포유자돈에서 돼지써코바이러스 2형이 돼지유행성설사 바이러스 감염에 미치는 영향 - II. 임상증상, 병리조직학적 검사 및 면역조직학적 검사 - Effects of porcine circovirus type 2 on the pathogenesis of porcine epidemic diarrhoea virus infection in piglets - II. Clinical sign, histopathological lesion and immunohistochemical finding -원문보기
The purpose of this study was to evaluate the effect of a subsequent infection of PCV2 on piglets with PEDV. In clinical signs, the signs observed in dual-infected with PEDV and PCV2 piglets and alone infected with PEDV piglets ranged from diarrhoea to vomiting and dehydration. Dual-infected piglets...
The purpose of this study was to evaluate the effect of a subsequent infection of PCV2 on piglets with PEDV. In clinical signs, the signs observed in dual-infected with PEDV and PCV2 piglets and alone infected with PEDV piglets ranged from diarrhoea to vomiting and dehydration. Dual-infected piglets developed signs of anorexia, vomiting and watery diarrhoea within 12 hpi. Nevertheless alone -infected piglets caused pasty diarrhea at first. In mortality, dual infections showed 25%, but alone -infections showed 8.3%, respectively. In gross findings, piglets dual-infected with PEDV and PCV2 appeared the severe findings of congestion, distension of lumen, milder curdes of undigested milk in stomach than those of single-infected piglets. In histopathological findings, piglets of dual-infection group appeared the more severe findings of villous atrophy and fusion, congesion, exfoliation, vacuolation, squamation, loss of cilia and proliferation of crypt. Significant (P<0.05) decrease in VH:CD ratio in dually infected piglets compared to piglets from alone-PEDV infections. In immunohistochemical findings, strong hybridization signals in dual-infected piglets observed moderate to severe villous atrophy or vacuolation with positive cells arranged continuously over the villi. In the lumen, exfoliated enterocytes were strongly positive in dual-infected piglets. A number of PEDV-positive cells in dual-infected pigs were significantly higher than that in alone PEDV-infected piglets.
The purpose of this study was to evaluate the effect of a subsequent infection of PCV2 on piglets with PEDV. In clinical signs, the signs observed in dual-infected with PEDV and PCV2 piglets and alone infected with PEDV piglets ranged from diarrhoea to vomiting and dehydration. Dual-infected piglets developed signs of anorexia, vomiting and watery diarrhoea within 12 hpi. Nevertheless alone -infected piglets caused pasty diarrhea at first. In mortality, dual infections showed 25%, but alone -infections showed 8.3%, respectively. In gross findings, piglets dual-infected with PEDV and PCV2 appeared the severe findings of congestion, distension of lumen, milder curdes of undigested milk in stomach than those of single-infected piglets. In histopathological findings, piglets of dual-infection group appeared the more severe findings of villous atrophy and fusion, congesion, exfoliation, vacuolation, squamation, loss of cilia and proliferation of crypt. Significant (P<0.05) decrease in VH:CD ratio in dually infected piglets compared to piglets from alone-PEDV infections. In immunohistochemical findings, strong hybridization signals in dual-infected piglets observed moderate to severe villous atrophy or vacuolation with positive cells arranged continuously over the villi. In the lumen, exfoliated enterocytes were strongly positive in dual-infected piglets. A number of PEDV-positive cells in dual-infected pigs were significantly higher than that in alone PEDV-infected piglets.
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문제 정의
국내 양돈산업 뿐만 아니라 전 세계 양돈산업에 있어서 막대한 경제적 손실을 주고 있는 돼지 전신성 질병인 PCV2와 포유자돈 소화기질병 인 PEDV과의 상관관계를 구명하고자 감염실험을 실시하여 다음과 같은결과를 얻었다.
이루어지지 않고 있다. 따라서 국내에서 분리된 PEDV와 PCV2를 초유를 섭취한 일반 포유자돈에 감염시킨 다음 미생물학적, 병리학적 검사를 통하여 PCV2가 PED에 미치는 영향을 구명하고자 실시하였다.
