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문제 정의
- 이에 본 연구자들은 동물자원에 관심을 가지고 오소리에 관한 연구를 계획하였다. 따라서 여러 문헌적 내용을 바탕으로 과학적 근거를 확인하기 위해 본 연구에서는 오소리 기름과 오소리를 주원료로 발효한 발효액을 대상으로 하여 식재료나 또는 기능성 식품으로의 활용이 가능한지를 타진하여 보고자 하였다. 그 첫 단계로 이들의 영양성분을 분석하였고 세포실험을 통해 독성 여부를 확인하였으며 그 결과는 다음과 같다.
- 또한 최근의 흐름에 따라 기능성 소재에 대한 연구가 이루어지고 있으나 거의가 약용식물, 허브 및 한약재 등의 식물자원에 국한되어 있는 실정이다. 이에 본 연구자들은 동물자원에 관심을 가지고 오소리에 관한 연구를 계획하였다. 따라서 여러 문헌적 내용을 바탕으로 과학적 근거를 확인하기 위해 본 연구에서는 오소리 기름과 오소리를 주원료로 발효한 발효액을 대상으로 하여 식재료나 또는 기능성 식품으로의 활용이 가능한지를 타진하여 보고자 하였다.
- 이에 본 연구자들은 오소리의 효능을 기대하고 사용하는 방법 중에 오소리 기름과 발효액을 선택하여 그 영양성분을 분석하고 독성시험을 거쳐 오소리가 식용동물로서 안정성과 영양적 가치가 어느 정도인가를 확인하여 오소리 제재를 기능성 식품의 원료로 사용이 가능한가 여부를 살펴봄으로서 식용자원으로의 활용 가치를 판단하여 보고자 하였다.
제안 방법
- A)에 주입하여 함량을 분석하였다. 각 지방산 함량은 자동면적적분기에서 area%(percent of total fatty acid)로 구했으며 각 지방산의 동정은 동일한 조건 하에서 standard fatty acid ester 등 (Nu check Co. GLC 87A)에 대해 분석하여 얻은 retention time 과 비교하여 이루어졌다. 이때 분석조건은 Table 3 과 같다.
- 0085ul/200ul medium)를 처리하고 24시간 동안 배양하였다. 그런 다음 상등액을 제거하고 50ul의 MTT 용액(5mg/mC)에 넣고 4시간 후에 MTT 용액을 제거한 후 DMSO를 100ul 가하여 실온에서 5~10분 동안 shaking 시킨 후에 540nml에서 ELISA reader(Power Wave X, Bio-Tek Instruments. INC, U.S.A.)로 흡광도를측정하였다.
- 0085ul/200ul medium)를 처리하고 24시간 동안 배양하였다. 그런 다음 상등액을 제거하고 NR 용액 (4mg/iN) 200ul를 가하여 3시간동안 배양하였으며, NR 용액을 제거하고1% acetic acid, 50% ethanol을 200ul를 가하여 실온에서 5~10분 동안 shaking시킨 후에 540mml에서 ELISA reader(Power Wave X, Bio-Tek Instruments. INC,U.S.A.)로 흡광도를 측정하였다.
- 즉 수분함량은 105℃ 상압가열건조법,조단백질은 Semi-micro kjeldahl법 (Kjeltec 1030 Auto Analyzer, Tecator, Sweden), 조지방 함량은 Soxhlet 추출법(IS-3LGWB15, Ilsin, Korea), 식이섬유 함량은 HzSd-NaOH 분해 법 (Fiberatec system M 1020 Hot Extract, Tecxator, Sweden), 조회분은 직접회화법으로측정하였다. 당질은 총 100에서 수분, 조단백질, 조지방, 조회분 및 식이섬유소를 뺀 값으로 계산하여 구하였다.
- 6 xlO4 cell/well을 96 well plate에 분주하여 37℃, 5% CO2 incubator에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 상등액을 제거한 후에 준비된 발효액 시료 (5ul, 12.5ul, 25ul/200ul medium)와 에멀젼 시료 (DMSO에 1차 dilution시켜서 0.0017ul, 0.00425ul, 0.0085ul/200ul medium)를 처리하고 24시간 동안 배양하였다. 그런 다음 상등액을 제거하고 50ul의 MTT 용액(5mg/mC)에 넣고 4시간 후에 MTT 용액을 제거한 후 DMSO를 100ul 가하여 실온에서 5~10분 동안 shaking 시킨 후에 540nml에서 ELISA reader(Power Wave X, Bio-Tek Instruments.
