Meloxicam-loaded microspheres were prepared with poly(D,L-lactic acid)(PLA) by a solvent-emulsion evaporation method. The morphology, particle size, drug loading capacity, drug entrapment efficiency (EE) and release patterns of drug were investigated in vitro. Various batches of micro spheres with d...
Meloxicam-loaded microspheres were prepared with poly(D,L-lactic acid)(PLA) by a solvent-emulsion evaporation method. The morphology, particle size, drug loading capacity, drug entrapment efficiency (EE) and release patterns of drug were investigated in vitro. Various batches of micro spheres with different size and drug content were obtained by changing the ratio of meloxicam to $PLA^{\circ}{\AE}s$ with different molecular weight, PLA concentration in the dispersed phase and stirring rate. Meloxicam crystals on microsphere surface, which were released rapidly and could act as a loading dose, were observed with increasing drug content. The release rate was increased with increase in drug contents and decrease in the molecular weight of PLA. Microspheres prepared with smaller molecular weight produced faster drug release rate. The release rate of meloxicam for long-acting injectable delivery system in vitro, which would aid in predicting in vivo release profile, could be controlled by properly optimizing various factors affecting characteristics of microspheres. Blood concentration-time profile of meloxicam after intramuscular injection of meloxicam-loaded microspheres in rabbits showed possibility of long term application of this system in clinical settings.
Meloxicam-loaded microspheres were prepared with poly(D,L-lactic acid)(PLA) by a solvent-emulsion evaporation method. The morphology, particle size, drug loading capacity, drug entrapment efficiency (EE) and release patterns of drug were investigated in vitro. Various batches of micro spheres with different size and drug content were obtained by changing the ratio of meloxicam to $PLA^{\circ}{\AE}s$ with different molecular weight, PLA concentration in the dispersed phase and stirring rate. Meloxicam crystals on microsphere surface, which were released rapidly and could act as a loading dose, were observed with increasing drug content. The release rate was increased with increase in drug contents and decrease in the molecular weight of PLA. Microspheres prepared with smaller molecular weight produced faster drug release rate. The release rate of meloxicam for long-acting injectable delivery system in vitro, which would aid in predicting in vivo release profile, could be controlled by properly optimizing various factors affecting characteristics of microspheres. Blood concentration-time profile of meloxicam after intramuscular injection of meloxicam-loaded microspheres in rabbits showed possibility of long term application of this system in clinical settings.
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문제 정의
수 있는 효율적인 제형개발에 이용되어 왔다.37)본 연구에서는 생체 분해성 중합체의 하나인 poly(D, L-lactic acid) (PLA)를 이용한 멜록시캄 함유 미소립자를 제조하여 지속적인 약물제어 방출을 통하여 치료효과를 높힐 수 있는 새로운 제어방출 약물전달시스템을 개발하고자 하였다. 멜록시캄을 함유하는 PLA 미소립자를 제조하여 멜록시캄이 지속적으로 방출될 수 있는 적절한 제형과 그 제조 과정 및 조건을 확립하고, PLA 미소립자로부터 멜록시캄의 방출 경향 및방출 속도를 결정하여 근육이나 피하에 주사하는 제형으로개발하고자 하였다.
내의 약물 함량 등이 있다.39, 40)본 실험에서는 이러한 인자들 중 매트릭스 중합체의 분자량, 미소립자의 크기와 약물 함량의 변화에 따른 약물 방출경향을 in Vitro에서 관찰하고 일정 기간 동안 영차 속도와 유사하게 방출되는 적절한 제형으로 최적화 하고자 하였다. 또한 제조한 미소립자를 토끼에 근육 주사하여 장기간 혈중 농도를 일정하게 유지시킬 가능성에 대한 실험을 수행하였다.
