생분해에 의한 용존 자연유기물질 분광특성 및 Pyrene 결합반응성 변화 Changes in Spectroscopic Characteristics and Pyrene Binding Reactivities of Dissolved Organic Matters By Biodegradation원문보기
본 연구에서는 낙엽과 토양에서 추출한 용존 자연유기물질(DOM)을 대상으로 생분해 과정 중 변화하는 분광특성과 pyrene 결합 반응성을 조사하였다. 유기물질 특성 변화 분석을 위해 용존 유기탄소(DOC), 용존 자연유기물질 내 방향족 탄소성분을 나타내는 고유흡광도(Specific UV absorbance: SUVA), synchronous 형광 스펙트럼과 유기탄소결합계수(pyrene organic carbon-normalized binding coefficient: K$_{oc}$) 분석을 실시하였다. 3주간의 배양기간 동안 낙엽 추출 DOM과 토양 DOM의 DOC는 각각 61%, 51% 감소하였다. 배양 전과 후의 분광특성을 비교해 보면 단백질/아미노산 계 형광특징(PLF)은 점차 감소된 반면 SUVA, 펄빅산계 형광 특징(FLF)과 휴믹산 계 형광 특징(HLF)은 점차 증가하였다. 이러한 자연유기물질의 분광특성 변화는 생분해 과정을 통해 휴믹화가 진행되며 자연유기물질 내 비방향족 생분해성 탄소성분이 단단한 구조의 방향족 탄소구조로 변화됨을 시사한다. SUVA 값과 유기오염물질과의 결합정도를 나타내는 K$_{oc}$ 값 사이에서는 시료의 종류와 상관없이 1차 상관관계(r = 0.97)를 보여 주어 생분해가 진행되는 동안 방향족 탄소구조 분포가 자연유기물질의 소수성 오염물질과의 결합 정도에 큰 영향을 미침을 보여주었다. 또한 형광특징 중 FLF와 HLF가 K$_{oc}$ 값과 높은 상관관계를 보였으며 자연유기물질의 기원에 따라 다른 상관관계식을 보여주었다. 본 연구를 통해 생분해가 진행되는 동안 자연유기물질 성분변화 및 소수성 유기오염물질의 거동 예측에 자연유기물질의 분광특성이 좋은 모니터링 지표로 사용될 수 있음을 보여 주었다.
본 연구에서는 낙엽과 토양에서 추출한 용존 자연유기물질(DOM)을 대상으로 생분해 과정 중 변화하는 분광특성과 pyrene 결합 반응성을 조사하였다. 유기물질 특성 변화 분석을 위해 용존 유기탄소(DOC), 용존 자연유기물질 내 방향족 탄소성분을 나타내는 고유흡광도(Specific UV absorbance: SUVA), synchronous 형광 스펙트럼과 유기탄소결합계수(pyrene organic carbon-normalized binding coefficient: K$_{oc}$) 분석을 실시하였다. 3주간의 배양기간 동안 낙엽 추출 DOM과 토양 DOM의 DOC는 각각 61%, 51% 감소하였다. 배양 전과 후의 분광특성을 비교해 보면 단백질/아미노산 계 형광특징(PLF)은 점차 감소된 반면 SUVA, 펄빅산계 형광 특징(FLF)과 휴믹산 계 형광 특징(HLF)은 점차 증가하였다. 이러한 자연유기물질의 분광특성 변화는 생분해 과정을 통해 휴믹화가 진행되며 자연유기물질 내 비방향족 생분해성 탄소성분이 단단한 구조의 방향족 탄소구조로 변화됨을 시사한다. SUVA 값과 유기오염물질과의 결합정도를 나타내는 K$_{oc}$ 값 사이에서는 시료의 종류와 상관없이 1차 상관관계(r = 0.97)를 보여 주어 생분해가 진행되는 동안 방향족 탄소구조 분포가 자연유기물질의 소수성 오염물질과의 결합 정도에 큰 영향을 미침을 보여주었다. 또한 형광특징 중 FLF와 HLF가 K$_{oc}$ 값과 높은 상관관계를 보였으며 자연유기물질의 기원에 따라 다른 상관관계식을 보여주었다. 본 연구를 통해 생분해가 진행되는 동안 자연유기물질 성분변화 및 소수성 유기오염물질의 거동 예측에 자연유기물질의 분광특성이 좋은 모니터링 지표로 사용될 수 있음을 보여 주었다.
