본 연구에서는 소목 열수추출물을 용매 순차 분획하여 얻은 EtOAc 분획물을 가지고 감마선 조사(100 kGy)한 후 색상 변화와 항산화활성 향상 변화를 평가하였다. 평가시험으로서 소목 용매 순차 분획물과 선정된 EtOAc 분획물에 감마선을 조사(100 kGy)후 DPPH 라디칼 소거활성에서 4가지 유기용매 분획물(chloroform, ethylacetate, n-butanol, $H_{2}O$) 중 EtOAc 분획물의 전자공여능$IC_{50}$ 값이 비조사구와 조사구 각각 0.71 및 0.61 ${\mu}g/mL$로 현저히 높았으며, 비조사구와 조사구 각각 $38.5{\sim}91.5%$ 및 $45.7{\sim}94.8%$의 라디칼 소거활성을 보여 조사구의 활성이 높게 나타났다. 또한 감마선 조사(100 kGy)한 EtOAc 분획물의 색상 변화는 명도(L값) 및 황색도(b값)의 경우 조사 후 증가한 반면, 적색도(a값)는 감소하였다. 총 페놀 함량은 비조사구와 조사구 각각 865 및 1195 mg/g으로 조사 후 유의적인 차이를 보였다(p<0.05). Superoxide anion radical 소거활성 시험에서 EtOAc 분획물의 비조사구와 조사구 각각 $16.3{\sim}84.7%$ 및 $20.2{\sim}92.5%$로 조사구의 superoxide anion radical에 대한 소거활성이 높게 나타내었고 첨가수준 50 ${\mu}g/mL$ 이상의 농도에서는 60% 이상의 소거력을 나타내었다. 지질과산화 억제 시험에서 EtOAc 분획물의 비조사구와 조사구 각각 $14.6{\sim}85.6%$ 및 $19.5{\sim}93.4%$로 조사구의 지질과산화에 대한 억제 효과가 높게 나타내었고 첨가수준 0.4 ${\mu}g/mL$와 0.8 ${\mu}g/mL$ 농도에서는 비조사 시료에 비해 유의적으로 높은 활성을 나타내었다(p<0.05). Comet assay를 이용한 EtOAc 분획물의DNA 방어효과 시험에서 생쥐 림프구에서 방사선에 의한 DNA 외가닥 절단 정도를 측정한 결과 TM 값은 정상대조군에서 $3.85({\pm}0.15)$이었고 방사선 조사군의 경우 $22.6({\pm}0.38)$로 증가되었다. 감마선 조사시킨 시료처리군의 경우 10 ${\mu}g/mL$에서 각각 $15.6({\pm}0.28)$, $12.01({\pm}0.31)$로서 DNA의 외가닥 절단에 대한 유의한 억제효과를 관찰할 수 있었다(p<0.05). 이러한 결과는 소목의 구성성분 중 brazilein, brazilin, gallic acid, quercetin 같은 다양한 페놀성 화합물과 플라보노이드의 배당체들이 방사선 조사에 의해 이탈됨에 따른 페놀 함량이 증가하여 항산화 활성도 향상됨을 확인할 수 있었다. 따라서 소목 추출물에 감마선 조사기술을 이용한다면 항산화 활성의 향상과 색택 개선 등 산업적으로 활용도가 높은 천연소재를 제조할 수 있으리라 사료된다.
