선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 본 연구에서는 [3-2', 6:2, 6'-difructose dianhydride(DFA)IV의 안전성 평가의 일환으로 단회 투여시와 반복투여 시 나타날 수 있는 독성을 평가하고자 DFA IV의 SD 계통암수 랫드에 대한 단회 및 4주 반복투여 경구 독성 시험을 의약품 등의 독성시험기준(식품의약품 안전청고시, 제 1999-61호)에 준하여 수행하였다.
- 본 연구에서는 리얼바이오텍(주)에서 개발한 DFA Ⅳ.의 임상 적용을 위한 비임상 안전성 평가의 일환으로 경구투여에 의한 단회투여시 독성유무의 확인 및 반복투여 시의 독성을 조사하기 위하여 랫드를 이용하여 단회 및 4주간 반복 경구독성 시 험을 실시하였다.
제안 방법
- 실시한 후, 복대동맥을 절단하여 방혈 . 치사 시켜육안적으로 외부소견, 피호!", 복강장기, 흉강장기 및 뇌에 대하여 검사하였다. 또한, 노], 흉선, 폐, 심장, 간장, 비장, 신장, 부신, 정소, 정소상체, 난소 및 자궁의 장기에 대하여 절대장기 중량을 전자저울(AND, GR-200)을 이용하여측정하였고, 부검전 절식된 체중에 대한 상대장기 중량을 산출하였다.
- HGB), 헤마토크리트(hematocrit; Het), 평균적 혈구 용적(mean corpuscular volume; MCV), 평균적 혈구 혈색소량(mean corpuscular hemoglobin; MCH), 적혈구 평균 혈색소 농도 (mean corpuscular hemoglobin cone.; MCHC), 혈소판수(platelet count; Pit}를 측정하였으며, differential leucocyte count는 혈액도말표본을 육안적으로 검경하여 검사하였다. 또한 부검일에 혈액응고시간검사를 위해 항 응고제로 3.
- SD(Sprague Dawley) 계통의 특정병원균 부재 암수컷랫드 각각 5주령 50마리를 (주)대한바이오링크에서 입수하여 공급처에서 제공한 시험계의 병원체 검사 성적서를 참고로 하여 입수동물의 검수검역을 실시하였다. 동물 입수 후 7일간 시험을 실시하는 동물실내에서 순화시켰다.
- 9 ml을 취하여 잘 섞은 후 3000 rpm에서 10분간 원심분리 하여 얻어진 혈장을 이용하여 측정하였다. 혈장은 분리한 후 -70℃ deepfreezer(8417S/N85075-2084, Forma Scientific)0!] 6 또는 7일간 보관 하였다가 37℃ 수조에서 녹인 후 혈액응고시간 검사장치 (CA-50, Sysmex, 일본)를 사용하여 PT (prothrombin time)를 측정하였다.
- 뇨검사: 뇨 검사용 시험지(Bayer)와 요자동분석장치 (Uriscan optima plus, 영동제약)를 이용하여 요비중, pH, 요단백(protein), 케톤체(ketone body), 잠혈(occult blood), 요당(glucose), 빌리루빈(bilirubin), 아질산염 (nitrite)및 유로빌리노겐(urobilinogen)에 관하여 검사하였다. 요침사검사는 적혈구, 백혈구, 상피세포 및 원주를 관찰하였다.
- 단회투여 독성시험에 있어서 최고용량은 예비급성독성시험결과를 토대로 5000 ㎎/㎏으로 설정하고 공비 2.5 를 두어 그 아래로 1개의 용량군를 추가하였다. DFA Ⅳ.
- 따라서 본 4주간 반복투여 독성시험에서는 2000 ㎎/㎏을 최고용량으로 설정하였고, 공비 2를 두어 아래로 2개의 군을 추가하였다. 대조군으로는 매체인 멸균증류수를 투여하는 매체대조군을 설정하였다. 동물들은 군별 10마리씩 균등하게 분배되도록 순위화 한 체중을 이용하여 무작위 법으로 분배하였다.
