넙치, Paralichthys olivaceus 자어의 원시생식소와 신장의 발달에 미치는 Polychlorinated Biphenyls (PCBs)의 영향 Effect of PCBs on the Primitive Gonad and Kidney Development of the Larval Stage of Olive Flounder, Paralichthys olivaceus in Culture Farm원문보기
양식산 넙치를 대상으로 아치사 만성농도의 PCBs가 자어기의 원시생식소와 신장의 발달에 미치는 영향을 살펴보았다. 원시생식소 발달 과정은 4단계; 원시생식세포(primodial germ cell, PGC) 단계, 생식융기 (genital ridge type, GRT) 단계, 원시생식소 I형(primitive gonad type I, PGT I) 단계 및 원시생식소 II형(primitive gonad type II, PGT II) 단계로 구분할 수 있었다. 시원생식세포는 부화 후 3일에 발견되었고, 원시 생식소는 대조구에서 부화 후 24일에 나타나며 처리구에서는 부화 후 22일에 나타났다. 신장 발달과정은 4단계; 단일관형 중신관(unitubular type of mesonephric duct, UTMD) 단계, 분지형 중신관(the branched mesonephric duct, BMD) 단계, 세뇨관 형성(convoluted tubule formation CTF) 단계 및 사구체 출현(glomerulus appearance, GA) 단계로 구분할 수 있었으며, 신장의 구조적 완성시기는 대조구와 처리구 모두 부화 후 25∼30일로 나타났다. 하지만 원시 생식소와 신장 모두 대조구와 처리구에서 유의한 차를 보이지 않았다 (P>0.05). 그러므로, 넙치 자어기의 원시 생식소와 신장의 발달에 따른 PCBs(3.0 $\mu\textrm{g}$/L)의 영향은 없었다.
양식산 넙치를 대상으로 아치사 만성농도의 PCBs가 자어기의 원시생식소와 신장의 발달에 미치는 영향을 살펴보았다. 원시생식소 발달 과정은 4단계; 원시생식세포(primodial germ cell, PGC) 단계, 생식융기 (genital ridge type, GRT) 단계, 원시생식소 I형(primitive gonad type I, PGT I) 단계 및 원시생식소 II형(primitive gonad type II, PGT II) 단계로 구분할 수 있었다. 시원생식세포는 부화 후 3일에 발견되었고, 원시 생식소는 대조구에서 부화 후 24일에 나타나며 처리구에서는 부화 후 22일에 나타났다. 신장 발달과정은 4단계; 단일관형 중신관(unitubular type of mesonephric duct, UTMD) 단계, 분지형 중신관(the branched mesonephric duct, BMD) 단계, 세뇨관 형성(convoluted tubule formation CTF) 단계 및 사구체 출현(glomerulus appearance, GA) 단계로 구분할 수 있었으며, 신장의 구조적 완성시기는 대조구와 처리구 모두 부화 후 25∼30일로 나타났다. 하지만 원시 생식소와 신장 모두 대조구와 처리구에서 유의한 차를 보이지 않았다 (P>0.05). 그러므로, 넙치 자어기의 원시 생식소와 신장의 발달에 따른 PCBs(3.0 $\mu\textrm{g}$/L)의 영향은 없었다.
The primitive gonad development in Paralichthys olivaceus was classified into (ⅰ) primordial germ cell (PGC), (ⅱ) genital ridge type (GRT), (ⅲ) primitive gonad type I (PGT I) and (ⅳ) primitive gonad type II stages. In the control group, PGC was recognizable on the 3rd days after hatching, and the pr...
The primitive gonad development in Paralichthys olivaceus was classified into (ⅰ) primordial germ cell (PGC), (ⅱ) genital ridge type (GRT), (ⅲ) primitive gonad type I (PGT I) and (ⅳ) primitive gonad type II stages. In the control group, PGC was recognizable on the 3rd days after hatching, and the primodial gonad after 24th days, while it was around the 22nd day after hatching in the group exposed to PCBs 3.0 $\mu\textrm{g}$/L for 30 days. Likewise, the progress of kidney development was recognized in four stages; unitubular type of mesonephric duct (UTMD), the branched mesonephric duct (BMD), convoluted tubule formation (CTF) and glomerulus appearing (GA) stage. It was structurally completed between the 25th and 30th day after hatching in two groups. There was no significant difference (p>0.05) in the time scale of development of gonad, and kidney between control and the PCBs - exposed group.
The primitive gonad development in Paralichthys olivaceus was classified into (ⅰ) primordial germ cell (PGC), (ⅱ) genital ridge type (GRT), (ⅲ) primitive gonad type I (PGT I) and (ⅳ) primitive gonad type II stages. In the control group, PGC was recognizable on the 3rd days after hatching, and the primodial gonad after 24th days, while it was around the 22nd day after hatching in the group exposed to PCBs 3.0 $\mu\textrm{g}$/L for 30 days. Likewise, the progress of kidney development was recognized in four stages; unitubular type of mesonephric duct (UTMD), the branched mesonephric duct (BMD), convoluted tubule formation (CTF) and glomerulus appearing (GA) stage. It was structurally completed between the 25th and 30th day after hatching in two groups. There was no significant difference (p>0.05) in the time scale of development of gonad, and kidney between control and the PCBs - exposed group.
