[논문]한라구절초 잎절편 배양에 의한 식물체 재분화

박영철; 김성용; 한태완

한라구절초 잎절편 배양에 의한 식물체 재분화
Plant Regeneration from Leaf Segment Culture of Chrysanthemum zawadskii ssp. coreanum 원문보기

박영철 (제주도농업기술원) , 김성용 (제주도농업기술원) , 한태완 (제주도환경산림과)

기내에서 삽목 배양중인 한라구절초[( Chrysanthemum zawadskii ssp. coreanum(Nakai) Y.N. Lee)]의 잎으로부터 효과적인 식물체 재생을 위한 NAA와 BA농도 및 배지고형물의 효과를 조사하였다. 0.2% Gelite를 고형물로 하였을 때 한라구절초의 잎 재분화에는 BA농도보다는 NAA 농도가 더 영향을 미쳤으며, NAA 농도가 1 mg/L 이상이면 모든 조직 에서 재분화를 보였다. 신초수는 NAA 단용 처리에서 많은 경향이었으며 NAA 1 mg/L 처리시가 가장 양호하였다. 배지고형물로 agar과 gelite를 가지고 재분화 효과를 조사한 결과, gelite 첨가시 잎절편 당 신초수가 많았으며 agar 첨가시에는 잎절편당 신초수가 적은 반면에 신초의 길이가 길게 나타났다. 한라구절초의 잎절편으로부터 재분화에는 MS에 3% sucrose, 0.8% agar와 NAA 1 mg/L를 첨가하여 25 $^{\circ}C$, 2,000 lux 정도에서 배양하는 것이 효과적이었다.

The effect of plant growth regulators and gelling agents for plant regeneration from leaf segment of Chrysanthemum zawadskii ssp. coreanum was investigated. NAA was more effective than BA for plant regeneration. MS medium supplemented with NAA 1 mg/L was the most effective in plant regeneration. The effect of agar and gelite as gelling agent was compared. Agar(0.8%) was more effective than gelite(0.2%) in plant regeneration. Regenerated shoots was successfully increased by shoot grafting in MS medium supplemented with NAA 0.1 mg/L in vitro, and hardened by shoot grafting in artificial soil mix(Peatmoss : Perlite = 1 : 1).

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문제 정의

본 연구는 한라산 특산식물인 한라구절초 잎절편에서 직접적인 재분화를 유도하여 형질전환 품종육성을 위한 기초자료로 활용하고자 실시하였다.

제안 방법

시료는 25 형 광등을 이용하여 2,000 lux, 광16/암8 시간조건에서 배양하였다. 또한 선발된 생장조절 물질을 고정 하여 0.2% gelite와 0.8% agar를 이용하여 잎의 재분화 효과를 조사하였다.
이용하였다. 잎의 재분화에 효과적인 식물생 장조절 물질을 조사하기 위하여 MS배 지 (Murashie와 Skoog, 1962)에 0.2% gelite와 3% sucrose 첨가하고, NAA(0, 0.5, 1, 1.5, 2, 4 mg/L)와 BA(0, 0.2, 0.4 mg/L)를 조합처 리하였다. 치상은 배양중인 한라구 절초의 잎을 엽 병 을 제거 하여 4개씩 3반복으로 치 상하였다.
4 mg/L)를 조합처 리하였다. 치상은 배양중인 한라구 절초의 잎을 엽 병 을 제거 하여 4개씩 3반복으로 치 상하였다. 시료는 25 형 광등을 이용하여 2,000 lux, 광16/암8 시간조건에서 배양하였다.

대상 데이터

치상은 배양중인 한라구 절초의 잎을 엽 병 을 제거 하여 4개씩 3반복으로 치 상하였다. 시료는 25 형 광등을 이용하여 2,000 lux, 광16/암8 시간조건에서 배양하였다. 또한 선발된 생장조절 물질을 고정 하여 0.
줄기 를 기 내삽목하여 증식 중인 식 물체의 잎을 시험재료로 이용하였다. 잎의 재분화에 효과적인 식물생 장조절 물질을 조사하기 위하여 MS배 지 (Murashie와 Skoog, 1962)에 0.

성능/효과

Agar와 gelite가 잎 재분화에 미치는 영향을 조사한 결과, agar를 첨가한 배지에서 뿌리형성율 및 재분화율이 높은 경향이 었으나 유의성 은 없었다. 그러나 줄기의 경우에는 gelite 첨가시 잎절편당 신초수가 다소 많았으며 agar 첨가시에는 잎절편당 신초수가 적은 반면에 신초의 길이가 길게 나타났다(Table 3).
밀접하게 관련이 있었다. NAA가 첨가되지 않은 처리구에서는 잎절편이 모두 고사하였으며 NAA1.0 mg/L 이상에서는 고사되는 현상을 거의 찾아 볼 가 이루어짐을 확인할 수 있었다(Fig. 1A). 뿌리의 발수 없었다(Table 1).
식물체 재생에 미치는 생장조절물질의 효과를 조사한 결과, 신초발생에는 Lee 등(1999)이 국화 잎 절편 재분화 시험 결과와 유사하게 BA보다는 NAA 농도와 밀접하게 관련이 있었다. NAA가 첨가되지 않은 처리구에서는 잎절편이 모두 고사하였으며 NAA1.
거의 형성되지 않아 직접적인 신초유기 초의 발생도 비슷한 경향을 나타냈다. 신초형성이뿌리형성 후 일정한 기간의 지나면 이루어지는 것으로 보아 NAA 0.5 mg/L + BA 0.4 mg/L 처리 구처 럼 뿌리와 신초의 발생율이 다른 것도 장기간에는 모두신초가 이루어질 것으로 판단되었다. 잎에서 발근은 배양후 7일 전후부터 이루어 졌으며 신초발생은 40 일경 에 이루어 졌다(Fig.
잎절편에서 재분화된 신초를 2~3 cm 정도로 잘라 3% sucrose, 0.8% agar, NAA 0.1 mg/L를 첨가한 MS 배지에 삽목하면 손쉽게 증식 이 가능하였으며 또한 배양된 식물체를 순화시킬 때에도 인공용토(피트모스 : 펄라이트 = 1:1)에 삽목하고 비 닐로 터널을 만들어 습도를 유지시켜주면 삽목율이 90% 정도로 잘 이루어 졌다(Fig. IB).
한라구절초의 잎절편으로부터 재분화에는 MS에 3% sucrose, 0.8% agar와 NAA 1 mg/L를 첨가하여 25 ℃, 2,000 lux 정도에서 배 양하는 것이 효과적 이 었다.

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