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문제 정의
- 이에 은조롱의 약용 근거에 대한 한방 문헌의 기록을 근거로 현재 대한약전외한약(생약)규격집에 수재된 白首烏의 명칭 및 생육시기별 conduritol F의 함량과 발육 변화를 비교하고자 한다.
- 이에 은조롱의 재배가 확대되는 추세에서 규격품 제조의 기준이 되는 기준 시험에 관련한 수확시기를 검토하였다.
제안 방법
- 건조품은 길이와 무게를 측정하여 시기별 발육을 측정하였다.
- 비극성 성분인 conduritol F의 HPLC 분석은 Luna 5u Silica(2) 100A (Phenomenex Co., USA)를 사용하여, 이동상은 98% acetonitrile을 유속 1.0 ml/min에서 column의 온도는 30℃로 유지하면서 검출기 UV (210 nm)를 사용하였으며, 주입량은 10ul 주입하였다.
- 시료의 분말 1 g에 70% methanol을 50 ml를 넣고 2시간 동안 초음파 추출한 후 원심분리하여 상등액을 취하여 HPLC 분석 최종 검액으로 하였다.
- 5)을 전개 용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말렸다. 여기에 묽은 황산시액을 고르게 뿌려 105 ℃에서 10분간 가열하여 conduritol F의 반점을 비교하였다.
- 은조롱의 시료는 대한약전외한약(생약)규격집에 기재된 TLC 확인시험을 실시하였다. 시료 추출액과 conduritol F 표준액, 대조군으로 이엽우피소(C.
- 은조롱의 재배과정에서 생육 시기별로 약용부위인 뿌리의 길이와 무게 변화를 관찰하였다.
- 은조롱의 재배에 따른 채취시기를 검토하기 위하여 시기별로 채취한 시료에 함유된 conduritol F의 함량변화를 측정하였다. 이를 보면 재배 식물(은조롱)의 생육 시기별 conduritol F의 함량변화를 보면 평균값은 9월이 높았으나 개체별 편차가 크게 나타나서 의미를 부여하기 어려우며, 시기별 함량차이는 통계적 유의성이 나타나지 않았다(Fig.
대상 데이터
- Conduritol F의 분석에 사용한 HPLC system은 SHIMADZU HPLC system(shimadzu, Japan)으로 LC-20AD Pump와 SPD-M20A UV/VIS-Detector, SIL-20A Automated Sample Injector, CHROMELEON LC SOLUTION Data Systems(version 1.21 SPI)으로 구성되어 있으며, 컬럼은 Luna 5u Silica(2) 100A (Phenomenex Co., USA) (5um, 250×4.6mm)를 사용하였다.
- (USA)의 HPLC grade를 사용하였으며, 기타 시약은 특급 이상의 제품을 사용하였다. 白首烏의 분석에 사용한 표준품은 은조롱에서 분리한 것으로 conduritol F (순도 94.60%)를 식품의약품안전청 한약재과학화연구사업단의 영남대학교 이승호교수로부터 제공을 받아 사용하였다 (Fig. 1).
- 본 연구에 사용한 은조롱(Cynanchi wilfordii Radix)은 경상북도 봉화군 물야면에 위치한 白首烏 재배지에서 2011년 7월부터 11월까지 시기별로 채취하였다 (n=7).
- 은조롱의 시료는 대한약전외한약(생약)규격집에 기재된 TLC 확인시험을 실시하였다. 시료 추출액과 conduritol F 표준액, 대조군으로 이엽우피소(C. auriculatum, 경상북도 영주재배, 2010년산)의 뿌리를 은조롱과 동일한 방법으로 추출하여 검액으로 사용하였다. 검액을 TLC plate (TLC Silica gel 60 F254, Merck KGaA, Germany)에 점적하였다.
- 은조롱(Cynanchi wilfordii Radix)의 재배지에서 7월, 8월, 9월, 10월, 11월의 15일 전후에 시기별로 생체 시료를 채취하여 건조기에서 50℃로 건조하였다.
데이터처리
- 실험으로부터 얻은 결과는 평균±표준편차 (mean ±S.D.)로 기록하였고 유의성 검정은 t-test를 사용하여 p값이 0.05 미만인 경우에 유의성으로 인정하였다.
