[논문]C-Terminal Region of Ankyrin-B Interact with Z-Line Portion of Titin

Kim, Myong-Shin; Kim, Hyun-Suk; Park, Eun-Ran; Lee, Yeong-Mi; Lee, Min-A; Kim, Ji-Hee; Choi, Jae-Kyong; Ahn, Seung-Ju; Min, Byung-In; Shon, Myeong-Hwan; Choi, Jang-Seok; Kim, Chong-Rak

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C-Terminal Region of Ankyrin-B Interact with Z-Line Portion of Titin 원문보기

Journal of experimental & biomedical sciences = 대한의생명과학회지, v.12 no.4, 2006년, pp.303 - 310

Kim, Myong-Shin (Department of Biomedical Laboratory of Science, Inje University) , Kim, Hyun-Suk (Department of Biomedical Laboratory of Science, Inje University) , Park, Eun-Ran (Department of Biomedical Laboratory of Science, Inje University) , Lee, Yeong-Mi (Department of Biomedical Laboratory of Science, Inje University) , Lee, Min-A (Department of Biomedical Laboratory of Science, Inje University) , Kim, Ji-Hee (Department of Biomedical Laboratory of Science, Inje University) , Choi, Jae-Kyong (Department of Biology, Graduate School, Inje University) , Ahn, Seung-Ju (Department of Clinical Pathology, Daegu Health Collage) , Min, Byung-In (Department of Radiation Applied Engineering, Inje University) , Shon, Myeong-Hwan (Department of Orthopedic Surgery, Inje University) , Choi, Jang-Seok (Department of Orthopedic Surgery, Inje University) , Kim, Chong-Rak (Department of Biomedical Laboratory of Science, Inje University)

Abstract ▼ AI-Helper

Ankyrins are a ubiquitously expressed family of intracellular adaptor proteins involved in targeting diverse proteins to specialized membrane domains in both the plasma membrane and the endoplasmic reticulum. We described here that the C-terminal domain of ankyrin-B interact specifically with Z-line portion of titin in yeast two-hybrid analysis, in vitro pull-down assays and localization experiments in COS-7 cells. In this study we provide the first experimental evidence that Z-line portion of titin is necessary for the localization of ankyrin-B and ankyrin-B links between the sarcolemma and the myofibril in costameres.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

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제안 방법

Amplified PCR fragments were cloned into the bait vector pAS2-l (Matchmaker system II; BD Biosciences Clontech) to obtain GAL4-BD fiision. In order to investigate potential ankyrin-B and titin interactions, the titin fragments were amplified by PCR using appropriate primers and ligated into the pGAD424 vector (Matchmaker system I; BD Biosciences Clontech) to obtain GAL4-AD fusion.

대상 데이터

COS-7 cells, a monkey kidney fibroblast, were purchased from the KCLB Korean Cell Line Bank (KCLB 21651). The cells were maintained in DMEM (Cambrex Bio Science Walkersville, Inc.

이론/모형

To confirm the specificity of interaction between ankyrin- B and titin, performed a GST-pull down assays. Titin ZIgl/ 2 and MIg7/8 domain were amplified by PCR using appro priate primers and then inserted into pSP64 poly(A) vector.

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