- 일반적인 독성시험 가이드라인에서는 2000 ㎎/㎏을 반복투여시험에서의 한계용량으로 정하고 있다. 따라서 본 4주간 반복투여 독성시험에서는 2000 ㎎/㎏을 최고용량으로 설정하였고, 공비 2를 두어 아래로 2개의 군을 추가하였다. 대조군으로는 매체인 멸균증류수를 투여하는 매체대조군을 설정하였다.
- 본 시험의 용량은 앞서 실시한 예비 급성독성 시험 결과 최고용량 5000 ㎎/㎏까지 독성학적인 변화를 야기 시키지 않았다. 따라서 본 단회투여 독성시험에서는 5000 ㎎/㎏를 고용량군으로 하고, 공비 2.5를 두어 2000 ㎎/㎏를 저용량군으로 설정하였다. 용매대조군에는 생리식 염수만을 투여하였다.
- ; MCHC), 혈소판수(platelet count; Pit}를 측정하였으며, differential leucocyte count는 혈액도말표본을 육안적으로 검경하여 검사하였다. 또한 부검일에 혈액응고시간검사를 위해 항 응고제로 3.2% sodium citrate 용액이 0.1 ml 들어있는 시험관에 혈액 0.9 ml을 취하여 잘 섞은 후 3000 rpm에서 10분간 원심분리 하여 얻어진 혈장을 이용하여 측정하였다. 혈장은 분리한 후 -70℃ deepfreezer(8417S/N85075-2084, Forma Scientific)0!] 6 또는 7일간 보관 하였다가 37℃ 수조에서 녹인 후 혈액응고시간 검사장치 (CA-50, Sysmex, 일본)를 사용하여 PT (prothrombin time)를 측정하였다.
- 치사 시켜육안적으로 외부소견, 피호!", 복강장기, 흉강장기 및 뇌에 대하여 검사하였다. 또한, 노], 흉선, 폐, 심장, 간장, 비장, 신장, 부신, 정소, 정소상체, 난소 및 자궁의 장기에 대하여 절대장기 중량을 전자저울(AND, GR-200)을 이용하여측정하였고, 부검전 절식된 체중에 대한 상대장기 중량을 산출하였다.
- 수 모두에서 처치군 및 대조군에서 공히 매우 미약하게 관찰되었다. 방광에서 호산성 물질(eosinophilic material), 갑상선의 ultimobranchial cyst, 안구의 안검염 (inflammation/eyelid)이 수컷 고농도군 2례, 암컷 대조군 및 고농도군에서 각각 1례 씩 관찰되었다. 심장의 염증(inflammation) 소견이 수컷의 고농도군 1례에서 관찰되었다(Table 8).
- 병리조직학적인 검사: 투여한 모든 동물의 육안적 병변, 피부(유선포함), 저정낭, 전립선, 방광, 고환, 부고환, 난소, 자궁, 질, 비장, 췌장, 장간막림프절, 위, 십이지장, 공장, 회장, 맹장, 결장, 직장, 신장, 부신, 간장, 타액선, 악하림프절, 갑상선(부갑상선 포함), 대동맥, 흉선, 심장, 폐장, 기관, 식도, 좌골신경, 골격근, 흉골, 혀, 흉척수, 안구, 하더리안선, 뇌 및 뇌하수체중 안구는 제외하고 10% 중성포르말린 용액에 고정하였으며, 안구는 Davidson 용액에 고정하였다. 이렇게 고정된 장기를 이용하여 매체 대조군과 최고용량군에서 아래의 모든 장기를 파라핀 포매하고, 5로 박절하여 H&E 염색 표본을 만들어 검경하였다.
- 부검: 투여 후 14일째에 모든 생존동물을 CO2 가스를 이용하여 마취한 후 개복 하여 복대동정맥 절단으로 방 혈 치사 시킨 후 육안적으로 모든 내부 장기를 관찰하였다.
- 사료 및 물 섭취량 측정: 시험기간 중에 주 1회 사료 및 물 섭취량을 측정하였다. 측정방법은 체중측정 일에 사료 및 물의 정량을 급여한 후 익일에 잔량을 측정하여 마리 당 평균 섭취량(g/rat/day)으로 산출하였다.