37)본 연구에서는 생체 분해성 중합체의 하나인 poly(D, L-lactic acid) (PLA)를 이용한 멜록시캄 함유 미소립자를 제조하여 지속적인 약물제어 방출을 통하여 치료효과를 높힐 수 있는 새로운 제어방출 약물전달시스템을 개발하고자 하였다. 멜록시캄을 함유하는 PLA 미소립자를 제조하여 멜록시캄이 지속적으로 방출될 수 있는 적절한 제형과 그 제조 과정 및 조건을 확립하고, PLA 미소립자로부터 멜록시캄의 방출 경향 및방출 속도를 결정하여 근육이나 피하에 주사하는 제형으로개발하고자 하였다. 이러한 지속성 제어방출 약물전달시스템은 알츠하이머 질환 환자를 치료할 때 환자의 낮은 약물복용순응도를 극복할 수 있고, 암환자 치료시 병소 부위로 약물을 집중시킬 수 있으며, 기존의 제형에 비하여 치료용량을줄일 수 있어부작용인 위장관 작용 및 전신 부작용을 감소시킬 수 있어 효과적인 약물치료를 기대할 수 있을 것으로사료된다.
제안 방법
0.05, 0.1, 0.2, 0.5, 1, 및 5 Rg/mL농도가 되도록 멜록시캄을 혈장에 가하고 450를 취하여 E-tube에 넣고, 내부표준 물질인 피록시캄 50(농도 5 ㎎/mL)를 가하였다. 전술한 방법에 의하여 각각의 시료를 처리한 후 농도를 측정하여 표준검량선을 작성하였으며, 정확도 및 정밀도를 측정하여 validation을 수행하였다.
Jasco UV detector (UV-975)와 autosampler (MIDAS)가 장착된 Jasco PU-980 HPLC 시스템을 사용하였으며, 고정상으로 가드 칼럼이 장착된 C18 column (Crestpak C18S 4.6x 150 mm, 5 pm particle size)을 사용하였고, 100 μL-loop를 이용하여 시료를 주입하였고, 355 tun에서 검출하였다. 정량한도는 signal to noise ratio를 3으로 하여 구하였다.
Solvent emulsion evaporation method에 의해 멜록시캄을함유한 PLA 미소립자를 제조하여 in vitro에서의 약물 방출 경향을 관찰하였으며, 제조된 미소립자를 토끼에 주사하여 장시간 약효를 지속시킬 수 있는 주사형 제형으로서의 가능성을 실험하였다.
이현탁액 한 방울을 sample holder에 떨어뜨린 후 laminar flow hood (Gelaire laminar flow air class 100, Gelman Instruments)에서 건조시켰다. 건조된 시료를 금으로 스퍼터링시킨 후 분석하였다. 또한 광학현미경을 사용하여 임의로관찰한 미소립자의 입자 크기를 ocular micrometerfi- 이용하여 측정하고 평균 반경을 구하였다.
SEM 분석을 위하여 다음과 같이 시료를 처치하였다. 균등한 현탁액을 얻기 위하여 소량의 미소립자를 증류수에 분산시켰다. 이현탁액 한 방울을 sample holder에 떨어뜨린 후 laminar flow hood (Gelaire laminar flow air class 100, Gelman Instruments)에서 건조시켰다.
39, 40)본 실험에서는 이러한 인자들 중 매트릭스 중합체의 분자량, 미소립자의 크기와 약물 함량의 변화에 따른 약물 방출경향을 in Vitro에서 관찰하고 일정 기간 동안 영차 속도와 유사하게 방출되는 적절한 제형으로 최적화 하고자 하였다. 또한 제조한 미소립자를 토끼에 근육 주사하여 장기간 혈중 농도를 일정하게 유지시킬 가능성에 대한 실험을 수행하였다. 미소립자의 크기는 실험 과정 중교반 속도와 중합체 농도를 변화시켜 조절하였고 중합체에 대한 사용 약물의 양을 조절하여 약물 함량을 변화시켰다.
