[논문]삼지구엽초로부터 분리한 Icariin의 생리활성

김서진; 박명수; 딩티안; 왕준; 오덕환

doi:10.3746/jkfn.2011.40.10.1397

[국내논문] 삼지구엽초로부터 분리한 Icariin의 생리활성
Biological Activities of Isolated Icariin from Epimedium koreanum Nakai 원문보기

한국식품영양과학회지 = Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition, v.40 no.10, 2011년, pp.1397 - 1403

김서진 (강원대학교 바이오산업공학부 식품생명공학과) , 박명수 (강원대학교 바이오산업공학부 식품생명공학과) , 딩티안 (강원대학교 바이오산업공학부 식품생명공학과) , 왕준 (강원대학교 바이오산업공학부 식품생명공학과) , 오덕환 (강원대학교 바이오산업공학부 식품생명공학과)

초록
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본 연구는 삼지구엽초의 기능성 식품학적 이용성 증진을 위한 기초적인 연구로써 우리나라 산야에서 존재하며 예로부터 약용으로 이용되고 있는 삼지구엽초의 주요성분인 icariin을 분리하여 생리활성을 검토하였다. 에탄올로 추출한 삼지구엽초를 극성이 다른 용매인 에틸아세테이트, 부탄올, 헥산, 물, 클로로포름 층으로 분리하여, icariin의 함량을 측정한 결과 각각 27.9, 2.5, 1.7, 1.4, 1.3 ${\mu}g/g$이었고, icariin 수율이 가장 많은 에틸아세테이트 분획물로부터 정제한 icariin 수율은 295.5 ${\mu}g/g$이었으며 대부분 에틸아세테이트에서 용출되는 것을 확인하였다. 용매별 분획물의 항산화효과는 에틸아세테이트 분획층에서 49.0 ${\mu}g/mL$로 가장 높았으며, 부탄올(59.2 ${\mu}g/mL$), 헥산(119.8 ${\mu}g/mL$), 물(122.0 ${\mu}g/mL$), 클로로포름(138.5 ${\mu}g/mL$) 층의 순으로 나타났으며, 정제된 icariin(15.3 ${\mu}g/mL$)은 대조구인 ascorbic acid (19.5 ${\mu}g/mL$), ${\alpha}$-tocopherol(18.2 ${\mu}g/mL$)보다 다소 높은 활성을 나타내었다. Salmonella Typhimurium을 이용한 돌연변이 및 항돌연변이성에 미치는 영향을 조사한 결과, 삼지구엽초에서 분리한 icariin은 TA98과 TA100세포 모두에서 돌연변이성을 나타내지 않았다. 인간면역세포인 B세포와 T세포에서의 면역활성시험을 측정한 결과, icariin은 대조구보다 B세포에서 1.27배, T세포에서 1.28배의 비교적 높은 면역증강활성을 나타내었다. 이러한 결과는 삼지구엽초를 이용한 기능성식품 및 식품재료로서의 이용성 증진을 위한 기초 자료로 제공될 수 있을 것으로 판단된다.

Abstract ▼ AI-Helper

Epimedium koreanum Nakai is a wild medicinal plant commonly consumed in South Korea due to its health beneficial effects. In the present study, the antioxidative, antimutagenic and immunological activities of E. koreanum Nakai extracts were investigated for their use in food. The yields of icariin compounds from the ethanol extract as well as the ethyl acetate, butanol, hexane, water, and chloroform fractions of E. koreanum were 27.9, 2.5, 1.7, 1.4, and 1.3 ${\mu}g/g$, respectively. The icariin components (295.5 ${\mu}g/g$) were collected from the ethyl acetate fraction by thin layer chromatography (TLC) and analyzed via high performance liquid chromatography (HPLC). The antioxidant activities of each fraction were as follows: ethyl acetate (49.0 ${\mu}g/mL$), butanol (59.2 ${\mu}g/mL$), hexane (119.8 ${\mu}g/mL$), water (122.0 ${\mu}g/mL$), and chloroform (138.5 ${\mu}g/mL$), based on $RC_{50}$ ${\mu}g/mL$. Icariin, isolated and identified as the main component, showed strong antioxidant activity with a $RC_{50}$ value of 15.3 ${\mu}g/mL$, which was higher than those of ascorbic acid (19.5 ${\mu}g/mL$) and ${\alpha}$-tocopherol (18.2 ${\mu}g/mL$). In an Ames test, none of the fractions produced mutagenic effects on Salmonella Typhimurium TA98 and TA100. In an immunomodulating activity test, the effects of E. koreanum Nakai on B cells (Rhamos) and T cells (Jurkat) were investigated. These results show that the growth and viability of B and T cells were increased by isolated icariin components for 1.27 and 1.28 fold, respectively. These results also provide preliminary data for the development of E. koreanum Nakai as an edible food material.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

