항진균성 항생물질을 생산하는 Bacillus thuringiensis BK4의 항생물질 정제와 토마토 시들음병의 효과적인 방제 An Antifungal Agent Produced by Bacillus thuringiensis BK4, an Antagonistic Bacterium against Fusarium Wilt Disease of Tomato원문보기
토마토시들음병 방제균주인 Bacillus thuringiensis BK4의 항진균성 항생물질의 대량생산조건을 확립하였고, 항생물질 BK4를 조정제 수준에서 in vitro, in vivo pot 실험을 통해 실제 토마토 시들음병에 대한 토양내 방제력을 검증하였다. B. thuringiensis BK4는 탄소원으로 0.5% xylose, 질소원으로 0.2% peptone No. 3, 5 mM $CaCl_2$를 첨가하였을 때 토마토 시들음병균인 Fusarium oxysoporum에 대한 항진균활성과 균체생산량이 가장 높았으며 또한, B. thuringiensis BK4가 생산하는 항진균성 항생물질 BK4를 조정제 수준에서 in vivo pot 실험을 통해 토마토 시들음병균인 F. oxysoporum에 대한 방제력이 탁월하다는 것을 확인하였다. B. thuringiensis BK4의 균체와 조정제수준의 항생물질 BK4를 병용처리 하였을 경우 각각을 단독으로 처리하였을 때와 비교하여 상가(相加)효과를 확인할 수 있었으며, 기대했던 상승(相乘)효과는 확인하지 못하였다. B. thuringiensis BK4가 생산하는 항생물질 BK4를 Sephadex LH-20 column chromatography와 prep-HPLC를 통해 retention time이 38min인 단일물질로 정제할 수 있었으며, 정제된 항생물질의 MIC(Minimum Inhibition Concentration)를 측정한 결과 50${\mu}$g/ml이었다.
토마토시들음병 방제균주인 Bacillus thuringiensis BK4의 항진균성 항생물질의 대량생산조건을 확립하였고, 항생물질 BK4를 조정제 수준에서 in vitro, in vivo pot 실험을 통해 실제 토마토 시들음병에 대한 토양내 방제력을 검증하였다. B. thuringiensis BK4는 탄소원으로 0.5% xylose, 질소원으로 0.2% peptone No. 3, 5 mM $CaCl_2$를 첨가하였을 때 토마토 시들음병균인 Fusarium oxysoporum에 대한 항진균활성과 균체생산량이 가장 높았으며 또한, B. thuringiensis BK4가 생산하는 항진균성 항생물질 BK4를 조정제 수준에서 in vivo pot 실험을 통해 토마토 시들음병균인 F. oxysoporum에 대한 방제력이 탁월하다는 것을 확인하였다. B. thuringiensis BK4의 균체와 조정제수준의 항생물질 BK4를 병용처리 하였을 경우 각각을 단독으로 처리하였을 때와 비교하여 상가(相加)효과를 확인할 수 있었으며, 기대했던 상승(相乘)효과는 확인하지 못하였다. B. thuringiensis BK4가 생산하는 항생물질 BK4를 Sephadex LH-20 column chromatography와 prep-HPLC를 통해 retention time이 38min인 단일물질로 정제할 수 있었으며, 정제된 항생물질의 MIC(Minimum Inhibition Concentration)를 측정한 결과 50${\mu}$g/ml이었다.
The optimum production condition for the antibiotic from Bacillus thuringiensis BK4 was determined, and the suppression rate of Fusarium-wilt by the butanol-extracted antibiotic was verified by employing tomatoes in vitro and in vivo pot tests. Cell growth and antifungal activity were the best when ...
The optimum production condition for the antibiotic from Bacillus thuringiensis BK4 was determined, and the suppression rate of Fusarium-wilt by the butanol-extracted antibiotic was verified by employing tomatoes in vitro and in vivo pot tests. Cell growth and antifungal activity were the best when 0.5% xylose and 0.2% peptone No.3 were given as carbon and nitrogen sources, respectively, in the presence of 5mM $CaCl_2$. The partially purified antibiotic successfully prevented Fusarium oxysporum pathogen in pot experiments. When the pots were treated with both live cells and the partially purified antibiotic, an additive-effect was seen in the suppression of Fusarium-wilt, but synergistic effect was not detected. The antibiotic, denoted BK4, purified by Sephadex LH-20 column chromatography was eluted with a single peak at a retention time of 38 min. on prep-HPLC; Minimum inhibition concentration of the homogenous antibiotic was determined to be 50${\mu}$g/ml.