더불어 PCV2는 포유자돈이 PEDV 감염의 과정과 연관된 것으로 제기되었다(Jung 등, 2006). 본 연구에서는 국내 뿐만 아니라 전 세계적으로 문제를 일으키는 PCVD 인 PCV2와 돼지 유행성 설사병인 PEDV 의 복합감염에 대한 병인을 구명하기 위하여 포유자돈에 PEDV와 PCV2를 단독 또는 복합으로 접종하여 경시적으로 임상검사, 병리학적 검사사 및 면역조직학적검사를 실시하였다.
제안 방법
PEDV 또는 PCV2를 단독감염 또는 복합감염시 소장에서 PEDV의 항원을 검출하고자 십이지장, 공장, 회장을 면역 조직화학염색을 실시하였다(Table 3) (Fig. 17-28). PEDV를 공격접종한 실험 I군에서 공격접종 24시간 후 2두를 부검시 1두의 십이지장, 공장, 회장의융모 상피세포에서 약한 반응을 보였으나 36시간과 48 시간 후 2두를 부검시에 모두 십이지장, 공장, 회장의융모 상피세포에서 강한 반응을 보였다.
PEDV의 항원을 분포 알아보기 위하여 십이지장, 공장, 회장을 면역조직화학적 검사를 하였다. 포르말린에고정된 소장의 각 부위별 조직을 통상적으로 파라핀에포매시킨후 4|im 두께로 잘라서 3 ~ aminopropyltrie- thoxysilane(Sigma)으로 coating 처리된 슬라이드에 부착시켜 냉동아세톤으로 2분간 처리하여 건조시켰다.
-Text 1). 각 실험군에 3일령때부터 덱사메타손을 3ml/두씩 매일 근육주사 실시하였다. 실험자돈은 PEDV를 공격접종 24시간 후부터 12시간 간격으로 경정맥에서 채혈하였고 항문에서 분변채취 하였다.
병리학적 검사에서 PEDV와 PCV2를 복합접종한 실험 II군은 감염초기에 단독접종군 비해 융모:음와 길이의 비율이 더 낮게 보였고 감염과정에서 단독접종군비해 심한 병리조직학적 손상을 일으켰다.
실험군은 4개군으로 구분하여 실험 I, II군은 12두씩, 실험 m와 대조군은 각각 11두 5두씩 배치하였다. 실험 I군(group I)은 6 일령때 PEDV를 2.5ml두씩 구강 접종한 군, 실험 H군 (group II)은 3일령때 PCV2를 2.5ml/두씩 각각 비강 및근육 접종한 다음 6일령때 PEDV를 2.5ml/두씩 구강접종한 군, 실험 Ⅲ군(group Ⅲ)은 3일령때 PCV2를 2.5ml두씩 각각 비강 및 근육 접종한 군, 실험 Ⅳ.군 (group IV)은 대조군으로 멸균 생리식염수를 접종한군으로 구분하였다(Fig.
시험동물로 선발하였다. 실험군과 대조군의 포유자돈은 각각의 실험돈방에 넣어 24시간 동안 적응시킨후 3일령에 공격접종을 실시하였다. 실험군은 4개군으로 구분하여 실험 I, II군은 12두씩, 실험 m와 대조군은 각각 11두 5두씩 배치하였다.
실험군과 대조군의 포유자돈은 각각의 실험돈방에 넣어 24시간 동안 적응시킨후 3일령에 공격접종을 실시하였다. 실험군은 4개군으로 구분하여 실험 I, II군은 12두씩, 실험 m와 대조군은 각각 11두 5두씩 배치하였다. 실험 I군(group I)은 6 일령때 PEDV를 2.
실험도중 폐사되 거나 실험 종료시 2.2㎎/㎏ ketamine (Katala®, 유한양행)과 3.5㎎/㎏ xylazine (Rom-pun®, 한국바이엘)으로 안락사 시킨 후 부검을 실시하여 육안소견을 관찰하였다.
실험자돈은 PCV2, PEDV를 공격접종하기 전부터실험종료까지 체중, 구토, 설사, 식욕부진 등의 임상증상을 매일 일정한 시간에 관찰하여 기록하였다.
각 실험군에 3일령때부터 덱사메타손을 3ml/두씩 매일 근육주사 실시하였다. 실험자돈은 PEDV를 공격접종 24시간 후부터 12시간 간격으로 경정맥에서 채혈하였고 항문에서 분변채취 하였다.