미소립자 제조 과정 및 in vitro 약물방출 실험시 멜록시캄 농도는 355nm에서 UV로 측정하였으며, 약물동태 실험을 위한 토끼에서 혈중 멜록시캄의 농도는 문헌에서 보고된 방법 41-43)을 약간 변형하여 다음과 같이 수행하였다. Jasco UV detector (UV-975)와 autosampler (MIDAS)가 장착된 Jasco PU-980 HPLC 시스템을 사용하였으며, 고정상으로 가드 칼럼이 장착된 C18 column (Crestpak C18S 4.
미소립자에 함유된 멜록시캄의 양을 결정하기 위하여 일정량의(5 mg) 미소립자를 1 mL 아세토니트릴에 녹이고 이를 50배 희석한 후 355nm에서 UV 흡광도를 측정하여 얻은 멜록시캄의 농도로부터 미소립자 내의 약물 함량을 결정하였다. 이 때 멜록시캄을 함유하지 않은 미소립자를 사용하여 공실험을 행하였다.
또한 제조한 미소립자를 토끼에 근육 주사하여 장기간 혈중 농도를 일정하게 유지시킬 가능성에 대한 실험을 수행하였다. 미소립자의 크기는 실험 과정 중교반 속도와 중합체 농도를 변화시켜 조절하였고 중합체에 대한 사용 약물의 양을 조절하여 약물 함량을 변화시켰다.
또한 광학현미경을 사용하여 임의로관찰한 미소립자의 입자 크기를 ocular micrometerfi- 이용하여 측정하고 평균 반경을 구하였다. 미소립자의 표면 특성을관찰하기 위해 ion coater(Model IB-3, Eiko Engineering Co., Japan)를 이용하여 백금으로 피복시킨 후 주사 전자 현미경을 사용하여 관찰하였다.
분자량이 10, 000인 PLA-0010을 사용하여 약물함량이 서로 다른 세가지 batch (6.5, 13.1, 25.2%)를 제조한 후 약물 방출 경향을 비교하였으며 약물함량이 증가할수록 초기에 방출되는 약물의 burst release (초기 24시간 동안 방출된 약물의 양) 및 그 후에 방출되는 약물의 양이 많았다 (Figure 6). 약물 함량이 25.
비등점이 낮아 쉽게 증발하며 중합체와 약물을 동시에 용해시킬 수 있는 분산상으로 유기용매인 methylene chloride 를 사용하였으며, 분산상과 분산매의 비율을 1:30으로 하여다양한 batch의 미소립자를 제조하였다. 전술된 방법으로 제조한 미소립자의 형태 및 표면의 특성을 관찰하기 위하여 SEM 사진을 Figure 3에 나타내었다.
이때 sink condition을 유지하기 위하여채취한 분량에 해당되는 방출 실험액을 보충하였으며, 측정된 흡광도로부터 미소립자에서 방출된 약물의 농도를 결정하고 약물의 방출 경향을 관찰하였다. 약물 방출 실험동안방출 실험액에서의 약물의 안정성을 확인하기 위해 0.5 mg 의 멜록시캄을 0.01%의 Tween-80를 함유한 phosphate bufifered saline(pH6.8) 100mL에 가하였다. 이러한 용액을함유한 플라스크를 shaking water bath(37℃, lOOcpm)를사용하여 교반하면서 30일 간 일정 간격으로 시료를 채취하여 membrane filter (pore size 0.
용매로 사용한 methylene chloride에 가하는 멜록시캄의양을 변화시키면서 약물함량이 각각 다른 여러 종류의 미 소립자를 제조하였다. 약물과 중합체인 PLA0010의 비율을 변화시키며 비용매로 3% 젤라틴을 함유하고 있는 수상을 사용하여 500 rpm에서 제조한 다양한 미소립자 batch의 특성을 Table I에 나타내었다.
이 때 멜록시캄을 함유하지 않은 미소립자를 사용하여 공실험을 행하였다.