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문제 정의
본 연구는 오염 물질에 많이 노출된 내만과 연안지역에 서식하며 , 외부요인에 아주 민감한 시기의 넙礼 Paralichthys olivaceus 자어를 대상으로, 현재 배출수 허용농도인 3.0 卜埃/L 농도에서 원시 생식소와 신장 발달에 미치는 PCBs 영향을 조직학적으로 밝혀 생태계의 오염이 양식산 생물의 초기 기관 발달에 미치는 영향에 대한 기초자료를 제공하는데 그 목적이 있다.
양식산 넙치를 대상으로 아치사 만성농도의 PCBs가 자어기의 원시생식소와 신장의 발달에 미치는 영향을 살펴보았다. 원시생식소 발달 과정은 4단계 : 원시생식세포(primodial germ cell, PGC) 단계, 생식융기 (genital ridge type, GRT) 단계, 원시생식소 I형(primitive gonad type I, PGT I) 단계 및 원시생식소 II 형 (primitive gonad type Ⅱ, PGT II) 단계로 구분할 수 있었다.
제안 방법
먼저 원시생식세포 단계를 살펴보면, 부화 후 3일에서 8일된대조구 개체 (전장 3.1-4.2 mm)와 노출구 개체 (전장 3.0-4.4 mm) 에서 전기 자어의 중앙에 위치한 일자형의 장관과 척색사이의전장 1/2 지 점 체강 뒤쪽에서 시원생식세포군이 섬유성 간충직에 싸여 존재하였다(Fig. 1-A).
시험기간 중 각 시험구에서 매일 무작위 추출된 넙치 자어는 (N=120) 어체 전체를 Bouin's solution에 24시간 고정 후 수세와탈수과정을 거쳐 para伍n에 포매하고 4~6 呻 두께로 연속절편하였다. 제작된 조직표본은 Mayer's hematoxylin과 0.
실험은 순환식 방법에 의해 실시하였으며, 사육해수의 환수 시기는 3일마다 교환하였고 미공여과(0>=3 呻)시킨 자연 해수를 사용하였다. 사육환경으로서 광주기는 12시간 간격(light: 12 hour, dark: 12 hour)虎로 조절하였으며, 수온, 염분, pH 및 용존산소는 18.
제작된 조직표본은 Mayer's hematoxylin과 0.5% eosin(H- E>의 비교염색을 실시한 후 광학현미경 하에서 관찰하였다.
대상 데이터
시험구는 PCBs(Aroclor 1254, Dr. Ehrenstorfer GmbH, Germany) 를 aceton에 1:1로 녹인 후 증류수로 1 g/L의 표준용액을 만든다음, 현재 배출수 허용농도인 3.0(±0.1)Rg/L로 희석하였고 대조구는 PCBs를 첨가하지 않은 동등한 해수를 사용하였다.
데이터처리
대조구와 처리구의 각 단계별 평균 부화일수의 결과 처리는 SPSS 통계프로그램(SPSS Inc.)을 이용하여 ANOVA test를 실시한 후 다중비교는 최소 유의차 검정(Least - significance difference test)但로 유의성3<0.05)을 검정하였다.
성능/효과
조직상이 매우 다양한 것으로 알려져 있다. 그리고 구조 및 기능과 관련하여 담수의 사구체 신원, 담수의 무사구체 신원, 해산 사구체 신원과 해산 무사구체 신원의 네 가지 신원형태가 있는데(Hickman and Trump, 1969), 본 연구에서 넙치는부화 후 25일에서 30일된 대조구와 처리구 개체에서 사구체가관찰되는 것으로 보아 전형적인 해산 사구체 신원을 가지고 있는 것을 알 수 있었다. 신장에서의 주된 병변은 入구체와 신관에서 나타나는데 본 연구에서 다른 증상과 부화일수의 차이를볼 수 없었다.
본 연구에서 넙치는 중신관의 전단부가 편평상피로 구성되어 있는 단일관형 중신관을 부화 후 1일에서 4일 동안 대조구개체(2.2~3.5mm)와 처리구 개체(2.2~3.3mm)에서 관찰되었고, 부화 후 12일에서 18일된 대조구 개체 (5.0~7.2mm)와 부화 후 10일에서 16일된 처리구 개체(4.8~6.5mm)에서 신장의 후반부에 완전한 세뇨관의 형성을 보였다.