본 연구에서는 소목 열수추출물을 용매 순차 분획하여 얻은 EtOAc 분획물을 가지고 감마선 조사(100 kGy)한 후 색상 변화와 항산화활성 향상 변화를 평가하였다. 평가시험으로서 소목 용매 순차 분획물과 선정된 EtOAc 분획물에 감마선을 조사(100 kGy)후 DPPH 라디칼 소거활성에서 4가지 유기용매 분획물(chloroform, ethylacetate, n-butanol, $H_{2}O$) 중 EtOAc 분획물의 전자공여능 $IC_{50}$ 값이 비조사구와 조사구 각각 0.71 및 0.61 ${\mu}g/mL$로 현저히 높았으며, 비조사구와 조사구 각각 $38.5{\sim}91.5%$ 및 $45.7{\sim}94.8%$의 라디칼 소거활성을 보여 조사구의 활성이 높게 나타났다. 또한 감마선 조사(100 kGy)한 EtOAc 분획물의 색상 변화는 명도(L값) 및 황색도(b값)의 경우 조사 후 증가한 반면, 적색도(a값)는 감소하였다. 총 페놀 함량은 비조사구와 조사구 각각 865 및 1195 mg/g으로 조사 후 유의적인 차이를 보였다(p<0.05). Superoxide anion radical 소거활성 시험에서 EtOAc 분획물의 비조사구와 조사구 각각 $16.3{\sim}84.7%$ 및 $20.2{\sim}92.5%$로 조사구의 superoxide anion radical에 대한 소거활성이 높게 나타내었고 첨가수준 50 ${\mu}g/mL$ 이상의 농도에서는 60% 이상의 소거력을 나타내었다. 지질과산화 억제 시험에서 EtOAc 분획물의 비조사구와 조사구 각각 $14.6{\sim}85.6%$ 및 $19.5{\sim}93.4%$로 조사구의 지질과산화에 대한 억제 효과가 높게 나타내었고 첨가수준 0.4 ${\mu}g/mL$와 0.8 ${\mu}g/mL$ 농도에서는 비조사 시료에 비해 유의적으로 높은 활성을 나타내었다(p<0.05). Comet assay를 이용한 EtOAc 분획물의DNA 방어효과 시험에서 생쥐 림프구에서 방사선에 의한 DNA 외가닥 절단 정도를 측정한 결과 TM 값은 정상대조군에서 $3.85({\pm}0.15)$이었고 방사선 조사군의 경우 $22.6({\pm}0.38)$로 증가되었다. 감마선 조사시킨 시료처리군의 경우 10 ${\mu}g/mL$에서 각각 $15.6({\pm}0.28)$, $12.01({\pm}0.31)$로서 DNA의 외가닥 절단에 대한 유의한 억제효과를 관찰할 수 있었다(p<0.05). 이러한 결과는 소목의 구성성분 중 brazilein, brazilin, gallic acid, quercetin 같은 다양한 페놀성 화합물과 플라보노이드의 배당체들이 방사선 조사에 의해 이탈됨에 따른 페놀 함량이 증가하여 항산화 활성도 향상됨을 확인할 수 있었다. 따라서 소목 추출물에 감마선 조사기술을 이용한다면 항산화 활성의 향상과 색택 개선 등 산업적으로 활용도가 높은 천연소재를 제조할 수 있으리라 사료된다.
Caesalpinia sappan L. is an indeciduous tree distributed in China, India, Miyanmar and Vietnam. Its heartwood has long been used in oriental folk medicines to treat diseases. In this study, antioxidative activities of Caesalpinia sappan L. and the effect of gamma irradiation on its chemical and biol...
Caesalpinia sappan L. is an indeciduous tree distributed in China, India, Miyanmar and Vietnam. Its heartwood has long been used in oriental folk medicines to treat diseases. In this study, antioxidative activities of Caesalpinia sappan L. and the effect of gamma irradiation on its chemical and biological properties were investigated. The ethyl acetate fraction (EtOAc fr.) of Caesalpinia sappan L. was irradiated with 100 kGy of gamma ray. The dark red color of EtOAc fr. was significantly (p<0.05) removed by irradiation (Hunter L and b values increased and a value decreased). The total phenolic content of EtOAc fr. was 865 mg/g and it was increased to 1195 mg/g by gamma irradiation. DPPH radical and superoxide anion radical scavenging activities and lipid peroxidation inhibitory activity of EtOAc fr. were very high and its activities were also increased by gamma irradiation. EtOAc fr. also inhibited the irradiation-induced DNA damage of lymphocyte as determined by comet assay. In conclusion, EtOAc fr. of Caesalpinia sappan L. extract showed high antioxidative activities in vitro. Furthermore, gamma irradiation on EtOAc fr. ameliorated the color and antioxidative properties. Therefore, it can be suggested that Caesalpinia sappan L. may be a good material for antioxidant function and gamma irradiation may be applied for the improvement of chemical and biological properties of Caesalpinia sappan L.
