[논문]2012년 제주의 양식 넙치 및 자연산 어류의 Kudoa septempunctata 감염 조사

송준영; 최준호; 최혜승; 정승희; 박명애

doi:10.7847/jfp.2013.26.3.129

2012년 제주의 양식 넙치 및 자연산 어류의 Kudoa septempunctata 감염 조사
Monitoring of Kudoa septempunctata in Cultured Olive Flounder and Wild Fish in Jeju Island during 2012 원문보기

韓國魚病學會誌= Journal of fish pathology, v.26 no.3, 2013년, pp.129 - 137

송준영 (국립수산과학원 병리연구과) , 최준호 (국립수산과학원 병리연구과) , 최혜승 (국립수산과학원 병리연구과) , 정승희 (국립수산과학원 병리연구과) , 박명애 (국립수산과학원 수산생물방역과)

초록
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Kudoa septempunctata가 한국의 양식 넙치의 근육에 기생하는 것이 보고되어, 본 연구에서는 2012년 동안 제주 지역의 양식 넙치 및 자연산 어류에서 K. septempunctata의 감염 현황을 조사하였다. 제주지역 26개소의 넙치 양식장으로부터 143마리를 조사한 결과, 4개소 7마리(4.9%)에서 쿠도아 감염이 확인되었으며, 넙치 치어 67마리에서는 쿠도아가 검출되지 않았다. 또한, 제주 지역에서 어획 된 자연산 어류 8종에서도 쿠도아가 검출되지 않았다. 쿠도아가 검출 된 7마리 어류에 대하여 등근육 부위별 쿠도아 검출을 비교하기 위하여, 넙치의 두부쪽에서 채취한 등근육, 미부쪽에서 채취한 등근육, 그리고 등근육전체를 긁어 모은 샘플을 사용하여 검출률을 비교한 결과, 전체를 긁어 모든 샘플을 사용할 경우 검출률이 100%로 가장 높아, 어느 한 쪽에서 근육을 채취하는 것 보다 등근육 전체 부위를 골고루 채취하는 것이 쿠도아 검출에 더 효율적임을 확인하였다.

Abstract ▼ AI-Helper

The study surveyed infection rate of Kudoa septempunctata parasitized in the trunk muscle of olive flounder, Paralichthys olivaceus, cultured in Jeju Island and wild fish species caught in the coastal area around Jeju Island during 2012. Among 143 olive flounder that were randomly sampled from 26 different culture farms, K. septempunctata was detected in 7 fish samples (4.9%) from 4 different culture farms, showing no typical Kudoa infestation. However, K. septempunctata was not detected in olive flounder fry sampled from hatcheries and 8 species of wild fish. In addition, we compared 3 different sampling sites on trunk muscle of 7 Kudoa positive fish that included head part, tail part and entire muscle. Among 7 fish, K. septempunctata was detected in 3 fish that were sampled from head part; while 4 fish from tail part of trunk muscle. However, all 7 fish were positive when sampled from entire muscle. Thus, we suggest that it will be more efficient to use entire muscle sample than sampling partial muscle parts for detection of K. septempunctata.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

본 연구에서는, 우리 나라에서 활넙치 대일 수출이 활발한 제주 지역을 중심으로, 양식 넙치와 자연산 어류의 K. septempunctata의 감염 현황을 파악하기 위하여 18S rDNA와 28S rDNA를 검출하는 PCR법과 현미경 검사를 통해 K. septempunctata 감염률을 조사하였으며, 넙치 근육의 채취 부위에 따른 검출률을 비교하였다.