- . 수 랫드에 공히 매체 대조군과 시험물질을 각각 2000, 1000 및 500 ㎎/㎏의 용량으로 주 7회, 4주간 총 28회반복 경구투여 임상증상, 체중변화, 사료섭취량, 음수 소비량, 안검사, 뇨검사, 혈액학적검사., 혈액생화학적검사, 부검 및 장기중량 측정, 병리조직학적검사 등을 수행한 결과, 시험종료시 까지 암 .
- 시험물질을 측량하여 용매인 멸균증류수에 용해하여 최고용량군의 시험물질 투여액을 조제하고, 이를 단계별로 희석하여 저용량군들의 투여액을 조제하였다. 조제는 매일 투여직전에 실시하였다.
- 실험은 온도 23 ± 3℃, 상대습도 50 ± 15%, 환기횟수 10-203]/hr, 조명시간 12시간(오전 8시~ 오후 8시 ) 및 조도 150-300 Lux로 설정된 한국생명공학연구원 유전자원동 실험동물실에서 수행되었다 . 시험자들은 모두 고압증기멸균(121℃, 20분)된 작업복과 보호장구를 착용하고 작업을 실시하였다. 동물은 폴리카보네이트제 사육상자(260W X 410L X 200H mm)에 순화기간 및 검역기간 중에는 각각 5마리 이하/사육상자로 사육하였고, 투여기간 중에는 2마리 이하/사육상자로 사육하였다.
- 안과학적 검사: 군 분리 전 순화기간 중에 모든 동물에 대하여 눈의 외관을 관찰하였다. 투여 후에는 투여 최종 주에 모든 동물의 눈의 외관을 육안적으로 관찰하였다.
- 특히 대조군과 최고용량군의 경우 안저 카메라(Genesis, Kowa, 일본)를 이용하여 눈의 안저를 검사하였다. 안저검사는 산동제(OcuHomapine, 삼일제약 주식회사)를 이용하여 동공을 확장 시킨 후 검사하였다.
- 요당(glucose), 빌리루빈(bilirubin), 아질산염 (nitrite)및 유로빌리노겐(urobilinogen)에 관하여 검사하였다. 요침사검사는 적혈구, 백혈구, 상피세포 및 원주를 관찰하였다. 채뇨는 대사케이지를 이용하여 실시하였고 정성분석, 요색조검사 및 요침사 검사를 위해서 3~4시간 동안 채뇨 된 신선뇨를 사용하였고, 뇨량은 24시간 동안의 축뇨를이용하여 측정하였다.
- 5를 두어 2000 ㎎/㎏를 저용량군으로 설정하였다. 용매대조군에는 생리식 염수만을 투여하였다. 시험군의 구성은 선발된 암수 각각 20마리의 동물을 군간 체중이 고르게 2개의 용량군과 1개의 대조군으로 하여 군당 암수 각각 5마리씩 배치하였다.
- Ⅳ.의 임상 적용을 위한 비임상 안전성 평가의 일환으로 경구투여에 의한 단회투여시 독성유무의 확인 및 반복투여 시의 독성을 조사하기 위하여 랫드를 이용하여 단회 및 4주간 반복 경구독성 시 험을 실시하였다.
- 고정하였다. 이렇게 고정된 장기를 이용하여 매체 대조군과 최고용량군에서 아래의 모든 장기를 파라핀 포매하고, 5로 박절하여 H&E 염색 표본을 만들어 검경하였다.
- )에 넣고 15~20분 동안 상온에 방치하여 응고시켰다. 이후 3, 000 rpm으로 10분간 원심분리 하여 획득한 혈청으로 자동분석장치 (AU400,Olympus, 일본)를 이용하여 aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase(ALT), alkaline phos-phatase(ALP), blood urea nitrogen(BUN), creatinine (CREA), glucose(GLU), total cholesterol(TCHO), total protein(TP), creatine phosphokinase(CPK), albumin (ALB), total bilirubin(TBIL), triglyceride(TG), calcium (Ca), inorgamic phosphorus(IP)을 측정하였고, 전해질 자동분석 장치(644 Na, K, Cl Analyzer, Ciba-Corning, USA)를 이용하여 염소(chloride; Cl), 나트륨(sodium; Na), 칼륨(potassium; K)을 측정하였다.