The optimum production condition for the antibiotic from Bacillus thuringiensis BK4 was determined, and the suppression rate of Fusarium-wilt by the butanol-extracted antibiotic was verified by employing tomatoes in vitro and in vivo pot tests. Cell growth and antifungal activity were the best when 0.5% xylose and 0.2% peptone No.3 were given as carbon and nitrogen sources, respectively, in the presence of 5mM $CaCl_2$. The partially purified antibiotic successfully prevented Fusarium oxysporum pathogen in pot experiments. When the pots were treated with both live cells and the partially purified antibiotic, an additive-effect was seen in the suppression of Fusarium-wilt, but synergistic effect was not detected. The antibiotic, denoted BK4, purified by Sephadex LH-20 column chromatography was eluted with a single peak at a retention time of 38 min. on prep-HPLC; Minimum inhibition concentration of the homogenous antibiotic was determined to be 50${\mu}$g/ml.
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문제 정의
항진균성 항생물질의 토양내 방제능 검중. B. thuringiensis BK4가 생산하는 항진균성 항생물질의 토마토 시들음병에 대한방제능을 in vivo pot test를 통해 검증하고자 하였다. B.
따라서 본 연구에서는 본 연구실에서 이미 선발한 토마토 시들음병에 대한 강력한 길항능력을 가진 우리나라의 토착 길항균 주를 이용하여 이 균주가 생산하는 항진균성 항생물질의 생산조건을 조사하고 정제하여 토마토 시들음병을 균주자체와 더불어 조정제 항생물질 수준에서 방제하는 학문적 접근을 시도하고자 하였으며, in vivo pot 실험을 통하여 길항물질만으로 처리하는 방법, 그리고 고농도의 길항물질과 길항미생물을 병행 처리하는 방법을 모색하여 화학농약과 동일한 효과를 나타낼 수 있는 천연 길항물질과 그 생산 미생물균체를 이용한 속효성과 지효성을 함께 갖춘 병행생물방제법에 대한 연구를 하고자 하였다.
조정제 항생물질 BK4와 미생물제제의 병용실험. 본 실험에서는 이미 in vivo pot 실험에서 토마토 시들음병에 대한 방제 능을 확인된 B. thuringiensis BK4 배양액과 조정제 항생물질 BK4를 병용처리하여 조정제 항생물질로부터 얻을 수 있는 속효성 방제효과와 미생물균체로부터 얻을 수 있는 지효성 방제 효과를 동시에 꽤하고자 시도하였다. 아울러 조정제 항생물질을 단독으로 처리하였을 경우의 방제능과 비교하여 본 균주를 제제화하여 병용하였을 때 토마토 시들음병을 좀 더 강력하게 방제할 수 있는 방법을 찾고자 하였다.
thuringiensis BK4 배양액과 조정제 항생물질 BK4를 병용처리하여 조정제 항생물질로부터 얻을 수 있는 속효성 방제효과와 미생물균체로부터 얻을 수 있는 지효성 방제 효과를 동시에 꽤하고자 시도하였다. 아울러 조정제 항생물질을 단독으로 처리하였을 경우의 방제능과 비교하여 본 균주를 제제화하여 병용하였을 때 토마토 시들음병을 좀 더 강력하게 방제할 수 있는 방법을 찾고자 하였다. 실험조건은 위의 방제능 재검증 실험과 동일하게 하여 실시하였으며 배양액의 균체 수와 조정제 항생물질의 농도는 각각 가장 높은 방제력을 나타내는 107 cfii/mZ, 500)ig/mZ로 3 m?씩, 병용으로 6 ml를 관주접종하였다.