Caesalpinia sappan L. is an indeciduous tree distributed in China, India, Miyanmar and Vietnam. Its heartwood has long been used in oriental folk medicines to treat diseases. In this study, antioxidative activities of Caesalpinia sappan L. and the effect of gamma irradiation on its chemical and biological properties were investigated. The ethyl acetate fraction (EtOAc fr.) of Caesalpinia sappan L. was irradiated with 100 kGy of gamma ray. The dark red color of EtOAc fr. was significantly (p<0.05) removed by irradiation (Hunter L and b values increased and a value decreased). The total phenolic content of EtOAc fr. was 865 mg/g and it was increased to 1195 mg/g by gamma irradiation. DPPH radical and superoxide anion radical scavenging activities and lipid peroxidation inhibitory activity of EtOAc fr. were very high and its activities were also increased by gamma irradiation. EtOAc fr. also inhibited the irradiation-induced DNA damage of lymphocyte as determined by comet assay. In conclusion, EtOAc fr. of Caesalpinia sappan L. extract showed high antioxidative activities in vitro. Furthermore, gamma irradiation on EtOAc fr. ameliorated the color and antioxidative properties. Therefore, it can be suggested that Caesalpinia sappan L. may be a good material for antioxidant function and gamma irradiation may be applied for the improvement of chemical and biological properties of Caesalpinia sappan L.
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문제 정의
)은 Leguminosae에 속한 낙엽 관목으로서 인도의 동부, 중국의 남부와 동남아시아에재배되며, 최근 연구에 의하면 소목의 성분 중 brazilein과 brazilin의 중추신경억제작용, 항 보체 효과, 항균작용, 혈관완화작용과 항경련작용 등의 효과가 있음이 보고되었으며, 한방에서는 어혈로 인한 타박 손상, 월경통, 월경 폐색, 현훈, 출산 후 각종 증상에 사용해 왔다(15-19). 따라서 본 연구에서는 소목(Caesalpinia sappan L.) 추출물을 기능성 소재로서활용하기 위해 감마선 조사 후 색상 및 항산화 활성 변화를보았다.
제안 방법
EtOAc 분획물을 첨가하여 배양한 림프구를 방사선 조사한 후 DNA 외가닥 절단에 미치는 영향을 단세포전기영동분석으로 측정하여 Fig. 5에 나타내었다. 결과, 방사선에 의해절단된 DNA 가닥은 전기영동 상에서 양극(+)방향으로 이동하여 head와 tail로 구성된 혜성 (comet) 모양으로 관찰 되
상징 액의 흡광도를 532 nm 측정하였다. 각 시료의 지질과산화 억제활성은대조구에 대한 시료 첨가 구의 MDA 생성 감소 정도를 다음식과 같이 산출하였다.
비조사구는 동일한 온도효과를 얻기 위하여 감마선 조사시설 외부에 둔 후 조사 직후 처리 구와 함께 4℃ 냉장고에저장하였다. 감마선 조사 및 비 조사된 소목 추출액은 rotary evaporator(EYELA N-1000, Japan)를 이용하여 용매를 제거한 후 ~60℃ 냉동고에서 동결하고, freeze dryer(Ilshin FD5505, Korea)를 이용하여 동결건조한 후 분쇄하였다. 제조된 소목 파우더는 -20℃에 냉동 보관하면서 실험에 사용하였다.
3) 하에서 20분간 정치 시켜 DNA의 양 가닥이 풀리게 한 다음 25 V, 300 mA에서 20분간 어두운 조명상태에서 전기영동을시행하였다. 고 알칼리 상태를 중화시키기 위해 tris buffer(0.4 M Tris, pH 7.4)로 3회 세척하여 슬라이드를 중화시키고 DNA가 슬라이드에 침착될 수 있도록 ethan이에 1시간침적 하였다. 슬라이드를 건조 시 킨 후 ethidium bromide(20 lig/mL)로 염색한 후 세포의 DNA 손상 정도를 CCD 카메라가 부착된 형광현미경을 사용하여 측정하였고, 이미지분석프로그램 (Komet 4.
50℃의 증류수 500 mL에 녹여 chloroformCCHCh), ethyl-acetate(EtOAc), n-butanolS-BuOH)로 순차적으로 분획하고, magnesium sulfate(MgSO4) 또는 sodium sulfate (NazSOG를 이용하여 氏0를 제거하였다. 그리고 위와 동일한 방법에 따라, 용매를 감압 농축하여 각 분 획별 건조물을얻었다.
, Osaka, Japan)를 이용하여 Illuminant D65 10° 광원에서 측정하였다. 기계는 측정 전표준흑판과 표준백판으로 표준화한 후 사용하였으며, Hunter color L(명도, lightness), a(적색도, redness) 및 b(황색도, yellowness)를 측정하였다. 측정된 값은 Spectra Magic Software(version 2.