- 일반증상 및 폐사의 관찰: 시험기간 중 모든 동물에 대하여 매일 1회 이상 일반상태, 중독증상 및 사망의 유무를 관찰하였고, 이상이 있었던 경우 증상의 종류, 발견일 및 증상의 정도를 개별적으로 기록하였다.
- 일반증상 및 폐사의 관찰: 투여 당일은 최종 투여 후 1시간에서 6시간까지는 매시간 마다, 투여 익일부터 14일까지는 매일 1회 일반증상의 변화, 독성증상 및 사망 동물의 유무를 관찰하였다.
- 요침사검사는 적혈구, 백혈구, 상피세포 및 원주를 관찰하였다. 채뇨는 대사케이지를 이용하여 실시하였고 정성분석, 요색조검사 및 요침사 검사를 위해서 3~4시간 동안 채뇨 된 신선뇨를 사용하였고, 뇨량은 24시간 동안의 축뇨를이용하여 측정하였다.
- 체중변호k 모든 동물에 대하여 투여개시시 및 시험 기간 중 주 1회와 부검일에 체중을 측정하였다.
- 체중변화: 시험에 사용된 모든 동물에 대하여 투여개시 전과 투여 후 L 3, 7 및 14일에 체중을 측정하였다.
- 물 섭취량을 측정하였다. 측정방법은 체중측정 일에 사료 및 물의 정량을 급여한 후 익일에 잔량을 측정하여 마리 당 평균 섭취량(g/rat/day)으로 산출하였다.
- 조제는 매일 투여직전에 실시하였다. 투여 방법은 동물을 경배부피부 고정법으로 고정하고 금속제 경구 투여용 존대를 이용하여 위내에 직접 주입하였다. 조제된 시험물질은 투여개시 직전에 tube mixer를 이용하여 잘 현탁 시킨 후에 투여하였다.
- 대하여 눈의 외관을 관찰하였다. 투여 후에는 투여 최종 주에 모든 동물의 눈의 외관을 육안적으로 관찰하였다. 특히 대조군과 최고용량군의 경우 안저 카메라(Genesis, Kowa, 일본)를 이용하여 눈의 안저를 검사하였다.
- 투여횟수 및 기간은 단회투여 독성시험에서는 시험물질을 시험개시시 1회 투여하였고, 4주 반복투여 독성시험에서는 1회/일, 7일/주로 하여 4 주간 투여하였다. 투여액량은 투여 직전의 체중을 측정하고 이를 기준으로 투여 액량을 계산하였으며, 10 ml/kg으로 산출하였다.
- 조제된 시험물질은 투여개시 직전에 tube mixer를 이용하여 잘 현탁 시킨 후에 투여하였다. 투여횟수 및 기간은 단회투여 독성시험에서는 시험물질을 시험개시시 1회 투여하였고, 4주 반복투여 독성시험에서는 1회/일, 7일/주로 하여 4 주간 투여하였다. 투여액량은 투여 직전의 체중을 측정하고 이를 기준으로 투여 액량을 계산하였으며, 10 ml/kg으로 산출하였다.
- 투여 후에는 투여 최종 주에 모든 동물의 눈의 외관을 육안적으로 관찰하였다. 특히 대조군과 최고용량군의 경우 안저 카메라(Genesis, Kowa, 일본)를 이용하여 눈의 안저를 검사하였다. 안저검사는 산동제(OcuHomapine, 삼일제약 주식회사)를 이용하여 동공을 확장 시킨 후 검사하였다.
- 혈액생화학적 검사: 부검시에 모든 시험동물들에 대하여 혈액학적검사와 같은 방법으로 후대정맥에서 채혈한혈액을 혈청분리관(Estar vac.)에 넣고 15~20분 동안 상온에 방치하여 응고시켰다. 이후 3, 000 rpm으로 10분간 원심분리 하여 획득한 혈청으로 자동분석장치 (AU400,Olympus, 일본)를 이용하여 aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase(ALT), alkaline phos-phatase(ALP), blood urea nitrogen(BUN), creatinine (CREA), glucose(GLU), total cholesterol(TCHO), total protein(TP), creatine phosphokinase(CPK), albumin (ALB), total bilirubin(TBIL), triglyceride(TG), calcium (Ca), inorgamic phosphorus(IP)을 측정하였고, 전해질 자동분석 장치(644 Na, K, Cl Analyzer, Ciba-Corning, USA)를 이용하여 염소(chloride; Cl), 나트륨(sodium; Na), 칼륨(potassium; K)을 측정하였다.