그중에서도 삼지구엽초는 앞에서 언급한 바와 같이 이용성이 높은 식물임에도 불구하고 국내에는 삼지구엽초의 주성분인 icariin의 생리활성에 대하여 과학적으로 주로 연구된 바 없으며 다만 한방에서 약재 첨가물로서 일부 사용되고 있을 뿐이다. 따라서 본 연구는 삼지구엽초의 주된 약효성분으로 알려진 icariin의 항산화활성, 항돌연변이 및 면역증진 효과를 탐색하여 삼지구엽초의 기능성식품 소재로의 사용 가능성을 확보하기 위한 기초 자료로 활용하고자 하였다.
본 연구는 삼지구엽초의 기능성 식품학적 이용성 증진을 위한 기초적인 연구로써 우리나라 산야에서 존재하며 예로부터 약용으로 이용되고 있는 삼지구엽초의 주요성분인 icariin을 분리하여 생리활성을 검토하였다. 에탄올로 추출한 삼지구엽초를 극성이 다른 용매인 에틸아세테이트, 부탄올, 헥산, 물, 클로로포름 층으로 분리하여, icariin의 함량을 측정한 결과 각각 27.

제안 방법

대조군으로는 α-tocopherol과 ascorbic acid(Sigma)를 사용하였다. DPPH radical 소거활성은 DPPH의 흡광도가 50% 감소할 때 나타나는 시료의 농도(RC₅₀)로 표시하였으며, 각 시료는 3회 반복 실험을 실시하여 평균값을 구하였다.
4)로 전체량이 700 μL가 되도록 하였다. Histidine/biotin이 첨가된 top agar를 2 mL씩 각 tube에 붓고 3초간 vortex하고 minimal glucose agar plate 상에 도말하고 평판 고화시켜 37℃에서 48시간 배양하여 생긴 복귀돌연변이(his⁺ revertant colony) 수를 측정하여 돌연변이원성의 유무를 판정하였다. 항 돌연변이 실험에 사용된 발암물질은 B(a)P 및 4NQO를 사용하였다.
1과 같이 6개의 분획물을 얻었다. Icariin 표준물질과 분리물질을 TLC plate(Precoated Kieselgel 60 FII 254, Merck) 상에 점적시켜 전개용매(ethyl acetate : chloroform : formic acid : water＝ 8:1:1:1)로 전개하여 UV 365 nm로 조사하여 생리활성 물질을 확인하였다. Icariin 표준물질과 유사한 위치의 화합물들을 농축한 후 다시 column chromatography를 통해 분획물을 얻은 후 TLC plate 상에서 단일 spot을 확인하였다.
Icariin 표준물질과 분리물질을 TLC plate(Precoated Kieselgel 60 FII 254, Merck) 상에 점적시켜 전개용매(ethyl acetate : chloroform : formic acid : water＝ 8:1:1:1)로 전개하여 UV 365 nm로 조사하여 생리활성 물질을 확인하였다. Icariin 표준물질과 유사한 위치의 화합물들을 농축한 후 다시 column chromatography를 통해 분획물을 얻은 후 TLC plate 상에서 단일 spot을 확인하였다. TLC 상에 분리된 물질을 HPLC(Waters 600, USA)를 이용하여 icariin의 함량을 분석(Table 1)하였으며, 분리된 icariin은 정제하여 동결건조 하여 본 실험에 사용하였다.
Icariin 표준물질과 유사한 위치의 화합물들을 농축한 후 다시 column chromatography를 통해 분획물을 얻은 후 TLC plate 상에서 단일 spot을 확인하였다. TLC 상에 분리된 물질을 HPLC(Waters 600, USA)를 이용하여 icariin의 함량을 분석(Table 1)하였으며, 분리된 icariin은 정제하여 동결건조 하여 본 실험에 사용하였다.
이것을 20분간 preincubation한 다음 histidine/biotin이 첨가된 45℃의 top agar를 2 mL씩 각 tube에 붓고 minimal glucose agar plate 상에 도말하고 평판 고화시켜 37℃에서 48시간 배양하여 생긴 복귀돌연변이 수를 측정하여 돌연변이원성의 유무를 판정하였다. 돌연변이 억제효과의 정도(inhibition rate)는 아래의 식에 의하여 계산하였으며, 대조구로는 icariin을 첨가하지 않은 dimethyl sulfoxide(DMSO)를 사용하여 균 생육억제 유무를 판정하였다.