제안 방법

5% agarose gel에 전기영동 한 후 MultiImage^®Ⅱ (Alphainnotech, USA)로 PCR 산물의 증폭을 확인하였다. PCR 양성 반응을 나타내는 샘플은 Gel DNA extraction kit (Millipore, USA)를 사용하여 정제한 후, t-blunt vector (Solgent, Korea)에 클로닝하고 Cempetent cell DH5α (Biofact, Korea) 에 transformation 후 Accuprep^® plamid mini extraction kit (Bioneer)를 사용하여 plasmid를 분리한 후 Solgent사에 시컨싱을 의뢰하였다.
근육에 기생하는 쿠도아 감염을 정확히 진단하기 위해서는, 근육의 어느 부위를 채취하여 실험에 사용하느냐에 따라 검출 결과가 달라질 수 있으므로, 샘플링 부위를 결정하는 것이 중요하다. 본 연구에서는, 넙치의 두부쪽에서 채취한 등근육, 미부쪽에서 채취한 등근육, 그리고 등근육 전체를 긁어 모은 샘플을 사용하여 쿠도아 검출률을 비교하였다(Table 3). 그 결과, 두부 근육에서는 7마리 중 3마리(42.
제주 지역에서 양식되는 넙치 육성어를 대상으로 현미경 검경법과 PCR을 통해 K. septempunctata 감염 현황을 조사하였다. 26개소 양식장으로부터 채집한 143마리 넙치 중 4개소의 7마리(4.

대상 데이터

septempunctata 감염 현황 조사를 위해, 2012년 1년 동안 제주 지역의 총 26개소의 넙치 양식장으로부터 성어 143마리(출하사이즈, 500g 이상)와 종묘장 5개소로부터 치어 67마리의 샘플을 채집하였다. 또한, 제주 지역에서 주로 어획되는 8종의 자연산 어류(넙치, 쥐치, 벵에돔, 능성어, 돌돔, 참돔, 부시리, 방어)를 제주 서귀포시의 수산물 위판장에서 구입하여 조사에 사용하였다 (Table. 1).
양식 넙치에서 K. septempunctata 감염 현황 조사를 위해, 2012년 1년 동안 제주 지역의 총 26개소의 넙치 양식장으로부터 성어 143마리(출하사이즈, 500g 이상)와 종묘장 5개소로부터 치어 67마리의 샘플을 채집하였다. 또한, 제주 지역에서 주로 어획되는 8종의 자연산 어류(넙치, 쥐치, 벵에돔, 능성어, 돌돔, 참돔, 부시리, 방어)를 제주 서귀포시의 수산물 위판장에서 구입하여 조사에 사용하였다 (Table.

이론/모형

모든 실험어의 K. septempunctata 감염 조사를 위한 현미경 검사는 일본의 수산청(일본수산청, 2012)에서 발표한 자료를 참고하여 실험을 수행하였으며, PCR 방법은 일본 수산청의 방법과 Grabner 등(2012) 의 방법을 참고하여 실험을 수행하였다.

성능/효과

septempunctata의 감염 현황을 조사하였다. 그 결과, 26개소 조사 양식장으로부터 채집한 143마리 중 4개소 7마리(4.9%)의 넙치 육성어에서 K. septempunctata의 유전자가 검출 되었다. 검출 된 양식장의 경우 같은 수조 안에서 샘플링 한 3∼5마리 중 1∼2마리에서 검출 양성을 나타낸 반면, 나머지 어류는 K.
본 연구에서는, 넙치의 두부쪽에서 채취한 등근육, 미부쪽에서 채취한 등근육, 그리고 등근육 전체를 긁어 모은 샘플을 사용하여 쿠도아 검출률을 비교하였다(Table 3). 그 결과, 두부 근육에서는 7마리 중 3마리(42.8%), 미병부 근육은 7마리 중 4마리(57%), 등근육 전체를 사용한 샘플은 모든 샘플(100%)에서 쿠도아 유전자가 검출되어, 어느 한 부위의 근육을 샘플링 하는 것보다(Fig. 1(a), (b)) 등근육 전체(Fig. 1(c))를 긁어 채취하는 것이 쿠도아 검출에 더 효율적임을 확인하였다. 7마리 중 3마리는 모든 부위에서 유전자 검출 양성이 었으며 그 중 2마리에서는 포자가 확인되었으나 한 마리에서는 포자가 확인되지 않았다.
septempunctata 또한 환경에 존재하는 중간 숙주, 넙치에 감염되는 시기, 감염 경로, 감수성 어종 등이 밝혀지지 않았다. 본 연구의 결과, 넙치 종묘장 5개소로부터 치어 67마리를 조사하였으나, 쿠도아 포자 및 유전자가 검출되지 않았다. 그러나, Iijima 등 (2012)에 의한 보고에서 넙치 치어 300마리 중 1마리에서 real-time PCR 결과 쿠도아 유전자가 검출되어, 넙치의 치어 시기부터 감염이 시작되는 것을 제안하였다.

