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문제 정의
- 따라서, 본 연구에서는 섭취된 지질에서 지방산흡수에중요한 역할을 하는 lipase의 활성을 억제할 수 있는 천연성분의 분리와 더불어 국내 식생활에 맞춘 탄수화물과연관된 다이어트 소재로서 이미 동물 실험을 통해 탄수화물의 흡수를 억제하는 효과를 나타낸 것으로 보고된난황 항체를 이용하여 비만 개선 효과를 관찰하고자 하였다5’. 본 실험에서 사용된 난황 항체는 소화기관내에서탄수화물의 최종 소화 흡수를 억제함으로써 비만 개선에도 효과를 나타낼 수 있을 것으로 추측되는 식품 첨가물이다.
- 본 실험에서 사용된 난황 항체는 소화기관내에서탄수화물의 최종 소화 흡수를 억제함으로써 비만 개선에도 효과를 나타낼 수 있을 것으로 추측되는 식품 첨가물이다. 즉, 본 연구에서는 천연 추출물 중 지방 분해 효소를 억제하는 성분이 함유된 것으로 추측되는 가지 및 길경 등의 천연물과 당질 흡수를 억제하는 것으로 보고되어진 난황 항체를 조합하여 탄수화물과 지방의 소화 흡수를 동시에 저해할 수 있는 조성물을 제조한 후 이 조성물의 다이어트에 관한 임상 효능 및 안전성을 평가하고자 하였다.
- 췌장 lipase의 활성을 억제하는 결과를 보인 가지와길경의 열수 추출물이 실제로 체내에서 지질의 흡수 억제 효능이 있는지를 확인하기 위하여 동물 실험을 행하였다. 지질 유화액을 경구투여 한 후 천연물 열수 추출물을 경구투여 하여 시간대별로 혈중 총 콜레스테롤 농도와 중성지질농도를 측정하였으며 그 결과는 Table 3 과 같다.
제안 방법
- 지질과 천연 추출물을 섭취하고 난 후 0, 2. 4시간 후에 심장 채혈로 혈액을 채취하여 중성 지질과 총콜레스테롤 함량을 분석용 kit(아산제약)을 이용하여 분석하였다.
- 또한 혈압 및 맥박 등의 일반적인 건강 상태 조사를 행하였으며. 50일이 경과한 후 다시 혈액을 채취하여 동일한 검사를 반복하여 시료의 안정성을 검사하였다.
- 길경(Pfatycodon grandiflorum Palibin), 가지(Sa/a- num melongena L.), 숙지황(i?a2imannia glutinosa Liboschitz), 의이인(Coix lachryma-jobi var. ma- yuen), 천궁(Cnidii J?hizoma)을 Table 1 과 같은 비율로 총 400g 되게 칭량한 다음 2000 ml 의 증류수를 가수 한 후 2시간 동안 100℃ 열수에서 추출하였다. 추출된 액을 다시 계속 가열하여 1000oil 이 될 때까지 농축한 후, 여기에 난황분말을 Img/ml 의 농도로 첨가하여 잘 혼합한 뒤 1회 복용분량인 30ri 씩 개별 포장하였다.
- 검사를 행하였다. 또한 혈압 및 맥박 등의 일반적인 건강 상태 조사를 행하였으며. 50일이 경과한 후 다시 혈액을 채취하여 동일한 검사를 반복하여 시료의 안정성을 검사하였다.
- 또한, 임상 실험용 시료의 부작용의 유발 및 안정성을 검사하기 위하여 시료를 섭취하기 전 채혈하여 glutam- ate-pyruvate transaminase(GPT)을 포함하여 혈액학적 검사를 행하였다. 또한 혈압 및 맥박 등의 일반적인 건강 상태 조사를 행하였으며.
- 본 연구에서의 임상 실험은 sucrase 등의 탄수화물의소화 흡수 효소의 활성을 억제하는 난황 항체 성분과 지방 성분의 체내 흡수에 필요한 lipase의 활성을 억제하는 성분으로 구성된 시료를 피검자들에게 정상적인 식사를 진행하는 중에 50일간 투여를 통해 진행하였다. 그 결과 복용 전과 비교하여 체지방의 12%가 감소하였고, 피하지방 7nm.