제안 방법
항진균성 항생물질의 정제. B. thuringiensis BK4가 생산하는 항진균성 항생물질의 정제를 위해 항생물질 BK4생산용 최적 배지인 배지 BK4에서 37℃, 3일 배양시킨 배양여액을 12, 000 rpm, 15 min에서 원심분리하여 상등액을 회수하고 동량의 n- butanol을 첨가하여 15분간 교반기에서 천천히 교반시켜 배양 상등액의 항진균성 항생물질을 n-butanol층으로 추출하였고 수층은 버리고 n-butanol하층만을 취하여, 이를 다시 1/2량의 증류수를 첨가하여 15분간 교반시키면서 n-butamol층으로 추출되지 않은 소량의 항생물질 및 불순물은 수층으로 전이시켜 완전하게 제거하였다. 이 과정을 3회 실시하여 얻은 n-butanol층은 감압농축기를 통해 n-butanol 완전히 제거하고 증류수에 녹였으며 본정제의 시료로 사용하였다.
항진균성 항생물질의 정제와 MIC 측정. B. thuringiensis BK4의 배양상등액을 n-butanol로 항진균성 항생물질을 추출하고 Diaion HP-20 column을 통해 분리하였다. 50% MeOH 분획에서 F.
In vivo pot test를 통한 항진균성 항생물질의 방제능 검토 B. thuringiensis BK4가 생산하는 항진균성 항생물질의 방제능검토를 위해 토마토를 기주 식물로 하여 in vivo pot 실험을 실시하였다. B.
항진균성 항생물질의 MUC 측정. Minimum inhibition concentration(MIC) 측정은 prep-HPLC를 이용하여 단일 peak로정제한 후 회수한 활성분획을 질소가스를 이용하여 잔존하는 유기용매 및 수분 등의 불순물을 완전히 제거한 후 0-2,000 ng/ ml 단위로 녹여 사용하였다. 다양한 농도의 항생물질 BK4를 5 mm paper-disc위에 적시고 F.
조정제된 항생물질 BK4를 Diaion HP-20 column (IX30 cm)에 loading 한 후 MeOH를 0-100%까지 gradient 하게 높여주면서 분획을 받았고, 각 분획들은 MeOH를 evaporator 로 제거한 후 7? oxysporunfie 대한 길항력을 paper disc법을 통해 확인하였다. 길항력이 있는 분획은 Sephadex LH-20 column (1.5X50cm)에 loading하였고 각각의 분획들은 0.5ml/min의 flow rate로 3 m씨 받았고, 활성분획을 모아 동일한 조건의 Sephadex LH-20 column에 다시 loading하여 활성이 있는 분획을 취하였다. Sephadex LH-20 column re-chromatography에서 얻은 활성분획은 prep-HPLC를 통해 단일 peak로 정제하였다.
Minimum inhibition concentration(MIC) 측정은 prep-HPLC를 이용하여 단일 peak로정제한 후 회수한 활성분획을 질소가스를 이용하여 잔존하는 유기용매 및 수분 등의 불순물을 완전히 제거한 후 0-2,000 ng/ ml 단위로 녹여 사용하였다. 다양한 농도의 항생물질 BK4를 5 mm paper-disc위에 적시고 F. oxysporum의 포자를 회수하여도 말한 PDA(potato dextrose agar) 배지 위에 놓고 억제환의형성여부와 크기로 측정하였다.9,10)
thuringiensis BK4가 생산하는 항진균성 항생물질은 n-butanol로 추출하여 evaporator로 butanol을 제거하고 질소가스를 이용하여 농축한 후 조정제액을 증류수에 녹여 사용하였고, 배양^액은 3일 동안 3UC에서 최저배지조건에서 키우고 이를 계수하여 그대로 사용하였으며, 토양은 일반 상토(서울 농자재)에 밭흙 : 모래를 2 : 로 섞은 것을 사용하였다. 또, 토마토 시들음병균인 F. oxysporum의 포자는 E oxysporum를 PDB 에 접종한 후 28℃에서 4일간 배양한 후 배양여액을 멸균된 거즈로 여과하여 회수하였고, 300개/ml 상당의 포자를 5ml 관주접종한 후, 1일간 습실처리하고 여기에 B. thuringiensis BK4의 균체 IN cfii/m/와 항생물질 BK4를 500 ㎍/ml의 농도로 각각 5 m/씩 처리하였다. 이를 항온항습실에서 키우면서 주기적으로 발병을 확인하였다6,12,13,14) 한편, 토마토 시들음병의 방제가 계상은 대조구로 아무것도 처리하지 않은 pot와 F.
