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문제 정의
- 따라서 본 연구는 내만과 연안지역에 서식하는 저서종인 넙치, Paralichthys olivaceus 치어의 신장, 간 및 아가미를 대상으로 PCBs에 대한 병변현상을 검토하였다.
제안 방법
- 실험에 제공된 재료는 60일간 사육하면서 10일 간격으로 대조구와 노출구 각각 10마리 (N=120)를 무작위 추출하였다. 넙치 치어의 신장, 아가미 및 간을 해부하여 Bouin's solution에 일정시간 고정 후 수세와 탈수과정을 거쳐 paraffin에 포매 후 4-6/zm 두께로 연속절편하여 조직표본을 만들었다. 제작된 조직표본은 Mayer's hematoxylin과 0.
- 6mg/L로서 실험종료시까지 동일하게 유지하였다. 사료는 상업용 넙치 배합사료 (주:천흐제일, 한 국)를 하루에 두 번 어체중 (습중량)의 3%를 2회로 나누어 공급하였다.
- 실험은 PVC수조 (70X45X20 cm)를 사용하여 환수식 방법에 의해 실시하였고, 실험해수는 2일 마다 환수하였다. 사육수는 미공여과 (©=3如)시킨 자연해수를 사용하였고 광주기 는 12시간 간격 (light: 12 hour, dark: 12 hour)으로 조절하였으며, 이때, 수온, 염분, pH 및 용존산소는 18.0±0.3℃, 32.7±0. 4%, 8.
- 넙치 치어의 신장, 아가미 및 간을 해부하여 Bouin's solution에 일정시간 고정 후 수세와 탈수과정을 거쳐 paraffin에 포매 후 4-6/zm 두께로 연속절편하여 조직표본을 만들었다. 제작된 조직표본은 Mayer's hematoxylin과 0.5% eosin (H-E)의 비교염 색, Mallory 삼중염 색과 AB-PAS (alcian blue and periodic acid Schiff's solution, pH 2.5) 반응을 실시한 후 광학현미경으로 관찰하였다. 조직학적 변화양상의 기재는 조사된 개체 가운 데 50% 이상의 개체에서 나타나는 조직상을 기준으로 하였다.
대상 데이터
- 넙치 치어는 남해안 소재 육상수조식 양어장에서 300L의 순환여과식 수조에서 1주일 이상 순화시킨 후 외관상 질병 증세가 나타나지 않고, 먹 이붙임이 좋은 부화후 40일째의 넙치 (평균 전장 4.14 cm, 평균 전중은 1.02g) 를 선택하여 실험어로 사용하였다.
- 실험에 제공된 재료는 60일간 사육하면서 10일 간격으로 대조구와 노출구 각각 10마리 (N=120)를 무작위 추출하였다. 넙치 치어의 신장, 아가미 및 간을 해부하여 Bouin's solution에 일정시간 고정 후 수세와 탈수과정을 거쳐 paraffin에 포매 후 4-6/zm 두께로 연속절편하여 조직표본을 만들었다.
- 실험용액은 PCBs (Aroclor 1254, Dr. Ehrenstorfer GmbH, Germany)를 aceton에 1:1로 녹인 후 증류수로 1 g/L의 표준용 액을 만든 다음, 현재 배출수 허용농도인 3.0(±0.1) “g/L로 설정하였으며, 대조구는 PCBs를 첨가하지 않은 동등한 해수 를 사용하였다.
- 실험은 PVC수조 (70X45X20 cm)를 사용하여 환수식 방법에 의해 실시하였고, 실험해수는 2일 마다 환수하였다. 사육수는 미공여과 (©=3如)시킨 자연해수를 사용하였고 광주기 는 12시간 간격 (light: 12 hour, dark: 12 hour)으로 조절하였으며, 이때, 수온, 염분, pH 및 용존산소는 18.
- 5) 반응을 실시한 후 광학현미경으로 관찰하였다. 조직학적 변화양상의 기재는 조사된 개체 가운 데 50% 이상의 개체에서 나타나는 조직상을 기준으로 하였다.
성능/효과
- 며, 췌장조직이 산재해 있는 간췌장의 형태를 보였다. 간세포 는 둥근 다각형이고 Mallory 삼중염색에서 간세포는 푸른색 이 조금 나타나며, 다수의 간세포들을 가지는 간세포삭 (hepatic cord)의 구분이 가능하였다. 간조직의 여러부위에서 간정맥, 모세혈관, 담관과 췌장이 확인되었으며, 췌장은 해부 학적으로 독립된 기관이 아니라 간의 일부와 유문수를 덮고 있는 지방조직에 함몰되어 있었다 (Fig.