육안소견으로 병변을 보이는 십이지장, 공장, 회장의조직은 10% neutral-buffered formalin에 고정하여 파라핀포매 과정을 거친 뒤 4㎛ 두께로 조직절편을 제작한 다음 hematoxylin & eosin (H&E) 염색을 실시하여 광학현미경으로 관찰하였다.
PBS로 3분씩 2회 세척한 다음 1% methyl green에 10분간 염색하였다. 증류수에서 dipping한 다음 ethanol 에 3분간씩 2회 탈수하고 xylene 에 3분간씩 2회처리하여 mounting하여 광학현미경으로 관찰하였다.
포유자돈에 PCVD 원인체의 PCV2와 포유자돈 바이러스 설사병인 PEDV를 자돈에 감염시켜 돼지써코바이러스 2형이 돼지유행성설사에 미치는 영향을 관찰하고자 임상검사, 병리학적 검사 및 면역조직화학적검사를 실시하여 다음과 같은 결론을 얻었다.
대상 데이터
PEDV는 국내에서 분리된 바이러스를 녹십자수의약품주식 회 사 연구소에서 아프 리 카원숭이 콩팥세 포(Vero cell)를 이용하여 배양한 DR13주(1.5 x IO5 TCID 50/ml)를 분양받아 사용하였고 PCV2는 국내에서 분리된바이러스를 서울대학교 수의과대학 미생물학 교실에서 돼지 신장세포주(nPK-15 cell)를 이용하여 배양한 99R주(105 TCIDKml)를 사용하였다.
산차를 고려하여 초유를 섭취한 4복의 포유자돈 40 두를 시험동물로 선발하였다. 실험군과 대조군의 포유자돈은 각각의 실험돈방에 넣어 24시간 동안 적응시킨후 3일령에 공격접종을 실시하였다.
데이터처리
실험을 통하여 얻은 결과를 통계학적 유의성 검사는SAS package (Ver. 6.12, USA)를 이용한 Mann~ Whitney U test를 실시하였다.
성능/효과
PEDV만을 단독감염시킨 실험 I군에서 공격접종 24시간 후 2두를 부검시 1두의 십이지장와 공장은 융모의가벼운 충혈, 위축을 보였고, 융모 : 음와 길이의 비율이 6~7 : 1로 관찰되었다. 36시간 후 2두를 부검시 1 두의 공장은 융모의 위축과 충혈, 수종성 변화, 가벼운섬모소실, 음와상피세포의 증식을 보였고 융모 : 음와길이의 비율이 4~5 : 1로 관찰되었다. 48시간 후 2두를 부검시 모두의 십이지장, 공장, 회장은 융모의 심한위축과 탈락 보였으며 융모 : 음와 길이의 비율이 3 : 1 로 관찰되었다.
5~6 : 1로 관찰되었다. 36시간 후 2두를 부검시 2 두의 십이지장에서 융모의 중등도 위죽과 심한 융합, 융모상피세포의 탈락, 심한 편평상피세포화와 섬모소실, 뚜렷한 음와상피세포의 증식을 보였으며 융모 : 음와 길이의 비율이 3~5 : 1로 관찰되었다. 48시간 후 2 두를 부검시 회장은 융모의 심한 위축과 융합, 상피세포의 심한 탈락, 일부 공포화, 심한도 편평상피세포화와 심한 섬모소실을 보였으며 점막층에서 술잔세포의증식이 관찰되었고 융모 : 음와 길이의 비율이 2~3 : 1 로 관찰되었다.
36시간 후 2두를 부검시 2 두의 십이지장에서 융모의 중등도 위죽과 심한 융합, 융모상피세포의 탈락, 심한 편평상피세포화와 섬모소실, 뚜렷한 음와상피세포의 증식을 보였으며 융모 : 음와 길이의 비율이 3~5 : 1로 관찰되었다. 48시간 후 2 두를 부검시 회장은 융모의 심한 위축과 융합, 상피세포의 심한 탈락, 일부 공포화, 심한도 편평상피세포화와 심한 섬모소실을 보였으며 점막층에서 술잔세포의증식이 관찰되었고 융모 : 음와 길이의 비율이 2~3 : 1 로 관찰되었다. 60시간 및 72시간 후 각 3두를 부검시공장은 융모의 심한 위축과 융합, 중등도 충혈, 상피세포의 심한 탈락과 중등도 편평상피세포화, 심한 섬모소실과 음와상피세포의 증식을 보였고, 회장은 융모의심한 위축과 융합, 충혈, 상피세포의 심한 탈락과 공포화, 심한 편평상피세포화를 보였고 융모 : 음와 길이의비율이 1~2 : 1로 관찰되었다.
