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문제 정의
- 과산화지질을 급여한 흰쥐에서 갈근 추출물이 체지질구성, 간장기능 및 항산화능에 미치는 영향을 검토했다. 혈장 총 콜레스테롤량 및 혈장 중성지질량은 과산화지질첨가군 모두가 정상군 보다 증가하였으나 갈근추출물 첨가에 의해 하락하여, 대조군보다 낮은 수치를 보였다.
- , 2000). 따라서 본 연구는 식품의 지질산화를 억제하고 체내에서 과산화물질의 독성을 완화시켜 줄 수 있는 천연기능성 항산화물질을 개발하기위한 기초연구로 과산 화지질식이를 급여한 흰쥐들에게 처리군 별로 갈근 추출물의 양을 달리하여 경구투여한 후, 체내 지질구성, 간장기능 및 항산화능에 미치는 영향을 처리군간에 비교 검토했다.
- 그러나 중성지질은 대조군에서 가장 높은 수치를 나타내었고, 갈근처리군들은 감소하는 경향을 보였다. 이러한 결과는 간장 내 지질합성과 분해에 갈근추출물에 내재하는 어떤 성분이 영향을 주었을 가능성을 시사해 준다.
제안 방법
- 51g인 Sprague-Dawely계의 수컷 32마리를 일주일간 기본식이(Table 1) 및 환경에 적응시킨 후 정상군(기본식이군), 대조군(기본식이+10% 과산화지질), lOO㎎/㎏ 갈근추출물처리군(기본식이+10%과산화지질 +100㎎/㎏ 갈근추출물) 및 200㎎/㎏ 갈근추출물처리군(기본식이+10%과산화지질+200㎎/㎏ 갈근추출물)의 4군으로 나누고 각 처리군 당 8마리씩 평균체중이 유사하게 임의 배치했다. 각 처리군 별 식이급여는 7주간의 실험기간 동안 일일 식이 섭취량을 측정하여 처리군 별 식이섭취량의 차이가 5% 전후가 되도록 급여량을 제한하였다. 물은 자유급식하였다.
- . 교반하여 유지의 산화를 유도한 후, 과산화물가(POV)(金田와 植田, 1987)를 측정하였다. 과산화수준은 200meq/kg 이상이었다.
- 급여는 처리군 별로 매일 오후 5시경에 죤대를 이용하여 경구 투여했다.
- 물은 자유급식하였다. 기본식이의 구성은 AIN-76정제사료조성 (Table 1)에 의거하였으며, 과산화지 질식이는 첨가대두유의 에너지가를 고려하여 가능한 범위 내에서 일반적인 영양소 함량이 처리군 간에 유사하도록 조정하였다.
- 시중에서 구입한 양질의 갈근분말 500g(건조중량)을 적량으로 나누어 수조상에서 냉각수 환류하에 5시간씩 3회 추출하고, 여과, 감압 농축하여 MeOH extract 120g을 만들었다. 급여는 처리군 별로 매일 오후 5시경에 죤대를 이용하여 경구 투여했다.
- 평균체중이 172.88±3.51g인 Sprague-Dawely계의 수컷 32마리를 일주일간 기본식이(Table 1) 및 환경에 적응시킨 후 정상군(기본식이군), 대조군(기본식이+10% 과산화지질), lOO㎎/㎏ 갈근추출물처리군(기본식이+10%과산화지질 +100㎎/㎏ 갈근추출물) 및 200㎎/㎏ 갈근추출물처리군(기본식이+10%과산화지질+200㎎/㎏ 갈근추출물)의 4군으로 나누고 각 처리군 당 8마리씩 평균체중이 유사하게 임의 배치했다. 각 처리군 별 식이급여는 7주간의 실험기간 동안 일일 식이 섭취량을 측정하여 처리군 별 식이섭취량의 차이가 5% 전후가 되도록 급여량을 제한하였다.
- 간장 catalase활성측정은 Johnsson과 Hkan Borg(1988) 의 방법에 준했다. 혈액 Glutamic oxaloacetic transaminase(GOT) 및 glutamic pyruvic transaminase(GPT)의 활성치와 지질구성은 혈액자동분석기(Boehringer Manheim, 독일)에 의해 측정했다. 간장의 total cholesterol, HDL-cholesterol, triglyceride량은 kit(일본 Wako Co.
데이터처리
- 실험결과는 SPSS package를 이용하여 one-way ANOVA 검정을 수행하였으며, 각 처리군간의 유의성 검정은 Duncan's multiple range test 에 의해 P<0.05 수준에서 실시했다.
이론/모형
- 간장SOD 측정은 Flohe 등(1992)의 방법으로 측정했다. 간장 catalase활성측정은 Johnsson과 Hkan Borg(1988) 의 방법에 준했다. 혈액 Glutamic oxaloacetic transaminase(GOT) 및 glutamic pyruvic transaminase(GPT)의 활성치와 지질구성은 혈액자동분석기(Boehringer Manheim, 독일)에 의해 측정했다.