- 0(Biospace사, 서울, 대한민국)을 사용하였다. 시료의 복용전 피검자의체성분 및 체중, 혈액분석을 행하였고, 실험기간 종료시점인 50일이 경과한 뒤 동일항목을 측정하였다.
- 이들과 더불어 홍 등5’에 의해 체내에서 당질의 흡수를 억제하는 것으로 효과가 있는 것으로 보고된 소화흡수 효소에 대한 난황 항체를 첨가하여 제조하였다. 이상의 임상용 시료는 천연물을 중심으로 구성되어 있어 체내에서 높은 안전성을 확보할 것으로 추측되며.
- 즉, lipase는 섭취된 지질 성분의 체내 흡수에 있어서 매우 중요한 효소이며, 따라서 가지, 길경의 섭취시지방의 장내 소화 흡수를 억제할 가능성이 높은 것으로추측되었다. 이를 확인하기 위하여 가지 및 길경의 열수추출물을 이용하여 췌장 lipase의 억제 활성을 in vitro 에서 조사하였다.
- 이상의 임상용 시료는 천연물을 중심으로 구성되어 있어 체내에서 높은 안전성을 확보할 것으로 추측되며. 이를 확인하기 위하여 한국한의학연구원에 내원하는 23명의 임상 피검자들 대상으로 50일간 이 시료를 복용시키며 일반적 건강 지표를 측정함으로써 안전성을 검사하였으며, 그 결과는 Table 4와 같다. Glutamate-pyruvate transaminase (GPT) 는 간세포내에 존재하는 효소로서 간 손상이 발생하였을 경우 혈액으로 유출된다.
- 즉, 각 군당 6마리의 마우스를 사용하여 지질유화액 (Cron oil 6 ml : Cholic acid 80mg ; Cholestertyl oleate 2g ; saline 6ml)을 20mg/mouse로 1회 경구투여하여 지질을 섭취하게 한 후, 가지 및 길경 열수추출물을 150mg /mouse로 경구투여하였다. 지질과 천연 추출물을 섭취하고 난 후 0, 2.
- 즉, 돼지소장으로부터 소화흡수에 관여하는 효소를 분리정제 한 뒤, 이를 항원으로 하여 산란계에 면역 접종하고 이 산란계로부터 얻어진 달걀에서 난황 단백질을 분리한 뒤 동결건조하여 시료를 얻었다.
- 지질 유화액을 경구투여 한 후 천연물 열수 추출물을 경구투여 하여 시간대별로 혈중 총 콜레스테롤 농도와 중성지질농도를 측정하였으며 그 결과는 Table 3 과 같다. 지질성분만을 경구투여 하였을 경우 2시간 및 4 시간 경과 후 혈중 총콜레스테롤 농도와 중성지질농도는지질을 투여하지 않았을 때에 비교하여 증가하는 ma- yuen), 천궁(Cnidii J?hizoma)을 Table 1 과 같은 비율로 총 400g 되게 칭량한 다음 2000 ml 의 증류수를 가수 한 후 2시간 동안 100℃ 열수에서 추출하였다. 추출된 액을 다시 계속 가열하여 1000oil 이 될 때까지 농축한 후, 여기에 난황분말을 Img/ml 의 농도로 첨가하여 잘 혼합한 뒤 1회 복용분량인 30ri 씩 개별 포장하였다.
대상 데이터
- 길경 (Platycodon grandiflorum Palibin) 및 가지 (Solanum melongena L.) 추출물 제조를 위하여 원료량의 5배량의 증류수를 넣고 100℃, 정치상태에서 2시간 동안 1차 추출한 뒤, 추출액을 모아 다시 5배량의 물을 넣고 2시간 동안 동일한 조건으로 2차 추출을 한 뒤, 추출액을 모아 진공농축기로 농축한 뒤 동결건조하여 시료로서 사용하였다.
