액아가 포함된 줄기절편을 $0.5\;mgl^{-1}$ BA와 함께 IAA, NAA, 2,4-D를 농도별 $(1,2,3\;mgl^{-1})$로 조합한 MS기본배지에 치상하여 신초를 유도하였다. 액아로부터 신초의 형성은 $0.5\;mgl^{-1}$ BA와 $2;mgl^{-1}$ IAA를 혼합처리한 배지에서 57%의 효율로 가장 높게 나타났다. 신초로부터 발근은 MS배지에 IBA를 $1\;mgl^{-1}$를 첨가하였을 때 가장 좋았다. 발생한 root의 길이는 평균 4주 후 약 4 cm로 측정되었다.
액아가 포함된 줄기절편을 $0.5\;mgl^{-1}$ BA와 함께 IAA, NAA, 2,4-D를 농도별 $(1,2,3\;mgl^{-1})$로 조합한 MS기본배지에 치상하여 신초를 유도하였다. 액아로부터 신초의 형성은 $0.5\;mgl^{-1}$ BA와 $2;mgl^{-1}$ IAA를 혼합처리한 배지에서 57%의 효율로 가장 높게 나타났다. 신초로부터 발근은 MS배지에 IBA를 $1\;mgl^{-1}$를 첨가하였을 때 가장 좋았다. 발생한 root의 길이는 평균 4주 후 약 4 cm로 측정되었다.
A propagation for Fatsia japonica using axillary bud explants were established. Cultures were initiated from axillary bud explants on MS medium supplemented with IAA $(1,2,3\;mgl^{-1})$, 2,4-D $(1,2,3\;mgl^{-1})$ or NAA $(1,2,3\;mgl^{-1})$ in combination with BA
A propagation for Fatsia japonica using axillary bud explants were established. Cultures were initiated from axillary bud explants on MS medium supplemented with IAA $(1,2,3\;mgl^{-1})$, 2,4-D $(1,2,3\;mgl^{-1})$ or NAA $(1,2,3\;mgl^{-1})$ in combination with BA $(0.5\;mgl^{-1})$. The maximum shoot bud formation was obtained in MS medium supplemented with $0.5\;mgl^{-1}$ BA and $2;mgl^{-1}$ IAA after 4 weeks culture. The microshoot rooted within 4 week in MS medium containing $1.0\;mgl^{-1}$ IBA.
A propagation for Fatsia japonica using axillary bud explants were established. Cultures were initiated from axillary bud explants on MS medium supplemented with IAA $(1,2,3\;mgl^{-1})$, 2,4-D $(1,2,3\;mgl^{-1})$ or NAA $(1,2,3\;mgl^{-1})$ in combination with BA $(0.5\;mgl^{-1})$. The maximum shoot bud formation was obtained in MS medium supplemented with $0.5\;mgl^{-1}$ BA and $2;mgl^{-1}$ IAA after 4 weeks culture. The microshoot rooted within 4 week in MS medium containing $1.0\;mgl^{-1}$ IBA.
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문제 정의
, 2002; Moon & Youn, 1999) 팔손이에 대한 조직 배양 연구는 보고된 바 없다. 본연구는 팔손이의 액아배양을 통해 신초의 대량증식 조건을 조사하였다.
자연환경의 훼손 등에 따른 자원식물의 감소에 대처하기 위해서는 이들 식물을 기내 (in vitro)에서 효율적으로 증식시킬 수 있는 기술을 개발함으로써 자원식물의 보존과 우량 품종의 개발 . 유용성분의 효율적 생산 등을 이룰 수 있다 (Heyenga et al.
제안 방법
et Planch) 는 광주광역시 송정동 일대에서 채취하였다. 1년생 팔손이를 액아 부분을 포함한 잎과 줄기를 15-20 cm 크기로 절단하여 흐르는 물에 충분히 수세하고 무균상에서 70% EtOH에 3분, sodium hypochlorite에 6분 정도 침적하여 표면살균한 후 멸균수로 3회 이상 세척하고 멸균된 여과지로 물기를 제거한 후 1 cm~ 1.5 cm 크기로 절단하여 3% sucrose만을 포함한 MS 고형배지(0.3% gelite, pH 5.8)에서 24시간 배양하였다.
농도별로 조합처리 하였다. 모든배지는 3%의 sucrose 와 0.3% gelite를 첨가한 후 pH를 5.7~5.8로 맞추어 121℃에서 20분간 고압습윤 멸균처리 하였다. 표면살균 처리된 팔손이의 액아부분이 포함된 줄기절편을 무균조건하에서 0.
5, mg1-1)로 처리하여 발근을 유도하였다. 발근은 암조건에서 수행하였으며, 2 주일 간격으로 뿌리의 양상 및 수, 길이를 측정하였다.
신초로부터 발근을 유도하기 위해 IBA를 0.1, 0.25 그리고 0.5 mgr1 농도로 처리하여 암조건에서 약 5주 동안 배양하였다 (Table 2). 그 결과 처음에는 신초당 2~3개에 불과하였으나, 이후 부정근의 형성이 빠른 속도로 진행되었으며 초기에 형성된 부정근보다 성장 상태가 양호하였다.