- 6 xlO4 cell/well을 96 well plate에 분주하여 37℃, 5% CO2 incubator에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 상등액을 제거한 후에 준비된 발효액 시료 (5ul, 12.5ul, 25ul/200ul medium)와 에멀젼 시료 (DMSO에 1차 dilution시켜서 0.0017ul, 0.00425ul, 0.0085ul/200ul medium)를 처리하고 24시간 동안 배양하였다. 그런 다음 상등액을 제거하고 50ul의 MTT 용액(5mg/mC)에 넣고 4시간 후에 MTT 용액을 제거한 후 DMSO를 100ul 가하여 실온에서 5~10분 동안 shaking 시킨 후에 540nml에서 ELISA reader(Power Wave X, Bio-Tek Instruments.
- 오소리를 도축하여 털과 내장을 제거하면 약 15~ 20kg이 남게되는데 이를 분쇄하고 식품공전에서 사용이 허락된 한약재* 중 백하수오, 복령, 백출, 두충, 구기자, 오미자, 숙지황 및 황정을 각각 300g씩 넣고 센 불에서 2시간, 그 이후 약한 불에서 6시간, 총 8시간 가열하여 extract를 만들었다. 한편 쌀 80kg으로 고두밥을 만들어 식힌 후 누룩 40kg과 잘 섞어서 이를 항아리에 넣은 후 만들어 놓은 extract와 동량의 물을 가하여 잘 섞은 후 실온(18~23℃)에서 평균 40일간 발효시켰다.
- 45ul filter로여과한 후 시험용액으로 하였다. 정량은 아미노산 혼합 표준용액과 시험용액을 아미노산 분석기에 주입하여 chromatogram의 peak 면적으로 계산하였으며 아미노산 분석기 (Pharmacia Biotech, Cambridge, England) 의 측정조건은 Table 1과 같다.
대상 데이터
- 오소리는 평균 10~15%의 피하지방을 함유하고 있다고 알려져 있는데3 전북 완주군 고산면의 농장에서 사육된 암, 수 오소리를 도축하여 피하지방만을 분리한 후 pan에 올려놓고 열을 가하여 투명한 황색의 액상 지질을 얻어 여과 후 시료로 사용하였다.
- 한국 세포주 은행 (KCLB)에서 분양받은 liver cell (NCTC clone 1469) 과 kidney cell(VERO) 을 96 well plate에 3.23xlO5 cell/well, 4.6xl04 cell/well을 분주하고 37℃, 5% CO2 incubator에서 24시간 동안 배양하였다.배양 상등액을 제거한 후에 준비된 발효액 시료(5ul,12.
- 한국 세포주 은행 (KCLB)에서 분양받은 liver cell(NCTC clone 1469)과 kidney cell(VER。)을 3.23 xlO5 cell/well, 4.6 xlO4 cell/well을 96 well plate에 분주하여 37℃, 5% CO2 incubator에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 상등액을 제거한 후에 준비된 발효액 시료 (5ul, 12.
데이터처리
- 모든 분석은 각각 5회 실시하였고 분석수치는 평균 土S.D.으로 제시하였다.
이론/모형
- 무기 질 함량은 습식법8)으로 전처 리하여 AtomicAbsorption Spectrophotometer(Spectra AA 220 FS, Varian, Australia)를 이용하여 Table 2의 조건에 따라분석하였다
- 액상지질과 발효액에 대해 수분, 조단백질, 조지방, 조회분 및 식이섬유소 함량을 식품공전'의 방법에 의해 분석하였다. 즉 수분함량은 105℃ 상압가열건조법,조단백질은 Semi-micro kjeldahl법 (Kjeltec 1030 Auto Analyzer, Tecator, Sweden), 조지방 함량은 Soxhlet 추출법(IS-3LGWB15, Ilsin, Korea), 식이섬유 함량은 HzSd-NaOH 분해 법 (Fiberatec system M 1020 Hot Extract, Tecxator, Sweden), 조회분은 직접회화법으로측정하였다.
- 분석하였다. 즉 수분함량은 105℃ 상압가열건조법,조단백질은 Semi-micro kjeldahl법 (Kjeltec 1030 Auto Analyzer, Tecator, Sweden), 조지방 함량은 Soxhlet 추출법(IS-3LGWB15, Ilsin, Korea), 식이섬유 함량은 HzSd-NaOH 분해 법 (Fiberatec system M 1020 Hot Extract, Tecxator, Sweden), 조회분은 직접회화법으로측정하였다. 당질은 총 100에서 수분, 조단백질, 조지방, 조회분 및 식이섬유소를 뺀 값으로 계산하여 구하였다.