적절한 시간에 2mL의 시료를 취하여 흡광도를 355 nm에서 측정하였다. 이때 sink condition을 유지하기 위하여채취한 분량에 해당되는 방출 실험액을 보충하였으며, 측정된 흡광도로부터 미소립자에서 방출된 약물의 농도를 결정하고 약물의 방출 경향을 관찰하였다. 약물 방출 실험동안방출 실험액에서의 약물의 안정성을 확인하기 위해 0.
유기 용매인 methylene chloride를 완전히 증발시키기 위해 실온에서 & 시간 동안 동일한 속도로 계속 교반하였다. 이렇게 제조한 현탁액을 sintered glass disk를 통해 여과시켜 미소립자를 분리해 내고 유화제로 사용한 젤라틴을 제거하기 위해 차 가운증류수로 3-4회 세척한 후 진공 건조기에서 24시간 건조시켜 미소립자 분말을 얻었다.
Methylene chloride에 중합체를 녹인 용액(5%, w/v)에 각각 다른 일정량의 멜록시캄을 가해 sonication하여 5 mL^I 균질한 용액상태를 제조하였다. 자석교반기를 이용하여 일정한 속도로 교반하면서 l-3%(w/v) 젤라틴을 함유한 인산 완충액 (0.01 M, pH6.8) 150mL이 담긴 비이커에 위의 용액을 주사기(18 gumge)를 이용하여 서서히 적가하였다. 유기 용매인 methylene chloride를 완전히 증발시키기 위해 실온에서 & 시간 동안 동일한 속도로 계속 교반하였다.
5, 1, 및 5 Rg/mL농도가 되도록 멜록시캄을 혈장에 가하고 450를 취하여 E-tube에 넣고, 내부표준 물질인 피록시캄 50(농도 5 ㎎/mL)를 가하였다. 전술한 방법에 의하여 각각의 시료를 처리한 후 농도를 측정하여 표준검량선을 작성하였으며, 정확도 및 정밀도를 측정하여 validation을 수행하였다.
6x 150 mm, 5 pm particle size)을 사용하였고, 100 μL-loop를 이용하여 시료를 주입하였고, 355 tun에서 검출하였다. 정량한도는 signal to noise ratio를 3으로 하여 구하였다. 이동상으로 62% 완충액과 38% 아세토니트릴의 혼합액을 사용하였으며, 유속은 1.
제조과정 중 분산상에 가하는 중합체의 농도를 변화시킴으로써 입자크기가 서로 다른 미소립자를 얻었다(Table II). 가해주는 멜록시캄의 농도를 1.
진행하였다. 첫 번째 그룹은 증류수에 멜록시캄(5mg/kg)을 경구로 투여하였으며, 두 번째 그룹은 증류수에 현탁시킨 멜록시캄 미 소립자 0.5 mL(멜록시캄으로 5mg/kg)< 뒷다리 근육에 주사하였다. 채혈은 토끼의 귀정맥으로부터 적절한 시간에 1.
평균 분자량이 서로 다른 PLA-0010, PLA-0015, PLA- 0020의 중합체를 사용하여 제조한, 약물함량과 크기가 서로 동일한 세 batch의 약물 방줄경향을 비교하였다. 사용한 중합체의 분자량이 작을수록 빠른 약물 방출속도를 나타내었으며 분자량이 10, 000인 경우에 15, 000이나 20, 000의 경우보다 약물방출이 신속하였다(Fig.
6분을나타내었으며, 혈장 성분과의 간섭현상이 없었다. 표준검량선 작성을 위하여 전술한 동일한 방법으로 추출한 다음 각각의 시료 IOOrL를 주입하여 크로마토그램을 얻었다. 이러한 방법을 6개의 시료에 대해 반복하였으며, 평균회수율은 83.
