선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
제안 방법
- 고체배지에서 배양한 발아단계의 체세포배를 선별하여 액체배지에 옮겨 배양하여 현탁배양 배발생세포의 유도실험을 수행하였다. 배양온도가 배발생세포 유도에 주는 영향을 조사하기 위하여 배양온도를 18℃, 25℃와 30℃로 달리하였으며 매 삼각플라스크에 40개의 발아단계의 체세포배를 접종하였다.
- 배양온도는 각각 10℃, 18℃, 25℃와 30℃로 조절하여 각 배양온도에서의 식물체 재분화율을 조사하였다. 동시에 생장조절물질의 식물체 재분화에 주는 영향을 조사하기 위하여 체세포배를 0.1, 0.5, 1, 2mg/l BA를 첨가한 배지에 옮겨 배양하였다. 배양 4주 후 경엽의 분화가 시작된 유식물체를 선별하여 1/3M와 MS배지에 옮겨 배양 8주 후 식물체 재분화율과 재분화 식물체의 줄기와 뿌리 생장에 미치는 무기염의 영향을 조사하였다.
- 종자에서 배를 분리하여 무기염의 농도를 1/3 로 줄인 MS (Murashige and Skoog, 1962)배지에 치상하여 발아시켰다. 발아 2주후의 유식물체를 3-5 mm 길이로 잘라 MS 무기염에 0.5mg/l 2,4-D, 3g/l sucrose, 2.5 g/l Gelrite (DUCHeFA)를 첨가한 배지에 치상하여 배발생 캘러스를 유도하였다. 배발생캘러스의 증식과 체세포배의 배양은 엄 등 (2002)의 방법을 따랐다.
- 배양 6주 후 배발생세포 형성율과 매 삼각플라스크에서 증식된 배발생세포의 생체중을 측정하였다. 배발생세포괴의 형성율은 전체 삼각플라스크 중 배발생캘러스가 유도된 삼각플라스크 수의 비율로 계산하였다.
- 배발생세포의 접종밀도 50 mg, 200 mg, 800 mg 으로 달리하여 18℃에서 4주간 액체배지한 결과 모든 처리에서 체세포배가 유도되었으며 순차적으로 구형, 심장형, 어뢰형의 발육단계를 거쳐 정상적으로 발아하였다 (Fig. ID, E). 형성된 체세포배수와 체세포배의 전체 생체중은 접종밀도가 클수록 큰 경향을 보였다 (Table 2).
- 5, 1, 2mg/l BA를 첨가한 배지에 옮겨 배양하였다. 배양 4주 후 경엽의 분화가 시작된 유식물체를 선별하여 1/3M와 MS배지에 옮겨 배양 8주 후 식물체 재분화율과 재분화 식물체의 줄기와 뿌리 생장에 미치는 무기염의 영향을 조사하였다. 식물체 재분화배지는 10 g/l 설탕과 2.
- 체세포배 유도시 배발생세포의 적정 접종밀도를 조사하기 위하여 매 삼각플라스크에 50 mg, 200 mg, 800 mg의 배발생세포를 접종하여 배양온도를 18℃로 조절한 진탕배양기 (HK-S125, Korea)에서 배양하였다. 배양 4주 후 형성된 체세포배수와 체세포배의 생체중을 조사하였다. 배양 배지는 고체배양에서의 2차배 유기배지와 같은 조성으로 하고 10일에 한번 계대하였다.
- 배양온도가 배발생세포 유도에 주는 영향을 조사하기 위하여 배양온도를 18℃, 25℃와 30℃로 달리하였으며 매 삼각플라스크에 40개의 발아단계의 체세포배를 접종하였다. 배양 6주 후 배발생세포 형성율과 매 삼각플라스크에서 증식된 배발생세포의 생체중을 측정하였다. 배발생세포괴의 형성율은 전체 삼각플라스크 중 배발생캘러스가 유도된 삼각플라스크 수의 비율로 계산하였다.
- 암배양하였다. 배양배지는 생장조절물질을 첨가하지 않은 1/3MS배지에 10 g/l 설탕, 2.5 g/l Gelrite를 첨가한 고체배지를 사용하였으며 1개월 후 2차체세포배 유도율을 조사하였다.
- 배양온도가 2차체세포배발생에 주는 영향을 조사하기 위하여 체세포배를 구형과심장형 및 발아단계로 구분하여 배양온도를 18℃, 25℃와 30℃로 조절한 생장상에서 배양온도를 달리하여 암배양하였다. 배양배지는 생장조절물질을 첨가하지 않은 1/3MS배지에 10 g/l 설탕, 2.
