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문제 정의
- 따라서 식이섬유와 클로로필이 풍부하고 식이성 polyphenol 물질인 β-sitosterol, quercetin 및 kaemperol 등을 많이 함유하고[38] 있는 부추를 섭취시켜 유산소 운동 시 혈중지질과 산화스트레스 억제제로서의 항산화 효소에 미치는 영향을 구명하여 기초자료를 제공하는데 목적이 있다.
제안 방법
- Catalase는 상층액 200 μl를 정량화하여 hydrogen peroxide 와 sodium-potassium phosphate buffer pH 7.4를 기질로 하여 37°C에서 1분간 반응시킨 후 ammonium molybdate를 첨가하여 파장 405 nm에서 hydrogen peroxide와 ammonium molybdate의 황색 화합물의 흡광도를 측정하였다.
- MDA의 분석은 Oxis사(미국)의 BIOXTECHLPO-586 kit을 사용하여 sample 및 sample blank에 200 μl씩 검체를 분주하고 reagent blank에 증류수(D.W) 200 μl Tlor 분주한 후 0.5 M butylated hydroxytoluene을 10 μl씩 sample, standard, reagent blank에 분주하고 희석된 R1 reagent을 650 μl을 sample, standard, reagent blank에 각각 분주한 후 혼합하여 36% HCL 150 μl을 넣고 tube의 마개를 닫은 후 45°C에서 60분간 배양하였다.
- SOD의 활성 분석은 SOD Assay Kit-WST (Dojindo, Japan) 를 이용하여 측정하였다. sample과 blank2에 20 μl의 sample solution넣고, blank1과 blank3에는 ddH2O을 넣는다.
- 각 실험군의 실험동물은 희생하기 전 12시간 이상 절식시켜 ether 마취 후 단두하여 혈액을 채취하여 3000 rpm에서 20분간 원심분리 하였으며, 복부를 절개하여 간을 채취하였다. 채취 후 액체 질소에 급속 동결시킨 후 -70oC에 보관하여 혈중지질, MDA, SOD, CAT을 분석하였다.
- 사육은 cage 50×30×25.5 cm의 크기에 2마리씩 사육하였으며, 사육실의 온도는 22.0±1.0℃, 상대습도는 50±10%로 조절하고, 명암주기는 12시간 간격으로 유지하였다.
- 실험동물의 운동은 트레드밀(Pro-Jog EJ36GLE, Korea Hi-Tech)로 실시하였으며, 1주차에는 속도 14～15 m/min (0% grade), 주 5회, 1일 25분 실시하였고, 2주차에는 속도 15～16 m/min (0% grade), 주5회, 1일 30분으로 실시하였다. 운동기간은 총 2주간 실시하였다[4,17].
- 부추는 포항부추로서 동결 건조하여 가루로 만들어 식이에 첨가하였다. 운동군과 대조군은 일반사료(Formula-M07: 조단백 20% 이상, 조지방 7% 이상, 조섬유 7% 이하, 조회분 6%이하, Ca 0.5% 이상, P 1.0% 이상)를 공급하고, 운동+부추섭취 군과 부추섭취군은 Formula-M07사료에 부추분말 5% [30]를 첨가한 사료를 섭취하고, 물과 사료는 같은 조건으로 충분히 섭취하도록 하였으며 매일 사료의 양을 측정하였다.
- 실험동물의 운동은 트레드밀(Pro-Jog EJ36GLE, Korea Hi-Tech)로 실시하였으며, 1주차에는 속도 14～15 m/min (0% grade), 주 5회, 1일 25분 실시하였고, 2주차에는 속도 15～16 m/min (0% grade), 주5회, 1일 30분으로 실시하였다. 운동기간은 총 2주간 실시하였다[4,17].
- 각 실험군의 실험동물은 희생하기 전 12시간 이상 절식시켜 ether 마취 후 단두하여 혈액을 채취하여 3000 rpm에서 20분간 원심분리 하였으며, 복부를 절개하여 간을 채취하였다. 채취 후 액체 질소에 급속 동결시킨 후 -70oC에 보관하여 혈중지질, MDA, SOD, CAT을 분석하였다.
- 체중측정은 동물측정용 분석용 전자저울(A&D Company Limited CE, Japan)로 측정하였다.
대상 데이터
- 실험동물은 생후 4주령 Sprague Dawley계 수컷 흰쥐 24마리(Samtako, Korea)를 구입하여 1주일간 일반사료로 적응시켰다. 그룹은 유산소운동+부추섭취군(6마리), 유산소운동군(6마리), 부추섭취군(6마리), 대조군(6마리)으로 총 24마리로 구분하였다. 사육은 cage 50×30×25.
- 대조군은 19.1±3.32 U/mg protein이었다.