- 대한실험동물 센터로부터 분양받은 웅성의 C57BL/6J 마우스를 이용하여 천연물의 지질 흡수 억제능을 즉정하였다. 즉, 각 군당 6마리의 마우스를 사용하여 지질유화액 (Cron oil 6 ml : Cholic acid 80mg ; Cholestertyl oleate 2g ; saline 6ml)을 20mg/mouse로 1회 경구투여하여 지질을 섭취하게 한 후, 가지 및 길경 열수추출물을 150mg /mouse로 경구투여하였다.
- 또한, 본 연구의 임상 실험에서 사용된 시료는 한국인의 식생활 패턴에서 섭취 비중이 가장 높은 탄수화물의체내 소화, 흡수를 억제하는 효능이 있는 것으로 홍 등5, 이 보고한 난황 항체를 포함하였다. 홍 등5, 의 보고에 의하면 실험 동물에게 당질 소화흡수에 대한 난황 항체를투여하지 않은 군과 투여한 군으로 구분한 뒤 당질을 투여하고 혈당의 변화를 60분간 측정한 결과에서 난황 항체를 투여한 군에서 20-30% 정도의 혈당 증가량의 저해가 나타난다고 하였다.
- 따라서. 본 연구에서 사용된 난황 항체 및 천연 추출물의 조합으로 제조된 시료는 인체에서 혈압 또는-간 조직에 부작용을 야기하지는 않아 안전성이 있는 것으로 생각된다.
- 천연추출물과 난황단백질을 함유한 시료의 실제 비만 조절 효능 여부를 확인하기 위하여 사람을 대상으로 하여 임상 효능 평가를 실시하였다: 임상 대상자는 한국한의학연구원에 내원하는 23명의 피검자를 대상으로 하였다. 피검자의 일반적 특징은 Table 2와 같았다: 피검자들에게 시료의 섭취는 1일 2회 아침과 저녁 식사 전에 50일간 복용하도록 지도하였으며, 정상적인 식사를 진행할 것을 권고하였다.
이론/모형
- 췌장 lipase를 이용하였다. Lipase 활성의 측정은 Fossati 등의 방법을 통하여 lipase의 기질인 triolein으로부터 분리되어 나오는 oleic acid의 함량을 비색정량법을 통해서 측정하였다8’. 측정된 lipase 활성은 천연추출물이 첨가되지 않은 상태에서의 lipase의 활성을 100% 로 하여 천연추출물의 상대적 lipase 활성을 나타내었다.
- 피검자들의 체성분 및 체중의 측정은 Bioelectrical Impedence Analysis를 이용한 Inbody 2.0(Biospace사, 서울, 대한민국)을 사용하였다. 시료의 복용전 피검자의체성분 및 체중, 혈액분석을 행하였고, 실험기간 종료시점인 50일이 경과한 뒤 동일항목을 측정하였다.
성능/효과
- 췌장 lipase 만을 첨가하였을 때 분해되어 나오는 oleic acid 의 양을 100%로 기준 하였을 때 가지 또는 길경의 열수 추출물이 첨가된(50ug/ml, 100ug/nl) 상태에서 lipase의 활성으로 생성되는 oleic acid의 함량은 가지에서 약 각 농도에서 35%, 47%(100ug/ml), 길경에서 41%, 53%(50ug/ml) 만이 검출되었다. 가지와 길경 모두에서 농도 의존적인 모습으로 췌장 lipase의 활성을 저하시키는 것으로 나타났다. 따라서.
- 진행하는 중에 50일간 투여를 통해 진행하였다. 그 결과 복용 전과 비교하여 체지방의 12%가 감소하였고, 피하지방 7nm. 체중 2우이 감소하는 효과를 나타내어 비만개선에 뚜렷한 효과가 있는 것으로 판명되었다.
- 활성의 변화는 없는 것으로 나타나 시료에 의한 간 장애는 없는 것으로 판명되었다. 또한, 일반적 건강지표인 혈압, 맥박수 등에 있어서 시료의 복용전과 복용후에 유의적인 변화가 관찰되지는 않았다. 따라서.