배양 완료 후 2 mg/mL 농도의 MTT시약을 well당 10 μL씩 분주한 다음 37℃, 5% CO2 배양기에서 4시간 후 MTT시약이 포함된 배지를 제거하고 dimethyl sulfoxide(DMSO) 150 μL를 가한 후 상온에서 발색시키고, ELISA microplate reader(EL × 808, Bio-tekⓇ Inc., HighlandPark, VT, USA)를 이용, 540 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 대조구로는 삼지구엽초의 70% 에탄올 추출액을 사용하였다.
분리된 icariin과 표준품 icariin의 면역 증진 효과 활성을 검색하기 위해 Human T cell(Jurkat)과 B cell(Rhamos)의 생육촉진 실험과 생육 활성도를 알아보았다(Fig. 4, Fig. 5). 분리된 icariin과 표준품 icariin의 Human T cell(Jurkat)과 B cell(Rhamos) 생육 촉진 실험 결과, B cell은 분리된 icariin과 표준품 icariin이 대조군인 70% 에탄올 추출물에 비해 각각 1.
삼지구엽초 주요성분인 icariin의 면역 증진 효과는 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT, Sigma) assay(19)와 24 well plate에 세포를 2.0×104 cells/mL의 농도로 조절한 후 시료를 투여하여 8일 동안 배양시키며 매일매일 각 well의 cell을 hemacytometer로 세포수를 측정하여 생육증강도를 측정하는 두 가지 방법을 사용하였다.
삼지구엽초의 뿌리, 줄기, 잎 중 뿌리와 줄기는 증류수로 2～3차례 수세한 다음 음건하였고, 잘게 세절하였다. 이들 시료를 일정량 취하여 삼각플라스크에 넣고 10배량의 70% 에탄올을 첨가하여 40℃에서 10시간씩 3회 진탕 추출한 다음 No.
2 여과지로 여과하였다. 여과액을 4℃에서 12시간 냉각한 다음 여과하고, 그 여과액을 감압 농축하여 추출용매를 제거한 후, 각각의 부위에서 얻어진 70% 에탄올 추출물을 용매의 극성에 따라 Fig. 1과 같이 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트, n-부탄올 및 물 층으로 순차적으로 분획하고, 감압농축한 후 동결건조 하여 사용하였다. 각 용매 분획물 중 icariin 함량이 가장 많았던 에틸아세테이트 분획물을 methanol로 녹여 소량(약 1 g)의 silica gel 60 (70～230 mesh, Merck, Milwaukee, WI, USA)과 섞은 후 methanol을 완전히 휘발시켜 silica gel에 흡착시켰다.
4)로 전체량이 700 μL가 되도록 하였다. 이것을 20분간 preincubation한 다음 histidine/biotin이 첨가된 45℃의 top agar를 2 mL씩 각 tube에 붓고 minimal glucose agar plate 상에 도말하고 평판 고화시켜 37℃에서 48시간 배양하여 생긴 복귀돌연변이 수를 측정하여 돌연변이원성의 유무를 판정하였다. 돌연변이 억제효과의 정도(inhibition rate)는 아래의 식에 의하여 계산하였으며, 대조구로는 icariin을 첨가하지 않은 dimethyl sulfoxide(DMSO)를 사용하여 균 생육억제 유무를 판정하였다.

대상 데이터

대조군으로는 α-tocopherol과 ascorbic acid(Sigma)를 사용하였다.
본 실험에 사용한 면역 증진 효과 검증세포는 인간 면역 세포인 T-cell(Molt-4)과 B-cell(Rhamos)을 이용하여 검증하였다. 삼지구엽초 주요성분인 icariin의 면역 증진 효과는 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT, Sigma) assay(19)와 24 well plate에 세포를 2.
본 실험에 사용한 재료는 경기도 농업기술원에서 재배·보존하고 있는 국내산 있는 삼지구엽초(Epimedium koreanum Nakai)를 제공받아 실험에 사용하였다(16).
Histidine/biotin이 첨가된 top agar를 2 mL씩 각 tube에 붓고 3초간 vortex하고 minimal glucose agar plate 상에 도말하고 평판 고화시켜 37℃에서 48시간 배양하여 생긴 복귀돌연변이(his⁺ revertant colony) 수를 측정하여 돌연변이원성의 유무를 판정하였다. 항 돌연변이 실험에 사용된 발암물질은 B(a)P 및 4NQO를 사용하였다. 미리 건열 멸균시킨 glass cap tube에 icariin 50 μL를 첨가한 다음 하룻밤 배양된 균주를 100 μL씩 주입한 후, 0.

