[논문]PCR을 이용한 개의 아나플라즈마병 진단과 장기간 치료

이숙진; 이미진; 채준석; 나기정

PCR을 이용한 개의 아나플라즈마병 진단과 장기간 치료
Diagnosis of Anaplasmosis by PCR and Long Term Medication in a Dog 원문보기

Journal of veterinary clinics = 한국임상수의학회지, v.22 no.2 = no.49, 2005년, pp.170 - 173

이숙진 (충북대학교 수의과대학 및 동물의학연구소) , 이미진 (전북대학교 수의과대학) , 채준석 (전북대학교 수의과대학) , 나기정 (충북대학교 수의과대학 및 동물의학연구소)

Abstract ▼ AI-Helper

A 4-year-old female Shunauzer dog was referred to the Veterinary Teaching Hospital of Chungbuk National University due to anorexia and depression. The dog had a history of regular walking on grass fields, weight loss, and hyperthermia $(40.6^{\circ}C)$. In the physical examination, lymph node enlargement was confirmed. Complete blood count result revealed leukocytosis and thrombocytopenia but there was no decreasing of red blood cells. On blood chemistry, serum ALP, GGT, CPK, and LDH were elevated. Abdominal radiograph showed splenomegaly. Anaplasma platys infection was suspected with inclusion body-like substances in platelets on blood smear. Anaplasma platys was confirmed by PCR. On the basis of laboratory examination, final diagnosis was anaplasmosis. Treatment was followed for 3 months with tetracycline and doxycycline. The patient was monitored every week during the treatment. The patient has recovered to normal condition without any clinical signs. We are going to emphasize the need of PCR technique in diagnosis and to report the possibility of long term treatment more than two months in rickettial disease.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

문제 정의

치료 효과는 질병의 경과나 환자의 면역상태 등에 따라 다르게 나타날 수 있다. 본 증례를 통해서 리케 치아성 질병의 진단을 위한 PCR기법의 필요성과 치유되기까지 3개월가량 장기간 투약된 경우를 보고하고자 한다.

