선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 본 연구는 2005년도 1월부터 10월까지 서울대학교병원의 혈액배양에서 분리된 모든 그람양성균을 대상으로, 통상적인 디스크확산법을 시행하면서 erythromycin (ERY)과 clindamycin(CLI) 디스크 근접 시험검사가 동시에 수행될 수 있도록 고안하여 유도성 clindamycin 내성 빈도를 조사하였고, 그 시험법의 효율성을 알아보았다. 유도성 clindamycin 내성을 보이는 균들의 표현형적 특성을 알아보기 위하여 Etest 항균제 시험지(AB BIODISK, Solna, Sweden)를 이용한 최소억제농도 검사를 실시하여 그 분포를 조사하였다.
- 기존의 디스크 분주기를 사용하는 경우에는 디스크 배열을 조절하여 별도의 시간과 배지의 소모없이 쉽게 검사할 수 있으므로 매우 유용하다고 판단된다. 최소억제농도법을 실시하는 검사실에서도 적절한 기준을 설정하고 이들에 대한 디스크 근접검사를 실시하여 유도성 MLSB 내성을 보고할 것을 권장한다.
제안 방법
- Etest를 이용한 최소억제 농도검사 : 대상 균주 중 ERY 내성, CLI 감수성인 모든 포도구균 59균주가 시험되었으며, 각 균주의 ERY와 CLI의 최소억제 농도를 검사하기 위하여 Etest strip(AB BIODISK, Solna, Sweden)을 사용하였다. 시험방법은 디스크 근접시험과 동일한 방법으로 MH agar plate에 균을 접종하고 두 가지 항생제의 Etest strip, CM(clindamycin, 0.
- 균 동정 및 항생제 감수성검사 : 각 균주의 균 동정은 VITEK(bioMeriux Inc., NC, USA)을 이용하여 검사하였다. 항생제 감수성검사는 CLSI M2-A8의 표준 지침(2005)에 따라 디스크확산법으로 실시하였으며 CLSI M100-S15의 기준에 따라 판독하였다.
- CLSI collaborative study(Zelazny 등, 2005)는 ERY와 CLI, 두 디스크 사이의 거리가 15 mm와 26 mm인 두 방법에 대한 연구에서 26 mm인 경우 위 음성의 결과가 나타날 수 있음을 보여주고 있으며 균 접종이 많은 부위에서는 15 mm 간격법을 사용하는 것이 좋다고 권장하였다. 그러나 15 mm 혹은 26 mm 간격법은, 전자는 너무 가깝게 디스크를 설치하는 오류가 쉬워 각 항생제의 실제 억제대의 형태를 확인할 수 없는 경우가 생기고, 후자는 너무 멀리 디스크를 설치하는 오류가 쉬워 위음성의 결과를 초래하기 때문에 본 연구에서는 20 mm 간격법을 사용하였다. 또한 검사업무의 효율적인 측면을 고려하여 디스크 분주기에서 CLI 디스크를 제거하여 분주한 후 CLI 디스크만 인위적으로 ERY 디스크에 근접하여 설치하는 방법을 사용하였으며 매우 효율적으로 판독이 가능하다는 것을 알 수 있었다.
- 35℃, 대기 상태로 18시간 배양하였다. 두 항생제의 균 성장 억제대가 위축됨이 없이 나타나면 “D-zone 음성”, CLI의 억제대가 ERY disk 방향으로 위축되어 “D”자 모양으로 나타나면 “D-zone 양성”으로 판독하였다(Fig. 1).
- 디스크 근접 시험검사(disk approximation test, D-zone test) : 항생제 감수성검사를 실시할 때 디스크 분주기(12 디스크 용, Oxoid Ltd., Hampshire, UK)에서 CLI disk를 제거하고 11개의 디스크만 분주하고, CLI-2 μg 디스크는 ERY-15 μg disk(Oxoid Ltd., Hampshire, UK) 끝에서 20 mm가 떨어지도록 설치하였다. 35℃, 대기 상태로 18시간 배양하였다.