사구체 출현 단계는 부화 후 25일에서 30일된 대조구 개체 (전장 9.0-10.1 mm)와 처리구 개체(전장 9.4~10.9 mm)에서 사구체가 출현하였으며(Fig. 3-E), 성체와 거의 유사한 신장 형태가 관찰되었다(Fig. 3-F). 그런데 Fig.
세뇨관 형성 단계는 부화 후 12일에서 18일된 대조구 개체 (전장 5.0~7.2mm)와 부화 후 10일에서 16일된 처리구 개체(전장 4.8~6.5 mm)에서 중신의 후반부에 분절을 이루고 있는 세뇨관의 형성을 볼 수 있었으며 (Fig. 3-C), 방광까지 연결되는 것을 관찰할 수 있었다(Fig. 3-D).
원시생식소 발달 과정은 4단계 : 원시생식세포(primodial germ cell, PGC) 단계, 생식융기 (genital ridge type, GRT) 단계, 원시생식소 I형(primitive gonad type I, PGT I) 단계 및 원시생식소 II 형 (primitive gonad type Ⅱ, PGT II) 단계로 구분할 수 있었다. 시원생식세포는 부화 후 3일에 발견되었고, 원시 생식소는 대조 구에서 부화 후 24일에 나타나며 처리구에서는 부화 후 22 일에 나타났다. 신장 발달과정은 4단계; 단일관형 중신관 (unitubular type of mesonephric duct, UTMD) 단계 , 분지형 중신관(the branched mesonephric duct, BMD) 단계, 세뇨관 형성 (convoluted tubule formation CTF) 단계 및 사구체 출현 (glomerulus appearance, GA) 단계로 구분할 수 있었으며, 신장의 구조적 완성시기는 대조구와 처리구 모두 부화 후 25~30일로 나타났다.
시원생식세포는 부화 후 3일에 발견되었고, 원시 생식소는 대조 구에서 부화 후 24일에 나타나며 처리구에서는 부화 후 22 일에 나타났다. 신장 발달과정은 4단계; 단일관형 중신관 (unitubular type of mesonephric duct, UTMD) 단계 , 분지형 중신관(the branched mesonephric duct, BMD) 단계, 세뇨관 형성 (convoluted tubule formation CTF) 단계 및 사구체 출현 (glomerulus appearance, GA) 단계로 구분할 수 있었으며, 신장의 구조적 완성시기는 대조구와 처리구 모두 부화 후 25~30일로 나타났다. 하지만 원시 생식소와 신장 모두 대조구와 처리 구에서 유의한 차를 보이지 않았다 (尸>0.
원시생식소 II형 단계는 부화 후 24일에서 30일된 대조구 개체(전장 8.8-10.1 mm)와 부화 후 22일에서 30일된 처리구 개체(전장 8.9~10.9mm)에서 전 단계에 비해 초기생식소는 좀 더 비 후 되고, 초기생식소 내부에서는 활발한 분열증식상을 보이는시원생식세 포군과 체세포들이 관찰되었다 (Fig. 1-D). 그런데 Fig.
원시생식소 발달 과정은 4단계 : 원시생식세포(primodial germ cell, PGC) 단계, 생식융기 (genital ridge type, GRT) 단계, 원시생식소 I형(primitive gonad type I, PGT I) 단계 및 원시생식소 II 형 (primitive gonad type Ⅱ, PGT II) 단계로 구분할 수 있었다. 시원생식세포는 부화 후 3일에 발견되었고, 원시 생식소는 대조 구에서 부화 후 24일에 나타나며 처리구에서는 부화 후 22 일에 나타났다.
이상으로 원시생식소와 신장의 발달에 따른 조직형태와 부화일수에 따른 변화를 살펴본 결과 PCBs의 배출수 허용농도인 3.0 卜比兀에 영향이 없는 것으로 나타났다.
자어의 신장 발달 양상은 크게 4단계: 단일관형 중신관 (unitubular type of mesonephric duct, UTMD) 단계, 분지 형 중신관(the branched mesonephric duct, BMD) 단계, 세뇨관 형성 (convoluted tubule formation, CTF) 단계 및 사구체 줄현 (glomerulus appearance, GA) 단계로 구분할 수 있었다.
자어의 원시생식소 발달 양상은 4단계: 원시생식세포 (primordial germ cell, PGC) 단계, 생식융기 (genital ridge type, GRT) 단계, 원시생식소 I형 (primitive gonad type I, PGT I) 단계 및 원시생식소 II형 (primitive gonad type Ⅱ, PGT II) 단계로 구분할 수 있었다.
, 1997), p-nonylphenol에 송사리, Oryzias latipes 알을 수정에서부터 3개월간 노출시켜 수컷에서 testis-ova 형성을 관찰하였다(Gray and Metcalf, 1997). 하지만 본 연구에서 원시생식소 발달에 따른 조직형태학적 변화와 부화일수의 차이는 없는 것으로 나타났다.
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