신초를 유도하기 위하여 MS기본배지에 BA와 NAA, 2, 4-D, IAA를 농도별로 조합처리 하였다. 모든배지는 3%의 sucrose 와 0.
액아가 포함된 줄기절편을 0.5 mgl-1 BA와 함께 IAA, NAA, 2, 4-D를 농도별 (1, 2, 3 이舟)로 조합한 MS 기본 배지에 치상하여 신초를 유도하였다. 액아로부터 신초의 형성은 0.
액아로부터 유도된 신초로 부터 발근을 유도하기 위하여 MS기본배지에 IBA를 농도별 (0.1, 0.25, 0.5, mg1-1)로 처리하여 발근을 유도하였다. 발근은 암조건에서 수행하였으며, 2 주일 간격으로 뿌리의 양상 및 수, 길이를 측정하였다.
대상 데이터
본 실험 에 사용한 팔손이 (Fatsia japonica Decne. et Planch) 는 광주광역시 송정동 일대에서 채취하였다. 1년생 팔손이를 액아 부분을 포함한 잎과 줄기를 15-20 cm 크기로 절단하여 흐르는 물에 충분히 수세하고 무균상에서 70% EtOH에 3분, sodium hypochlorite에 6분 정도 침적하여 표면살균한 후 멸균수로 3회 이상 세척하고 멸균된 여과지로 물기를 제거한 후 1 cm~ 1.
성능/효과
1). 0.5 mgr1 BA와 2 mgl"1 NAA 그리고 1 mgF 2, 4- D를 처리한 실험구에서 각각 32%와 27%의 신초형성을 확인할 수 있었으며, 0.5 mgl-1 BA와 2mgr4 IAA 처리구에서 57%로 가장 높게 나타났다. 그러나 나머지 조건에서는 모두 캘러스만 형성될 뿐 신초는 발생하지 않았다 (Table 1).
크게 영향을 미치는 것으로 관찰되었다. 500 lux 이하의 약광 하에서 배양하면 줄기생장에 뚜렷한 효과가 나타났고 (결과 미제시), 배양 5주 후에도 신초지의 정단괴저가 거의 관찰되지 않고 절간 조직의 생장이 좋았다. 이 수종을 정상 조건에서 배양하면 절간 생장이 매우 느린 점을 감안할 때 이식 가능한 줄기의 연속생산을 위해서는 약광 하에서 배양하여도 좋다고 생각된다.
BA와 NAA, 2, 4-D 그리고 IAW를 농도별 조합처리한 MS 기본배지에 줄기절편을 치상하여 암조건 아래서 배양하였을 때 약 4~5주 후 신초가 유기되는 것을 관찰할 수 있었다 (Fig. 1). 0.
5 mgr1 농도로 처리하여 암조건에서 약 5주 동안 배양하였다 (Table 2). 그 결과 처음에는 신초당 2~3개에 불과하였으나, 이후 부정근의 형성이 빠른 속도로 진행되었으며 초기에 형성된 부정근보다 성장 상태가 양호하였다. 조직 배양에서 반복적인 계대배양은 줄기의 재 유령화를 촉진하는 것으로 알려져 있는데 (Amaud et al.
신초로부터 발근은 MS배지에 IBA를 1 를 첨가하였을 때 가장 좋았다. 발생한 root의 길이는 평균 4주 후 약 4cm로 측정되었다.
5 mgl-1 BA와 함께 IAA, NAA, 2, 4-D를 농도별 (1, 2, 3 이舟)로 조합한 MS 기본 배지에 치상하여 신초를 유도하였다. 액아로부터 신초의 형성은 0.5mgl-1 BA와 2mgl-1 IAA를 혼합처리한 배지에서 57%의 효율로 가장 높게 나타났다. 신초로부터 발근은 MS배지에 IBA를 1 를 첨가하였을 때 가장 좋았다.
그러나 나머지 조건에서는 모두 캘러스만 형성될 뿐 신초는 발생하지 않았다 (Table 1). 한편 0.5 mgr1 BA+2mgl-1 IAA 처리구에서는 절편의 기부에서 캘러스의 형성과 함께 신초가 형성되었으며, 3주 간격으로 계대배양 시 새로운 신초가 유기됨을 확인할 수 있었다 (Fig. 2). 일반적으로 활엽수종의 배양에서는 cytokinin류로 BA를 가장 많이 사용하고 있으며, BA는 정아의 생장을 억제시켜 액아로부터 줄기발생을 촉진하는 것으로 알려지고 있다 (George, 1996).
한편, 배양과정에서 빛의 세기(light intensity)가 줄기의 생장에 크게 영향을 미치는 것으로 관찰되었다. 500 lux 이하의 약광 하에서 배양하면 줄기생장에 뚜렷한 효과가 나타났고 (결과 미제시), 배양 5주 후에도 신초지의 정단괴저가 거의 관찰되지 않고 절간 조직의 생장이 좋았다.
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