- 지 방산 조성 은 Folch's방법에 따라 추출한 후 Morrison들의 방법에 의해 BF3-methanol로 methylation 하여 Gas Chromatograhy (Hewlett Packand 6890,Denver, U.S.A)에 주입하여 함량을 분석하였다. 각 지방산 함량은 자동면적적분기에서 area%(percent of total fatty acid)로 구했으며 각 지방산의 동정은 동일한 조건 하에서 standard fatty acid ester 등 (Nu check Co.
성능/효과
- 1. 액상기름은 97.64%의 조지방, 1.99%의 조회분 및조단백 0.37%로 구성되어 있었고 발효액은 수분 96.08%, 당질 1.53%, 조회분 0.92%, 식이섬유소 0.65%, 조단백 0.54% 및 조지방 0.28%가 함유되어있었다.
- 2. 액상기름에서는 100g 중 아미노산이 총 2.67mg, 발효액에서는 100g 중 80.90mg함유되어 있었다.
- 3. 기름의 경우, 칼슘, 인, 칼륨, 나트륨, 마그네슘, 철분, 구리, 아연 및 망간 순으로 함량이 높았고 한약재를 첨가하여 발효한 액에는 칼륨, 칼슘, 인, 마그네슘, 나트륨, 구리, 망간, 철분 및 아연 순으로 높은 함량을 보였다.
- 4. 동물성 식품임에도 오소리 기름과 발효액 모두 불포화지방산 함량이 높은 것이 특징이었다.
- 5. 세포를 통해 독성여부를 판단한 결과 독성은 나타나지 않았다.
- 99% 함유되어 있었다. 97% 정도가 지질이지만 조단백과 조회분이 다른 동물성 기름보다 함유량이 높다는 점은 미력하지만 영양학적으로 판단할 때 식품으로서의 가치는 있다고 판단된다.
- 반면, 발효액에서는 산성아미노산 2종류, 염기성 아미노산 3종류 및 중성아미노산 11종류로 총 16종류가 함유되어 있었다. 가장 높은 함량을 보인 것은 arginine으로 25.05mg% 함유되어 있었고 그 다음easpartic acid 17.02mg%, proline 7.45mg%, alanine3.84mg% 순으로 그 함량이 높게 나타났다. 총 아미노산 중 필수아미노산의 함량은 17.
- 닭, 돼지 및 쇠기름, 생선 등의 동물성 기름과'2)오소리 기름의 일반성분을 비교해 보면, 수분, 당질 및 식이섬유소가 함유되어 있지 않은 점은 같았으나 조 단백 함량이 0.37%로 다른 동물성 기름의 함유량인 0.1 ~ 0.2%보다 많은 양이었고 다른 동물성 기름에는 함유되어 있지 않은 조회분도 1.99% 함유되어 있었다. 97% 정도가 지질이지만 조단백과 조회분이 다른 동물성 기름보다 함유량이 높다는 점은 미력하지만 영양학적으로 판단할 때 식품으로서의 가치는 있다고 판단된다.
- 같은 동물성인 오소리 기름의 무기질 함량은 이들 기름보다 높음을 알 수 있었다. 또한 오소리 발효액의 무기질 함량도 식품영양가표(2) 에 제시된 막걸리, 매실주, 보드카(40도) 및 소주의 함량보다 높은 것으로 나타났다.
- 20%) 함량이 가장 높았다. 발효액의 지방산 조성은 포화지방산 16.89%, 단일불포화지방산 16.89%, 다가불포화지방산 54.93%이 었으며 불포화지방산 중 w6계 지방산인 68:2(10.07%)의 구성비율이 가장 높았다. 또한 총 0)6 계 지방산과 총 w3계 지방산의 함유비율이 액상 기름에서는 2.
- 위 결과로 판단할 때 우리 나라에서도 식용으로 허가되어 근육부분 뿐 아니라 오소리를 이용한 식품의 제조 및 사용이 가능하게 되었다. 따라서 오소리의 액상 기름과 한약재를 첨가한 발효액의 영양구성으로 보아 식품 또는 조리시 사용이 가능한 식재료로 활용 가능성이 있다고 생각되며 또한 오소리의 보고된 효능과 영양성분을 관련지어 볼 때 지방산 조성은 기능성 식품으로의 활용에도 적합하리라 사료된다.