대상 데이터
Baker Inc.(NJ, USA)사의 HPLC grade를 사용하였으며 본 연구에서 사용된 이외의 모든 시약은 특급 또는 일등품을 사용하였다.
Wako Pure Chemical Industries, Ltd.(Osaka, Japan)로부터 구입하여 사용하였다.
, Ltd.(Tokyo, Japan)의 제품을 사용하였다. Nitta Gelatin Inc.
6마리의 토끼를 두 그룹으로 나뉘어 실험을 진행하였다. 첫 번째 그룹은 증류수에 멜록시캄(5mg/kg)을 경구로 투여하였으며, 두 번째 그룹은 증류수에 현탁시킨 멜록시캄 미 소립자 0.
뉴질랜드 화이트 토끼(평균 체중 1.8 kg)를 사용하였으며실험시작 전 24시간 동안 절식상태에서 물만 공급하였다. 실험시작 1주일 전부터 실험 진행하는 동안 동물사의 온도는 20℃S, 습도는 70% 수준으로 유지하였고 12시간 주기로광원을 제공하였다.
멜록시캄 및 피록시캄은 Sigma Chemical Company(St. Louis, MO. USA)로부터 구입하여 사용하였으며 평균 분자량이 각각 10, 000, 15, 000, 20, 000의 PLA인 PLA-0010, PLA-0015, PLA-0020을 . Wako Pure Chemical Industries, Ltd.
본 연구 수행에 이용된 주요 기기와 기구는 spectrophoto- meter(Shimadzu UV-1201), Jasco PU-980 HPLC system, shaking water bath(KMC-1205S W1, Vision), sonicator (Branson 1200, Branson Ultrasonics), 자석교반기 (Coming), sintered glass filter(36060FNL, 3G4, Iwaki Glass Com pany), optical microscope(Nikon Alphaphot-2 YS2) with eyepiece micrometer disc(Nikon, MBM12100) 등이었다.
정량한도는 signal to noise ratio를 3으로 하여 구하였다. 이동상으로 62% 완충액과 38% 아세토니트릴의 혼합액을 사용하였으며, 유속은 1.0 mL/min이었고, 사용 전 초음파 bath에서 30분 동안 가스를 제거하였다. 완충액은 170mmol의 sodium acetate를 증류수에 녹이고 빙초산으로 pH를 3.
7%로 재현성이 있는 것으로나타났다. 정량방법의 linearity를 결정하기 위하여 멜록시캄의 농도가 0.05-5 μg/mL인 6개의 표준시료를 사용하였으며 , 이러한 방법으로 작성된 검량선의 식은, 피크의 넓이비 =0.013x농도+0.011 이었으며, r2은 0.9954이었다. 이러한농도범위에서, 일내변동계수 (C.
3000g에서 20분간 원심분리시킨 후 상징액 100 μL를 HPLC에 주사하여 정량하였다. 혈장단백질 침전용시약으로 아세토니트릴과 perchloric acid(70%)를 l:l(v/v)로혼합한 액을 사용하였다.
데이터처리
건조된 시료를 금으로 스퍼터링시킨 후 분석하였다. 또한 광학현미경을 사용하여 임의로관찰한 미소립자의 입자 크기를 ocular micrometerfi- 이용하여 측정하고 평균 반경을 구하였다. 미소립자의 표면 특성을관찰하기 위해 ion coater(Model IB-3, Eiko Engineering Co.
이론/모형
멜록시캄을 함유한 미소립자의 제조는 수중유상 유제를 사용하고 용매-증발법에 의하여 다음과 같이 제조하였다.4) PLA를 비등점이 낮아 쉽게 증발하며 중합체와 멜록시캄을동시에 용해시킬 수 있는 분산상으로 methylene chloride(b.
흔하게 사용되는 방법중의 하나이다. 본 실험에서는 난용성 약물인 멜록시캄 함유 미소립자 제조에 이 방법을 이용하였다. 그러나 이 방법은 수용성인 약물에 대해서는 낮은 encapsulation efficiency 때문에 적합하지 않다.