내 노화 억제작용의 척도로 이용되고 있다. 따라서 본실험에서는 환원성 물질의 분석시약으로 안정한 free radical인 DPPH를 이용하여 소목 추출물의 전자공여능을 측정하였다(Fig. 1). 그 결과, 시료의 농도가 증가할수록 DPPH에대한 전자공여능도 증가하는 경향을 보였으며, 비조사 시료군에 비해 감마선 조사 시료군 전자공여능이 낮은 농도(0.
본 연구에서는 소목 열수 추출물을 용매 순차 분획하여 얻은 EtOAc 분획물을 가지고 감마선 조사(100 kGy)한 후 색상 변화와 항산화 활성 향상 변화를 평가하였다. 평가시험으로서 소목 용매 순차 분획물과 선정된 EtOAc 분획물에 감마선을 조사(100 kGy)후 DPPH 라디칼 소거활성에서 4가지유기 용매 분획 물(chloroform, ethylacetate, butanol, H2O) 중 EtOAc 분획물의 전자공여 능 IC50 값이 비조사구와 조사구 각각 0.
분리된 림프구의 방사선 조사는 방사선과학연구소에 소재하는 irradiator( Gammacell 40 Exactor, Nordion International Inc., Ontario, Canada)를 이용하여 以七、-^선 (선량율: 1.14 Gy/min)을 2 Gy의 선량으로 1회 조사하였다. 림프구는 방사선 조사 후 DNA 수복을 차단하기 위하여 전기영동을 시 행하기 전까지 4℃를 유지하였다.
선량계 보정은 영국의 National Physical Laboratory(NPL) 규격에 준용하여 표준화한 후 사용하였으며, 총 흡수 선량의 오차는 2%이내였다. 비조사구는 동일한 온도효과를 얻기 위하여 감마선 조사시설 외부에 둔 후 조사 직후 처리 구와 함께 4℃ 냉장고에저장하였다. 감마선 조사 및 비 조사된 소목 추출액은 rotary evaporator(EYELA N-1000, Japan)를 이용하여 용매를 제거한 후 ~60℃ 냉동고에서 동결하고, freeze dryer(Ilshin FD5505, Korea)를 이용하여 동결건조한 후 분쇄하였다.
5 M NaCl, 100 mM Na2EDTA, 10 mM Tris base, 1% Triton X-100, 10% DMSO, pH 10)에 1시간 동안 세포를 용해시켰다. 세포를전기 영동완충액(300 mM NaOH, 1 mM EDTA, pH>12.3) 하에서 20분간 정치 시켜 DNA의 양 가닥이 풀리게 한 다음 25 V, 300 mA에서 20분간 어두운 조명상태에서 전기영동을시행하였다. 고 알칼리 상태를 중화시키기 위해 tris
소목 열수추출물을 CHCk, EtOAc, n-BuOH, 压0로 분획한 후각 분획물에 예비실험을 통해 결정된 선량인 100 kGy 의 감마선을 조사 시 킨 후, 비조 사 군과 조사군의 전자공여능을 비교하여 Table 1에 나타내었다. 그 결과, 4가지 유기용매분획 물 중 EtOAc 분획물의 전자공여 능이 현저히 높았으며 , 다른 유기용매 분획물에서는 전자공여 활성이 낮게 측정되었다.
소목 추출물(50 mg/mL)의 감마선 조사는 방사선과학연구소 내 선원 40만 Ci의 Cobalt-60 감마선 조사시설 (IR-221 MDS Nordion International Co. Ltd., Ottawa, Canada)을이용하여 실온(12±1℃)에서 시간당 10 kGy의 선량율로 100 kGy의 흡수선량으로 수행하였다. 흡수선량의 확인은 alanine dosimeter(지름 5 mm, Bruker, Instruments, Rheinstetten, Germany)를 사용하였다.
소목 추출물의 감마선 조사에 따른 시료의 색변화를 측정하기 위해 추출물을 quartz celKCM A-98, 10 mm in width) 에 옮기고 Color Difference Meter(Spectrophotometer CM-3500D, Minolta Co, Ltd., Osaka, Japan)를 이용하여 Illuminant D65 10° 광원에서 측정하였다. 기계는 측정 전표준흑판과 표준백판으로 표준화한 후 사용하였으며, Hunter color L(명도, lightness), a(적색도, redness) 및 b(황색도, yellowness)를 측정하였다.
