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문제 정의
- 따라서 본 연구는 경기도 화성지역의 시설재배 무화과를 대상으로 총채벌레의 발생실태와 피해양상을 조사하여 향후 무화과에 발생하는 총채벌레의 연구 및 방제를 위한 기초 자료로 활용하고자 수행되었다.
제안 방법
- V8, Carl Zeiss, Germany)을 이용하여 형태적 분류를 하였고, 형태적으로 분류된 개체를 다시 genomic DNA (gDNA)를 추출하고 rDNA의 ITS2 부위를 이용한 PCR-RFLP의 단편패턴을 이용하여 확인하였다(Toda and Komazaki, 2002). PCR-RFLP의 단편패턴을 이용한 종 동정을 위해 genomic DNA (gDNA) 추출은 gDNA는 DNeasy Blood and Tissue kit (Qiagen, Inc)를 이용하여 kit의 protocol에 따라 추출하였다. ITS2 (internal transcribed spacer 2) 부위의 증폭은 Toda and Komazaki (2002)가 사용한프라이머 5’-TGTGAACTGCAGGACACATGA-3’와 5‘-GGTAATCT CACCTGAACTGAGGTC-3’를 이용하였고, 증폭조건은 Ahn et al.
- 경기도 화성시 서신면의 시설에서 재배되고 있는 무화과를 대상으로 2013년 8월부터 10월까지 3개월간 총채벌레의 피해 과실에서 채집한 개체와 무화과 과원에 설치한 황색 평판 끈끈이트랩(15 × 25 cm, Greenagrotech, Korea)에 포획된 개체를 Wang et al. (2010)과 Woo et al. (1971)이 제시한 분류키를 바탕으로 실체현미경(SteREO Discovery. V8, Carl Zeiss, Germany)을 이용하여 형태적 분류를 하였고, 형태적으로 분류된 개체를 다시 genomic DNA (gDNA)를 추출하고 rDNA의 ITS2 부위를 이용한 PCR-RFLP의 단편패턴을 이용하여 확인하였다(Toda and Komazaki, 2002).
- 시기별로 과실에 나타나는 피해현황을 조사하기 위해 각 줄을 반복으로 하여 3반복으로 조사하였으며, 각 줄에서 5주를 임의 선정하여 월 1회씩 총 4회에 걸쳐 조사하였다. 과실의 피해 특성은 피해 받은 과실을 수거하여 실험실에서 수술용 칼을 이용하여 과실을 반으로 갈라 과실의 내부를 실체 현미경(SteREO Discovery. V8, Carl Zeiss, Germany)을 이용하여 관찰하고 특징을 기술하였다.
- 총채벌레의 발생밀도는 화성시 서신면의 시설에서 재배되고 있는 무화과의 중점 수확시기인 8월부터 10월까지 3개월간에 걸쳐 황색 평판 끈끈이트랩(15 × 25 cm, Greenagrotech, Korea)을 이용하여 조사하였다. 끈끈이트랩은 과원의 중앙부에 3m 간격으로 1.5 m 높이에 총 5장을 설치하였으며, 7~13일 간격으로 교체하고 수거하였다. 수거한 황색 평판 끈끈이 트랩은 Wang et al.
- 밀도조사가 실시된 동일한 무화과 과원에서 2013년 7월부터 10월까지 4개월간 과실에서의 총채벌레 피해현황과 피해특성을 조사하였다. 시기별로 과실에 나타나는 피해현황을 조사하기 위해 각 줄을 반복으로 하여 3반복으로 조사하였으며, 각 줄에서 5주를 임의 선정하여 월 1회씩 총 4회에 걸쳐 조사하였다.
- 5 m 높이에 총 5장을 설치하였으며, 7~13일 간격으로 교체하고 수거하였다. 수거한 황색 평판 끈끈이 트랩은 Wang et al. (2010)과 Woo et al. (1976), 그리고 PCR-RFLP의 단편패턴을 토대로 분류한 결과물을 토대로 실체현미경(SteREO Discovery. V8, Carl Zeiss, Germany)을 이용하여 밀도를 조사하였다.