데이터처리

모든 연구 결과의 자료는 통계 프로그램인 SAS(ver. 12.0, Statistical Analysis System, Milwaukee, WI, USA)를 이용하여 평균 및 표준편차를 계산하였으며, 군간의 비교에서 각각의 요인은 분산분석(Analysis of Variance, ANOVA)을 사용하였고, Duncan's multiple range test로 p=0.05 수준에서 유의성을 검증하였다.

이론/모형

돌연변이원성 실험에 사용한 Salmonella Typhimurium의 histidine 영양요구성 변이주는 TA98, TA100의 두 종류를 이용하여 Ames test를 개량한 preincubation muta-genicity test(18)를 이용하였다. 건열 멸균시킨 glass cap tube에 icariin 50 μL를 가하고, TA culture 배지에서 하룻밤 배양된 균주 100 μL를 가한 다음 0.
항산화 활성은 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH, Sigma, Milwaukee, WI, USA)를 이용하여 시료의 라디칼 소거효과(radical scavenging effect)를 측정하는 Blois법(17)을 활용하였다. DPPH 약 2 mg을 ethanol 15 mL에 녹여 DPPH 용액을 제조하였다.

성능/효과

S9 mix를 필요로 하는 간접변이원인 polycyclic aromatic hydrocarbon(B(a)P)을 사용한 TA98 균주에 대한 분리된 icariin과 표준품 icariin의 항돌연변이원성은 Fig. 2와 같이 1,000 μg/mL의 시료 농도에서 각각 97.3%, 93%의 높은 억제효과를 각각 나타내었고, TA100 균주에서 항돌연변이원성은 1,000 μg/mL의 시료 농도에서 각각 88.6%, 92.6%로 억제효과를 각각 나타내었다(Fig. 2).
2 μg/mL)보다 다소 높은 활성을 나타내었다. Salmonella Typhimurium을 이용한 돌연변이 및 항돌연변이성에 미치는 영향을 조사한 결과, 삼지구엽초에서 분리한 icariin은 TA98과 TA100세포 모두에서 돌연변이성을 나타내지 않았다. 인간면역세포인 B세포와 T세포에서의 면역활성시험을 측정한 결과, icariin은 대조구보다 B세포에서 1.
TA100 균주에서도 1,000 μg/mL 농도에서 99.4%, 96.5%의 매우 높은 억제효과를 나타내었다.
가장 많은 icariin 함량을 나타낸 ethyl acetate 분획물을 silica gel column chromatography와 sephadex LH-20 column chromatography를 이용하여 재 분획·농축한 후, TLC(Rf 0.6)와 HPLC로 icariin 함량을 측정한 결과 295.5 μg/g의 함량을 나타내었다(Table 2).
각 분획물의 항산화 활성은 ethyl acetate 분획층에서 49.0 μg/mL로 가장 높았으며, butanol(59.2 μg/mL), hexane(119.8 μg/mL), water(122.0 μg/mL), chloroform(138.5 μg/mL) 층의 순으로 나타났다.
본 실험결과에 사용한 삼지구엽초의 생리활성물질인 icariin의 함량은 에탄올 추출물에서 19.2 μg/g의 함량을 나타냈으며, 에탄올 추출물을 분획하여 icariin 함량을 측정한 결과 ethyl acetate(27.9 μg/g), butanol(2.5 μg/g), hexane (1.7 μg/g), water(1.4 μg/g), chloroform(1.3 μg/g) 순으로 icariin은 ethyl acetate 분획물에서 대부분 용출됨을 확인하였으며(Table 2), 삼지구엽초의 주성분은 icariin임이 확인되었고 대부분 ethyl acetate 분획물에서 용출된다는 보고(20) 와 일치하였다.