- 배양온도가 배발생세포 유도에 주는 영향을 조사하기 위하여 배양온도를 18℃, 25℃와 30℃로 달리하였으며 매 삼각플라스크에 40개의 발아단계의 체세포배를 접종하였다. 배양 6주 후 배발생세포 형성율과 매 삼각플라스크에서 증식된 배발생세포의 생체중을 측정하였다.
- 식물체 재분화를 유도하였다. 배양온도는 각각 10℃, 18℃, 25℃와 30℃로 조절하여 각 배양온도에서의 식물체 재분화율을 조사하였다. 동시에 생장조절물질의 식물체 재분화에 주는 영향을 조사하기 위하여 체세포배를 0.
- 본 실험에서는 헛개나무의 체세포를 이용한 배발생세포의 유도, 및 현탁배양을 통해 균일한 체세포배를 연속적으로 대량 생산할 수 있는 단순하고 효율적인 체세포배 생산체계를 확립하였다. 한편 체세포배의 식물체재분화에 관여하는 온도, 생장조절물질, 배지조성 등 배양조건을 검토하였다.
- 액채배양에서의 체세포배 발달의 동조화를 이루기 위하여 배발생세포가 유도된 후 계대할 때에 200μm의 강철체로 배발생세포괴를 걸러 체를 통과하는 배발생세포괴만 새로운 배지로 옮겨 배양하는 방법으로 균일한 크기의 배발생세포괴를 증식하였다. 배발생세포의 접종밀도 50 mg, 200 mg, 800 mg 으로 달리하여 18℃에서 4주간 액체배지한 결과 모든 처리에서 체세포배가 유도되었으며 순차적으로 구형, 심장형, 어뢰형의 발육단계를 거쳐 정상적으로 발아하였다 (Fig.
- 재분화된 식물체의 성장에 주는 무기염의 영향을 조사하기 위하여 유식물체를 MS와 1/3MS 고체배지에 옮겨 배양하였다 (Table 4). 그 결과 MS배지에서는 multiple shoot가 유도되고 shoot 성장은 억제되나 1/3MS배지에서는 줄기신장속도가 MS배지에 비하여 빨랐으며 새로운 shoot가 유기되기도 하였으나 MS배지에 비하여 수도 적고 성장이 저조하였다.
- 종자의 종피를 벗긴 후 70% 에탄올에 30분, 2% 차아염소산나트륨용액에 20분 소독하고 멸균수로 5 회 세척하였다. 종자에서 배를 분리하여 무기염의 농도를 1/3 로 줄인 MS (Murashige and Skoog, 1962)배지에 치상하여 발아시켰다. 발아 2주후의 유식물체를 3-5 mm 길이로 잘라 MS 무기염에 0.
- 증식시킨 배발생세포를 식물생장조절물질이 첨가되지 않은 1/3MS 액체배지에 옮겨 배양하여 체세포배를 유도하였다. 체세포배 유도시 배발생세포의 적정 접종밀도를 조사하기 위하여 매 삼각플라스크에 50 mg, 200 mg, 800 mg의 배발생세포를 접종하여 배양온도를 18℃로 조절한 진탕배양기 (HK-S125, Korea)에서 배양하였다. 배양 4주 후 형성된 체세포배수와 체세포배의 생체중을 조사하였다.
- 체세포배로부터 식물체 재분화에 미치는 싸이토키닌의 영향을 조사하기 위하여 발아단계의 체세포배를 여러농도의 BA를 첨가한 MS배지에서 4주간 배양하였다 (Table 3). 그 결과 1 mg/l 과 2mg/l의 BA를 처리한 경우 거의 모든 배양체가 갈변하면서 캘러스화되었다.
- 한편 체세포배의 식물체재분화에 관여하는 온도, 생장조절물질, 배지조성 등 배양조건을 검토하였다. 본 연구에서 제시된 헛개나무의 식물체재분화방법은 우량종묘의 대량생산 및 돌연변이와 형질전환을 통한 신품종육성연구에 유용하게 이용될 수 있을 것이다.
대상 데이터
- 배양은 50㎖의 액체배지가 들어 있는 250 ㎖ 삼각플라스크에서 진행하였고 교반속도는 100 rpm 으로 조절하여 암배양하였다. 매 처리구당 20개의 삼각플라스크를 사용하였으며 2번 반복실험을 하였다.
- 헛개나무의 종자는 강원도 양양군 자생지에서 채취하여 실험재료로 사용하였다. 종자의 종피를 벗긴 후 70% 에탄올에 30분, 2% 차아염소산나트륨용액에 20분 소독하고 멸균수로 5 회 세척하였다.
이론/모형
- 5 g/l Gelrite (DUCHeFA)를 첨가한 배지에 치상하여 배발생 캘러스를 유도하였다. 배발생캘러스의 증식과 체세포배의 배양은 엄 등 (2002)의 방법을 따랐다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.