. 이는 개와 마찬가지로 너구리에서도 개 심장사상중 성중의 주기생부위가 우심실과 폐동맥인 것으로 판단된다.
- 그러나 한국에 서식중인 야생 너구리에 대한 개심장사상충의 감염은 지금까지 보고된 바 없어 본 연구보고가 첫 번째인 것으로 판단된다. 본 연구에서는 다른 사상충의 자충과 감별 진단을 하기 위해 modified Knott's test로 자충을 확인한 후 acid phosphatase 염색 결과, 두 마리 모두에서 개심장사상충의 염색 특징인 분비공 및 항문 공이 각각적색으로 염색됨을 확인할 수 있었다. 이는 너구리에서도 개와 마찬가지로 말초혈액에 자충이 출현한다는 사실을 의미하는 것으로 판단된다.
- 또한 EUSal 검사에서는 개심장사상충 항원에 대한 양성반응을 나타내었다. 부검 소견에서 너구리1은 폐동맥에서 수컷성충 1마리(길이 9.0 cm)를 확인하였고 (Fig. 2), 너구리 2는 우심실과 폐동맥에서 성충수컷 1 마리 (길이 11.0 cm)와 암컷 1마리(길이 25.0 cm)를 각각 확인하였다(Fig. 3).
- 또한 두 마리모두 각각 modified Knott's test에서 개심장사상충의 자충을 확인하였고 다른 사상충의 자충들과의 감별을 위해 acid phosjrfiatase 염색을 실시한 결과 분비공 및 항문공이 적색으로 염색되어 개심장사상충의 자충을 관찰하였으며 ELISA항원검사 결과에서 양성반응을 나타내었다. 부검 소견에서는 너구리 1의 경우 폐동맥에서 길이 9.0 cm의 수컷성충이, 너구리 2에서는 우심실과 폐동맥에서 길이 11.0 cm의 수컷 1마리와 길이 25.0 cm 암컷 1마리성충을 각각 확인하였다. 앞으로 보다 많은 너구리를 대상으로 개심장사상충의 감염률 조사가 이루어져야 할 것으로 생각된다.
- 임상병리학적 검사 결과 Nareaho's pgm血ter26와 비교할 때 너구리1은 단핵구, 총단백질량(TP), 평균 적혈구 혈색소량 (MCH) 및 평균적혈구 혈색소 농도 (MCHC)가낮고 백혈구는 높은 수치를 나타내었으며, 너구리 2는 호중구 및 ALT (alanine aminotransferase)는 높고 호산구, 평균 적혈구 용적(MCV) 및 평균적혈구 혈색소량 (MCH)은 낮은 수치를 각각 나타내었다 (Table 1).
후속연구
- 0 cm 암컷 1마리성충을 각각 확인하였다. 앞으로 보다 많은 너구리를 대상으로 개심장사상충의 감염률 조사가 이루어져야 할 것으로 생각된다.
- 이는 개와 마찬가지로 너구리에서도 개 심장사상중 성중의 주기생부위가 우심실과 폐동맥인 것으로 판단된다. 앞으로 보다 많은 두 수의 너구리를 대상으로 개심장사상충의 감염률에 대한 조사는 물론, 한국에서식하고 있는 너구리에 있어서 어느 종의 모기가 개 심장 사상충을 전염시키는 중간 매개체로 작용하는지에 관한 연구도 병행되어야 할 것으로 사료된다.
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