- 간장내 TBARS량은 Ohkawa 등(1979)의 방법으로, glutathione peroxidase(GSH-Px) 활성측정은 Levander 등(1983)의 방법에 의해 측정했다. 간장SOD 측정은 Flohe 등(1992)의 방법으로 측정했다. 간장 catalase활성측정은 Johnsson과 Hkan Borg(1988) 의 방법에 준했다.
- 혈장 TBARS의 정량은 EDTA처리 혈액으로부터 혈장을 분리하여 37℃에서 120분간 배양 후 Buege와 Aust(1978)의 방법에 의해 정량했다. 간장내 TBARS량은 Ohkawa 등(1979)의 방법으로, glutathione peroxidase(GSH-Px) 활성측정은 Levander 등(1983)의 방법에 의해 측정했다. 간장SOD 측정은 Flohe 등(1992)의 방법으로 측정했다.
- 심장천자법에 의해 채혈, 공시했다. 혈장 TBARS의 정량은 EDTA처리 혈액으로부터 혈장을 분리하여 37℃에서 120분간 배양 후 Buege와 Aust(1978)의 방법에 의해 정량했다. 간장내 TBARS량은 Ohkawa 등(1979)의 방법으로, glutathione peroxidase(GSH-Px) 활성측정은 Levander 등(1983)의 방법에 의해 측정했다.
성능/효과
- 혈장 GOT 및 GPT의 활성치는 과산화지질첨가군들이 정상군보다 높은 수치를 보였으나 갈근처리에 의해 하락했다. 간장 GSH-Px, SOD 및 CAT활성치는 과산화지질 첨가군 모두가 정상군보다 낮은 값을 보였으나 과산화처 리군 간에서는 갈근처 리군이 대조군보다 높은 값을 보였다.
- 이러한 결과는 식이의 과산화지질첨가가 혈액 내 과산화물의 축적을 증가시켰으며 , 한편으로는 처리한 갈근 추출물이 과산화물의 축적을 억제하였음을 시사해 준다. 간장 TBARS량도 혈장과 유사한 경향으로 과산화지질첨가군 모두가 정상군 보다 높은 수치를 보였다. 과산화지질첨가군들 간에는 갈근주줄물 처리군이 대조군보다 낮은 수치를 보여, 혈장 TBARS량의 변동경향과 유사했다.
- 05). 간장의 총 콜레스테롤량은 전 처리군에서 유의한 차이를 나타내지 않았으며, 중성지질량은 정상군보다 과산화 지질처리군 모두가 높은 수치를 보였다. 그러나 과산화지질 처리군 간에서는 갈근 처리군들이 대조군보다 낮은 경향을 보였다.
- 05). 과산화지질 첨가군들은 대조군이 가장 높은 값을 나타내었고, 갈근 처리군들은 갈근급여량이 증가함에 따라 감소하여, 대조군보다 낮은 값을 보였다(P<0.05). 이러한 결과는 식이에 첨가한 과산화지질이 혈중 콜레스테롤량의 증가에 영향을 준 것으로 생각되어지며, 고지방식이를 급여하였을 때 혈중 총콜레스테롤량이 증가하였다는 다른 연구자들(Ahrens et al.
- 05). 그러나 중성지질은 대조군에서 가장 높은 수치를 나타내었고, 갈근처리군들은 감소하는 경향을 보였다. 이러한 결과는 간장 내 지질합성과 분해에 갈근추출물에 내재하는 어떤 성분이 영향을 주었을 가능성을 시사해 준다.
- , 2004), 본 실험에서 과산화물의 죽적을 나타내는 TBARS농도의 증감과 잘 부합했다. 또한 항산화계 효소활성의 저하는 생체 내 과산화물의 과잉축적에 직접적으로 영향을 준다는 것을 시사했다.
- 1, 2 및 3에 각 처리군 별 GSH-Px, SOD 및 CAT의 활성치를 나타냈다. 모든 항산화계 효소 활성치들은 과산화 처리군 모두가 정상군보다 낮은 수치를 보였다. 과산화 처리군간에서는 GSH-Px 및 CAT의 활성치는 갈근처리군이 대조군보다 낮은 값을 보였다.
- 혈장 HDL-cholesterole 혈액 내 콜레스테롤을 간장으로 재순환시키는 것으로 성인병 예방에 큰 역할을 한다. 본 실험에서 갈근처리군의 HDL- cholesterol량의 증가현상 및 총콜레스테롤의 감소현상은 갈근이 콜레스테롤 강하능을 가지고 있음을 입증해주며, 녹차 및 솔잎추출물 등의 polyphenol성분이 다량으로 내재하고 있는 식물류들을 고지방식이로 비만을 유도한 쥐에게 급여하였을 때 혈장 HDL-cholesterol을 증가시켰다고 보고한 Sin과 Han(1997) 및 Kang 등(1996)의 결과와 일치했다. 그러나 혈장내 SL-cholesterol량은 개체에 따라 간장 내에서의 합성과 분해의 정도가 달라 다른 결과를 나타내기도 하며(Hang and Hostmark, 1987), 이와 유사한 실험에서도 연구자들 간에 상반되는 결과를 보고했다(Harris et al.