대상 데이터
- 시험자들은 모두 고압증기멸균(121℃, 20분)된 작업복과 보호장구를 착용하고 작업을 실시하였다. 동물은 폴리카보네이트제 사육상자(260W X 410L X 200H mm)에 순화기간 및 검역기간 중에는 각각 5마리 이하/사육상자로 사육하였고, 투여기간 중에는 2마리 이하/사육상자로 사육하였다. 사육 상자는 시험번호 및 동물번호를 기입한 라벨 지를 부착하여 식별하였다.
- 사육 상자는 시험번호 및 동물번호를 기입한 라벨 지를 부착하여 식별하였다. 사료는 (주)대한바이오링크로부터 공급받은 방사선조사로 멸균된 실험동물용 고형사료(PicoLab Co. Ltd, USA)를 자유섭취 시켰다. 물은 수도물을 고압증기 멸균한 후 물병을 이용하여 자유섭취 시켰다.
- 동물 입수 후 7일간 시험을 실시하는 동물실내에서 순화시켰다. 순화기간 중 일반증상을 관찰하여 건강한 동물 40마리를 시험에 사용하였다. 실험은 온도 23 ± 3℃, 상대습도 50 ± 15%, 환기횟수 10-203]/hr, 조명시간 12시간(오전 8시~ 오후 8시 ) 및 조도 150-300 Lux로 설정된 한국생명공학연구원 유전자원동 실험동물실에서 수행되었다 .
- 용매대조군에는 생리식 염수만을 투여하였다. 시험군의 구성은 선발된 암수 각각 20마리의 동물을 군간 체중이 고르게 2개의 용량군과 1개의 대조군으로 하여 군당 암수 각각 5마리씩 배치하였다. 평균체중은 수컷은 192.
- 시험물질로 사용한 DFA IV의 성상은 백색의 단맛을 가진 결정성 분말이며, 순도 98% 이상의 것으로 멸균증류수(중외제약 주식회사)로 용해하여 사용하였다.
- 순화기간 중 일반증상을 관찰하여 건강한 동물 40마리를 시험에 사용하였다. 실험은 온도 23 ± 3℃, 상대습도 50 ± 15%, 환기횟수 10-203]/hr, 조명시간 12시간(오전 8시~ 오후 8시 ) 및 조도 150-300 Lux로 설정된 한국생명공학연구원 유전자원동 실험동물실에서 수행되었다 . 시험자들은 모두 고압증기멸균(121℃, 20분)된 작업복과 보호장구를 착용하고 작업을 실시하였다.
데이터처리
- 연속인 자료의 분석항목은 체중, 사료섭취량, 물섭취량, 혈액학적 검사, 혈액응고시간, 혈액생화학적 검사 및 장기중량이며, 통계분석 1 단계는 정규성검정인 Kolmogorov-Smirnov 검정을 실시하였고, 정규성을 만족하지 않는 경우에는 비모수적인 검정방법을 사용하였다. 2단계는 정규성을 만족하는 경우에 등분산성을 검정하는 Bartlett 검정을 실시하였으며, 마지막 3단계로는 모수적인 다중비교(Dunnette's test) 혹은 비모수적인 다중비교를 실시하였다. 비연속인 자료의 분석항목은 요분석이며, 통계분석 방법으로는 1단계는 척도변환을 통하여 데이터를 재입력하였고, 2단계로 비모수적인 다중비교(Kruskal-Wallis test)를 실시하였다.
- 단회투여 독성시험에서는 측정항목중 체중결과에 대해서 대조군과 시험군간의 유의성 검증을 위해 t-test 검정법을 사용하였으며, 4주 반복투여 독성시험에서 얻어진 자료에 대한 매체대조군과 시험물질 투여군간의 비교는일반적으로 모수적인 다중비교(parametric multiple comparison procedures) 혹은 비모수적인 다중비교(non parametric multiple comparison procedures}를 사용하였다. 이러한 모든 통계학적인 분석은 상용으로 널리 사용되고 있는 통계 패키지인 SPSS10K를 이용하였다.