5와 같다. 분리된 icariin과 표준품 icariin 모두 B cell과 T cell에서 4일째 생육 활성도가 최대를 나타내었고 B cell보다 T cell에서 생육 활성도가 대조군인 70% 에탄올 추출보다 더 높게 나타났고 생육 촉진과 생육 활성에 대한 분리된 icariin과 표준품 icariin의 차이는 그리 크지 않았다. 이상의 결과에서 삼지구엽초 여러 용매 분획물 중 ethyl acetate에서 분리 정제한 icariin이 높은 면역증진효과를 보였으므로, 향후 식품산업에 있어서의 면역 증강 효능을 가진 삼지구엽초의 건강 기능성식품 개발에 매우 중요한 자료가 될 수 있을 것으로 사료된다.
5). 분리된 icariin과 표준품 icariin의 Human T cell(Jurkat)과 B cell(Rhamos) 생육 촉진 실험 결과, B cell은 분리된 icariin과 표준품 icariin이 대조군인 70% 에탄올 추출물에 비해 각각 1.27배, 1.31배의 생육 촉진 활성을 나타내었고, T cell에서도 분리된 icariin과 표준품 icariin 모두 1.28배의 생육촉진 효과를 보였다(Fig. 4). T cell과 B cell의 생육 활성도를 배양 시간별로 8일 동안 생 세포수를 측정한 결과는 Fig.
분리된 icariin과 표준품 icariin의 TA98균주에서의 4NQO에 대한 항변이원성은 시료 농도 750 μg/ mL에서 각각 90% 이상의 억제효과를 보이고 1,000 μg/mL농도에서는 각각 98.9%, 91%의 높은 억제효과를 나타내었다.
삼지구엽초 icariin 성분이 TA98, TA100 돌연변이 균주에 대한 B(α)P의 변이원성은 icariin을 첨가하지 않은 대조구에 비해 93.0% 이상의 높은 억제효과를 보이고 있는데, 이는 Gruter 등(26)에 의한 mushroom의 B(α)P에 대한 최고 항변이 활성도(97.0%)와 비슷한 결과를 나타내었으며, 매우 높은 돌연변이 억제효과를 갖는다는 것을 시사하고 있다.
삼지구엽초의 항돌연변이원성을 알아본 결과, B(α)P나 4NQO에서 전반적으로 TA98과 TA100 균주 모두에서 항돌 연변이원성 활성이 높았다.
에탄올로 추출한 삼지구엽초를 극성이 다른 용매인 에틸아세테이트, 부탄올, 헥산, 물, 클로로포름 층으로 분리하여, icariin의 함량을 측정한 결과 각각 27.9, 2.5, 1.7, 1.4, 1.3 μg/g이었고, icariin 수율이 가장 많은 에틸아세테이트 분획물로부터 정제한 icariin 수율은 295.5 μg/g이었으며 대부분 에틸아세테이트 에서 용출되는 것을 확인하였다.
용매별 분획물 중 가장 높은 항산화 활성을 나타낸 ethyl acetate 분획물에서 분리 정제한 icariin의 항산화 활성은 15.3 μg/mL로 icariin 표준품의 항산화 활성(15.6 μg/mL)과 거의 비슷한 활성을 나타냈으며, 대조구로 사용된 기존 천연 항산화제 ascorbic acid(19.5 μg/mL)와 α-tocopherol(18.2 μg/mL)보다 다소 높은 항산화 활성을 나타내었다.
용매별 분획물의 항산화 효과는 에틸아세테이트 분획층에서 49.0 μg/mL로 가장 높았으며, 부탄올(59.2 μg/mL), 헥산(119.8 μg/mL), 물(122.0 μg/mL), 클로로포름(138.5 μg/mL) 층의 순으로 나타났으며, 정제된 icariin(15.3 μg/mL)은 대조구인 ascorbic acid (19.5 μg/mL), α-tocopherol(18.2 μg/mL)보다 다소 높은 활성을 나타내었다.
Salmonella Typhimurium을 이용한 돌연변이 및 항돌연변이성에 미치는 영향을 조사한 결과, 삼지구엽초에서 분리한 icariin은 TA98과 TA100세포 모두에서 돌연변이성을 나타내지 않았다. 인간면역세포인 B세포와 T세포에서의 면역활성시험을 측정한 결과, icariin은 대조구보다 B세포에서 1.27배, T세포에서 1.28배의 비교적 높은 면역 증강활성을 나타내었다. 이러한 결과는 삼지구엽초를 이용한 기능성식품 및 식품재료로서의 이용성 증진을 위한 기초 자료로 제공될 수 있을 것으로 판단된다.