Changes in spectroscopic characteristics and pyrene binding coefficients of terrestrial dissolved organic matters(DOM) were investigated during microbial incubation. The incubation studies were conducted for 21 days using a leaf litter DOM and a soilderived DOM with an inoculum from a river. The dis...
Changes in spectroscopic characteristics and pyrene binding coefficients of terrestrial dissolved organic matters(DOM) were investigated during microbial incubation. The incubation studies were conducted for 21 days using a leaf litter DOM and a soilderived DOM with an inoculum from a river. The dissolved organic carbon(DOC), the specific UV absorbance(SUVA), the synchronous fluorescence spectra, and the pyrene organic carbon-normalized binding coefficient(K$_{oc}$) of the DOM were measured at the incubation days of 0, 3, 7, 14 and 21. After the 21-day incubation, DOC were reduced to 61% and 51% of the original concentrations of the litter DOM and the soil-derived DOM, respectively. Comparison of the spectroscopic characteristics before and after the incubation revealed that the SUVA, the fulvic-like fluorescence(FLF), the humic-like fluorescence(HLF) of the different DOM were enhanced by the incubation whereas the protein-like fluorescence(PLF) was reduced. This indicates that more aromatic and humic-like compounds were enriched during the biodegradation process while biodegradable and weak carbon structures were depleted. Irrespective of the DOM sources, SUVA values showed a positive relationship with pyrene K$_{oc}$ with a correlation coefficient of 0.97. The FLF and HLF also exhibited good correlations with K$_{oc}$ values although different regression equations were obtained from the different DOM. Our results suggest that the selected spectroscopic characteristics could be good estimation indices for the changes of the binding reactivity of DOM for hydrophobic organic contaminants during biodegradation process.
Changes in spectroscopic characteristics and pyrene binding coefficients of terrestrial dissolved organic matters(DOM) were investigated during microbial incubation. The incubation studies were conducted for 21 days using a leaf litter DOM and a soilderived DOM with an inoculum from a river. The dissolved organic carbon(DOC), the specific UV absorbance(SUVA), the synchronous fluorescence spectra, and the pyrene organic carbon-normalized binding coefficient(K$_{oc}$) of the DOM were measured at the incubation days of 0, 3, 7, 14 and 21. After the 21-day incubation, DOC were reduced to 61% and 51% of the original concentrations of the litter DOM and the soil-derived DOM, respectively. Comparison of the spectroscopic characteristics before and after the incubation revealed that the SUVA, the fulvic-like fluorescence(FLF), the humic-like fluorescence(HLF) of the different DOM were enhanced by the incubation whereas the protein-like fluorescence(PLF) was reduced. This indicates that more aromatic and humic-like compounds were enriched during the biodegradation process while biodegradable and weak carbon structures were depleted. Irrespective of the DOM sources, SUVA values showed a positive relationship with pyrene K$_{oc}$ with a correlation coefficient of 0.97. The FLF and HLF also exhibited good correlations with K$_{oc}$ values although different regression equations were obtained from the different DOM. Our results suggest that the selected spectroscopic characteristics could be good estimation indices for the changes of the binding reactivity of DOM for hydrophobic organic contaminants during biodegradation process.
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문제 정의
본 연구에서는 낙엽과 토양에서 추출한 용존 자연유기물질을 대상으로 생분해 과정 중 변화하는 분광특성과 pyrene 결합 반응성을 조사하였다. 3주간의 배양기간 동안 두 시료 내 DOC는 50% 이상 감소하였다.
본 실험에 사용된 낙엽과 토양은 하천 내 육질성 유기물을 구성하는 대표적인 유기물 기원이 되며 빗물 등에 의해 낙엽과 토양에서 침출된 유기물은 하류 하천으로 흘러가면서 생분해과정을 거치게 된다. 본 연구에서는 이러한 자연적 과정을 동일한 환경조건 내에서 재현하고자 하였다.
본 연구의 목적은 (1) 서로 다른 기원(낙엽과 토양)을 가진 자연유기물질을 대상으로 미생물 분해과정동안 변화하는 성분 및 특성을 분광측정 결과를 중심으로 관찰하고, (2) 분해과정 중 분광특성과 소수성 유기오염물(pyrene)과의 결합 반응성사이의 상관관계를 비교하는 것이다. 특히 형광 분석을 통해 얻어지는 자연유기물질의 다양한 형광지표를 사용하여 생분해에 의한 자연유기물질 특성 변화 및 오염물 결합 반응성 정도에 대한 예측 가능성을 조사하고자 한다.