thuringiensis BK4의 제제화를 위해 항생물질의 대량생산조건을 조사하였다. 배지에 첨가되는 탄소원, 질소원, 무기염의 종류와 농도에 따른 항생물질 생산성을 조사하기위해 0.7% K2HPO4, 0.2% KH2PO4, 0.1% (NH4)2SO4, 0.05% Sodium citrate, 0.01% MgSO4-7H2O, glucose 0.1% 조성으로 구성된 David minimal 배지에 10종의 탄소원과 11종의 질소원를 각각 0.1%씩 첨가하여 배앙한 후 균체생육도와 토마토 시들음병균 F. oxysponim의 생육저해율을 측정하였으며, 탄소원과 질소원이 결정된 배지에 13종의 무기염을 첨가하여 균체생육도와 길 항력을 측정하였다.7)
아울러 조정제 항생물질을 단독으로 처리하였을 경우의 방제능과 비교하여 본 균주를 제제화하여 병용하였을 때 토마토 시들음병을 좀 더 강력하게 방제할 수 있는 방법을 찾고자 하였다. 실험조건은 위의 방제능 재검증 실험과 동일하게 하여 실시하였으며 배양액의 균체 수와 조정제 항생물질의 농도는 각각 가장 높은 방제력을 나타내는 107 cfii/mZ, 500)ig/mZ로 3 m?씩, 병용으로 6 ml를 관주접종하였다. 그 결과 접종 3일후부터 토마토 시들음병에 대한 상가(相加)효과를 확인할 수 있었으며, 기대했던 상승(相乘)효과는 확인하지 못하였다(Fig.
thuringiensis BK4의 균체 IN cfii/m/와 항생물질 BK4를 500 ㎍/ml의 농도로 각각 5 m/씩 처리하였다. 이를 항온항습실에서 키우면서 주기적으로 발병을 확인하였다6,12,13,14) 한편, 토마토 시들음병의 방제가 계상은 대조구로 아무것도 처리하지 않은 pot와 F. oxysporum의포자만 처리한 pot를 비교하여 %단위로 환산하였고, 방제 균의 균체와 항생물질 BK4를 함께 처리한 경우는 단독으로 처리한 경우와 비교하여 방제가가 동일한 경우를 상가(相加)효과로 하고 더 높을 경우 상승(相乘)효과로 판단하였으며, 이 모든 실험은 3회 반복실험을 하였다.
5). 조정제 항생물질 BK4와 미생물제제의 병용실험. 본 실험에서는 이미 in vivo pot 실험에서 토마토 시들음병에 대한 방제 능을 확인된 B.
항진균성 항생물질 BK4의 정제는 Sephadex LH-20, Diaion HP-20 gel filtration column chromatography와 prep-HPLC로 행하였다. 조정제된 항생물질 BK4를 Diaion HP-20 column (IX30 cm)에 loading 한 후 MeOH를 0-100%까지 gradient 하게 높여주면서 분획을 받았고, 각 분획들은 MeOH를 evaporator 로 제거한 후 7? oxysporunfie 대한 길항력을 paper disc법을 통해 확인하였다.
항진균성 항생물질의 최적생산 조건. 항진균성 항생물질을 생산하는 B. thuringiensis BK4의 제제화를 위해 항생물질의 대량생산조건을 조사하였다. 배지에 첨가되는 탄소원, 질소원, 무기염의 종류와 농도에 따른 항생물질 생산성을 조사하기위해 0.
항진균성 항생물질의 정제와 MIC 측정. B.
대상 데이터
thuringiensis BK4가 생산하는 항진균성 항생물질의 방제능검토를 위해 토마토를 기주 식물로 하여 in vivo pot 실험을 실시하였다. B. thuringiensis BK4가 생산하는 항진균성 항생물질은 n-butanol로 추출하여 evaporator로 butanol을 제거하고 질소가스를 이용하여 농축한 후 조정제액을 증류수에 녹여 사용하였고, 배양^액은 3일 동안 3UC에서 최저배지조건에서 키우고 이를 계수하여 그대로 사용하였으며, 토양은 일반 상토(서울 농자재)에 밭흙 : 모래를 2 : 로 섞은 것을 사용하였다. 또, 토마토 시들음병균인 F.
사용균주. 본 연구에 사용한 균주는 Bacillus thuringiensis BK4 (KACC91160P)로 이미 본 연구실에서 지난해 선발한 토마토 시들음병균인 Fusarium oxysporum%: 길항하는 항진균성 항생물질을 생산하는 균주이다.6)
이론/모형
제거한 후 7? oxysporunfie 대한 길항력을 paper disc법을 통해 확인하였다. 길항력이 있는 분획은 Sephadex LH-20 column (1.