후속연구

28배의 비교적 높은 면역 증강활성을 나타내었다. 이러한 결과는 삼지구엽초를 이용한 기능성식품 및 식품재료로서의 이용성 증진을 위한 기초 자료로 제공될 수 있을 것으로 판단된다.
삼지구엽초의 항산화 활성을 나타내는 물질로 Kim (22)은 에탄올 추출물에 DPPH와 반응하기 적합한 입체구조를 가지는 flavonoid 물질이 존재하기 때문으로 사료된다고 보고하였으며, Iinuma 등(23)은 삼지구엽초의 주성분인 icariin와 epimedin이 생쥐에서 간의 Kupffer cell에 의한 탐식작용을 활성화시킨다고 하였으며, Liu 등(24)은 삼지구엽초의 메탄올 추출물이 생명력이 결핍된 환자에 있어서 백혈구 수를 유의하게 증가시켜 면역능을 촉진시킨다고 보고하였다. 이러한 결과로 삼지구엽초 추출물을 더 정제할수록 항산화 활성은 증가된다는 보고(25)와 일치하며, 삼지구엽초의 경우 기능성식품을 개발할 때 추출물보다는 정제물을 이용하는 것이 여러 가지 측면에서 더 바람직할 것이며, 삼지구엽초를 이용한 천연 항산화제의 개발에도 많은 도움이 될 것이라 사료된다.
분리된 icariin과 표준품 icariin 모두 B cell과 T cell에서 4일째 생육 활성도가 최대를 나타내었고 B cell보다 T cell에서 생육 활성도가 대조군인 70% 에탄올 추출보다 더 높게 나타났고 생육 촉진과 생육 활성에 대한 분리된 icariin과 표준품 icariin의 차이는 그리 크지 않았다. 이상의 결과에서 삼지구엽초 여러 용매 분획물 중 ethyl acetate에서 분리 정제한 icariin이 높은 면역증진효과를 보였으므로, 향후 식품산업에 있어서의 면역 증강 효능을 가진 삼지구엽초의 건강 기능성식품 개발에 매우 중요한 자료가 될 수 있을 것으로 사료된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	삼지구엽초 지상부를 건조한 것을 뭐라고 하는가?	잎은 잎자루가 길고 난형이고 끝이 뾰족하며 밑 부분이 심장형으로서 가장자리에 털 같은 잔톱니가 있다(2). 삼지구엽초 지상부를 건조한 것을 음양곽(淫羊)이라 하는데 한방에서는 강정, 항암, 항바이러스, 이뇨 등에 효능이 있는 것으로 알려지고 있다(3,4). 또한 지하부도 음양 곽근으로 지상부와는 달리 천식의 발작이나 월경부조 또는 소야망증 등의 치료 목적으로 사용되고 있는 생약이다(5).
	삼지구엽초 잎의 외형적 특징은 어떠한가?	삼지구엽초(Epimedium koreanum Nakai)는 매자나무과에 속하는 다년생초본식물로서 주로 경기, 강원 중북부지역을 중심으로 자생하고 있으며 초장은 30 cm 내외로 줄기의 가지가 세 개로 1가지에 3개의 잎이 달려 삼지(三枝)구엽(九葉)초라 한다(1). 잎은 잎자루가 길고 난형이고 끝이 뾰족하며 밑 부분이 심장형으로서 가장자리에 털 같은 잔톱니가 있다(2). 삼지구엽초 지상부를 건조한 것을 음양곽(淫羊)이라 하는데 한방에서는 강정, 항암, 항바이러스, 이뇨 등에 효능이 있는 것으로 알려지고 있다(3,4).
	삼지구엽초의 주성분에는 어떤 것들이 있는가?	삼지구엽초의 주성분은 flavonoid인 icariin(6,7), quercetin, anhydroicaritin-3-O-α-rhamnoside, n-alkanes, phytosterols, phytosteryl glucosides, epimedoside C, epimedoside, icariside A1, maltol, salidroside, epimedin I, icaritin-3-O-α -rhamnoside, ikarisoside A-F 등이 분리 보고(8-11)되었다. 이중 icariin은 삼지구엽초의 주요 약효성분으로 고혈압과 간독성을 억제한다는 보고(12)가 있으며, flavonoid glycoside인 epimedin A, B 및 C가 추가로 보고(13)되었다.

참고문헌 (29)

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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