본 연구의 목적은 (1) 서로 다른 기원(낙엽과 토양)을 가진 자연유기물질을 대상으로 미생물 분해과정동안 변화하는 성분 및 특성을 분광측정 결과를 중심으로 관찰하고, (2) 분해과정 중 분광특성과 소수성 유기오염물(pyrene)과의 결합 반응성사이의 상관관계를 비교하는 것이다. 특히 형광 분석을 통해 얻어지는 자연유기물질의 다양한 형광지표를 사용하여 생분해에 의한 자연유기물질 특성 변화 및 오염물 결합 반응성 정도에 대한 예측 가능성을 조사하고자 한다. 본 실험에 사용된 낙엽과 토양은 하천 내 육질성 유기물을 구성하는 대표적인 유기물 기원이 되며 빗물 등에 의해 낙엽과 토양에서 침출된 유기물은 하류 하천으로 흘러가면서 생분해과정을 거치게 된다.
제안 방법
05 M sulfuric acid를 용매로 quinine sulfate dehydrate 100 µg/L를 제조하여 형광 측정 시 여기파장과 방출파장이 각각 350와 450 nm에 해당하는 형광세기를 시료의 형광세기 값에 대해 나누어 줌으로서 모든 시료의 형광세기의 단위를 quinine sulfate equivalents(QSE)로 표준화 하였다.12) 물 분자 활동에 의해 나타나는 라만 스펙트럼과 이로 인해 생기는 장파장에서의 2차 랄리 산란(Raleigh scattering) 효과로 인한 용존 자연유기물질 형광특징 분석 방해 제거를 위해 290 nm 파장 이하의 빛을 차단하는 필터를 사용하였다. 형광 측정 전 모든 시료에 대해 흡광 광도계로 측정된 254 nm에서의 흡광도 값이 0.
자연유기물질과 결합하지 않은 pyrene의 형광세기는 여기 파장 336 nm와 방출파장 373 nm에서 가장 잘 표현되었다.5) 흡광 광도계를 사용하여 같은 여기파장과 방출파장에서 시료 내 용존 자연유기물질의 흡광도를 측정하여 pyrene 형광세기 보정을 실시하였다(inner-filter correction). 이 때 용존 자연유기물질과 결합하지 않은 용존 pyrene 농도는 용존 자연유기물질이 없는 네 가지 다른 농도의 pyrene 용액으로부터의 형광세기를 이용한 표준 검정선을 토대로 정량화하였다.
5. A correlation between the SUVA and the Koc values of the DOM samples(a litter DOM and a soil-derived DOM) during the incubation.
5,6) Pyrene Koc 값을 얻기 위해 용존 자연유기물질의 농도는 15 mg C/L 이하가 되도록 하였으며 그 이상일 경우 희석하여 사용하였다. Koc 값은 용액의 이온화세기와 pH에 영향을 받을 수 있으므로 용액의 이온화 세기와 pH를 각각 0.1 M과 7.0이 되도록 NaCl과 0.1 N HCl 용액을 사용하여 조절하였다.14) Pyrene 농축용액은 메탄올을 용매로 사용하여 제조하였다(60 mg/L).
Koc 실험을 위해 pyrene 농축용액 일부를 마이크로실린지를 사용하여 준비된 시료에 주입하여 시료의 최종 pyrene 농도가 12 µg/L이 되도록 하였다.
1% 이하로서 co-solvent 영향을 충분히 배제하였다. Pyrene과 시료가 충분히 섞이도록 15분 동안 교반시키고 평형 상태가 되도록 한 후 형광측정을 실시하였다. 자연유기물질과 결합하지 않은 pyrene의 형광세기는 여기 파장 336 nm와 방출파장 373 nm에서 가장 잘 표현되었다.
두 가지 기원의 용존 자연유기물질에 대해 생분해 과정 동안 얻어지는 형광특징과 Koc 값 사이의 상관관계를 비교 하였다(Table 2). 낙엽 시료의 경우 앞에서 제시한 네 가지 형광특징에 대해 그 상관계수(r)는 0.
두 가지 기원의 용존 자연유기물질에 대해 생분해가 진행되는 동안 pyrene Koc 값과 SUVA간의 상관관계를 조사 하였다(Fig. 5). 유기물 기원에 상관없이 두 지표 사이에서 공통적인 1차 상관관계식을 얻을 수 있었으며 그 상관성이 아주 높았다(r = 0.