36시간 후 2두를 부검시 1 두의 공장은 융모의 위축과 충혈, 수종성 변화, 가벼운섬모소실, 음와상피세포의 증식을 보였고 융모 : 음와길이의 비율이 4~5 : 1로 관찰되었다. 48시간 후 2두를 부검시 모두의 십이지장, 공장, 회장은 융모의 심한위축과 탈락 보였으며 융모 : 음와 길이의 비율이 3 : 1 로 관찰되었다. 60시간 및 72시간 후 각 3두를 부검시점막하직층에서 상피세포의 변성 및 괴사에 의한 탈락및 재생, 회장에서는 융모의 심한 위축과 융합 및 수종성 변화가 보였고 융모 : 음와 길이의 비율이 2~3 : 1 로 관찰되었다.
48시간, 60시간 및 72시간 후 각각 2, 3, 3 두를 부검시 십이지장, 회장의 융모상피세포에서 약한반응이 나타났고, 십이지장, 공장의 점막고유층과 회장의 점막고유층과 Peyer's patch의 중심부에서 중등도반응이 보였다.
48시간 후 2 두를 부검시 회장은 융모의 심한 위축과 융합, 상피세포의 심한 탈락, 일부 공포화, 심한도 편평상피세포화와 심한 섬모소실을 보였으며 점막층에서 술잔세포의증식이 관찰되었고 융모 : 음와 길이의 비율이 2~3 : 1 로 관찰되었다. 60시간 및 72시간 후 각 3두를 부검시공장은 융모의 심한 위축과 융합, 중등도 충혈, 상피세포의 심한 탈락과 중등도 편평상피세포화, 심한 섬모소실과 음와상피세포의 증식을 보였고, 회장은 융모의심한 위축과 융합, 충혈, 상피세포의 심한 탈락과 공포화, 심한 편평상피세포화를 보였고 융모 : 음와 길이의비율이 1~2 : 1로 관찰되었다. 전반적으로 PEDV에의해 융모상피세포의 공포변성과 괴사에 의한 전형적인 탈락과 위축소견은 보였고 상피세포의 재생은 관찰되지 않았다.
48시간 후 2두를 부검시 모두의 십이지장, 공장, 회장은 융모의 심한위축과 탈락 보였으며 융모 : 음와 길이의 비율이 3 : 1 로 관찰되었다. 60시간 및 72시간 후 각 3두를 부검시점막하직층에서 상피세포의 변성 및 괴사에 의한 탈락및 재생, 회장에서는 융모의 심한 위축과 융합 및 수종성 변화가 보였고 융모 : 음와 길이의 비율이 2~3 : 1 로 관찰되었다.
전반적으로 PEDV에의해 융모상피세포의 공포변성과 괴사에 의한 전형적인 탈락과 위축소견은 보였고 상피세포의 재생은 관찰되지 않았다. PCV2를 공격 접종한 실험 Ⅲ군와 대조군의 포유자돈은 십이지장, 공장, 회장에서 특이적인 PED의 병 리조직학적 변화가 관찰되지 않았다.
PCV2를 공격접종한 실험 Ⅲ군의 개별 자돈들은 소장의 장막면 혈관의 가벼운 충혈 소견 이외에는 특징적인 육안소견이 관찰되지 않았다. 또한 대조군에도별 다른 특징적 인 육안소견이 관찰되지 않았다.
같다. PEDV 공격접종군에서 공격접종 24시간 후 2두의 평균 증체는 0.06kg, 48시간 후 2두의 평균 증체는 -0.23kg, 72시간 후 2두의 평균 증체는 -0.36kg로 나타났다. PEDV와 PCV2 복합 공격 접종군에서 자돈 공격접종 24시간 후 2두의 평균 증체는 -0.