4)로 3회 세척하여 슬라이드를 중화시키고 DNA가 슬라이드에 침착될 수 있도록 ethan이에 1시간침적 하였다. 슬라이드를 건조 시 킨 후 ethidium bromide(20 lig/mL)로 염색한 후 세포의 DNA 손상 정도를 CCD 카메라가 부착된 형광현미경을 사용하여 측정하였고, 이미지분석프로그램 (Komet 4.0, Kinetic imaging, Ltd., Great Britain) 을 통해 분석하였다. DNA 손상 정도는 절단된 DNA 가닥이이동하여 형성된 tail 길이인 tail length(TL; pm) 또는 tail 길이와 tail 내 DNA 파편(fragment)의 양을 수치화시킨 다음과 같은 식으로 정의되는 tail moment(TM)로 나타내었으며, TL 및 TM 값이 증가할수록 DNA가 손상을 많이 받은것을 의미한다.
균일하게 마쇄한 간을 9, 000xg에서 20분간 원심분리한 후 상등액을 얻었다. 이것을 105,000xg에서 1시간 동안 초원심분리하여 침전물을 취함으로써 기타 세포 내 가용성 물질이 제거된 microsome 분획을 얻었다. 이것을 0.
가하여 3시간 끊여 추출하였다. 이를 원심분리기 (Union 5KR Hanil, Korea)를 이용하여 상징 액을 분리하고 Whatman No. 4와 No. 2 여과지로 중복 여과한 여액을 rotary evaporator(EYELA N-1000, Japan)를 이용하여 감압농축하여 부피를 줄인 후 freeze dryer(Ilsin FD5505, Korea) 를 이용하여 완전히 건조하였다. 열수 추출 건조물을 각각 .
대상 데이터
본 실험에 사용된 소목(Casalpirda sappan L.)은 심재(心 材)를 음건한 것으로 서울 한약 거래상에서 구입하여 이물질을 선별한 후 시료로 사용하였다.
흡수선량의 확인은 alanine dosimeter(지름 5 mm, Bruker, Instruments, Rheinstetten, Germany)를 사용하였다. 선량계 보정은 영국의 National Physical Laboratory(NPL) 규격에 준용하여 표준화한 후 사용하였으며, 총 흡수 선량의 오차는 2%이내였다. 비조사구는 동일한 온도효과를 얻기 위하여 감마선 조사시설 외부에 둔 후 조사 직후 처리 구와 함께 4℃ 냉장고에저장하였다.
71 pg/mL) 순이었으며, 본 실험의 ICso 값이 더 낮아 다소차이가 있었지만 경향은 일치하여 본 실험이 적합하게 행하였음을 알 수 있었다. 이후의 실험에서는 유기용매 분획물중 가장 활성이 높은 EtOAc 분획물을 시료로 사용하였다.
데이터처리
본 실험에서 얻어진 결과는 mean土SD로 표시하였고, 통계적 유의성은 Student's t-test로 검정하였다.
이론/모형
림프구는 방사선 조사 후 DNA 수복을 차단하기 위하여 전기영동을 시 행하기 전까지 4℃를 유지하였다. 림프구 DNA 손상 정도는 Singh 등(22)의 방법에 준하여 시행하였다. 0.
생체의 산화적 손상에 주된 요인인 superoxide anion radicalCOQ에 대한 EtOAc 분획물의 활성을 xanthine/ xanthine oxidase 반응계를 이용한 WST-8 방법으로 살펴보았다(Fig. 2). EtOAc 분획물은 농도 의존적 인 superoxide anion radical에 대한 소거 활성을 나타내었다.
소목 추출물의 총 폴리페놀 화합물 함량은 Folin-Ciocalteu의 방법(20)을 사용하여 분석하였다. 소목추출물을 메탄올로 녹여 최종 농도를 1,000 ppm으로 하였고 각각의 시료 0.
성능/효과
05). Comet assay를 이용한 EtOAc 분획물의 DNA 방어효과 시험에서 생쥐 림프구에서 방사선에 의한 DNA 외가닥 절단 정도를 측정한 결과 TM 값은 정상대조군에서 3.85( ±0.15)이었고 방사선 조사 군의 경우 22.6( ±0.38)로 증가되었다. 감마선 조사시킨 시료처리 군의 경우 10 iig/mL에서 각각 15.