제안 방법

EDTA-2K로 처리한 전혈 시료를 DNeasy blood kit (Qiagen, Germany)를 이용하여 DNA를 추출하였으며, 추출한 DNA를 이용하여 A. p/a에 대한 PCR을 실시하였다.
혈소판 수치는 치료 이후 정상 범위 내에서 증가와 감소를 반복하였다. 그 후 항생제를 doxycycline(독시사이크린 하이클레이트1®, 한영제약, 한국) 5 mg/kg을 BID, PO로 바꾸어 처방하였다. 2주 후에 내원하여 보호자는 증상의 호전과 악화가 반복됨을 호소하고 환자를 기증하게 되었다.
혈액화학 검사에서 ALP, GGT, LDH 및 CPK가증가 되었고 방사선 검사에서는 비장종대가 확인되었다.내 원 당시 혈액도말검사에서는 이상 소견이 보이지 않았으나 내원 3일 후 Wright-Giemsa 염색혈액도말상에서 혈소판이 많이 응집되어 있으면서 내부에 봉입체와 유사한 물체가 관찰되어 A. platys 감염을 의심하였다(Fig 1). 적혈구와 백혈구에서는 봉입체가 관찰되지 않았다.
내원시 보인 임상증상 및 검사 결과로 원인미정의 감염증으로 잠정 진단을 내렸으나 그 후에 혈액의 PCR 검사와 혈액도말 검사 결괴를 종합하여 A. platys 감염에 의한 아나플라즈마병으로 진단하였다.
이후 혈액검사와 PCR 검사를 통해서 anollasmosis로 진단됨에 따라 내원 1주일째부터 tetracycline(테라 사이클린®, 종근당, 힌국) 20 mg/kg을 TID, PO로 투여하고, 2주째에는 지속적인 투약 처방과 함께 퇴원을 하여 일주일마다 내원하여 치료경과를 관찰하였다. 내원시에는 체온을 측정하고, CBC, 혈액도말 검사 등을 실시하였다(Fig 3). Tetracycline 투여 39일째까지 고체온증 및 식욕부진 증상이 호전되지 않았으나 백혈구 수치는 점점 감소하여 정상 범위로 돌아왔다.
장기간의 식욕부진이 있었으므로 5% dextrose-lactated Ringer's solution(하트만-디액®, CJ, 힌국)을 IV하면서 2일간 입원처치하였다. 백혈구 증가증과 체온 상승으로 감염이 의심되어 입원하는 동안 ampicillin/sulbactam(암피박탐®, 건일제약, 한국)을 20m&kg용량으로 TID로 IV하고, 체온을 내려주기 위해 입원해 있는 동안 flunixin meglumineCFluximine®, BOMAC Lab, NewZealand) 1 mg/kg을 SID로 IV하였다.
리케치아성 질병의 원인체들은 서로 다른 16S rRNA를 가지고 있으므로 이러한 교차 반응 없이 민감하게 사용될 수 있다'.본 증례 보고에서도 16S rRNA에 대한 性日을 실시하여 진단을 하였다. PCR을 통한 확진 이후의 치료는 A.
이후 혈액검사와 PCR 검사를 통해서 anollasmosis로 진단됨에 따라 내원 1주일째부터 tetracycline(테라 사이클린®, 종근당, 힌국) 20 mg/kg을 TID, PO로 투여하고, 2주째에는 지속적인 투약 처방과 함께 퇴원을 하여 일주일마다 내원하여 치료경과를 관찰하였다. 내원시에는 체온을 측정하고, CBC, 혈액도말 검사 등을 실시하였다(Fig 3).
특별한 임상증상을 나타내지 않으면서 심각한 주기적 혈소판감소증을 유발하는 A. platys 감염증과 달리 고체온, 식욕부진, 체중감소의 증상 및 백혈구 증가증을 보이는 4년령의 슈나우저를 혈액도말 및 혈액의 PCR 검사를 통해 A. platys 감염증으로 진단하였다. Tetracycline과 doxycycline을 80여일간 장기간 투약하여 임상증상이 소실되었으며 PCR 검사를 통해 완치되었음을 확인하였다.

대상 데이터

A. platys 대한PCR은 16S rRNA를 표적으로 하는 Forward primer (5'-gat ttt tgt cgt age ttg eta tg-3')와 Reverse primer(5'-tag cac tea teg ttt aca gc-3')를 사용하였으며 PCR product—] 크기는 678 bp이었다. 초기의 denaturation은 95°C에서 30초, annealing은 54°C에서 30초, 그리고 exten- sion을 72。(2에서 90초로 하여 전체 34회 반복하였다.
체중 5 kg의 4년령암컷 슈나우저가 내원 열흘 전부터 식욕부진을 보여 지역의 병원에서 4일간 수액과 항생제 처치를 받았으나 개선되지 않아 충북대학교 동물병원에 내원하였다. 횐자는 실내에서 사육되었으며 정기적으로 풀밭이 있는 공원을 산책한 경험이 있었다.

성능/효과

platys 감염증으로 진단하였다. Tetracycline과 doxycycline을 80여일간 장기간 투약하여 임상증상이 소실되었으며 PCR 검사를 통해 완치되었음을 확인하였다.
2주 후에 내원하여 보호자는 증상의 호전과 악화가 반복됨을 호소하고 환자를 기증하게 되었다. 본 동물병원에서 추가적으로 20여일간 doxycycline을 투약한 후 임상증상이 소실되고 활력을 찾게 되어 투약을 중지하였다. 초기 내원이후 약 11개월째에 A.
본 동물병원에서 추가적으로 20여일간 doxycycline을 투약한 후 임상증상이 소실되고 활력을 찾게 되어 투약을 중지하였다. 초기 내원이후 약 11개월째에 A. platys^ 대한 PCR검사가 음성의 결과가 나와서 완치되었음을 확인하였다.