- 실험동물은 생후 4주령 Sprague Dawley계 수컷 흰쥐 24마리(Samtako, Korea)를 구입하여 1주일간 일반사료로 적응시켰다. 그룹은 유산소운동+부추섭취군(6마리), 유산소운동군(6마리), 부추섭취군(6마리), 대조군(6마리)으로 총 24마리로 구분하였다.
데이터처리
- 자료는 SPSS Ver 12.0 통계 package를 이용하여, 각 변인들 간에 평균 및 표준편차를 산출한 후 집단간 one-way ANOVA 를 실시하였고, 사후검증은 Duncan방법을 이용하였으며, 유의수준은 α=0.05로 설정하였다.
이론/모형
- TC, HDL-C과 TG는 효소 kit(신양화학, 서울)을 사용하여 정량화 하였다. LDL-C는 Fridewald [8]법에 따라 산출하였다.
- 간조직의 단백질 정량은 bovine scrum albumin을 표준용액으로 하여 Lowry 등[27]의 방법에 의해 측정하였다.
성능/효과
- 연구결과 TC는 집단간 유의한 차이가 없었으며, TG도 집단간 유의한 차이가 없었다. HDL-C는 유산소운동+부추섭취군, 유산소 운동군과 부추섭취군이 대조군 보다 유의하게 높았다. LDL-C는 유산소운동+부추섭취군, 유산소 운동군과 부추섭취 군이 대조군보다 유의하게 낮았다.
- HDL-C는 유산소운동+부추섭취군에서 45.3±1 .0 mg/dl으로 대조군보다 유의하게(p＜0.05) 높았으며, 유산소운동군도 44.8±11.9 mg/dl으로 대조군보다 유의하게(p＜0.05) 높았다.
- HDL-C는 유산소운동+부추섭취군, 유산소 운동군과 부추섭취군이 대조군 보다 유의하게 높았다. LDL-C는 유산소운동+부추섭취군, 유산소 운동군과 부추섭취 군이 대조군보다 유의하게 낮았다.
- TC의 농도는 유산소운동+부추섭취군에서 77.4±2.27 mg/dl이며, 유산소운동군은 73.4±2.49 mg/dl이었고, 부추섭취군은 74.9±3.98 mg/ dl, 대조군은 75.9±2.90 mg/dl으로 집단간 유의한 차이가 없었다.
- TG는 유산소운동+부추섭취군에서 32.8±7.84 mg/dl이며, 유산소운동군은 31.7±4.19 mg/dl이고, 부추섭취군은 27.2±1.81 mg/dl이고, 대조군은 33.0±4.84 mg/dl으로 집단간 유의한 차이가 없었다.
- 본 연구에서 유산소 운동과 부추섭취가 항산화 효소를 증가시켰으며 이는 식이 섬유와 클로로필이 풍부하고 polyphenol 물질인 β-sitosterol, quercetin 및 kaemperol 등을 많이 함유하고 있는 부추가 항산화력을 증가시킨 것으로 생각되며, 저강도의 유산소 운동이 항산화 효소의 활성도를 증가시키는데 더 효과적인 것으로 사료된다.
- 이는 부추에서 식이 섬유와 클로로필이 풍부하고 항혈전 성분인 adenosine 이 혈청 콜레스테롤 농도를 저하시키고, 중성지방을 감소시키는 효과가 있기 때문이다. 본 연구에서도 유산소 운동과 부추 섭취가 대조군에 비해 유의하게 감소하였다. 이는 운동으로 인해 HDL-C의 증가를 유발하였고 부추의 성분이 LDL-C 함량을 낮춘 것으로 사료된다.
- 부추섭취군은 49.8±8.87 mg/dl으로 대조군 보다 유의하게(p ＜0.01) 높았다.
- 연구결과 SOD활성도는 유산소 운동군과 부추섭취군이 대조군보다 유의하게 높았으며, CAT활성도는 유산소운동+부추 섭취군이 대조군보다 유의하게 높았다.
- 연구결과 TC는 집단간 유의한 차이가 없었으며, TG도 집단간 유의한 차이가 없었다. HDL-C는 유산소운동+부추섭취군, 유산소 운동군과 부추섭취군이 대조군 보다 유의하게 높았다.
- 연구결과 유산소 운동군과 부추섭취군이 대조군보다 MDA 농도가 유의하게 낮았다.
- 유산소운동+부추섭취군은 122.9±45.51 U/mg protein으로 대조군(p＜0.01)보다 유의하게 높았다.
- 유산소운동+부추섭취군은 20.7±1.66 U/mg protein이었고, 유산소운동군은 23.1±1.14 U/mg protein으로 대조군(p＜0.01) 보다 유의하게 높았으며, 부추섭취군은 22.8±0.93 U/mg protein으로 대조군보다 유의하게(p＜0.01) 높았다.
- 유산소운동+부추섭취군의 지질과산화물 생성은 2.67±0.93 nm/mg protein이었고, 유산소운동군은 2.01±0.53 nm/ mg protein으로 대조군보다 지질과산화물이 유의하게(p＜0.05) 낮았다.
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