두 시료의 synchronous 형광스펙트럼에서 나타난 피크 값과 세 피크 값에 대한 FLF의 상대적인 비율(Relative Fulvic-like fluorescence; RFLF)을 배양시간별로 비교하였다(Table 1). 낙엽 시료의 경우, PLF는 2주의 배양기간 동안 96% 감소하였고 이후 더 이상의 감소를 보이지 않은 반면 FLF 및 HLF는 3주 동안 지속적으로 증가하는 경향을 보였다.
또한 0.05 M sulfuric acid를 용매로 quinine sulfate dehydrate 100 µg/L를 제조하여 형광 측정 시 여기파장과 방출파장이 각각 350와 450 nm에 해당하는 형광세기를 시료의 형광세기 값에 대해 나누어 줌으로서 모든 시료의 형광세기의 단위를 quinine sulfate equivalents(QSE)로 표준화 하였다.
미생물 배양에 따른 용존 자연유기물질 특성 변화를 관찰하기 위한 용존 유기탄소 농도와 고유 흡광도 측정에는 각각 총 유기탄소 분석기(TOC Analyzer, Shimadzu V)와 흡광 광도계(Evolution 60, Thermo Scientific)를 사용하였다. 또한 형광 측정과 유기탄소결합계수(Koc)를 구하기 위해 형광 분광계(Luminescence spectrometer, Perkin-Elmer LS-50B) 를 사용하였다. 측정 시 형광 분광계의 여기파장과 방출파장 슬릿은 각각 10으로 고정시켰다.
미생물 배양에 따른 용존 자연유기물질 특성 변화를 관찰하기 위한 용존 유기탄소 농도와 고유 흡광도 측정에는 각각 총 유기탄소 분석기(TOC Analyzer, Shimadzu V)와 흡광 광도계(Evolution 60, Thermo Scientific)를 사용하였다. 또한 형광 측정과 유기탄소결합계수(Koc)를 구하기 위해 형광 분광계(Luminescence spectrometer, Perkin-Elmer LS-50B) 를 사용하였다.
배양 기간 동안 3, 7, 14, 21일에 시료분석을 실시하였으며 각 날짜 별로 3개의 동일한 시료를 준비해 실험오차를 고려하였다. 미생물 접종 후 즉시 같은 방법으로 시료 분석을 실시하여 미생물 분해 직전(0일째) 시료도 포함하였다. 모든 분석 전에는 배양시료를 0.
측정 시 형광 분광계의 여기파장과 방출파장 슬릿은 각각 10으로 고정시켰다. 배경용액으로부터 생길 수 있는 고유 형광특성을 고려하기 위해 매 측정 시마다 3차 증류수를 사용하여 형광측정을 실시하고 시료의 형광세기로부터 이를 차감 하였다. 또한 0.
산소주입을 위해 각 플라스크의 입구를 열어 매일 흔들어 주었다. 배양 기간 동안 3, 7, 14, 21일에 시료분석을 실시하였으며 각 날짜 별로 3개의 동일한 시료를 준비해 실험오차를 고려하였다. 미생물 접종 후 즉시 같은 방법으로 시료 분석을 실시하여 미생물 분해 직전(0일째) 시료도 포함하였다.
0으로 조절하였다. 배양 기간 동안 접종된 미생물에 대한 영양분 제한 가능성을 고려하여 최종시료에 C:N:P의 질량비율이 30 : 10 : 3이 되도록 NH4NO3(28.6 mg/L)와 K2HPO4(16.9 mg/L)을 넣은 후 멸균된 100 mL 삼각 플라스크를 준비하여 각 플라스크에 시료를 60 mL씩 옮겨 담았다. 미생물 접종을 위한 시료는 중랑천의 하천수를 대상으로 하였으며 5 µm 공극 유리섬유 필터(55 mm, Advantec)를 이용하여 여과 한 후 0.
배양에 따른 각 시료의 synchronous 형광스펙트럼의 특징을 비교하였다(Fig. 3). 일반적으로 300 nm 이하의 파장에서 나타나는 피크는 단백질/아미노산 계 형광특성으로 알려져 있으며 350 nm 근처에서 나타나는 피크를 펄빅산 계 형광특성, 350 nm 이상의 파장에서 나오는 피크는 휴믹산과 관련된 형광 특성으로 구분할 수 있다.
