[논문]GTG banding에 의한 경주지방의 무미 또는 단미 형태의 개(경주개 동경이)의 핵형분석

최석규; 성기창; 이은우; 박창은

GTG banding에 의한 경주지방의 무미 또는 단미 형태의 개(경주개 동경이)의 핵형분석
Chromosome analysis by GTG banding technique in the DongGyeongi dogs 원문보기

韓國家畜衛生學會誌 = Korean journal of veterinary service, v.33 no.2, 2010년, pp.207 - 211

최석규 (서라벌대학 애완동물보건관리과) , 성기창 (서라벌대학 애완동물보건관리과) , 이은우 (경북대학교 수의학과) , 박창은 (남서울대학교 임상병리학과)

Abstract ▼ AI-Helper

None of the numerous published canis idiogram and karyotypes has yet been generally accepted as a standard one because the dog has 76 acrocentric autosomes of similar size and shape. The karyotypes of DongGyeongi dog were analysed by conventional trypsin/Giemsa staining (GTG-banding techniques), and were compared with one another. There were no variations in karyotypes which were analysed by conventional GTG-banding techniques, but differences were observed in G-banding patterns with sapsaree (or canis familiaris strains). It is not clear that these disagreements in G-banding patterns between strains of dog were caused by chromosome polymorphism or a difference in interpretation.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

1992). 따라서 이 연구에서는 역사적 문헌 고찰에서 토종견으로 알려진(최 등, 2008) 경주지방의 무미 또는 단미 형태의 개(일명, 경주개 동경이)에서 세포 유전학적 핵형분석을 통하여 동경이의 품종 간 염색체 다변형 현상 및 염색체의 수적 결함이 있는지를 관찰하고자 하였다. 한편, GTG banding 법을 통해 유전자 수준의 결함, 염색체의 미세한 결손 및 추가, 분포율이 매우 낮은 비정상 핵형의 섞임증(mosaicism, 단일수정에도 불구하고 유전적으로 다른 세포집단이 한 개체에서 둘 이상 공존하는 상태를 말함)을 분석하고자 하였다.
따라서 이 연구에서는 역사적 문헌 고찰에서 토종견으로 알려진(최 등, 2008) 경주지방의 무미 또는 단미 형태의 개(일명, 경주개 동경이)에서 세포 유전학적 핵형분석을 통하여 동경이의 품종 간 염색체 다변형 현상 및 염색체의 수적 결함이 있는지를 관찰하고자 하였다. 한편, GTG banding 법을 통해 유전자 수준의 결함, 염색체의 미세한 결손 및 추가, 분포율이 매우 낮은 비정상 핵형의 섞임증(mosaicism, 단일수정에도 불구하고 유전적으로 다른 세포집단이 한 개체에서 둘 이상 공존하는 상태를 말함)을 분석하고자 하였다.

제안 방법

3분염법에서는 모든 상동염색체를 뚜렷하게 구별할 수가 있었으며, trypsin을 이용하여 동경이의 G-분염의 핵형을 얻어 이들의 핵형도를 작성하여 세대 간에 비교하였다(Fig. 3~7). 염색체가 대체적으로 X염색체는 차중부 염색체였으나 Y염색체는 차중부 혹은 중부염색체로 관찰할 수 있었으며, X염색체와 상염색체 중 가장 큰 1번 염색체를 제외한 나머지 염색체들은 일반 염색으로는 뚜렷하게 구별되지 않은 것이 단점이라 할 수 있다.
그 후 증류수로 세척한 뒤 공기 건조시킨 슬라이드를 1,000배 시야에서 검경하였다. GTG bandinge ChIPS-Karyo(Chromosome Image Processing System, GenDix, Inc. Seoul, Korea)를 이용하여 20개 이상의 중기세포에서 저장, 분석하였다.
경주개 동경이의 혈액에서 염색체 관찰을 위해 세포들의 배양 과정 및 중기(metaphase) 세포 유도가 헤파린이 처리된 동경이 헐액에서 잘 유도 되었는지를 알아보기 위해 중기 때 염색체 분포를 관찰하였다.
025% trypsin의 phosphate buffered saline(PBS)용액에 slide 표본을 10~30초 처리하였고5% Giemsa 용액으로 염색하였다. 그 후 증류수로 세척한 뒤 공기 건조시킨 슬라이드를 1,000배 시야에서 검경하였다. GTG bandinge ChIPS-Karyo(Chromosome Image Processing System, GenDix, Inc.