1과 같다. PEDV> 공격접종한 실험 I군의 포유자돈은 공격접종 후 1일째 또는 2일째부터 연변 또는수양성 설사를 나타내어 1~2일간 지속되었고 원기소실과 식욕감퇴는 공격접종 후 1 일부터 나타내었고 6두에서 구토 증상도 나타났으며 공격접종 후 3일에 1두가 폐사하여 8.3%(1/12)의 폐사율을 보였다.
17-28). PEDV를 공격접종한 실험 I군에서 공격접종 24시간 후 2두를 부검시 1두의 십이지장, 공장, 회장의융모 상피세포에서 약한 반응을 보였으나 36시간과 48 시간 후 2두를 부검시에 모두 십이지장, 공장, 회장의융모 상피세포에서 강한 반응을 보였다. 또한 60시간과 72시간 후 각 3두를 부검 된 실험자돈의 십이지장, 회장의 융모 상피세포에서 비교적 강한 반응을 보였으나 십이지장 점막고유층에서 미약한 반응을, 공장과회장의 점막고유층에서 미약한 반응에서 약한 반응을보였다.
5-16). PEDV만을 단독감염시킨 실험 I군에서 공격접종 24시간 후 2두를 부검시 1두의 십이지장와 공장은 융모의가벼운 충혈, 위축을 보였고, 융모 : 음와 길이의 비율이 6~7 : 1로 관찰되었다. 36시간 후 2두를 부검시 1 두의 공장은 융모의 위축과 충혈, 수종성 변화, 가벼운섬모소실, 음와상피세포의 증식을 보였고 융모 : 음와길이의 비율이 4~5 : 1로 관찰되었다.
36kg로 나타났다. PEDV와 PCV2 복합 공격 접종군에서 자돈 공격접종 24시간 후 2두의 평균 증체는 -0.10kg, 48시간 후 2두의 평균 증체는 -0.27kg, 72시간 후 2두의 평균 증체는 -0.42kg로 나타났다. PEDV와 PCV2 복합 접종군이 PEDV 단독 공격접종군에 비하여 유의성 있게 체중감소를 보였다(P< 0.
PEDV와 PCV2 복합 공격 접종한 실험 II군에서 공격접종 24시간 후 2두를 부검한 결과 위내에는 소화되지 않은 응유괴로 팽만되었고 소장내에도 소화되지 않은 응유괴가 있었으며 소장의 장막면 혈관은 암자적색으로 충혈되어 있었고, 48시간 후 2두를 부검한 결과장간막 림프절의 충혈, 소장의 가스가 차있어 심하게팽만되어 장내용물이 관찰될 정도로 장막이 얇아져 있었고, 72시간 후 폐사된 자돈 소장의 장간막 혈관의 충혈, 맹장과 결장내에는 수양성 내용물이 다량 차 있었다.
PEDV와 PCV2 복합 공격 접종한 실험 II군에서 공격접종 24시간과 36시간 후 각각 2두를 부검시 십이지장, 공장, 회장의 융모 상피세포에서 강한 반응이 나타났고, 탈락된 융모 상피세포에서도 강한 양성 반응 이관찰되었다. 48시간, 60시간 및 72시간 후 각각 2, 3, 3 두를 부검시 십이지장, 회장의 융모상피세포에서 약한반응이 나타났고, 십이지장, 공장의 점막고유층과 회장의 점막고유층과 Peyer's patch의 중심부에서 중등도반응이 보였다.
42kg로 나타났다. PEDV와 PCV2 복합 접종군이 PEDV 단독 공격접종군에 비하여 유의성 있게 체중감소를 보였다(P< 0.05). PCV2를 공격접종한 실험 Ⅲ군과 대조군의 포유자돈은 공격접종 후 실험기간동안꾸준한 증체을 나타냈다.
PEDV와 PCV2 복합 접종한 실험 II군의 포유자돈은공격접종 후 14시간 이후부터 구토를 시작하였으며 1 일째부터 심한 수양성 설사를 나타내어 2일간 지속되었으며 구토, 원기소실, 식욕절폐는 공격접종 후 1 일째부터 심하게 나타났으며 공격접종 후 2일와 3일에 3두가 폐사하여 25.0 %(3/12)의 폐사율을 보였으며 PEDV단독 감염된 실험 I군에 비하여 임상증상과 실험자돈의 폐사율의 차이가 나타났다(Table 1).