후속연구

본 연구에서는 일반 PCR방법에 의해 조사를 하였으므로, 검출 민감도에 의한 결과의 차이가 있을 수 있다. 또한, 현재까지 치어 시기에서 포자가 확인 된 경우는 없으므로, 감염 초기에는 포자 형성 이전 단계로 존재 할 가능성을 생각할 수 있어, K. septempunctata의 생활사나 감염 후 숙주 내에서의 동태에 관한 연구가 필요하다.
septempunctata의 감염 또한 환경에 존재하는 무척추 동물이 중간 숙주로 작용하고 있을 가능성을 생각할 수 있어 자연산 넙치의 쿠도아 감염의 가능성이 큰 것으로 생각되나, 본 연구에서 자연산 넙치에서 쿠도아가 검출되지 않았다. 자연산 넙치가 어획되는 적절한 시기에 많은 수의 샘플을 채집하지 못하여 본 연구의 조사에 3마리만 사용하였으므로, 차후 자연산 넙치의 K. septempunctata감염에 대한 더 많은 조사가 필요할 것으로 생각된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	쿠도아속 점액포자충은 무엇인가?	어류에서 분리 된 쿠도아속 점액포자충은 전 세계적으로 수많은 종류가 보고 되어왔으며 (Kent et al., 2001, Lom and Dyková 2006, Moran et al., 1999, Yokoyama2003), 대부분의 종이 체근육, 뇌, 심장막, 소화관, 신장, 난소 등의 기관에 육안으로 보이는 시스트를 형성하는 조직 기생성이다 (Blaylock et al., 2004, Burger et al.
	쿠도아속 점액포자충으로 보고된 종은 어떤 것들이 있는가?	, 2004). 이들 쿠도아충 가운데 넙치에서는 4개의 극낭을 가진 K. thyrsites가 근육 용해를 일으키는 것으로 최초로 보고되었으며 (Yokoyama et al., 2004), 농어에 기생하는 것으로 보고된 Kudoa lateolabracis가 최근에 넙치의 근육에서 발견되었고 (Grabner et al., 2012), 최근 한국의 양식 넙치의 근육에서 신종 쿠도아충인 Kudoa septempunctata의 기생이 보고되었다 (Matsukane et al., 2010). K.
	쿠도아충에 의한 감염으로 인해 나타나는 피해는?	, 1993, Nakajima and Egusa 1978, Sitjà-Bobadilla2009). 쿠도아충에 의한 감염은 숙주의 생리, 행동, 생존 등에 영향을 미치지 않지만(Moran et al., 1999), 근섬유에 기생하는 Kudoa thyrsites, Kudoa musculoliquefaciens, Kudoa paniformis, Kudoa clupeidae, Kudoa miniauriculata 등은 어류가죽은 후에 기생충의 단백질 분해효소에 의해 근육을 용해시켜 ‘젤리화’를 일으킴으로써 상품 가치를 떨어뜨려 경제적으로 피해를 일으킨다 (Kudo et al., 1987, Moran et al.

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일본 수산청 : 넙치에 기생하는 Kudoa septempunctata 의 검사법에 관하여, 2012.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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