- Etest를 이용한 최소억제 농도검사 : 대상 균주 중 ERY 내성, CLI 감수성인 모든 포도구균 59균주가 시험되었으며, 각 균주의 ERY와 CLI의 최소억제 농도를 검사하기 위하여 Etest strip(AB BIODISK, Solna, Sweden)을 사용하였다. 시험방법은 디스크 근접시험과 동일한 방법으로 MH agar plate에 균을 접종하고 두 가지 항생제의 Etest strip, CM(clindamycin, 0.016～256 μg/mL)과 EM (erythromycin, 0.016～256 μg/mL)을 서로 마주보게 설치하였다. 균의 억제대가 strip과 만나는 지점을 최소억제농도로 판독하고 CLSI M100-S15의 기준에 따라 평가하였다.
- 본 연구는 2005년도 1월부터 10월까지 서울대학교병원의 혈액배양에서 분리된 모든 그람양성균을 대상으로, 통상적인 디스크확산법을 시행하면서 erythromycin (ERY)과 clindamycin(CLI) 디스크 근접 시험검사가 동시에 수행될 수 있도록 고안하여 유도성 clindamycin 내성 빈도를 조사하였고, 그 시험법의 효율성을 알아보았다. 유도성 clindamycin 내성을 보이는 균들의 표현형적 특성을 알아보기 위하여 Etest 항균제 시험지(AB BIODISK, Solna, Sweden)를 이용한 최소억제농도 검사를 실시하여 그 분포를 조사하였다.
대상 데이터
- 대상균주 : 서울대학교병원에서 2005년 1월부터 10월까지 분리된 혈액배양 분리균주를 대상으로 하였다. 각 균주는 한 환자에서 처음에 분리된 균주만을 시험하였으며, 시험 전까지 10% skim milk broth에 혼탁한 후 －70℃에 보관하였다.
이론/모형
- 016～256 μg/mL)을 서로 마주보게 설치하였다. 균의 억제대가 strip과 만나는 지점을 최소억제농도로 판독하고 CLSI M100-S15의 기준에 따라 평가하였다.
- , NC, USA)을 이용하여 검사하였다. 항생제 감수성검사는 CLSI M2-A8의 표준 지침(2005)에 따라 디스크확산법으로 실시하였으며 CLSI M100-S15의 기준에 따라 판독하였다. Methicillin에 대한 감수성 여부는 cefoxitin-30 μg 디스크(Oxoid Ltd.
성능/효과
- 각 균종의 methicillin 감수성에 따른 D-zone test 결과는 Table 2와 같다. 3균주의 methicillin-resistant S. aureus(MRSA)는 모두 D-zone test에서 양성으로 보인 반면, 6균주의 methicillin-susceptible S. aureus(MSSA) 중, 3균주는 양성 결과를, 나머지 3균주는 음성 결과를 나타냈다. 50균주의 CNS 중 MRCNS 32균주는 10균주(31.
- aureus(MSSA) 중, 3균주는 양성 결과를, 나머지 3균주는 음성 결과를 나타냈다. 50균주의 CNS 중 MRCNS 32균주는 10균주(31.3%)가 양성, 22균주(68.8%)가 음성 결과를 보였다. 또한 MSCNS 18균주에서는 3균주(16.
- 25 μg/mL이하의 분포를 보였으며(Table 2), D-zone 음성인 균주와 차이가 없었다. ERY MIC는 methicillin에 내성이면서 D-zone 양성인 균주는 모두 128 μg/mL이상의 고도내성을 나타낸 반면, methicillin에 감수성이면서 D-zone 양성인 4 균주는 모두 중간내성(intermediate)을 나타내었다. D-zone 음성의 균주에서는 8 μg/mL이상의 다양한 내성 분포를 나타내었다(Table 3).
- 9%), 136 균주(44%)이었다. ERY 내성, CLI 감수성인 균주는 59균주로 전체의 19.1%를 차지하였다(Table 1). D-zone test의 대상이 되는 이 59균주는 S.
- D-zone 음성의 균주에서는 8 μg/mL이상의 다양한 내성 분포를 나타내었다(Table 3). ERY의 MIC가 한 균주의 MRSA는 ERY MIC가 256 μg/mL 이상으로 고도 내성을 나타내었고 CLI MIC가 1 μg/mL로 중증도 내성을 보였음에도 불구하고 D-zone test 양성을 나타내었다.