제조된 미소립자의 형태, 표면의 특성을 관찰하기 위하여 scanning electron microscope(SEM)을 사용하였다. SEM 분석을 위하여 다음과 같이 시료를 처치하였다.
성능/효과
있다.3) 이러한 제어 방출형 약물전달시스템의 하나로 중합체를 이용한 저장형 약물전달시스템이 있으며, 이것은 다양한중합체막 내에 약물을 봉입시킨 마이크로캡슐형과 중합체 매트릭스에 약물입자를 균질한 상태로 분산시킨 매트릭스 형으로 분류할 수 있다. 미소립자는 매트릭스형에 속하는 작은입자로서 비경구 투여경로인 근육이나 피하주사로 활용할 수있는 지속형 제어방출 약물전달시스템의 하나이다.
제조하였다.4) PLA를 비등점이 낮아 쉽게 증발하며 중합체와 멜록시캄을동시에 용해시킬 수 있는 분산상으로 methylene chloride(b.p. 39.5℃)를 사용하였으며, 분산상과 분산매의 비율을 1:30으로 하여 다양한 batch의 미소립자를 얻었다. Methylene chloride에 중합체를 녹인 용액(5%, w/v)에 각각 다른 일정량의 멜록시캄을 가해 sonication하여 5 mL^I 균질한 용액상태를 제조하였다.
미소립자는 매트릭스형에 속하는 작은입자로서 비경구 투여경로인 근육이나 피하주사로 활용할 수있는 지속형 제어방출 약물전달시스템의 하나이다.4)미소립자의 매트릭스 중합체로 생체내 비분해성 중합체를 사용할경우, 시스템으로부터의 약물 방출은 중합체 매트릭스를 통한 단순 확산에 의해서 조절이 되며, 이때 방출 시간이 경과함에 따라 약물의 depletion zone이 증가하여 약물 방출속도가 감소하여 영차의 방출 경향을 갖는 적절한 제형으로 설계하는 것이 쉽지 않다. 또한 약물방출이 완료된 후에도 체내에 남게 되어 수술을 통해 제거해야 하는 등의 단점을 갖고 있다.
입자 크기가 작을수록 방출 실험액과 접촉하는 전체 표면적이 증가하여 실험액의 유입에 의한 중합체 매트릭스의 붕괴 정도가 증가하고 약물의 확산거리가 감소하여 약물 방출 속도가 증가하는 경향을 나타내었다.5)25시간 이후 방출된 총량은 10 ㎛ 크기의 미소립자와 30 ㎛ 크기의 미 소립자 간에만 유의성 있는 차이를 나타내었다.
멜록시캄을 경구 투여할 경우 10시간 정도 지난 후 Gnax를 나타낸 후 혈중농도가 감소하여 약 30시간 후 검출되지 않았다. 경구투여하였을 때와 비교하여 미소립자에 봉입하여 근육주사할 경우 근육내에서 초기에 burst release에 의한 약물의신속한 방출에 의하여 혈중농도가 상승하는 경향을 나타내었다. 그 이후 장시간에 걸쳐 일정한 혈중농도를 유지하였으며, 이것은 단순확산에 의한 약물의 방출 및 가수분해에 의하여 PLA가 분해되면서 약물이 영차 속도와 유사하게 방출되기 때문인 것으로 사료된다.
또한 이러한 생체 분해성 중합체 매트릭스 시스템에서의 약물방출은 중합체 매트릭스를 통한 분배 의존성 확산 및 중합체 매트릭스 자체가 분해되어 조절되므로 영차의 약물 방출 경향을 나타내는 지속형 약물방출에 적합한 약물전달시스템으로 개발하기에 적합하다.6)
영향을 나타내었다. 매트릭스 중합체의 분자량이 15, 000 이고 약물함량이 6.5%이며 입자 크기가 서로 다른 batch (10, 20, 30 ㎛)의 약물방출 경향을 비교하였으며 , 입자크기가 작은 경우 더 신속하게 약물이 방출되는 것이 관찰되었다. 입자 크기가 작을수록 방출 실험액과 접촉하는 전체 표면적이 증가하여 실험액의 유입에 의한 중합체 매트릭스의 붕괴 정도가 증가하고 약물의 확산거리가 감소하여 약물 방출 속도가 증가하는 경향을 나타내었다.