- 간세포 는 둥근 다각형이고 Mallory 삼중염색에서 간세포는 푸른색 이 조금 나타나며, 다수의 간세포들을 가지는 간세포삭 (hepatic cord)의 구분이 가능하였다. 간조직의 여러부위에서 간정맥, 모세혈관, 담관과 췌장이 확인되었으며, 췌장은 해부 학적으로 독립된 기관이 아니라 간의 일부와 유문수를 덮고 있는 지방조직에 함몰되어 있었다 (Fig. 3, A).
- 3-D). 그리고 노출 50일에 췌장 외분비선의 상피세 포들의 핵들이 응축되는 형태를 보이는 개체들이 증가 (40%) 하였으며, 간세포의 팽창도 일부 개체 (30%)에서 나타나기 시작하였다. 노출 60일경에 췌장 부분의 조직 변화와 간세포 의 팽창이 관찰되었다 (Fig.
- 노출 10일부터 60일된 개체들의 간췌장 조직은 모세 혈관내 혈구의 팽창과 담관 상피층의 자유면이 AB-PAS (pH 2.5) 반응에서 alcian blue에 양성을 보여 청색으로 나타났다. (Fig.
- 노출 10일부터 60일된 개체들의 신장에서 사구체 내 혈구세포 가 팽창하고 흑색 대식세포 (macrophage)들이 관찰되었으며 (Fig. 1-B), 근위세뇨관과 원위세뇨관을 구성하고 있는 내강상피 층의 자유면은 AB-PAS (pH 2.5) 반응에서 alcian blue에 강한 양성반응을 보였다 (Fig. 1-C). 노출 20일과 노출 30일도 노출 10일의 조직 변화와 별 차이가 없었지만, 노출 40일에 세뇨관 상피 세포들이 장막과 기저막으로 부터 분리된 조직상이 일부 개체들 (약 10%)에서 보이다가 (Fig.
- 노출 10일부터 60일된 개체들의 아가미 조직은 모세 혈관의 팽창이 나타나고, 염세포의 증가 및 활성화가 관찰되었다. 노출 20일에 새엽 상피세포의 팽창 현상이 일부 개체 (30%)에서 보이다가 노출 30일에 새 엽 상피세포의 팽창 현상이 나타났다.
- (2001)은 구리 에 노출된 간에서 간세포의 팽창, 담관 상피층의 alcian blue에서 양성반응 및 췌장 효소원 과립의 감소를 보고하였다. 본 연구 에서도 간세포의 공포화와 대식세포, 담관 상피층의 alcian blue에서 양성반응 및 췌장 효소원 과립의 감소를 관찰할 수 있었다.
- , 1983). 본 연구에서 노출 50일에 관찰된 상피세포의 괴사는 아치사농도에서 장기간 노출되면 치사농 도 수준과 같은 조직 병변현상을 보여준다는 것을 뜻하며, 노출 10일부터 50일에 관찰되는 새판융합 등의 방어기작의 한계를 넘어서면 자극원에 직접적인 영향을 받을 것으로 사료된다.
- , 1989), TBTO (bis(tri-n-butyltin) oxide)에 노출된 구피, Poecilia reticulata의、간질조직 에서 비 정 형 적 인 핵을 가지는 대형의 호산성 세포가 우점적으로 나타난다고 보고하였다 (Wester and Canton, 1987). 본 연구에서도 세뇨관 상피세포의 비대, 세뇨관 내부의 공포체와 괴사를 관찰할 수 있었으며, 사망한 개체들에서는 세뇨관 자체가 완전히 탈락하며 호산성 세포가 출현되는 것을 볼 수 있었다. 흑색 대식세포군의 출현 및 증가는 자체방어 기작이며, 세뇨관 내강상피의-alcian blue 양성 현상은 세포의 기능적인 이상으로 인한 세뇨관 재흡수 기능의 장애 일 거 라고 하였으며 (Lee et al.
- 이상의 결과에서 본 연구의 노출농도이자 한국의 PCBs 배출수 허용농도 3.0“g/L 농도는 넙치 치어 각 기관의 조직학 적 병변 현상을 일으키며, 이 병변 현상이 심각할 경우에는 생존에 영향을 미칠 것으로 생각된다.
- 2-0. 한편, 노출 50일된 사망한 일부 개체 (10%) 의 아가미 조직상은 새판의 융합 (Fig. 2-D)과 새판 상피층의 분리 및 새판의 괴사 현상이 관찰되어 아가미 고유의 기능이 상실되었다 (Fig. 2-E).
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