- 밀도조사가 실시된 동일한 무화과 과원에서 2013년 7월부터 10월까지 4개월간 과실에서의 총채벌레 피해현황과 피해특성을 조사하였다. 시기별로 과실에 나타나는 피해현황을 조사하기 위해 각 줄을 반복으로 하여 3반복으로 조사하였으며, 각 줄에서 5주를 임의 선정하여 월 1회씩 총 4회에 걸쳐 조사하였다. 과실의 피해 특성은 피해 받은 과실을 수거하여 실험실에서 수술용 칼을 이용하여 과실을 반으로 갈라 과실의 내부를 실체 현미경(SteREO Discovery.
- 정제된 PCR 결과산물은 10 μL에 제한효소 Rsa I (Thermo Scientific, USA) 5 unit을 처리하고, 37℃에서 2시간 동안 반응시키고, 60℃에서 20분간 제한효소를 불활성 시킨 후, 2% agarose gel (TEA buffer)을 이용한 전기영동에서 절단된 DNA 단편 패턴을 통해 확인하였다.
- 증폭된 PCR 결과산물의 5 μL를 2% agarose gel (TAE buffer)에 전기영동을 통해 증폭 여부를 확인하고, 남은 PCR 결과산물은 Qiaquick PCR Purification Kit (Qiagen, USA)을 이용하여 정제하였다.
- 총채벌레의 발생밀도는 화성시 서신면의 시설에서 재배되고 있는 무화과의 중점 수확시기인 8월부터 10월까지 3개월간에 걸쳐 황색 평판 끈끈이트랩(15 × 25 cm, Greenagrotech, Korea)을 이용하여 조사하였다.
이론/모형
- ITS2 (internal transcribed spacer 2) 부위의 증폭은 Toda and Komazaki (2002)가 사용한프라이머 5’-TGTGAACTGCAGGACACATGA-3’와 5‘-GGTAATCT CACCTGAACTGAGGTC-3’를 이용하였고, 증폭조건은 Ahn et al. (2014)이 제시한 조건을 따랐다.
성능/효과
- 3). 7~9월은 온실재배 무화과의 과실의 주요 생산 시기이며, 농가에서는 과실을 수확하기 1달 전부터 모든 약제의 사용을 중단하기 때문에 총채벌레의 과실 피해가 증가할 것으로 예상되었으나, 본 조사에서는 7월 이후부터 과실의 피해는 감소하는 경향을 보였다. 이러한 원인으로는 본 조사에서 끈끈이트랩에 채집된 발생량이 Park et al.
- 무화과 주요 수확기인 7월부터 10월까지 4개월간 총채벌레에 의한 무화과 과실의 피해를 월별로 조사한 결과, 피해과율은 7월이 18.2%로 가장 많았으며, 8월에 9.7%, 9월에 2.9%, 10월에 1.3%로 시간이 지남에 따라 과실의 피해율은 현저하게 감소하였다(Fig. 3). 7~9월은 온실재배 무화과의 과실의 주요 생산 시기이며, 농가에서는 과실을 수확하기 1달 전부터 모든 약제의 사용을 중단하기 때문에 총채벌레의 과실 피해가 증가할 것으로 예상되었으나, 본 조사에서는 7월 이후부터 과실의 피해는 감소하는 경향을 보였다.
- 4-F). 본 실험에서 무화과 과실 속에서 관찰된 총채벌레 개체들은 대부분이 약충으로 화훼류나 채소류와 달리 무화과 과실은 쉽게 으깨어지는 꽃들로 구성된 과실로 총채벌레가 과실과 뒤섞여 밀도의 조사는 불가능하였다.
- 대만총채벌레의 경우에는 조사기간 동안 뚜렷한 발생밀도의 변화 없이 매우 낮은 밀도수준을 유지하였다. 본 조사에서 모든 총채벌레의 발생 밀도는 무화과의 주 생산시기인 8월에 가장 높았고, 8월 이후에는 감소하였다. 이러한 원인은 Park et al.