- Table 5에 2005년 1년간 분리된 포도구균 중 ERY-R, CLI-S의 표현형을 지닌 균주를 대상으로 디스크 근접검사로 유도성 내성 결과를 나타내었다. MRSA는 MSSA보다 높은 유도성 MLSB 내성률을 보였으며, S. aureus보다 전체적인 양성률은 낮지만 CNS에서도 동일한 경향을 보이고 있어, methicillin 내성 포도구균은 감수성인 균보다는 ERY 내성에 유도되는 유도성 MLSB 내성률이 높다는 것을 알 수 있었다. 이러한 특징은 미국 내 두개 병원의 포도구균을 대상으로 한 연구 (Schreckenberger 등, 2004)에서도 같은 결과를 보였다.
- 7%)만이 양성 결과를, 나머지는 모두 음성 결과를 보였다. 균종별로는 S. aureus(66.7%)가 CNS(26.0%)에 비하여 유도성 CLI 내성률이 높았다. 전체적으로는 59균주 중 19균주(32%)가 높은 D-zone 양성을 보였다.
- 그러나 15 mm 혹은 26 mm 간격법은, 전자는 너무 가깝게 디스크를 설치하는 오류가 쉬워 각 항생제의 실제 억제대의 형태를 확인할 수 없는 경우가 생기고, 후자는 너무 멀리 디스크를 설치하는 오류가 쉬워 위음성의 결과를 초래하기 때문에 본 연구에서는 20 mm 간격법을 사용하였다. 또한 검사업무의 효율적인 측면을 고려하여 디스크 분주기에서 CLI 디스크를 제거하여 분주한 후 CLI 디스크만 인위적으로 ERY 디스크에 근접하여 설치하는 방법을 사용하였으며 매우 효율적으로 판독이 가능하다는 것을 알 수 있었다.
- 유도성 MLSB 내성을 보이는 균주를 이용하여 각 항균제의 최소억제농도 간의 분석을 통하여 선별기준을 정하려는 시도가 있었으나 실패하였으며(Steward 등, 2005), 이 경우에도 간편한 디스크 근접 시험검사를 순수배양시에 실시하여 보고하는 것이 좋다고 보고하였다(Jorgensen 등, 2004). 본 연구에서는 비록 분석 균주가 너무 적기는 하지만 ERY MIC가 고도내성(>128 μg/mL) 이면서 CLI MIC가 감수성(<0.25 μg/mL)이면 MRSA에서는 100%, MRCNS에서는 약 50%가 유도성 MLSB 내성을 보였다.
- Table 5의 D-zone 양성의 결과는 이러한 Hazy-D 형태의 결과는 배제되었다. 유도성 MLSB 내성균들의 MIC 특성은 Steward 등(2005)의 결과와 차이가 없었으나, methicillin 감수성인 포도구균에서는 ERY에 저도 내성일지라도 CLI 내성을 유도할 수 있다는 근거를 본 연구에서 4균주 찾을 수 있었다(Table 4).
- 0%)에 비하여 유도성 CLI 내성률이 높았다. 전체적으로는 59균주 중 19균주(32%)가 높은 D-zone 양성을 보였다.
- 조사기간에 혈액배양에서 분리된 포도구균은 총 309균주였으며(각 환자당 중복균주 제외), ERY와 CLI 모두 감수성이거나 내성인 균주가 각각 111 균주(35.9%), 136 균주(44%)이었다. ERY 내성, CLI 감수성인 균주는 59균주로 전체의 19.
- 혈액배양에서 분리된 모든 그람양성구균(포도구균속, 연쇄구균속, 장구균속)에 대하여 디스크 근접검사를 포함한 항생제 감수성검사를 실시하였으나 포도구균에 대해서만 D-zone 양성을 나타내었다(결과 보이지 않음).
후속연구
- 전체 포도구균의 약 10% 내외의 적은 균주만이 유도성 MLSB 내성을 보이지만 ERY-I/R, CLI-S인 감수성 표현형을 가진 포도구균에서는 30%대의 높은 양성률을 보일 뿐만 아니라, 이러한 세균의 감염질환에 CLI 치료를 받는 환자의 경우에는 치료에 실패할 수 있고, 특히 S. aureus의 경우 그 독성이 강해 위험해 질 수 있기 때문에, D-zone test를 이용한 CLI 유도 내성검출은 반드시 실시되어야 할 것이다. 기존의 디스크 분주기를 사용하는 경우에는 디스크 배열을 조절하여 별도의 시간과 배지의 소모없이 쉽게 검사할 수 있으므로 매우 유용하다고 판단된다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.