- 정상 간과 신장세포를 이용하여 농도별로 MTT, Neutral Red Assay를 실시했을 때 정상세포에는 아무런 negative effects가 없는 것으로 나타났다.
- 29mg %)이 함유되어 있었다. 한약재를 첨가하여 발효한 액에는 다량 무기질로는 칼륨(19.40mg%), 칼슘 (11.22mg%), 인 (8.40mg%), 마그네슘 (8.40mg%) 및 나트륨(6.91mg%) 순으로 그 함량이 높았으며 미 량원소는 구리 0.49mg%, 망간 0.38mg%, 철분 0.28mg% 및 아연이 0.20mg% 함유되어 있었다.
- 한편, 알코올 도수가 42도인 발효액의 영양성분을 막걸리, 매실주, 보드카(40도), 소주 등과 비교해 볼때12) 다른 주류에서는 함유되어 있지 않은 식이섬유소가 0.65%함유되어 있었고 조단백 함량이 0.54%로써 다른 주류들의 함량인 0.1~0.5%보다 높았고 지질함량이 0.28%로써 지질함량이 가장 높은 매실주의 0.2% 보다 다소 높았으며 조회분이 0.92%로써 다른 주류들 (0.1 ~0.2%)보다 함유량이 높음을 알 수 있었다. 발효액의 조회분 및 식이섬유소의 함량은 발효시 첨가한 여러 한약재의 영향도 있으리라 생각되나 발효액 자체를 최종 제조된 식품으로 이용할 것이므로 영양소의 근원이 어딘가에 대한 점은 중요하지 않을 것이다.
- 식물의 국제거래에 관한 협약(CITES, Convention on International Trade in Endangered Spices of Wild Fauna and Flora) 에 의하여" 국가 간거래가 금지된 웅담 등 한방약재로 이용하던 야생동물을 대체할 수 있는 동물자원의 활용이 가능하게 되었다. 효용가치가 높은 야생동물을 인공증식 함으로써 야생동물을 보호할 수 있는 기반마련과 인공증식 기술개발로 지속 가능한 이용이라는 두 가지 목적을 동시에 달성하고 UR 및 WTO체제하의 농산물수입개방 등에 대응할 수 있는 농산촌의 새로운 소득자원으로 활용할 수 있게 되었다. 또한 2003년 7 월 14일자 식품의약품안전청에서는 고시 제2003-33 호에서는 오소리를 동물성 식품원료로 지정함으로써 기우리 나라에서도 제약없이 사용이 가능하게 되었다.
후속연구
- 동물성 식품이면서 (D 3계 지방산 및 불포화지방산 함량이 높다고 보고된 황소개구리 연구에서와 같이 본 연구 결과에서도 오소리 기름과 발효액의 불포화지방산 함량이 높다는 점은 오소리의 영양적 가치를 높일 수 있고 또한 이점은 기능성 원료로서 사용 가능한 요건이 될 수 있으리라 생각된다. 따라서 심장 혈관질환 예방, 면역성 증진⑹과 악성종양의 증식을 방지해 주는 것으로알려진 w6계 및 w3계 지방산을 이용한 기능식품으로의 활용방안 모색도 좋은 연구가 되리라 사료된다.
- 및 사용이 가능하게 되었다. 따라서 오소리의 액상 기름과 한약재를 첨가한 발효액의 영양구성으로 보아 식품 또는 조리시 사용이 가능한 식재료로 활용 가능성이 있다고 생각되며 또한 오소리의 보고된 효능과 영양성분을 관련지어 볼 때 지방산 조성은 기능성 식품으로의 활용에도 적합하리라 사료된다.
- 오소리 기름과 한익자]를 첨가한 발효액은 prostaglandin 생성 cascade에 관여하는 지방산인 linoleic acid, linolenic acid, arachidonic acid 및 EPA의 함량이 생체내에서 w6계 지방산에서 유도된 것과 0)3계 지방산에서 유도된 것들간의 적합한 비율을 형성하는데 유용한 비율이라 판단되며 앞으로 prostaglandin 생성 cascade에서의 각 단계별 중간산물의 함량을 조사해보면 명확히 알 수 있을 것이다. 동물성 식품이면서 (D 3계 지방산 및 불포화지방산 함량이 높다고 보고된 황소개구리 연구에서와 같이 본 연구 결과에서도 오소리 기름과 발효액의 불포화지방산 함량이 높다는 점은 오소리의 영양적 가치를 높일 수 있고 또한 이점은 기능성 원료로서 사용 가능한 요건이 될 수 있으리라 생각된다.
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