논토양은 수분이 많은 진흙을 대상으로 하였다. 시료 내 용존 유기물질을 추출하기 위해 우선 낙엽을 통풍이 잘 되는 장소에서 충분히 건조시킨 후 큰 나뭇가지나 눈에 보이는 고형물 등을 제거 한 후에 1 cm2 넓이로 잘랐다. 이후 coffee grinder를 사용하여 자른 낙엽을 갈아서 시료 질량 당 많은 양의 자연유기물질이 추출될 수 있도록 하였다.
5) 흡광 광도계를 사용하여 같은 여기파장과 방출파장에서 시료 내 용존 자연유기물질의 흡광도를 측정하여 pyrene 형광세기 보정을 실시하였다(inner-filter correction). 이 때 용존 자연유기물질과 결합하지 않은 용존 pyrene 농도는 용존 자연유기물질이 없는 네 가지 다른 농도의 pyrene 용액으로부터의 형광세기를 이용한 표준 검정선을 토대로 정량화하였다.
시료 내 용존 유기물질을 추출하기 위해 우선 낙엽을 통풍이 잘 되는 장소에서 충분히 건조시킨 후 큰 나뭇가지나 눈에 보이는 고형물 등을 제거 한 후에 1 cm2 넓이로 잘랐다. 이후 coffee grinder를 사용하여 자른 낙엽을 갈아서 시료 질량 당 많은 양의 자연유기물질이 추출될 수 있도록 하였다. 토양 시료는 건조 후 180 µm 공극 체를 사용하여 통과된 입자만 유기물 추출에 사용하였다.
대상 데이터
미생물 접종을 위한 시료는 중랑천의 하천수를 대상으로 하였으며 5 µm 공극 유리섬유 필터(55 mm, Advantec)를 이용하여 여과 한 후 0.2 µm 멤브레인 필터를 사용하여 접종액을 10배 농축하였다.
본 실험을 위해 사용된 낙엽과 논토양은 각각 서울 근교 수락산 산림지역과 대전시 인근에서 채취하였다. 낙엽은 활엽수이며 표토층과 그 밑층에 쌓인 낙엽을 섞어 균등히 하였다.
소수성 오염물 결합성을 얻기 위해 pyrene(Aldrich, 99.9%)을 대표 오염물질로 사용하였다. Pyrene은 용존 자연유기물질과 유기 오염물간의 결합 반응성을 조사하는데 흔히 사용되는 화합물이다.
성능/효과
유기물질 내 소수성 부분에 해당되는 휴믹물질은 난분해성 물질과 가장 관련이 깊다고 알려져 있지만 휴믹물질 중 일부는 생분해될 수 있다.1) 또한 생분해성 유기물도 휴믹화 과정을 거치면서 난분해성 물질로 바뀌는 등 생분해 과정 동안 자연유기물질 내 성분 및 구조적 특성은 크게 변화할 수 있다. Ogawa 등2)은 해양 유기물 내 존재하는 난분 해성 유기물의 상당 부분이 미생물에 의해 쉽게 분해되고 변형되는 탄수화물에 기인한다고 보고한 바 있다.
3 mg/L로 감소하였다. 14일 사이 가장 큰 감소율을 보여 배양 2주 동안 총 46%가 감소하였으며 최종 3주간 51%가 감소하였다. 이와 같은 DOC 감소율은 낙엽과 토양에서 추출한 자연유기물질을 대상으로 생분해도 실험을 실시한 McDowell 등15)의 결과와 잘 일치한다.
일반적으로 단파장에서의 형광세기는 느슨한 저분자 탄소구조와 연관성이 있으며 장파장으로 갈수록 방향족과 같은 단단한 고분자 탄소구조와 관련이 있는 것으로 보고되고 있다.21) 따라서 우리의 synchronous 형광 스펙트럼 결과는 미생물 분해가 진행될수록 약한 탄소구조 성분(주로 비휴믹계 탄소 구조)은 감소하며 방향족과 같은 단단한 탄소구조가 많은 휴믹물질은 증가함을 시사한다. 이 결과는 배양시간에 따라 높아지는 SUVA 값 변화와도 잘 일치한다.