- 2단계는 정규성을 만족하는 경우에 등분산성을 검정하는 Bartlett 검정을 실시하였으며, 마지막 3단계로는 모수적인 다중비교(Dunnette's test) 혹은 비모수적인 다중비교를 실시하였다. 비연속인 자료의 분석항목은 요분석이며, 통계분석 방법으로는 1단계는 척도변환을 통하여 데이터를 재입력하였고, 2단계로 비모수적인 다중비교(Kruskal-Wallis test)를 실시하였다.
- 이러한 모든 통계학적인 분석은 상용으로 널리 사용되고 있는 통계 패키지인 SPSS10K를 이용하였다. 연속인 자료의 분석항목은 체중, 사료섭취량, 물섭취량, 혈액학적 검사, 혈액응고시간, 혈액생화학적 검사 및 장기중량이며, 통계분석 1 단계는 정규성검정인 Kolmogorov-Smirnov 검정을 실시하였고, 정규성을 만족하지 않는 경우에는 비모수적인 검정방법을 사용하였다. 2단계는 정규성을 만족하는 경우에 등분산성을 검정하는 Bartlett 검정을 실시하였으며, 마지막 3단계로는 모수적인 다중비교(Dunnette's test) 혹은 비모수적인 다중비교를 실시하였다.
이론/모형
- multiple comparison procedures}를 사용하였다. 이러한 모든 통계학적인 분석은 상용으로 널리 사용되고 있는 통계 패키지인 SPSS10K를 이용하였다. 연속인 자료의 분석항목은 체중, 사료섭취량, 물섭취량, 혈액학적 검사, 혈액응고시간, 혈액생화학적 검사 및 장기중량이며, 통계분석 1 단계는 정규성검정인 Kolmogorov-Smirnov 검정을 실시하였고, 정규성을 만족하지 않는 경우에는 비모수적인 검정방법을 사용하였다.
성능/효과
- 수 랫드에 공히 매체 대조군과 시험물질을 각각 2000, 1000 및 500 ㎎/㎏의 용량으로 주 7회, 4주간 총 28회반복 경구투여 임상증상, 체중변화, 사료섭취량, 음수 소비량, 안검사, 뇨검사, 혈액학적검사., 혈액생화학적검사, 부검 및 장기중량 측정, 병리조직학적검사 등을 수행한 결과, 시험종료시 까지 암 . 수 모두 시험물질에 기인한 사망 동물은 없었으며, 음수 및 사료섭취량에서 산발적으로 관찰된 통계학적으로 유의한 섭취량의 저하는 일시적이거나 용량상관성이 없는 변화로서 시험물질의 투여에 의한 변화로는 인정되지 않았다.
- 이외에 안구의 안검염이 수컷 고농도군 2례, 암컷 대조군 및 고농도군에서 각각 1례 씩 관찰되었으나, 이 병변도 국소적으로 severity가 매우 경미하고, 대조군에서도 관찰된 변화로서 시험물질과는 무관하다. 결론적으로 본 시험에서 시험물질과 관련된 병리조직학적 변화는 관찰되지 않았다.
- 단, 수컷 2000 mg/ kg 투여군에서의 뇨비중의 증가와 수컷 전투여군에서혈청 creatine phophokinase의 증가가 통계적으로 유의하게 관찰되었으나 병리조직학적 변화 및 관련된 타 증상을 동반하지 않아 독성학적으로 의미있는 변화로 판단되지 않았다. 따라서 DFA IV의 랫드에서의 무해용량은(NOAEL)은 체중 kg당 2000 mg 이상일 것으로 판단된다.
- DFA Ⅳ.를 매일 1회 경구 투여하여 14일간 관찰한 결과, 모든 투여 용량군에서 사망예는 전혀 관찰되지 않아 개략의 치사량의 산출은 불가능 하였고, 일반적인 임상증상에서도 아무런 이상이 발견되지 않았으며 , 대조군과 비교하여 체중 변화나 모든 생존동물의 부검소견에서도 이상이 관찰되지 않았다.