성능/효과
첨가한 배지에서 균체생성량이 가장 높았고 길항력도 xylose를 첨가하였을 때보다는 낮았지만, 80%이상의 높은 길항력을 보였다. 하지만, 균체생성량에서 xylose와 큰 차이가 없고 토마토 시들음병균인 F.
thuringiensis BK4가 생산하는 항진균성 항생물질의 토마토 시들음병에 대한방제능을 in vivo pot test를 통해 검증하고자 하였다. B. thuringiensis BK4의 배양여액을 처리하였을 때와 조정제한 항생물질을 처리하였을 때 무처리구가 3일째부터 토마토 시들음병의 병징을 나타내어 쓰러지는 반면, 균체와 조정제 항생물질을 각각 처리한 실험구에서는 토마토 시들음병의 병징을 나타내지 않았으며 75% 이상의 방제가를 확인할 수 있었다(Fig. 5). 조정제 항생물질 BK4와 미생물제제의 병용실험.
oxysporum게 대한 길항력을 나타내었고 Sephadex LH-20 column에 50% MeOH을 이동상으로 하여 이 활성 분획을 다시 분리하였다. Fig. 3의 결과와 같이 Sephadex LH-20 column re-chromatogmphy를 통해 42번 분획에서 항진균 활성을 확인할 수 있었고, 이를 prep-HPLC를 통해 retention time이 38 min인 단일 peak 항생물질을 얻을 수 있었다(Fig. 4).
항진균성 항생물질 생산 최적배지조건. 항진균성 항생물질을 생산하는 B. thuringiensis BK4의 항 Fusarium성 항생물질의 생산 최적배지조건을 조사한 결과 탄소원으로 0.2% xylose, 질소원으로 0.5% Proteose peptone No. 3을 첨가하였을때 F. oxysporunfie 대한 길항력이 가장 높았으며, 0.2% xylose, 0.5% Proteose peptone No. 3로 탄소원과 질소원을 고정하고 13종 의무 기염을 각각 첨가하였을 때 0.5 mM CaCL가 들어간 배지에서 항생물질 생산성이 가장 높았다(Table 1, 2, 3, Fig. 2).
후속연구
실험조건은 위의 방제능 재검증 실험과 동일하게 하여 실시하였으며 배양액의 균체 수와 조정제 항생물질의 농도는 각각 가장 높은 방제력을 나타내는 107 cfii/mZ, 500)ig/mZ로 3 m?씩, 병용으로 6 ml를 관주접종하였다. 그 결과 접종 3일후부터 토마토 시들음병에 대한 상가(相加)효과를 확인할 수 있었으며, 기대했던 상승(相乘)효과는 확인하지 못하였다(Fig. 6). 이러한 결과로 볼 때 배양액과 조정제 항생물질 BK4의 병용처리시 배양액의 균체수와 조정제 항생물질의 농도와 비율을 조절할 필요가 있으며 기주식물인 토마토의 모종의 개수도 늘려야 할 것이다.
이러한 결과로 볼 때 배양액과 조정제 항생물질 BK4의 병용처리시 배양액의 균체수와 조정제 항생물질의 농도와 비율을 조절할 필요가 있으며 기주식물인 토마토의 모종의 개수도 늘려야 할 것이다. 또한, 방제능 확인 후 지속적인 관찰을 실시하여 방제능의 유지기간도 관찰하여 병용효과를 재검증해야 할 것이다.
6). 이러한 결과로 볼 때 배양액과 조정제 항생물질 BK4의 병용처리시 배양액의 균체수와 조정제 항생물질의 농도와 비율을 조절할 필요가 있으며 기주식물인 토마토의 모종의 개수도 늘려야 할 것이다. 또한, 방제능 확인 후 지속적인 관찰을 실시하여 방제능의 유지기간도 관찰하여 병용효과를 재검증해야 할 것이다.