후속연구

platys 음성을 확인하였다. 이러한 혈액의 PCR 검사 기법은 리케 치아성 질환의 진단뿐 아니라 투약시의 모니터링에도 유용하게 사용될 수 있을 것 이다.

참고문헌 (16)

Anderson BE, Sumner JW, Dawson JE, Tzianabos T, Greene CR, Olson JG, Fishbein DB, Olsen-Rasmussen M, Holloway BP, George EH, Azad AF. Detection of the etiologic agent of human ehrlichiosis by polymerase chain reaction. J Clin Microbiol 1992; 29: 2228-2233
Arraga-Alvardo C, Palmar M, Parra M, Salas P. Ehrlichia platys (Anaplasma platys) in dogs from Maracaibo, Venezuela: An Ultrastructural study of experimental and natural infections. Vet Pathol 2003; 40: 149-156

상세보기
Baker DC, Gaunt SD, Babin SS. Anemia of inflammation in dogs infected with Ehrlichia platys. Am J Vet Res 1988; 49: 1014-1016

상세보기
Baker DC, Simpson SD, Gaunt SD, Corstvet RE. Acute Ehrlichia platys infection in the dog. Vet Pathol 1987; 24: 449-453

상세보기
Breitschwerdt EB. The Rickettsioses. In: Textbook of Veterinary Internal Medicine, 5th ed. Philadelphia: WB Saunders. 2000: 400-408
Brown GK, Martin AR, Roberts TK, Aitken RJ. Detection of Ehrlichia platys in dogs in Australia. Aust Vet J 2001; 78(8): 554-558
Chang WL, Pan MJ. Specific amplication of Ehrlichia platys DNA from blood specimen by two-step PCR. J Clin Microbiol 1996; 34: 3142-3146

상세보기
Chang WL, Su WL, Pan MJ. Two-step PCR in the evaluation of antibiotic treatment for Ehrlichia platys infection. J Vet Med Sci 1997; 59: 849-851

상세보기
Dumler JS, Rikihisa Y, Dasch GA, Barbet AF, Palmer GH, Ray SC. Proposal for taxonomic reorganization of the order Rickettsiales, family Rickettsiaceae and tribe Ehrlichiae. Proceeding of 15th Meeting of the American Society for Rickettsiology; 30 April-03 May. Captiva Island, Florida. 2000: 52
Fench TW, Harvey JW. Serologic diagnosis of infectious cyclic thrombocytopenia in dogs using an indirect fluorescent antibody test. Am J Vet Res 1983; 44: 2407-2411

상세보기
Graze MB, Gaunt SD. Uveitis associated with Ehrlichia platys infection in a dog. J Am Vet Med Assoc 1986; 188: 916-917
Harrus S, Wanter T, Alzenberg I, Bark HT. Therapeutic effect of doxycycline in experimental subclinical canine monocytic ehrlichiosis: evaluation of a 6-week course. J Clin Microbiol 1998: 2140-2142
Harvey JW, Simpson CF, Gaskin JM. Cyclic thrombocytopenia induced by a Rickettsia-like agent in dogs. J Infect Dis 1978; 137: 182-188

상세보기
Iqbal Z, Chaichanasiriwithaya W, Rikihisa Y. Comparison of PCR with other tests for early diagnosis of canine ehrlichiosis. J Clin Microbiol 1994: 1658-1662

상세보기
Mathew JS, Ewing SA, Murphy GL, Kocan KM, Corstvet RE, Fox JC. Characterization of a new isolate of Ehrlichia platys (Order Rickettsiales) using electron microscopy and polymerase chain reaction. Vet Parasitol 1997; 68: 1-10

상세보기
Murphy GL, Ewing SA, Whitworth LC, Fox JC, Kocan AA. A molecular and serologic survey of Ehrlichia canis, E. chaffeensis, and E. ewingii in dogs and ticks from Oklahoma. Vet Parasitol 1998: 79: 325-339

상세보기

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증