굴피나무 지상부의 메탄을 추출물을 n-hexane, ethylacetate, n-butanol, $H_2O$으로 순차적으로 용매분획하였다. Ethylacetate 분획으로부터 silica gel chromatography를 반복하여 활성물질을 분리 정제하였다. 화합물은 NMR과 MS의 기기분석 결과 5-hydroxy-2-methoxy-1,4-naphthoquinone로 구조결정 되었다. 이 화합물은 in vivo 실험결과 토마토역병에 대하여 $100\;{\mu}g/ml$에서 76%의 방제효과를 나타내었다.
굴피나무 지상부의 메탄을 추출물을 n-hexane, ethylacetate, n-butanol, $H_2O$으로 순차적으로 용매분획하였다. Ethylacetate 분획으로부터 silica gel chromatography를 반복하여 활성물질을 분리 정제하였다. 화합물은 NMR과 MS의 기기분석 결과 5-hydroxy-2-methoxy-1,4-naphthoquinone로 구조결정 되었다. 이 화합물은 in vivo 실험결과 토마토역병에 대하여 $100\;{\mu}g/ml$에서 76%의 방제효과를 나타내었다.
Methanol extract obtained from aerial parts of Platycarya strobilacea was successively fractionated with n-hexane, ethylacetate, n-butanol, and water. From ethylacetate fraction, an active compound was isolated through repeated silica gel column chromatography and was identified as 5-hydroxy-2-metho...
Methanol extract obtained from aerial parts of Platycarya strobilacea was successively fractionated with n-hexane, ethylacetate, n-butanol, and water. From ethylacetate fraction, an active compound was isolated through repeated silica gel column chromatography and was identified as 5-hydroxy-2-methoxy-1,4-naphthoquinone by MS and NMR analyses. The compound showed in vivo 76% antifungal activity at $100\;{\mu}g/ml$ against tomato late blight disease.
Methanol extract obtained from aerial parts of Platycarya strobilacea was successively fractionated with n-hexane, ethylacetate, n-butanol, and water. From ethylacetate fraction, an active compound was isolated through repeated silica gel column chromatography and was identified as 5-hydroxy-2-methoxy-1,4-naphthoquinone by MS and NMR analyses. The compound showed in vivo 76% antifungal activity at $100\;{\mu}g/ml$ against tomato late blight disease.
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문제 정의
그 결과 굴피나무 지상부의 MeOH 추출물 (2, 000 fig/ml)이 in vivo test에서 토마토역병에 대해서 95%의 병원균 증식억제 효과를 나타내었다.'따라서 본 연구에서는 굴피나무 유래의 토마토역병에 대한 항진균 활성물질을 규명하고자, 굴피나무 잎과 어린가지를 포함한 지상부의 MeOH 추출물을 증류수 1,000 m/에 현탁시켜 n-hexane, EtOAc, n-BuOH 용매로 용매분획하여 각 분획을 대상으로 in vitro test에 의한 토마토 역병의 증식억제 효과를 조사하였다. 그 결과 EtOAc 분획에서 강한 활성을 나타냈다.
제안 방법
1H-(400 MHz) 및 13C-NMR(100 MHz) 스펙트럼은 Variant Unity Inova로, IR 스펙트럼은 Perkin-Elmer Model 599B로, EI/MS는 JEOL의 JMSAX 505-WA로 측정하였다. Column chromatography(c.
Column chromatography의 분획을 식물병원균인 토마토역병(Phytophthora infestans)에 대하여 in 에서 균사의 생육억제 활성실험을 실시하여 활성 물질을 분리 . 정제하는데 지표로 삼았다.
4 kg을 100% methanol(MeOH) 15/로 3회 반복 추출하여 MeOH 추출물 279 g을 얻었다. MeOH 추출물을 증류수 (1,000 m/) 에 현탁시켜 w-hexane(1,000 ml), ethylacetate (EtOAc, 1,000 mZ), n-butanol(BuOH, 1,000 m/)을 사용하여 각각 3회씩 순차적으로 용매분획하였다.
정제하는데 지표로 삼았다. P. infestans균의 균사를 포함하고 있는 agar disc(직경 5 mm)를 V-8 juice agar 배지 13)중앙에 접종한 후 분획물질을 좌우에 배치하는 paper disc 방법으로 균사생육의 억제효과를 측정하였다.
그 결과 EtOAc 분획에서 강한 활성을 나타냈다. in vitro 균사생장 억제 실험의 결과를 지표로 하여 분획으로부터 silica gel c.c.를 반복 사용하여 활성물질로 compound 1을 분리 . 정제하였다.
굴피나무 유래의 항진균성 활성물질을 구명하기 위하여 굴피나무 지상부를 MeOH로 추출하여 용매분획과 chromatography 로 분리, 정제하여 활성 화합물을 얻었다. 이 화합물에 대하여 NMR과 MS 분석 기법을 이용하여 화학적 구조를 결정하였고 토마토 역병에 대한 방제효과를 검토하였다.
접종한 식물은 하루동안 20℃ 습실상(상대습도 95% 이상)에 두어 습실상에서 발병을 유도하였다. 습실처리한 식물은 항온항습실(20℃, 상대습도 60~70%)로 이동하여 형광등이 켜진 선반에서 재배하면서 발병시켰다. 접종 4일 후, 병이 충분히 발생한 후에 병반면적율을 달관조사하고 방제가를 계산하였다.
약제 처리한 식물은 1일 후예 병원균인 P. bifestans의 유주자낭 현탁액(105 유주자낭/m/)에서 나출된 유주자 현탁액을 분무, 접종하였다. 접종한 식물은 하루동안 20℃ 습실상(상대습도 95% 이상)에 두어 습실상에서 발병을 유도하였다.