일반적으로 300 nm 이하의 파장에서 나타나는 피크는 단백질/아미노산 계 형광특성으로 알려져 있으며 350 nm 근처에서 나타나는 피크를 펄빅산 계 형광특성, 350 nm 이상의 파장에서 나오는 피크는 휴믹산과 관련된 형광 특성으로 구분할 수 있다.3) 배양 시작 전 synchronous 형광스펙트럼에서 낙엽과 토양 두 시료 모두에서 300 nm 이하인 280 nm와 290 nm 파장에서 단백질/아미노산 계 형광피크(Proteti-Like Fluorescence; PLF)가 나타났다. 또한 펄빅산 계 형광특성 영역(Fulvic-Like Fluorescence; FLF)인 345 nm 파장과 휴믹산 계 형광특성 영역 (Humic-Like Fluorescence; HLF)인 390 nm 파장 부근에서 공통적으로 형광피크가 관찰되었다.
예를 들어, 자연유기물질은 탄소순환 운반자 역할을 하고 조류나 미생물의 영양분으로 이용되어 조류 증식의 원인이 되기도 한다.3) 수질관리 측면에서는 자연유기물질은 수처리 공정 시 사용되는 염소와 반응하여 독성을 가진 염소소독부산물을 생성한다. 또한 소수성 오염물질과 결합하여 오염물의 거동, 생분해성, 독성 등에 영향을 미친다.
3) 일반적으로 PLF 농도는 유기물 내 아미노산 및 단백질 특히 미생물 대사물질인 tryptophan과 tyrosine뿐 아니라 폴리페놀의 일종인 응축된 타닌 형태의 화합물의 존재 시 높게 나타날 수 있다. 폴리페놀이 낙엽 등 식물의 침출수에 많이 존재한다는 점을 고려할 때 낙엽시료의 높은 PLF 농도를 설명할 수 있다.
분자량이 크거나 방향족 구조 성분이 많은 물질인 경우 오염물질과 더 잘 결합 하여 Koc 값은 높게 나타난다고 알려져 있다.6) 따라서 본 연구에서의 Koc 값의 증가는 생분해 과정이 진행됨에 따라 고분자의 방향족 구조가 상대적으로 많아짐이 그대로 반영된 것으로 보인다. 고분자의 방향족 탄소성분의 증가가 비방향족 탄소성분에 대한 미생물의 선택적 섭취에 의해 주도되는 것인지 혹은 생분해 과정 중 생분해성 유기물질의 휴믹화에 기인한 것인지는 추후 보다 체계적인 연구를 통해서 밝혀질 수 있을 것으로 기대한다.
유기오염물질과의 결합정도를 나타내는 Koc 값은 두 시료 모두 점차 증가하였다. SUVA 값과 Koc 값 사이에서는 시료의 종류와 상관없이 좋은 1차 상관관계(r = 0.97)를 보여 주어 생분해가 진행되는 동안에도 방향족 탄소구조 분포가 자연유기물질의 소수성 오염물질과의 결합 정도에 큰 영향을 미침을 보여주었다. 형광 특징 중 FLF와 HLF가 Koc 값과 높은 상관관계를 보였다.
McDowell 등15)은 다양한 종류의 낙엽과 토양에서 추출한 자연유기물질이 생분해되는 동안 초기 DOC의 약 50∼60%가 감소되었다고 보고하였다. 같은 연구에서 생분해율은 시료의 종류에 따라 달라졌으며 90일간 장기간 배양에도 불구하고 1주일 내에 DOC 변화율이 가장 컸다.
마찬가지로 토양 시료의 경우 7일까지 SUVA 값의 큰 변화를 보이지 않다가 7일 이후에 증가하기 시작해서 14일까지 약 30%가 증가하였다. 두 시료 모두 공통 적으로 DOC는 시간이 지남에 따라 감소한 반면 SUVA 값은 DOC와 비슷한 속도로 증가하였다. 미생물 분해동안 자연유기물질의 DOC가 SUVA 값과 역 상관관계를 가지는 것은 이전의 연구결과와 잘 일치한다.
또한 펄빅산 계 형광특성 영역(Fulvic-Like Fluorescence; FLF)인 345 nm 파장과 휴믹산 계 형광특성 영역 (Humic-Like Fluorescence; HLF)인 390 nm 파장 부근에서 공통적으로 형광피크가 관찰되었다. 두 시료 모두 미생물 분해가 진행되기 전과 3주 후를 비교해 볼 때 PLF는 미생물 분해과정 중 감소하는 반면 FLF 및 HLF는 증가하는 경향을 보였다. 일반적으로 단파장에서의 형광세기는 느슨한 저분자 탄소구조와 연관성이 있으며 장파장으로 갈수록 방향족과 같은 단단한 고분자 탄소구조와 관련이 있는 것으로 보고되고 있다.