05). EtOAc 분획물의 DNA 외가닥 절단 정도는 15.6 (±0.28)로 방사선 대조군에 비해 유의한 억제효과를 보였다 (p<0.05). 또한 방사선 조사시료군은 비조사 시료군에 비해더 많이 억제함을 확인하였다(p<0.
비교하여 Table 1에 나타내었다. 그 결과, 4가지 유기용매분획 물 중 EtOAc 분획물의 전자공여 능이 현저히 높았으며 , 다른 유기용매 분획물에서는 전자공여 활성이 낮게 측정되었다. Shrishailappa 등(23)의 소목에 대한 항산화 활성 에서각 분획물에 대한 활성도는 CHChOlOOO pg/mL), EtOAc (1.
3에 나타내었다. 그 결과, 시료는 농도 의존적으로 높은 지질 과산화 억제효과를 나타내었으며, 합성 항산화제인 BHT와 비교했을 때 비슷한 정도의 활성을 볼 수 있었다. 또한, 감마선 조사시료군의 첨가량 0.
1). 그 결과, 시료의 농도가 증가할수록 DPPH에대한 전자공여능도 증가하는 경향을 보였으며, 비조사 시료군에 비해 감마선 조사 시료군 전자공여능이 낮은 농도(0.4 pg/mL, 0.8 ug/mL)에서는 유의하게 증가하였다(p<0.05). 이것은 방사선을 조사한 시료의 페놀 화합물의 함량이 증가함과 부합한다.
8%의 라디칼 소거활성을 보여 조사구의 활성이 높게 나타났다. 또한 감마선 조사(100 kGy)한 EtOAc 분획물의 색상 변화는 명도(L값) 및황색도(b값)의 경우 조사 후 증가한 반면, 적색도(a값)는 감소하였다. 총 페놀 함량은 비조 사구와 조사구 각각 865 및 1195 mg/g으로 조사 후 유의적인 차이를 보였다(p<0.
첨가수준 50 ug/mL 이상의 농도에서는 60% 이상의 소거력을 나타내었다. 또한 감마선 조사시료군의 활성이 비조사 시료 군에 비해 유의적으로 높았다(p<0.05).
05). 또한 방사선 조사시료군은 비조사 시료군에 비해더 많이 억제함을 확인하였다(p<0.05).
7에서 131로 조사후에 증가하였다. 또한 총 색차값(座)에서도 색도의 큰 변화가 있음을 확인할 수 있었다.
그 결과, 시료는 농도 의존적으로 높은 지질 과산화 억제효과를 나타내었으며, 합성 항산화제인 BHT와 비교했을 때 비슷한 정도의 활성을 볼 수 있었다. 또한, 감마선 조사시료군의 첨가량 0.4 μg/ml工와 0.8 pg/mL 농도에서 비조사 시료 군에 비 해유의적으로 높은 활성을 나타내었다(pCO.05).
4). 생쥐 림프구에서 방사선에의한 DNA 외가닥 절단 정도를 측정한 결과 22.6( ±0.38)로정상대조군의 3.85(±0.15)에 비해 유의적으로 증가되었다 (p<0.05). EtOAc 분획물의 DNA 외가닥 절단 정도는 15.
이것은 Beaulieu 등(24)이양송이에 2 kGy의 감마선을 처리한 경우 총 페놀 함량이증가하였다는 보고와 부합한다. 소목 EtOAc 분획물의 감마선 조사 전후의 색차변화를 측정한 결과, 조사 후 명도(L값) 는 46.5에서 93.7로 증가한 것으로 나타나 상당히 밝은색을 나타냄을 확인하였고, 적색도(a값) 는 53.1에서 1.6으로 급격히 떨어졌으며 황색 도(b값)의 경우에도 76.7에서 131로 조사후에 증가하였다. 또한 총 색차값(座)에서도 색도의 큰 변화가 있음을 확인할 수 있었다.
감마선 조사가 항산화력에 미치는 영향을 조사하기 위하여, 선정된 EtOAc 분획물의 감마선 조사에 따른 총 페놀 함량변화를 Table 2에 나타내었다. 소목 EtOAc 분획물의 총 페놀 함량은 비조 사구가 865 mg/g인데 반해, 조사구는 1195 mg/g으로 통계적으로 유의하게 증가함을 보였다(p<0.05). 이러한 결과는 방사선에 의해 페놀성 화합물 배당체의 이탈로 인해 페놀 함량도 증가되었다.