- 총중성지질농도에서 길경 추출물을 투여한 군에서는 대조군에 비하여 유의적으로 낮은 혈중 총중성지질 농도를 보였다. 또한, 지질투여 후 4시간이 경과되었을 때 지질투여 전보다 더 낮은 중성지질 농도를 보였으나 들간의 유의적 차이는 없었다. 총콜레스테롤 농도에있어서 길경 투여군은 특별한 변화를 관찰할 수 없었다.
- 총콜레스테롤 농도에있어서 길경 투여군은 특별한 변화를 관찰할 수 없었다. 반면에 가지 추출물을 투여한 군에서는 혈중 총콜레스테롤 함량이 대조군에 비하여 낮은 함량을 보였으나 혈중종중성지질 함량에 있어서는 높은 효율을 보이지는 못한것으로 나타났다.
- 본 연구에서 사용된 시료를 50일간 복용한 후 GPT의 혈액 내 활성의 변화는 없는 것으로 나타나 시료에 의한 간 장애는 없는 것으로 판명되었다. 또한, 일반적 건강지표인 혈압, 맥박수 등에 있어서 시료의 복용전과 복용후에 유의적인 변화가 관찰되지는 않았다.
- 본 연구에서는 길경과 가지의 열수 추출물을 이용하여 lipase의 활성 억제 능력을 조사한 결과 표품 lipase 의 활성을 억제하는 것으로 나타났다. 이 결과가 실제로체내에서 적용되는가를 확인하기 위하여 실험 동물에게다량의 중성지질과 콜레스테롤을 경구 투여한 뒤 혈액내의 유리 지방산의 함량을 측정한 결과에서도 가지 및 길경의 추출물을 섭취한 실험 동물은 혈중의 지질 성분의농도가 대조군에 비하여 감소하는 결과를 나타냈다.
- 즉. 섭취 전 28.86 kg 이었던 피검자의 평균 체지방량은 임상 시료를 복용시킨 후 감소하는 모습을 보였으며, 50일 경과 후에 25.46 kg으로 약 12% 정도의 체지방량이 감소하는 결과가 나타났다.
- 활성을 억제하는 것으로 나타났다. 이 결과가 실제로체내에서 적용되는가를 확인하기 위하여 실험 동물에게다량의 중성지질과 콜레스테롤을 경구 투여한 뒤 혈액내의 유리 지방산의 함량을 측정한 결과에서도 가지 및 길경의 추출물을 섭취한 실험 동물은 혈중의 지질 성분의농도가 대조군에 비하여 감소하는 결과를 나타냈다. 따라서, 길경 및 가지의 추출물은 체내에서 lipase 효소 억제에 따른 지방산 흡수를 억제하는 효능을 가지고 있는것으로 사료된다.
- 섭취된 지질은 lipase의 작용에의하여 유리 지방산으로 분해되고, 분해된 유리지방산이소장의 점막 세포를 통해 흡수하는 기작으로 체내로 흡수된다. 즉, lipase는 섭취된 지질 성분의 체내 흡수에 있어서 매우 중요한 효소이며, 따라서 가지, 길경의 섭취시지방의 장내 소화 흡수를 억제할 가능성이 높은 것으로추측되었다. 이를 확인하기 위하여 가지 및 길경의 열수추출물을 이용하여 췌장 lipase의 억제 활성을 in vitro 에서 조사하였다.
- 지질 유화액을 경구투여 한 후 천연물 열수 추출물을 경구투여 하여 시간대별로 혈중 총 콜레스테롤 농도와 중성지질농도를 측정하였으며 그 결과는 Table 3 과 같다. 지질성분만을 경구투여 하였을 경우 2시간 및 4 시간 경과 후 혈중 총콜레스테롤 농도와 중성지질농도는지질을 투여하지 않았을 때에 비교하여 증가하는 것으로 나타났다. 총중성지질농도에서 길경 추출물을 투여한 군에서는 대조군에 비하여 유의적으로 낮은 혈중 총중성지질 농도를 보였다.
