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NTIS 바로가기한국생물공학회지 = Korean journal of biotechnology and bioengineering, v.23 no.5, 2008년, pp.460 - 462
Pollens grains collected from fully dehisced lily (Lilium longiflorum) anthers were given wounds by means of shaking in the presence of aluminum oxide particles. They were transformed by infiltration with Agrobacterium cells harboring a synthetic DNA encoding signal peptide-fused epidermal growth fa...
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핵심어 | 질문 | 논문에서 추출한 답변 |
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hEGF의 기본적인 기능은 무엇인가? | 2 kD 정도의 polypeptide다. hEGF의 기본적인 기능은 상피세포의 증식, 분화 및 조직 형성 관여로써 또한 위산분비 저해작용도 갖는다(10). 현재 미생물을 이용한 rEGF 생산이 가능하며 이는 희귀단백질의약품으로 분리되어 있다. | |
6.2 kD EGF 발현을 위한 발현 vector의 제작은 어떻게 수행되었나? | 2 kD EGF 발현을 위한 발현 vector의 제작은 다음과 같이 수행하였다. 53 amino acids의 human kidney EGF precursor(11)에 근거하여 설계한 EcoRI site 및 mature EGF N-termus(Asn) code를 지니는 forward primer (5'-gccgaattcaatagt-internal 72 nt-gacaagtat-3')와 SacI site를 지니면서 forward primer와 21 nt가 겹치는 reverse primer (5'-ctagagctcttagcg-internal 72 nt-tgcatacttgtccaatgcttcaat-3')를 이용한 PCR (95℃, 30 sec; 60℃, 20 sec; 72℃, 1 min: 30 cycles)로서 합성 EGF를 제작하고 이를 T-vector에 cloning (pT-EGF)하였다. 한편, Arabidopsis thaliana의 basic chitinase signal sequence (12)를 근거로 BamHI site 및 start codon이 포함되는 forward primer (5'-ggatccatg-internal 33 nt-cta-3') 및 EcoRI site를 지니면서 forward primer와 15 nt가 겹치는 reverse primer (5'-acgaattcggc-internal 24 nt-gat-3')를 PCR (95℃, 30 sec; 60℃, 20 sec; 72℃, 1 min:30 cycles)로 증폭하고 이는 BamHI 및 EcoRI을 처리한 pT-EGF의 upstream에 삽입하여 pT-Sig-EGF를 cloning하였다. 결과는 DNA sequencing에 의하여 확인하였다. 이는 다시 BamHI 및 SacI으로 처리함으로써 얻은 0.2 kb DNA조각을 pBI121ΔGUS에 클로닝하여 Fig. 1(A)와 같은 pBI-Sig-EGF를 확보하였다. | |
대다수의 식물의 이중 수정은 어떻게 이루어지는가? | 대다수의 식물은 종자결실을 위한 꽃가루 (화분)를 생산하며 웅성 유전체를 지니는 이들 화분은 암술에 도착하는 수분과정을 거쳐 화분관이 생성되고 결국 신장되는 화분은 배주에 이르러 난세포에 sperm cell을 전달함으로써 이중 수정 (double fertilization)이 이루어진다(1, 2). 화분은 살아있는 유전자 운반체로 이용할 수 있는데 Agrobacterium 또는 particle bombardment 등을 이용하여 외래 DNA를 주입받을 수 있고 이를 인공 수분시킬 경우 새로운 품종의 식물체를 개발할 수 있다(3-5). |
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