- 05). 이러한 결과는 과산화지질 첨가가 항산화계 효소들의 활성치를 하락시킬 수 있다는 다른 연구자의 결과와 잘 일치하며(Park et al., 2004), 본 실험에서 과산화물의 죽적을 나타내는 TBARS농도의 증감과 잘 부합했다. 또한 항산화계 효소활성의 저하는 생체 내 과산화물의 과잉축적에 직접적으로 영향을 준다는 것을 시사했다.
- , 1957; Kim and Jo, 1972; Kim and Park, 1981)의 연구 결과와 유사했다. 혈장 HDL-cholesterol량은 과산화지질처리군들 모두가 정상군보다 낮은 경향을 보였으나, 갈근처리군들은 대조군보다 높은 값을 보여 정상군과 유의한 차이를 나타내지 않았다(P>0.05). 혈장 HDL-cholesterole 혈액 내 콜레스테롤을 간장으로 재순환시키는 것으로 성인병 예방에 큰 역할을 한다.
- 그러나 과산화지질 처리군 간에서는 갈근 처리군들이 대조군보다 낮은 경향을 보였다. 혈장 및 간장 내 TBARS량은 과산화지질처리군 모두가 정상군보다 높은 값을 보였다. 그러나 과산화지질첨가군들 간에서는 갈근 처리군들이 대조군보다 낮은 경향을 보였다.
- 따라서 혈장 HDL-cholesterol량의 결과 해석을 위해서는 추후 보다 더 체계적인 연구가 필요할 것으로 생각된다. 혈장 중성지질량은 대조군이 가장 높은 값을 보였으며, 갈근처리군들은 모두가 대조군보다 낮은 값을 보였다(P<0.05). 이러한 결과는 중성지질을 하락시킬 수 있는 어떤 기능성 물질이 갈근에 내재하고 있을 가능성을 시사해 준다.
- 및 항산화능에 미치는 영향을 검토했다. 혈장 총 콜레스테롤량 및 혈장 중성지질량은 과산화지질첨가군 모두가 정상군 보다 증가하였으나 갈근추출물 첨가에 의해 하락하여, 대조군보다 낮은 수치를 보였다. 혈장 HDL-cholesterol량은 갈근추출물 첨가군이 대조군 보다 높은 경향을 나타내 었으나 유의한 차이를 나타내지는 않았다(P>0.
- Table 2에 각 처리군 별 혈장지질구성을 나타냈다. 혈장 총 콜레스테롤량은 과산화지질첨가군 모두가 정상군보다 높은 값을 나타내었다(P<0.05). 과산화지질 첨가군들은 대조군이 가장 높은 값을 나타내었고, 갈근 처리군들은 갈근급여량이 증가함에 따라 감소하여, 대조군보다 낮은 값을 보였다(P<0.
후속연구
- 특히 유지를 다량 내포하고 있는 식품들은 가공공정과 유통과정에서 지질과산화 반응이 일어날 가능성이 많으며, 이러한 식품류들이 함유하고 있는 지질과산화물은 최근에 만연하는 성인병을 비롯한 암 등의 각종 질환들의 발병을 촉진할 수도 있다. 따라서 생체 내외에서 지질과산화반응을 억제하고 체내에서 축적된 과산화물질의 독성을 완화시켜줄 수 있는 천연 기능성물질을 식품에 첨가하는 것은 각종 질환들에 대한 예방효과와 식품의 품질을 유지하는데 좋은 효과가 있을 것으로 생각된다. 한편, 칡(Pueraria thunbergiana BENTH)은 다년생 콩과식물로 뿌리(갈근)와 꽃(갈화)은 옛 부터 약용 및 식용으로 이용되 었으며, 특히 갈근(Pueraria radix)은 감기, 두통, 해갈, 설사 당뇨 및 해독에 이용되었다(Lee, 1980).
- , 2004). 따라서 혈장 HDL-cholesterol량의 결과 해석을 위해서는 추후 보다 더 체계적인 연구가 필요할 것으로 생각된다. 혈장 중성지질량은 대조군이 가장 높은 값을 보였으며, 갈근처리군들은 모두가 대조군보다 낮은 값을 보였다(P<0.
- 05). 이러한 결과는 중성지질을 하락시킬 수 있는 어떤 기능성 물질이 갈근에 내재하고 있을 가능성을 시사해 준다. 또한 간장 내 지질구성 (Table 3)은 Total cholest-erole 대조군을 비롯한 전 처리군에서 유의한 차이를 나타내지 않았다(P>0.
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