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전기화학적 방법에 의한 HRP의 최적 pH 도출
Electrochemical Determination of the Optimum pH of HRP 원문보기

분석과학 = Analytical science & technology, v.16 no.6, 2003년, pp.504 - 508  

윤길중 (청주대학교 이공대학 응용과학부)

Abstract AI-Helper 아이콘AI-Helper

A carbon paste electrode was constructed with peroxidase extracted from Horseradish and the variation of the response of the sensor with pH was investigated. Current profiles showed two highest sensitivities at two pH values respectively. In addition, two bands were observed in the electrophoretic e...

주제어

AI 본문요약
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제안 방법

  • 산화-환원을 행하는 효소인 과산화수소 분해효소의 최적 pH를 전기화학적인 방법으로 도출하였다. 고추냉이로부터 추출된 과산화수소 분해효소가 혼입된 탄소 반죽 전극의 pH 의존성 신호전류는 두 pH 값에서 극대현상 올 보였다.
  • 위 실험적 사실은 배추 뿌리 조직이 과산화수소를 분해하는 두 동위효소를 함유하고 있음을 암시하였다. 우선 전기영동 전개에 의하여 두 화학종의 존재를 확인한 후, 배추와 동일 족 (famEly) 인 십자화과 (cruciferae) 의 고추냉이로부터 추출된 효소를 이용하여 탄소반죽전극을 제작하였다. 이로부터 pH 변화에 따른 감응전류곡선을 얻고, 이들을 두 동위효소의 기여, 즉 두 가우스함수의 합이라고 가정한 후, 각각을 분해하여 두 동위효소의 최적 pH를 도출하였다
  • 이런 실험적 사실에 근거하여 Fig. 3에 있는 각각의 곡선을 두 가우스 함수의 합으로 간주하고 프로그램 Origin 7.0을 이용하여 두 가우스 함수로 분해하였다. 모든 농도에 대한 결과를 여러가지 파라미터와 함께 Table 2에 요약하였다.
  • 우선 전기영동 전개에 의하여 두 화학종의 존재를 확인한 후, 배추와 동일 족 (famEly) 인 십자화과 (cruciferae) 의 고추냉이로부터 추출된 효소를 이용하여 탄소반죽전극을 제작하였다. 이로부터 pH 변화에 따른 감응전류곡선을 얻고, 이들을 두 동위효소의 기여, 즉 두 가우스함수의 합이라고 가정한 후, 각각을 분해하여 두 동위효소의 최적 pH를 도출하였다
  • 고추냉이로부터 추출된 과산화수소 분해효소가 혼입된 탄소 반죽 전극의 pH 의존성 신호전류는 두 pH 값에서 극대현상 올 보였다. 전기영동에 의하여 전개된 두 띠는 효소가 두 동위효소로 구성되었음을 확인시켜 주었으므로, pH 의존성 신호를 두 동위효소에 의한 기여의 합으로 가정한 후, 이들을 분해하여 각각의 최대 전류 신호를 나타내는 pH 값을 두 동위효소의 최적 pH로 규정하였다
  • 후자는 KIPP & ZONEN(BD111, Holand) X-t 기록기가 장착되었다. 전해질 용액의 pH 측정은 Digital pH/mV/Temp meter(Suntex SP-701, Taiwan) 를, 그리고 전기영동 전개는 Dual Gel Caster(Might Small II kit, SE 250, Hoefer Scientific Inc., U. S. A.)를 사용하여 이루어졌다. 흑연가루( : MO.

대상 데이터

  • CV와 전류 측정을 위하여 Ag/AgCl 기준전극 (BAS, MF2052) 과 Pt 보조전극 (BAS MW1032) 이 연결된 EPSILON (BAS Model EPSILON cyclic voltanunograph, Bioanalytical System, Inc., U. S. A.)과 EG&G Model 362(Princeton Applied Research, U. S. A.) 일정 전위기를 각각 사용하였다. 후자는 KIPP & ZONEN(BD111, Holand) X-t 기록기가 장착되었다.
  • lmm)와 미네랄오일은 각각 Fluka와 Sigma사 제품이었다. 기 질 (substrate, abbr. S)로 사용된 과산화수소는 Junsei사 (35%, EP)의 제품이었으며, 고추냉이 과산화수소 분해효소 (Horseradish peroxidase, abbr. HRP, E.C. 1.11.1.7)는 Sigma사 제품을 사용하였다. 전해질은 0.
  • )를 사용하여 이루어졌다. 흑연가루( : MO.lmm)와 미네랄오일은 각각 Fluka와 Sigma사 제품이었다. 기 질 (substrate, abbr.
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참고문헌 (12)

  1. J. R. Kirchner. 'Encyclopedia of Chemical Technology' Vol. 13, 12, Wiely-lmerscince, New York, U.S.A., 1981. 

  2. I. Sax, 'Hawley's, Condensed Chemical Dictionary', 618, Van Nostrand Reinhold ew York, U.S.A., 1987. 

  3. V. Rajendran, E. C oregi, Y. Okamoto and L. Gorton, Anal. Chirn. Acta, 373, 241-251 (1998). 

  4. E. Casero, M. Darder, F. Pariente and E. Lorenzo, AnaL Chirn. Acta, 403, 1-9(2002). 

  5. S. Gaspar, K. Habermuller, E. C oregi and W. Schumann, SeIlS. Actuators B, 72, 63-68(2001). 

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  8. K. J. Yoon, K. J. Kim and H. S. Kwon, J. Kor. Chern. Soc., 43(3), 271-279(1999). 

  9. K. J. Yoon, B. G. Lee and H. S. Kwon, Anal. Sci. Tech., 13(1), 41-48(2000). 

  10. B. G. Lee, K. J. Yoon and H. 5. Kwon, Anal. Sci. Tech., 13(3), 315-322(2000). 

  11. H. S. Kwon, I. K. Park, K. J. Yoon and M. L. Seo, J. Kor. Chem. Soc., 44(4), 376-379(2000). 

  12. H. S. Kwon, K. K. Kim and C. G. Lee, J. Kor. Chem. Soc., 40(4), 278-282(1996). 

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