05). 이러한 결과는 소목의 구성성분 중 brazilein, brazilin, gallic acid, quercetin 같은 다양한 페놀성 화합물과 플라보노이드의 배당체들이 방사선 조사에 의해 이탈됨에 따른 페놀 함량이증가하여 항산화 활성도 향상됨을 확인할 수 있었다. 따라서소목 추출물에 감마선 조사기술을 이용한다면 항산화 활성의 향상과 색택 개선 등 산업적으로 활용도가 높은 천연소재를 제조할 수 있으리라 사료된다.
5%로조사구의 superoxide anion radical0!] 대한 소거활성이 높게나타내었고 첨가수준 50 iig/mL 이상의 농도에서는 60% 이상의 소거력을 나타내었다. 지질 과산화 억제 시험에서 EtOAc 분획물의 비조사구와 조사구 각각 14.6 ~85.6% 및 19.5-93.4%로 조사구의 지질 과산화에 대한 억제 효과가 높게 나타내었고 첨가수준 0.4 iig/mL 와 0, 8 pg/mL 농도에서는 비조사 시료에 비해 유의적으로 높은 활성을 나타내었다 (p<0.05). Comet assay를 이용한 EtOAc 분획물의 DNA 방어효과 시험에서 생쥐 림프구에서 방사선에 의한 DNA 외가닥 절단 정도를 측정한 결과 TM 값은 정상대조군에서 3.
또한 감마선 조사(100 kGy)한 EtOAc 분획물의 색상 변화는 명도(L값) 및황색도(b값)의 경우 조사 후 증가한 반면, 적색도(a값)는 감소하였다. 총 페놀 함량은 비조 사구와 조사구 각각 865 및 1195 mg/g으로 조사 후 유의적인 차이를 보였다(p<0.05). Superoxide anion radical 소거 활성 시험에서 EtOAc 분획물의 비조사구와 조사구 각각 16.
평가시험으로서 소목 용매 순차 분획물과 선정된 EtOAc 분획물에 감마선을 조사(100 kGy)후 DPPH 라디칼 소거활성에서 4가지유기 용매 분획 물(chloroform, ethylacetate, butanol, H2O) 중 EtOAc 분획물의 전자공여 능 IC50 값이 비조사구와 조사구 각각 0.71 및 0.61 ng/mL로 현저히 높았으며, 긱비조사구와조사구 긱斗 38.5 ~91.5% 및 45.7 ~94.8%의 라디칼 소거활성을 보여 조사구의 활성이 높게 나타났다. 또한 감마선 조사(100 kGy)한 EtOAc 분획물의 색상 변화는 명도(L값) 및황색도(b값)의 경우 조사 후 증가한 반면, 적색도(a값)는 감소하였다.
후속연구
이러한 결과는 소목의 구성성분 중 brazilein, brazilin, gallic acid, quercetin 같은 다양한 페놀성 화합물과 플라보노이드의 배당체들이 방사선 조사에 의해 이탈됨에 따른 페놀 함량이증가하여 항산화 활성도 향상됨을 확인할 수 있었다. 따라서소목 추출물에 감마선 조사기술을 이용한다면 항산화 활성의 향상과 색택 개선 등 산업적으로 활용도가 높은 천연소재를 제조할 수 있으리라 사료된다.
한편 방사선 조사는 식품 및 소재의 부패방지, 제품의 안전성 및 보존성 향상의 효과가 보고되어 식품뿐만 아니라제약, 의료 및 화장품과 같은 공중보건 산물에 널리 사용되며또한 감마선 조사기술은 잔류 독성 이 전혀 없고 식품원래의품질을 유지하면서 여러 가지 긍정적인 효과가 보고된 바있고, 가공 공정 및 기능성 향상까지 이용범 위가 확대되고있는 추세로 앞으로도 식품 산업의 여러 분야에 효과적으로활용할 수 있을 것으로 판단된다. 특히 최근에는 천연 추출물에 감마선 조사를 응용하여 첨가제 등으로 사용하기 에 바람직하게 색택을 밝고 투명하게 변화시키면서 본래 가지고있던 생리활성은 유지할 수 있다는 연구결과가 보고되었으며, 이의 공중 보건 제품 소재로서 활용도 진행 중에 있다.
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