- 그 결과 복용 전과 비교하여 체지방의 12%가 감소하였고, 피하지방 7nm. 체중 2우이 감소하는 효과를 나타내어 비만개선에 뚜렷한 효과가 있는 것으로 판명되었다. 또한, 2 kg의 체중 감소효과에도 불구하고 체지방량은 3.
- 체지방량 및 체중의 감소와 더불어 피검자들의 팔뚝의 피하지방 및 엉덩이 둘레 역시 각각 시료를 복용하고 50일이 경과된 후 7m와 2an가 유의적으로 감소하는 결과를 보였으며, 이것은 체지방량의 감소와 연관되어 나타난 것으로 추측되었다.
- 1과 같이 나타났다. 췌장 lipase 만을 첨가하였을 때 분해되어 나오는 oleic acid 의 양을 100%로 기준 하였을 때 가지 또는 길경의 열수 추출물이 첨가된(50ug/ml, 100ug/nl) 상태에서 lipase의 활성으로 생성되는 oleic acid의 함량은 가지에서 약 각 농도에서 35%, 47%(100ug/ml), 길경에서 41%, 53%(50ug/ml) 만이 검출되었다. 가지와 길경 모두에서 농도 의존적인 모습으로 췌장 lipase의 활성을 저하시키는 것으로 나타났다.
- Lipase 활성의 측정은 Fossati 등의 방법을 통하여 lipase의 기질인 triolein으로부터 분리되어 나오는 oleic acid의 함량을 비색정량법을 통해서 측정하였다8’. 측정된 lipase 활성은 천연추출물이 첨가되지 않은 상태에서의 lipase의 활성을 100% 로 하여 천연추출물의 상대적 lipase 활성을 나타내었다.
- 같이 나타났다. 피검자들의 평균 체중은 임상 시작 전 78.42kg 이였으며, 시료를 복용하며 50일이 경과된 후에 평균 체중이 76.47kg으로 약 1.95오의 체중이 감량된 것으로 나타났다. 그러나 복용전과 복용후 차이의 통계적 유의성은 발견되지 않았다.
후속연구
- 4kg이감소되는 것으로 나타났으며 이는 체내 신진대사를 활성화하거나 또한 근육량의 증가를 통해 균형 있는 신체 발달을 가져오는 것으로 사료된다. 따라서, 본 연구에서 사용된 시료의 섭취는 지방 및 탄수화물의 소화흡수를 억제함으로써 체지방의 감소 및 체내 신진대사를 활발히하여 비만 개선에 도움을 줄 수 있을 것으로 사료된다.
- 홍 등5, 의 보고에 의하면 실험 동물에게 당질 소화흡수에 대한 난황 항체를투여하지 않은 군과 투여한 군으로 구분한 뒤 당질을 투여하고 혈당의 변화를 60분간 측정한 결과에서 난황 항체를 투여한 군에서 20-30% 정도의 혈당 증가량의 저해가 나타난다고 하였다. 이러한 흡수율의 억제는 소모열량과 비교하여 과도하게 섭취하였을 때 발생하는 잉여에너지가 체내에서 지방으로 축적되는 것을 예방할 수있어 비만 개선에 도움을 줄 수 있을 것으로 생각된다.
- 이들과 더불어 홍 등5’에 의해 체내에서 당질의 흡수를 억제하는 것으로 효과가 있는 것으로 보고된 소화흡수 효소에 대한 난황 항체를 첨가하여 제조하였다. 이상의 임상용 시료는 천연물을 중심으로 구성되어 있어 체내에서 높은 안전성을 확보할 것으로 추측되며. 이를 확인하기 위하여 한국한의학연구원에 내원하는 23명의 임상 피검자들 대상으로 50일간 이 시료를 복용시키며 일반적 건강 지표를 측정함으로써 안전성을 검사하였으며, 그 결과는 Table 4와 같다.
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