- 이는 Sprague-Dawley 랫드에서 흔히 관찰되는 자연발생적 병변으로서 암컷보다 수컷에서 흔히 관찰되며, 신세뇨관에 단백질 원주, 신세뇨관의 확장 및 상피의 재생소견, 사구체 기저막의 비후, 혈철소 또는 lipochrome 색소 침착, 광물질 침착 등을 특징으로 한다. 본 시험에서 관찰된 병변은 severity가 매우 경미하고 대조군에서도 투여군과 같은 빈도로 발생하여 약물에 의한 변화가 아닌 자연적으로 흔히 발생하는 소견으로 판단하였다. 방광의 내강에서는 호산성 물질(eosinophilic material)이 관찰되었는데 이는 부속 생식선의 분비물(coagulated seminal fluid)로서 독성병변과는 무관하다.
- 단회투여 독성시험. 본 시험의 용량은 앞서 실시한 예비 급성독성 시험 결과 최고용량 5000 ㎎/㎏까지 독성학적인 변화를 야기 시키지 않았다. 따라서 본 단회투여 독성시험에서는 5000 ㎎/㎏를 고용량군으로 하고, 공비 2.
- 수에 있어서 단회경구투여시 시험물질과 연관된 특기할만한 임상증상이 관찰되지 않았고,LD50치는 암 . 수 모두 5000 ㎎/㎏ 이상일 것으로 판단되었으며, 또한 4주간 반복 경구투여 시험결과, 2000 ㎎/㎏의 용량으로 4주 연속 경구 투여시에도 명백한 독성학적인 변화는 관찰되지 않았다. 단, 수컷 2000 mg/ kg 투여군에서의 뇨비중의 증가와 수컷 전투여군에서혈청 creatine phophokinase의 증가가 통계적으로 유의하게 관찰되었으나 병리조직학적 변화 및 관련된 타 증상을 동반하지 않아 독성학적으로 의미있는 변화로 판단되지 않았다.
- , 혈액생화학적검사, 부검 및 장기중량 측정, 병리조직학적검사 등을 수행한 결과, 시험종료시 까지 암 . 수 모두 시험물질에 기인한 사망 동물은 없었으며, 음수 및 사료섭취량에서 산발적으로 관찰된 통계학적으로 유의한 섭취량의 저하는 일시적이거나 용량상관성이 없는 변화로서 시험물질의 투여에 의한 변화로는 인정되지 않았다. 또한 장기중량에서도 시험물질의 투여에 의한 어떠한 통계학적으로 유의한 변화도 없었다.
- 일반증상 및 사망률. 시험기간 동안 암수 모두에서 대조군을 포함한 시험물질 투여군 모두에서 특기할 만한 임상 증상은 관찰되지 않았으며, 폐사 및 빈사동물 또한 시험 전기간을 통하여 관찰되지 않았다(Table 1).
- 혈액생화학적인 검사에서는수컷의 시험물질 500, 1000, 2000 ㎎/㎏ 투여군에서 매체 대조군에 비해 ghjcose(GLU)및 albumin(ALB)의 감소와 creatine phosphokinase(CPK)의 증가가 통계학적으로 유의하게 관찰되었다. 암컷의 시험물질 투여군에서는 1000 및 2000 ㎎/㎏ 투여군에서 Ca의 증가와 CI의 감소, 전투여군에서 Na의 감소가, 200 ㎎/㎏ 투여군에서 blood urea nit「ogen(BUN)의 증가가 관찰되었다(Table 7).
- 검사소견. 혈액생화학적인 검사에서는수컷의 시험물질 500, 1000, 2000 ㎎/㎏ 투여군에서 매체 대조군에 비해 ghjcose(GLU)및 albumin(ALB)의 감소와 creatine phosphokinase(CPK)의 증가가 통계학적으로 유의하게 관찰되었다. 암컷의 시험물질 투여군에서는 1000 및 2000 ㎎/㎏ 투여군에서 Ca의 증가와 CI의 감소, 전투여군에서 Na의 감소가, 200 ㎎/㎏ 투여군에서 blood urea nit「ogen(BUN)의 증가가 관찰되었다(Table 7).
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.