이 때 교반속도가 감소함에 따라 수득율도 동시에 감소하였으며, 이것은 미소립자의 생성속도가 약물의 봉입율과 미소립자의 수득율에 영향을 미치기 때문이라고 사료된다. 미소립자가 생성되는 속도가 감소할 수록 미 소립자 내로 봉입되지 못하고 수상에 잔류하는 약물의 양이 증가하였고 미소립자의 매트릭스 형성에 참여하지 못하는 중합체의 양도 증가하였다.
중합체를 사용하여 제조한, 약물함량과 크기가 서로 동일한 세 batch의 약물 방줄경향을 비교하였다. 사용한 중합체의 분자량이 작을수록 빠른 약물 방출속도를 나타내었으며 분자량이 10, 000인 경우에 15, 000이나 20, 000의 경우보다 약물방출이 신속하였다(Fig. 7). 그러나 분자량이 PLA- 0015 미소립자와 PLA-0020 미소립자간의 7일 이후의 약물방출 경향은 유의성 있는 차이를 나타내지 않았다.
2%)를 제조한 후 약물 방출 경향을 비교하였으며 약물함량이 증가할수록 초기에 방출되는 약물의 burst release (초기 24시간 동안 방출된 약물의 양) 및 그 후에 방출되는 약물의 양이 많았다 (Figure 6). 약물 함량이 25.2%와 13.1%인 경우가 6.5%일 때에 비해 burst release/} 현저히 컸으며 6.5%의 약물 함량을 갖는 batch의 경우 14.7%의 burst release를 나타냈으며영차에 유사하게 지속적으로 약물을 방출하는 경향을 보였다. 그러나 30시간이 경과한 후의 총약물방출량은 약물 함량이 25.
중합체에 대한 멜록시캄의 비율이 높아질수록 약물함량이 높은 미소립자를 제조할 수 있었으며 입자의 크기는 약 10 pim 정도였다. 약물/중합체 비율을 10:90에서 30:70까지 변화시켜 약물함량이 5.7%(w/w)에서 12.39%(w/w) 정도인 미소립자를 제조할 수 있었다.
Figure 9에 미소립자내 약물함량과 중합체의 분자량에 따른 burst effect# 나타내었다. 약물함량이 증가할수록 burst release/} 증가하였으며 미소립자 제조에 사용된 PLA의 분자량이 클수록 burst release0)] 의해 방출되는 약물의 양이감소하였다. Burst release에 의해 방출되는 약물의 양을 임상적으로는 loading dose로 활용할 수 있으며 미소립자내 약물함량과 중합체의 분자량을 변화시킴으로써 burst release를조절할 수 있을 것이다.
) 나타내었다. 이 결과로 약물방출 실험을 진행하는 동안 멜록시캄이 방출 실험액에서 분해되지 않고 안정성을 유지하는 것이 확인되었다.
표준검량선 작성을 위하여 전술한 동일한 방법으로 추출한 다음 각각의 시료 IOOrL를 주입하여 크로마토그램을 얻었다. 이러한 방법을 6개의 시료에 대해 반복하였으며, 평균회수율은 83.7%이었고, 정량한도는 0.02 pig/mL이었다. 전술한 방법의 precision을 측정하기 위하여 동일한 aliquots를 사용하였으며, relative standard deviation0] 4.