대상 데이터

보존된 4대까지 개체를 대상으로 조사하였다. 1대는 서 라벌(암컷), 2대는 아름이(암컷), 3대는 오류(수컷), 4대는 화랑(수컷)과 원화(암컷)로 총 5개체를 조사하였다.
경북 경주지역을 중심으로 무미 또는 단미 형태의 개(일명, 경주개 동경이)를 대상으로 유전학적으로 혈통이 보존된 4대까지 개체를 대상으로 조사하였다. 1대는 서 라벌(암컷), 2대는 아름이(암컷), 3대는 오류(수컷), 4대는 화랑(수컷)과 원화(암컷)로 총 5개체를 조사하였다.

이론/모형

핵형분석은 Seabright(1971)와 R(|)nne (1989)의 방법에 의해 수행되었고 우선 말초혈액을 채취하기 위해 멸균한 주사기에 헤파린을 넣고 개의 앞다리 정맥에서10ml의 혈액을 채취한 다음 RPMI 1640과 fetal calf serum (FCS)고} phytohemagglutinin, penicillin을 혼합하여 만든 배지에서 배양하였다. 37℃, 5% CO₂ 배양기에서 72시간 배양시킨 뒤 colcemid (Gibco-BRL)를 50μ1 첨가시킨 후 l, 0(X)rpm에서 10분간 원심 분리하였다.

성능/효과

비슷한 양상을 보였다. 개의 품종간의 G-분 염법에 의한 양상의 이러한 변이는 염색체의 다변형 현상에 의한 것인지 아니면 인공산물에 의한 것인지는 아직까지도 명확하게 얘기할 수 없으며 또한 실험자의 기술적인 측면과 염색성의 차이, 세척시간, 핵형 분석 시 이미지 해상도의 차이 등으로 인해 결과의 차이를 보이는 것으로 사료된다.
2는 동경 이 4대의 암컷(원화)의 중기 때 염색체 분포를 보여주는 결과이다. 결과에서와 같이 banding 염색과 염색체의 수가 잘 보존되어 관찰되었고 세포분열과정 중 중기 유도와 염색체 분포 양상이 잘 분포되고 있음을 관찰할 수 있었다.
기존에 알려진 삽사리, 진돗개, 셰퍼드의 염색체 수와 같이 동경이의 염색체 수는 2m=78개로 다른 품종의 개들과 차이가 없었으며, 일반 Giemsa 염색에 의한 이들의 핵형분석 결과에서와 같이 염색체의 수가 동일하게 38쌍의 상염색체가 대부분 단부(acrocentric) 혹은 차단부(submetacentric) 염색체로 분포하고 있음을 알 수 있었다.
이에 반해 대부분의 상염색체들이 동원체 부분 짙게염색되어 짙은 띠를 보이고 14, 24, 25, 27, 28, 33, 34번의 염색체 일부에서 동원체의 염색성이 약한 결과를 보였다.
일반 Giemsa염색에 의한 핵형에서는 삽사리와의 품종 간에 특이한 변이는 없었으며, G-분염법에 14, 24, 25, 27, 28, 33, 34번의 염색체 일부에서 동원체의 염색성이 약한 결과를 보였다. 이러한 G-banding에 의한 결과는 아직 표준화가 되어있지 않지만, 유전자 수준의 결함, 염색체의 미세한 결손 및 추가, 분포율이 매우 낮은 비정상 핵형의 섞임증은 없었으며 1대부터 4대까지의 경주개 동경이에서 잘 보존되어 있어 향후 염색체 및 유전자 분석 동정의 지표로 활용할 수 있으리라 사료된다.

후속연구

그러나 아직까지도 고해상도를 보이는 염색법 및 분 염법의 개발이 미흡한 실정이어서 향후 토종견들에 대한 고도의 banding technique, 토종견의 특정 염색체를 probe로 하는 FISH 기법들이 사용되어 표준화를 이루어져야 할 것으로 사료된다.
따라서 이에 동일한 실험 과정을 통해 국내 토종견들에 대한 비교 분석을 재조명할 필요가 있을 것으로 사료된다. 개는 단일종으로서 수백 이상의 품종이 있으며 품종에 따라서는 같은 종이라고 할 수 없을 정도로 커다란 형 질을 보이는 특이한 종이다.
약한 결과를 보였다. 이러한 G-banding에 의한 결과는 아직 표준화가 되어있지 않지만, 유전자 수준의 결함, 염색체의 미세한 결손 및 추가, 분포율이 매우 낮은 비정상 핵형의 섞임증은 없었으며 1대부터 4대까지의 경주개 동경이에서 잘 보존되어 있어 향후 염색체 및 유전자 분석 동정의 지표로 활용할 수 있으리라 사료된다.
이와 같은 일부 염색체들에서의 품종간의 차이가 품종 간의 지표가 될 수 있는지 아니면 형태적, 생리적 차이와 관련하여 생긴 품종간의 염색체의 다변형 현상인지 혹은 실험결과에 대한 해석상의 차이인지를 판단하기 위해 더 많은 수의 분석을 통한 재현성을 검사해야 할 것으로 사료된다.

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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