PEDV와 PCV2를 복합감염시킨 실험 II군에서 공격접종 24시간 후 2두를 부검시 십이지장, 공장, 회장은융모의 충혈, 위축을 보였고 융모 : 음와 길이의 비율이 5~6 : 1로 관찰되었다. 36시간 후 2두를 부검시 2 두의 십이지장에서 융모의 중등도 위죽과 심한 융합, 융모상피세포의 탈락, 심한 편평상피세포화와 섬모소실, 뚜렷한 음와상피세포의 증식을 보였으며 융모 : 음와 길이의 비율이 3~5 : 1로 관찰되었다.
PEDV를 공격접종한 실험 I군에서 공격접종 24시간 후 2두를 부검시 1두의 십이지장, 공장, 회장의융모 상피세포에서 약한 반응을 보였으나 36시간과 48 시간 후 2두를 부검시에 모두 십이지장, 공장, 회장의융모 상피세포에서 강한 반응을 보였다. 또한 60시간과 72시간 후 각 3두를 부검 된 실험자돈의 십이지장, 회장의 융모 상피세포에서 비교적 강한 반응을 보였으나 십이지장 점막고유층에서 미약한 반응을, 공장과회장의 점막고유층에서 미약한 반응에서 약한 반응을보였다.
또한 PCV2를 공격접종 한 실험 Ⅲ군와 대조군의 포유자돈은 십이지장, 공장, 회장에서 특이적인 PED의 병리조직학적 변화가 관찰되지 않았다.
반면에 PEDV와 PCV2를 복합감염시 킨 실험 II군에서 공격접종 24시간 후 2두를 부검시 십이지장, 공장, 회장은 융모의 충혈, 위축을 보였고 융모:음와 길이의 비율이 5~6: 1로 관찰되었으며감염초기에 복합접종군은 단독접종군에 비해 더 심한병리조직학적 손상을 일으킨 것으로 추정된다. 또한실험 중후반에서도 단독접종군에 비해 더 심한 병리조직학적 소견을 보였으며 융모 : 음와 길이의 비율도 더낮게 보였다. PEDV와 PCV2 복합감염에 의해 소장점막의 융모상피세포에 대한 PEDV 의 파괴가 더 신속히그리고 강력하게 이루어진 것으로 사료된다.
면역조직화학적 검사에서 PEDV와 PCV2 복합접종한 실험 II군은 감염초기에 PEDV 단독접종군 비해 PEDV가 많이 분포되었고 실험 후기에는 단독접종군에 비해 바이러스도 적게 분포되었다.
본 연구에서 PEDV만을 단독접종시킨 실험 I군에서 접종 24시간후 2두를 부검시 1두의 십이지장와 공장은 융모의 가벼운 충혈, 위축을 보였고, 융모:음와 길이의 비율이 6~7 : 1로 관찰되었다. 반면에 PEDV와 PCV2를 복합감염시 킨 실험 II군에서 공격접종 24시간 후 2두를 부검시 십이지장, 공장, 회장은 융모의 충혈, 위축을 보였고 융모:음와 길이의 비율이 5~6: 1로 관찰되었으며감염초기에 복합접종군은 단독접종군에 비해 더 심한병리조직학적 손상을 일으킨 것으로 추정된다. 또한실험 중후반에서도 단독접종군에 비해 더 심한 병리조직학적 소견을 보였으며 융모 : 음와 길이의 비율도 더낮게 보였다.
실험기간 동안 실험군 및 대조군의포유자돈의 분변상태, 원기, 식욕, 구토, 폐사 등 관찰된 임상증상은 Table 2와 같다. 본 연구에서 PEDV> 공격접종한 실험 I군의 포유자돈은 공격 접종 후 1 일째또는 2일째부터 설사변 또는 수양성 설사를 나타내어 1~2일간 지속되었고 원기소실과 식욕감퇴는 공격접종 후 1일째부터 나타났고 6두에서 구토 증상도 나타났으며 공격접종 후 3일째에 1두가 폐사하여 8.3%(1/12)의 폐사율을 보였다. 이에 반해 PEDV와 PCV2 를 복합접종한 실험 II군의 포유자돈은 공격접종 후 1 일째부터 심한 수양성 설사를 나타내어 2일간 지속되었으며 구토, 원기소실, 식욕절폐는 공격접종 후 1 일째부터 심하게 나타났으며 공격접종 후 2일째와 3일째에 3두가 폐사하여 25.