5%이며 입자 크기가 서로 다른 batch (10, 20, 30 ㎛)의 약물방출 경향을 비교하였으며 , 입자크기가 작은 경우 더 신속하게 약물이 방출되는 것이 관찰되었다. 입자 크기가 작을수록 방출 실험액과 접촉하는 전체 표면적이 증가하여 실험액의 유입에 의한 중합체 매트릭스의 붕괴 정도가 증가하고 약물의 확산거리가 감소하여 약물 방출 속도가 증가하는 경향을 나타내었다.5)25시간 이후 방출된 총량은 10 ㎛ 크기의 미소립자와 30 ㎛ 크기의 미 소립자 간에만 유의성 있는 차이를 나타내었다.
02 pig/mL이었다. 전술한 방법의 precision을 측정하기 위하여 동일한 aliquots를 사용하였으며, relative standard deviation0] 4.7%로 재현성이 있는 것으로나타났다. 정량방법의 linearity를 결정하기 위하여 멜록시캄의 농도가 0.
제조 과정 중 수중유상 유제화와 유기용매의 증발을 위한교반속도의 조절, 분산상에 가해주는 PLA와 약물의 양 등을 조절하여 약물함량과 크기가 각각 다른 다양한 미소립자를 얻을 수 있었다. 제조한 미소립자의 약물 함량과 크기, 중합체의 분자량 등에 의해 약물 방출 경향이 변화될 수 있음을 관찰하였다.
제조과정에 사용하는 각 중합체의 분자량 차이는 제조된 미 소립자의 약물 함량, 봉입 효율 및 크기 등에 유의성 있는 영향을 미치지 않았다(Data not shown).
얻을 수 있었다. 제조한 미소립자의 약물 함량과 크기, 중합체의 분자량 등에 의해 약물 방출 경향이 변화될 수 있음을 관찰하였다. 초기의 burst release를 loading dose로 활용하고, 그 후에 서서히 지속적으로 약물이 방출되는 경향을이용하여 비스테로이드성 항염증제인 멜록시캄의 지속형 제어방출 약물전달시스템으로 개발하는 것이 가능하리라 사료된다.
약물과 중합체인 PLA0010의 비율을 변화시키며 비용매로 3% 젤라틴을 함유하고 있는 수상을 사용하여 500 rpm에서 제조한 다양한 미소립자 batch의 특성을 Table I에 나타내었다. 중합체에 대한 멜록시캄의 비율이 높아질수록 약물함량이 높은 미소립자를 제조할 수 있었으며 입자의 크기는 약 10 pim 정도였다. 약물/중합체 비율을 10:90에서 30:70까지 변화시켜 약물함량이 5.
후속연구
멜록시캄을 함유하는 PLA 미소립자를 제조하여 멜록시캄이 지속적으로 방출될 수 있는 적절한 제형과 그 제조 과정 및 조건을 확립하고, PLA 미소립자로부터 멜록시캄의 방출 경향 및방출 속도를 결정하여 근육이나 피하에 주사하는 제형으로개발하고자 하였다. 이러한 지속성 제어방출 약물전달시스템은 알츠하이머 질환 환자를 치료할 때 환자의 낮은 약물복용순응도를 극복할 수 있고, 암환자 치료시 병소 부위로 약물을 집중시킬 수 있으며, 기존의 제형에 비하여 치료용량을줄일 수 있어부작용인 위장관 작용 및 전신 부작용을 감소시킬 수 있어 효과적인 약물치료를 기대할 수 있을 것으로사료된다.4,8)
제조한 미소립자의 약물 함량과 크기, 중합체의 분자량 등에 의해 약물 방출 경향이 변화될 수 있음을 관찰하였다. 초기의 burst release를 loading dose로 활용하고, 그 후에 서서히 지속적으로 약물이 방출되는 경향을이용하여 비스테로이드성 항염증제인 멜록시캄의 지속형 제어방출 약물전달시스템으로 개발하는 것이 가능하리라 사료된다.
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