성능/효과
- 보건복지부 고시인 ‘한약재 수급 및 유통관리 규정’이 2011년 1월에 개정되어 준비기간을 거쳐 같은 해 10월부터 시행되었고 경과조치에 따라 2012년 3월말까지 6개월간의 자가규격품 소진기간이 종료되면 이제 4월부터는 다른 한약재들과 마찬가지로 은조롱도 한약제조업소의 품질검사 등 엄격한 안전관리를 거친 규격품만 제조되어 공급되게 됨으로써 규격품 제조를 위한 새로운 수요에 따라 은조롱의 재배면적과 생산량은 큰 폭으로 증가할 것으로 예상된다.
- 뿌리의 길이와 무게 발육을 종합하여 보면 뿌리의 성장과 비대가 10월 ~ 11월의 수확기에 근접하여 왕성한 것으로 추정된다. 그러나 은조롱의 재배지에서 늦가을(11월) 이후의 시기는 수확에 어려움이 있어 실질적으로 적용하기 어렵다고 생각된다.
- 은조롱 뿌리의 발달은 10월 ~ 11월이 유의한 것으로 나타났으며, 은조롱에 함유된 conduritol F의 함량 변화는 생육시기에 따라서는 큰 차이가 없는 것으로 나타났다. 이를 보면 은조롱의 채취 시기는 10월~11월의 늦가을이 가장 효율적인 것으로 판단된다.
- 은조롱의 뿌리발달 생육을 종합하여 보면 뿌리 길이의 성장이 10월 정도까지 발달되지만, 뿌리의 비대 성장은 9월부터 수확기까지 지속적으로 발달하는 식물생태가 이루어지는 것으로 나타났다. 이는 은조롱의 약용부위인 뿌리가 저장근 형태임에 비추어 다음해 성장기까지 영양분을 저장하기 위한 식물의 일반적인 생태와 일치하고 있다.
- 은조롱의 약용부위인 저장근 발육을 반영하는 건조무게는 10월과 11월이 다른 시기보다 유의성 있게 높았으며, 10월과 11월의 차이는 통계적 유의성은 없었지만 시기가 늦어질수록 비대된 뿌리의 비율이 높은 경향이 있는 것으로 나타났다. 은조롱의 약재 상품성을 고려할 때 저장근의 비대율이 높은 것을 선호되고 있다.
- 은조롱의 함유성분인 conduritol F의 TLC 확인시험(Fig. 2)에서 재배시료는 은조롱(Cynanchi wilfordii Radix)의 특징을 나타내었으며, 이엽우피소(Cynanchi auriculati Radix)는 conduritol F의 spot이 나타나지 않았다.
- 그러나 재배에 따른 생육 발달을 보면 뿌리의 성장과 비대가 10월~11월에 발달하는 것으로 나타났으며, 이 시기가 재배 농가의 수확량이 가장 높을 것으로 추정된다. 이를 보면 은조롱의 채취 시기는 유효성분의 함량 보다는 수확량을 고려하여 10월~11월의 늦가을이 적합할 것으로 사료된다.
- 은조롱의 재배에 따른 채취시기를 검토하기 위하여 시기별로 채취한 시료에 함유된 conduritol F의 함량변화를 측정하였다. 이를 보면 재배 식물(은조롱)의 생육 시기별 conduritol F의 함량변화를 보면 평균값은 9월이 높았으나 개체별 편차가 크게 나타나서 의미를 부여하기 어려우며, 시기별 함량차이는 통계적 유의성이 나타나지 않았다(Fig. 5).
- 이엽우피소의 국내 재배는 1990년대 초에 중국에서 종자를 도입하여 영주지역에서 시작하였다. 이엽우피소는 뿌리 발달이 은조롱보다 비대하고 단위 생산량이 높은 특성으로 재배 농가에서 선호도가 높았고, 한약재로 사용하기 위한 규격에 이엽우피소와 차별 기준이 미흡하여 상대적으로 은조롱의 시장 유통과 재배가 위축되었다. 그러나 최근 이엽우피소가 은조롱과 다른 식물이라는 인식이 보급되고, 2011년에 대한약전외한약(생약)규격집에 은조롱과 이엽우피소를 구분할 수 있는 확인시험법이 보완되면서 은조롱의 재배는 확대되고 있다.
- 그러나 최근 이엽우피소가 은조롱과 다른 식물이라는 인식이 보급되고, 2011년에 대한약전외한약(생약)규격집에 은조롱과 이엽우피소를 구분할 수 있는 확인시험법이 보완되면서 은조롱의 재배는 확대되고 있다. 확인시험법은 conduritol F의 함유에 대한 확인 시험으로 이 성분은 은조롱에는 다량 함유(약 0.5%)되어 있으나, 이엽우피소에는 함유되어 있지 않은 성분이다.
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