92의 높은 수치를 보여주었다. 두 시료에서 모두 Koc 값과 가장 높은 상관계수를 보여준 형광 특징은 FLF였다. 그러나 SUVA와는 달리 시료에 따라 서로 다른 상관관계 식을 보여주었다(Fig.
두 시료의 배양 시작 전과 후를 비교해 본 결과, Koc 값은 공통적으로 증가하는 경향을 보였다(Fig. 4). 다만 낙엽시료의 초기에서 21일 배양 후 Koc 값은 4.
3) 배양 시작 전 synchronous 형광스펙트럼에서 낙엽과 토양 두 시료 모두에서 300 nm 이하인 280 nm와 290 nm 파장에서 단백질/아미노산 계 형광피크(Proteti-Like Fluorescence; PLF)가 나타났다. 또한 펄빅산 계 형광특성 영역(Fulvic-Like Fluorescence; FLF)인 345 nm 파장과 휴믹산 계 형광특성 영역 (Humic-Like Fluorescence; HLF)인 390 nm 파장 부근에서 공통적으로 형광피크가 관찰되었다. 두 시료 모두 미생물 분해가 진행되기 전과 3주 후를 비교해 볼 때 PLF는 미생물 분해과정 중 감소하는 반면 FLF 및 HLF는 증가하는 경향을 보였다.
2 mg/L로 감소하였다. 배양 3일째에 초기 농도로부터약 47%가 감소해 가장 큰 변화를 보여주었고 이후 일정 하게 감소하여 21일까지 최종 61%의 DOC가 감소하였다. 토양 시료의 경우, DOC가 초기 29.
그러나 자연유기물질의 기원에 따라 그 상관관계식은 달랐다. 본 연구를 통해 생분해가 진행되는 동안 자연유기물질 성분변화 및 소수성 유기오염물질의 거동 예측에 자연 유기물질의 분광특성이 좋은 모니터링 지표로 사용될 수 있음을 보여 주었다.
시료의 종류에 따른 형광 특징의 변화 차이는 유기물의 생성기원에 기인한 것으로 판단되며 이 결과는 바꾸어 설명하면 형광 스펙트럼 결과가 유기물의 기원 추적에 유용 하게 사용될 수 있음을 반증한다.3) 일반적으로 PLF 농도는 유기물 내 아미노산 및 단백질 특히 미생물 대사물질인 tryptophan과 tyrosine뿐 아니라 폴리페놀의 일종인 응축된 타닌 형태의 화합물의 존재 시 높게 나타날 수 있다.
예상대로 낙엽과 토양 시료에서 용존 유기탄소 농도는 생분해가 진행됨에 따라 공통적으로 감소하였다(Fig .1). 낙엽 추출 유기물 시료의 경우, 용존 유기탄소(Dissolved organic carbon; DOC) 농도는 배양 초기 31.
5). 유기물 기원에 상관없이 두 지표 사이에서 공통적인 1차 상관관계식을 얻을 수 있었으며 그 상관성이 아주 높았다(r = 0.97). 이것은 SUVA 값이 생분해가 진행되는 동안에도 소수성 유기오염물 거동을 예측하는데 유용한 지표로 사용될 수 있으며 그 예측식은 유기물 기원에 무관할 수 있음을 시사한다.
96 범위에 있어 대체로 높은 상관관계를 보여주었다. 토양 추출 유기물의경우 Koc 값에 대한 상관계수가 PLF와 RFLF에서 각각 0.11과 0.41로 낮게 나온 반면 FLF와 HLF에서는 각각 0.93과 0.92의 높은 수치를 보여주었다. 두 시료에서 모두 Koc 값과 가장 높은 상관계수를 보여준 형광 특징은 FLF였다.
12) 물 분자 활동에 의해 나타나는 라만 스펙트럼과 이로 인해 생기는 장파장에서의 2차 랄리 산란(Raleigh scattering) 효과로 인한 용존 자연유기물질 형광특징 분석 방해 제거를 위해 290 nm 파장 이하의 빛을 차단하는 필터를 사용하였다. 형광 측정 전 모든 시료에 대해 흡광 광도계로 측정된 254 nm에서의 흡광도 값이 0.1 이하가 되도록 희석하여 용존 자연유기물질 자체가 흡수하는 빛으로 생길 수 있는 영향을 최소화하였다.13) Synchronous 형광 스펙트럼 분석은 여기파장과 방출파장의 차이를 30 nm로 고정하여 파장 200 nm에서 600 nm까지 측정하였다.