설사는 소장의융모상피세포가 변성, 괴사되어 융모의 위축과 탈락에따른 소화흡수장애로 인하여 장관내에서 소화되지 못하였거나 흡수되지 않은 내용물에 의해 장내 삼투압이상승하여 장관벽에서 장관내로 수분이 빠져 나오는 작용에 의하여 야기된다(황 등, 1994). 본 연구에서 PEDV만을 단독접종시킨 실험 I군에서 접종 24시간후 2두를 부검시 1두의 십이지장와 공장은 융모의 가벼운 충혈, 위축을 보였고, 융모:음와 길이의 비율이 6~7 : 1로 관찰되었다. 반면에 PEDV와 PCV2를 복합감염시 킨 실험 II군에서 공격접종 24시간 후 2두를 부검시 십이지장, 공장, 회장은 융모의 충혈, 위축을 보였고 융모:음와 길이의 비율이 5~6: 1로 관찰되었으며감염초기에 복합접종군은 단독접종군에 비해 더 심한병리조직학적 손상을 일으킨 것으로 추정된다.
충만되어 장벽이 심하게 얇아져서 장내용물이 보인다고 하였다(DeBouck 등, 1981; DeBouck과 Pen-saert, 1980; Coussement 등, 1982). 본 연구에서 PEDV와 PCV2 복합 공격 접종한 실험 II군에서 공격접종 24 시간 후 2두를 부검시 위내에는 소화되지 않은 응유괴로 팽만되어 있고 소장내에도 소화되지 않은 응유괴를함유하였으며 소장의 장막면 혈관의 암자적색으로 충혈되어 있었고, 48시간 후 2두를 부검시 장간막 림프절의 충혈, 소장의 가스가 차있어 심하게 팽만되어 장내용물이 관찰될 정도로 장막이 얇아져 있었고, 60시간 후 폐사된 자돈 소장의 장간막 혈관의 충혈, 맹장과결장내에는 수양성 내용물이 다량 차 있었다. 전반적으로 PEDV와 PCV2 복합접종군는 PEDV 단독접종군비해 감염초기에 심한 육안소견을 보였으며 감염중후기에는 유사한 육안소견을 보였다.
Kim 등(1999)은 10두의 PEDV에 감염돼지에서 면역염색을 실시하였으며 장 상피세포의 세포질에서 양성반응을 나타내었으며 양성 세포는 공장 및 회장의 위축 및 용합된 융모의 말단부 가장자리에 따라 분포하였다. 본 연구에서 소장조직내 항원의 분포를 확인하고자 파라핀 포매된 조직을 면역조직화학염색을 실시하였는데 PEDV를 단독접종한 실험 I군은 공격접종 24시간 후 2두를 부검시 1두의 십이지장, 공장, 회장의융모 상피세포에서 약한 양성 반응을 보였지만 PEDV 와 PCV2 복합 공격 접종한 실험 II군은 공격접종 24시간 후 2두를 부검시 모두의 십이지장, 공장, 회장의 융모 상피세포에서 강한 반응을 보였다. 감염초기의 복합접종군은 단독접종군에 비해 소장융모가 더 큰 손상을 받은 것으로 추정된다.
실험종료시에 부검을 실시하여 육안소견을 관찰하였던 결과는 PEDV를 공격접종한 실험 I군에서 공격접종 24시간 후 2두를 부검시 위내 소장의 장막면 혈관의 충혈이 관찰되었고, 48시간 이후 부터 2두 혹은 3 두를 부검한 결과 소장의 장막면이 암자적색으로 충혈되었고 가스가 차있으며 장간막 림프절의 충혈, 장막이 얇아져 있었고, 맹장과 결장내에는 수양성 내용물이 다량 차 있었다(Fig. 1-4).