참고문헌 (20)
Chung, B. K. and Hong, K. S. (1991) Biological control with Streptomyces sp. on Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum and Phytophthora nicotianae var. parastica causing seasame wilt and blight. The Kor. J. Mycol. 19, 231-238
Lee, E. T. and Kim, S. D. (1999) Isolation and antifungal activity of chitinase producing bacterium Serratia sp. 3095 as antagonistic bacterium against Fusarium sp. J. Kor. Soc. Agric. Chem. Biotechnol. 42, 181-187
Chung, B. K. and Ryou, N. Y. (1996) Effect of a soil amendment for controling fusarium wilt of cucumerinum. The Kor. J. Mycol. 24, 93
Starr, J. L., jerger, M. J., Marlyn, R, D. and Schilling, K. (1989) Effects of Meloidogyne incognita and Fusarium oxysporum f. sp. vasinfactum on plant mortaliy and yield of cotton. Phytopathology. 79, 640-646
Dube, H. C. and Podile, A. R. (1989) Biological control of microbial plant pathogens. Indian Review of Life Sciences. 9, 15-30
Jung, H. K., Kim, J. R., Kim, B. K., Yu, T. S., and Kim, S. D. (2005) Selection and Antagonistic Mechanism of Bacillus thuringiensis BK4 against Fusarium Wilt Disease of Tomato. Kor. J. Microbiol. Biotechnol. 33, 194-199
Hong, S. H., Lam, J. S., Park, Y. B. and Ha, J. H. (1990) The optimum culture condition for the production of antibiotics KG-1167B produced by Clostrium sp. Kor. J. Microbiol Biotechnol. 18, 292-265
Kim, K. K., Kang, J, G., Moon, S. S. and Kang, K. Y. (2000) Isolation and identification of antifungal N-butylbenzene-sulphonamide produced by Pseudomonas sp. AB2. J. Antibiot. 53, 131-136
Kim, Y. S., Song, J. K., Moon, D. C. and Kim, S. D. (1997) Isolation and structure determination of antifungal antibiotics from Bacillus subtillis YB-70, a power biocontrol agent. Kor. J. Microbiol. Biotechnol. 25, 62-37
Kim, K. Y. and Kim, S. D. (1997) Biological control of Pyricularaia oryzae blast spot with the antibiotic substance produced by Bacillus sp. KL-3. Kor. J. Microbiol. Biotechnol. 25, 396-402
Leoffler, W. Tschen, J. S., Venittanakom, N., Kugler, M., Knorpp, E., Hsieh, T. F. and Wu, T. G. (1986) Antifungal effects of bacilysin and fengymycin from Bacillus subtilis F- 293: a comparison with activaties of other Bacillus antibiotics. J. phytopathology 115, 204-213
Siddiqui, I. A., Qureshi, S. A., Sultana, V., Ehteshamul Haque, S. and Ghaffar, A. (2000) Biological control of root rot root knot disease complex of tomato. Plant and Soil. 227, 163-169
Chung, B. K. and Hong, K. S. (1991) Biological control with Streptomyces sp. on Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum and Phytophthora nicotianae var. parasitica causing sesame with and blight. Kor. J. Mycol. 19, 231-237
Charudattan, R. and Dinoor, A. (2000) Biological control of weeds using plant pathogens: accomplishments and limitations. Crop Pro. 19, 691-695
Hadar, Y., Chet, I. and Heins, Y. (1979) Biological control of Rhizoctonia solani damping-off with wheat bran culture of Trichoderma harizianum. Phytopathology 69, 64-69
Harman, G. E., Chet, I. and Barker, R. (1980) Tricoderma hamatum effects on seed and seedling disease induced in radish and pea by Phythium spp. or Rhizoctonia solanl. Phytopathology 70, 1167-1172
Kim, D. W., Do, K. S. and Choi, S. W. (2001) Antagonistic search for biological control of fusarium wilt in cymbium genus. J. Kor. Hort. Sci. 42, 581-586
Lim, K. S. and Kim, S. D. (1990) Antifungal mechanism of Pseudomonas stutzeri YPL-1 for biocontrol of Fusarium solani causing plant root rot. J. Microbiol. Biotechnol. 18, 81-88
Oostendrop, M. and Sikora, R. A. (1990) In vitro interrelationship between rhizosphere bacteria and Heterodera schachtii. Review de Nematologie. 13, 269-274
Takeuchi, S., Hirayama, K., Ueda, K., Sasaki, H. and Yonehara, H. (1958) Blasticidin S, a new antibiotic. J. Antibiot. 11, 1-5
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