97)를 보여 주어 생분해가 진행되는 동안에도 방향족 탄소구조 분포가 자연유기물질의 소수성 오염물질과의 결합 정도에 큰 영향을 미침을 보여주었다. 형광 특징 중 FLF와 HLF가 Koc 값과 높은 상관관계를 보였다. 그러나 자연유기물질의 기원에 따라 그 상관관계식은 달랐다.
후속연구
6) 따라서 본 연구에서의 Koc 값의 증가는 생분해 과정이 진행됨에 따라 고분자의 방향족 구조가 상대적으로 많아짐이 그대로 반영된 것으로 보인다. 고분자의 방향족 탄소성분의 증가가 비방향족 탄소성분에 대한 미생물의 선택적 섭취에 의해 주도되는 것인지 혹은 생분해 과정 중 생분해성 유기물질의 휴믹화에 기인한 것인지는 추후 보다 체계적인 연구를 통해서 밝혀질 수 있을 것으로 기대한다. 현재까지 용존 자연유기물질 생분해 과정동안 유기오염물의 결합 반응성을 조사한 선행 연구는 없다.
따라서 비록 자연유기물질의 형광 특징을 SUVA값과 같이 생분해동안 유기오염물질 결합 정도 변화를 예측할 수 있는 지표로 사용할 수 있지만 자연 유기물질의 기원에 따라 그 예측식이 달라질 수 있음을 보여 준다. 그러나 연구결과의 객관성을 확보하기 위해 더 많은 시료 수와 다양한 생성기원에 따른 자연유기물질을 대상으로 Koc 값과 형광측정에 대한 연구를 추가적으로 실시할 필요가 있다고 판단한다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
자연유기물질은 어떻게 구성되는가?
자연유기물질은 수 환경 내 어디에나 존재하며 다양한 생성기원과 경로로 인해 광범위한 분자량과 작용기를 가진 복잡한 혼합체 구조를 가진다. 자연유기물질은 생분해도에따라 크게 생분해성 물질과 난분해성 물질로 구성된다. 유기물질 내 소수성 부분에 해당되는 휴믹물질은 난분해성 물질과 가장 관련이 깊다고 알려져 있지만 휴믹물질 중 일부는 생분해될 수 있다.
유기물질 특성 분석법 중 형광측정법의 장점은?
일반적인 유기물질 특성 분석법으로는 총 유기 탄소(TOC) 분석법, 용존 자연유기물질 내 방향족 탄소성분을 나타내는 고유흡광도(Specific UV absorbance: SUVA), 분자량을 측정할 수 있는 size exclusion chromatography(SEC) 뿐 아니라 유기물의 구조를 분석하는 FT-IR, 13C-NMR 등이 있다. 그 중에서 유기물 내 단백질 계, 펄빅산 계, 휴믹산 계 형광특성을 구분하는 형광측정법은 그 분석방법이 간편하고 민감도가 뛰어나 수 환경 내에서 시공간적으로 변화하는 자연유기물질 특성 변화와 성분 분포를 보다 잘 이해하기 위한 실시간 모니터링 기술로 활용할 수 있다는 장점이 있다.10,11)
유기물질 특성 분석법으로는 무엇이 있는가?
일반적인 유기물질 특성 분석법으로는 총 유기 탄소(TOC) 분석법, 용존 자연유기물질 내 방향족 탄소성분을 나타내는 고유흡광도(Specific UV absorbance: SUVA), 분자량을 측정할 수 있는 size exclusion chromatography(SEC) 뿐 아니라 유기물의 구조를 분석하는 FT-IR, 13C-NMR 등이 있다. 그 중에서 유기물 내 단백질 계, 펄빅산 계, 휴믹산 계 형광특성을 구분하는 형광측정법은 그 분석방법이 간편하고 민감도가 뛰어나 수 환경 내에서 시공간적으로 변화하는 자연유기물질 특성 변화와 성분 분포를 보다 잘 이해하기 위한 실시간 모니터링 기술로 활용할 수 있다는 장점이 있다.
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