전반적으로 PEDV와 PCV2 복합접종군는 PEDV 단독접종군비해 감염초기에 심한 육안소견을 보였으며 감염중후기에는 유사한 육안소견을 보였다. 이러한 결과는 PEDV와 PCV2 복합감염에 의해 PED의 발병을 영향을 줄 수 있음을 알 수 있었다.
0%(3/12)의 폐사율을 보였다. 이상의 결과로 볼 때 PEDV와 PCV2 복합접종한 실험 II군은 PEDV 단독접종한 실험 I군에 비해 임상증상의 가중과 폐사율이 현저히 높아지므로 PCV2 복합접종에의해 영향을 줄 수 있음을 알 수 있었다. 포유자돈의체중변화는 복합접종군는 단독감염군 비해 더 많은 감소를 보였고 심한 설사에 의한 탈수와 식육절폐에 의하여 신속한 체중 감소를 일으킨 것으로 생각된다.
이상의 결과에서 PEDV와 PCV2를 복합감염시 킨 포유자돈은 단독감염시킨 포유자돈에 비하여 심한 임상및 병리조직학적 소견을 보여 돼지써코바이러스 2형과돼지유행성 설사를 더욱 심화시키는 것으로 나타났다.
3%(1/12)의 폐사율을 보였다. 이에 반해 PEDV와 PCV2 를 복합접종한 실험 II군의 포유자돈은 공격접종 후 1 일째부터 심한 수양성 설사를 나타내어 2일간 지속되었으며 구토, 원기소실, 식욕절폐는 공격접종 후 1 일째부터 심하게 나타났으며 공격접종 후 2일째와 3일째에 3두가 폐사하여 25.0%(3/12)의 폐사율을 보였다. 이상의 결과로 볼 때 PEDV와 PCV2 복합접종한 실험 II군은 PEDV 단독접종한 실험 I군에 비해 임상증상의 가중과 폐사율이 현저히 높아지므로 PCV2 복합접종에의해 영향을 줄 수 있음을 알 수 있었다.
임상증상에서 PEDV와 PCV2 복합접종한 실험 II군는 PEDV 단독접종한 실험 II군에 비해 감염초기부터더 신속한 발병을 보였으며, 감염 전과정에서 더 심한임상증상과 현저히 높은 폐사율을 보였다.
전반적으로 PEDV와 PCV2 복합 공격 접종한 실험 II군의 포유자돈의 소장에서 PEDV의 항원분포는 PEDV를 공격접종한 실험I군와 비교시 공격접종 24시간과 36시간 후에 더 강한 양성반응을 보였으나 48시간, 60시간 및 72 시간 후에는 더 약한 양성 반응을 보였다. 또한 PCV2를 공격접종 한 실험 Ⅲ군와 대조군의 포유자돈은 십이지장, 공장, 회장에서 특이적인 PED의 병리조직학적 변화가 관찰되지 않았다.
감염초기의 복합접종군은 단독접종군에 비해 소장융모가 더 큰 손상을 받은 것으로 추정된다. 접종후 36시간, 48시간에서는 단독접종군에서 강한 양성반응을 보였지만 복합접종군은 모든의 공장, 회장에서 강한 반응을 보였으며탈락된 융모 상피세포에서도 강한 양성 반응 보였다. 접종후 60시간, 72시간의 감염후기에 복합접종군은 공장의 점막고유층에서 중등도 양성 반응을 보였으며 단독접종군에 비해 전반적으로 양성 세포의 분포가 현저하게 떨어져 있는 것으로 관찰되었다.
접종후 36시간, 48시간에서는 단독접종군에서 강한 양성반응을 보였지만 복합접종군은 모든의 공장, 회장에서 강한 반응을 보였으며탈락된 융모 상피세포에서도 강한 양성 반응 보였다. 접종후 60시간, 72시간의 감염후기에 복합접종군은 공장의 점막고유층에서 중등도 양성 반응을 보였으며 단독접종군에 비해 전반적으로 양성 세포의 분포가 현저하게 떨어져 있는 것으로 관찰되었다. 이는 복합접종군의 융모의 심함 탈락, 위축 및 융합에 의하여 소장의표면적 이 감소되어 바이 러스의 복제할 수 있는 공간이부족하므로 바이러스 양성 세포가 줄어든 것으로 생각된다
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