분리, 정제하여 활성 화합물을 얻었다. 이 화합물에 대하여 NMR과 MS 분석 기법을 이용하여 화학적 구조를 결정하였고 토마토 역병에 대한 방제효과를 검토하였다.
저자들은 자생식물자원으로부터 천연물 농약을 개발하기 위하여 국내 자생식물의 MeOH 추출물을 대상으로 항진균 활성 검정을 실시하였다. 그 결과 굴피나무 지상부의 MeOH 추출물 (2, 000 fig/ml)이 in vivo test에서 토마토역병에 대해서 95%의 병원균 증식억제 효과를 나타내었다.
습실처리한 식물은 항온항습실(20℃, 상대습도 60~70%)로 이동하여 형광등이 켜진 선반에서 재배하면서 발병시켰다. 접종 4일 후, 병이 충분히 발생한 후에 병반면적율을 달관조사하고 방제가를 계산하였다.#
대상 데이터
Compound 1의 in vivo에 의한 항진균 활성 검정은 dimethylsulfoxide(DMSO)를 사용하여 용해한 후에 DMSO의 최종농도가 1%가 되도록 Tween 20 용액 (250|ig/mZ)으로 희석하여 실험하고자 하는 약제농도로 약제 용액을 준비하였다. 무처리구는 약제 없이 DMSO 1%와 Tween 20 250)ng/m/이 되도록 흐}였다.
본 연구에 사용된 굴피나무(Platycarya strobilacea) 는 2002년 6월 경북 상주시 가장동 소재 갑장산에서 채집하였으며 표본은 상주대학교 식물자원학과 천연물화학연구실에 보관 중이다.
온실에서 재배한 2엽기 토마토(Lycopersicoa esculentum)6^ 분리된 화합물 용액을 spray하고 온실에서 풍건하였다. 약제 처리한 식물은 1일 후예 병원균인 P.
성능/효과
벤젠환(1564cm-1)의 존재가 추정되었다. 1H-(400 MHz, CDC13) 및 "C-NMR 스펙트럼에서는 1, 4-naphthoquinone의 전형적인 signal들을 보여주었다. 또한 1H-NMR에서 aromatic methine proton signal0] 4개만 관즉되고 있는 점과, 13C-NMR 에서 olefine quarternary carbon 중 2개 signal 의 chemical shift가 각각 8C 161.
보고되었다.'” 토마토역병 병원균인 Phytophthora infestans에 대한 증식억제 효과를 in vivo 조건하에서 실험한 결과, 100, 250μg/m/ 농도에서 각각 76, 98% 방제효과를 나타내었다. 그에 반해서 현재 살균제로 사용되고 있는 대조약제인 Dimethomorph는 10μg/ml 농도에서 100% 방제효과를 나타냈다(Table 1).
2, 5-dihydroxy 치환체와 2, 8-dihydrpxy 치환체는 2개의 carbonyl기의 13C-NMR에 있어서의 chemical shift가 뚜렷이 다른데, 전자의 경우, C-1과 C-4는 각각 약 5C 180과 5C 190에서 관측되는데 비해, 후자의 경우는 각각 8C 183 및 5C 185에서 관측된다.12) Compound 1의 경우는 각각 δc 179.32와 δc 190.58에서 관측되어 2, 5-dihydroxy 치환체로 판명되었다. 한편 1H-NMR 스펙트럼에서 5h 12.
굴피나무 지상부의 MeOH 추출물을 용매분획하여 토마토역병 (tomato late blight) 에 대한 방제 효과를 분석한 결과, EtOAc fraction(fr.)에서 강한 활성을 나타내었다. EtOAc fir.
'따라서 본 연구에서는 굴피나무 유래의 토마토역병에 대한 항진균 활성물질을 규명하고자, 굴피나무 잎과 어린가지를 포함한 지상부의 MeOH 추출물을 증류수 1,000 m/에 현탁시켜 n-hexane, EtOAc, n-BuOH 용매로 용매분획하여 각 분획을 대상으로 in vitro test에 의한 토마토 역병의 증식억제 효과를 조사하였다. 그 결과 EtOAc 분획에서 강한 활성을 나타냈다. in vitro 균사생장 억제 실험의 결과를 지표로 하여 분획으로부터 silica gel c.
실시하였다. 그 결과 굴피나무 지상부의 MeOH 추출물 (2, 000 fig/ml)이 in vivo test에서 토마토역병에 대해서 95%의 병원균 증식억제 효과를 나타내었다.'따라서 본 연구에서는 굴피나무 유래의 토마토역병에 대한 항진균 활성물질을 규명하고자, 굴피나무 잎과 어린가지를 포함한 지상부의 MeOH 추출물을 증류수 1,000 m/에 현탁시켜 n-hexane, EtOAc, n-BuOH 용매로 용매분획하여 각 분획을 대상으로 in vitro test에 의한 토마토 역병의 증식억제 효과를 조사하였다.
1H-(400 MHz, CDC13) 및 "C-NMR 스펙트럼에서는 1, 4-naphthoquinone의 전형적인 signal들을 보여주었다. 또한 1H-NMR에서 aromatic methine proton signal0] 4개만 관즉되고 있는 점과, 13C-NMR 에서 olefine quarternary carbon 중 2개 signal 의 chemical shift가 각각 8C 161.01과 3C 160.95인 점으로부터 naphthalene 환의 2곳에 수산기가 결합하고 있음이 확인되었다. 또한 8h 3.
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