- 4-C and E). 실체현미경을 이용하여 과실의 피해 부위를 확대한 결과, 총채벌레에 피해를 받아 갈변된 부위에서는 회색의 곰팡이류가 과육을 양분으로 성장하고 있었으며(Fig. 4-D), 총채벌레의 사체와 탈피각들이 다수 관찰되었다(Fig. 4-F). 본 실험에서 무화과 과실 속에서 관찰된 총채벌레 개체들은 대부분이 약충으로 화훼류나 채소류와 달리 무화과 과실은 쉽게 으깨어지는 꽃들로 구성된 과실로 총채벌레가 과실과 뒤섞여 밀도의 조사는 불가능하였다.
- 총채벌레의 발생 밀도는 파총채벌레, 꽃노랑총채벌레, 대만총채벌레 3종 모두 무화과 과실의 수확기 초기인 8월에 가장 많은 발생량을 보였으며, 9월부터 발생량은 현저히 감소하는 것으로 나타났다. 종별 총채벌레의 발생밀도는 파총채벌레가 조사 전 기간 동안 월등하게 우점하는 것으로 나타났으며, 그 다음으로 꽃노랑총채벌레로 나타났다. 꽃노랑총채벌레는 8월 중순경에 피크를 보였으나, 파총채벌레에 비해서는 낮은 수준의 발생밀도를 보였으며, 9월 이후에는 지속적으로 매우 낮은 밀도를 유지하였다.
- 총채벌레에 의해 피해 받은 과실에서 채집한 총채벌레의 종을 동정하고 PCR-RFLP 패턴을 이용해 확인한 결과 피해과실에서는 꽃노랑총채벌레(Frankliniella occidentalis Pergande), 파총채벌레(Thrips tabaci Lindeman), 대만총채벌레(F. intonsa Trybom) 3종으로 확인되었으며, 황색끈끈이 트랩을 이용해 포획된 개체도 같은 종으로 확인되었다(Fig. 1). PCR-RFLP를 이용한 총채벌레의 단편패턴은 Fig.
- 2는 2013년도에 무화과 주요 수확시기인 8월부터 10월까지 황색 끈끈이 트랩을 이용하여 무화과원에서 발생하는 총채벌레 종류별 발생밀도 변화를 조사한 결과이다. 총채벌레의 발생 밀도는 파총채벌레, 꽃노랑총채벌레, 대만총채벌레 3종 모두 무화과 과실의 수확기 초기인 8월에 가장 많은 발생량을 보였으며, 9월부터 발생량은 현저히 감소하는 것으로 나타났다. 종별 총채벌레의 발생밀도는 파총채벌레가 조사 전 기간 동안 월등하게 우점하는 것으로 나타났으며, 그 다음으로 꽃노랑총채벌레로 나타났다.
후속연구
- (2002)의 국화 재배시설의 경우 노지에서 9월 중순까지 발생량이 유지되는 것과는 달리 9월 초순 이후로 시설에서의 총채벌레의 밀도는 급격히 감소하였다. 따라서 차후 무화과에 발생하는 총채벌레의 발생 밀도 및 피해 조사에 있어 조사시기 설정이 중요할 것으로 생각된다.
- 노지의 경우 무화과 재배지 주변의 기주식물에 따른 다양한 총채벌레가 발생 할 것이며 과실로에서의 피해도 지속적으로 발생할 것으로 생각된다. 따라서 향후 무화과의 안정적인 생산을 위해서는 노지재배의 무화과에 발생하는 총채벌레에 대한 발생 실태 조사 및 수확 전 1개월 동안 농약을 살포할 수 없는 무화과 재배 특성을 고려한 방제법 개발이 필요할 것이라 사료된다. 본 조사결과들은 무화과원에서의 총채벌레 피해에 대한 문제인식을 불러일으킴은 물론, 향후 보다 정밀한 연구를 위한 기초자료로서 활용이 가능할 것으로 생각된다.
- 따라서 향후 무화과의 안정적인 생산을 위해서는 노지재배의 무화과에 발생하는 총채벌레에 대한 발생 실태 조사 및 수확 전 1개월 동안 농약을 살포할 수 없는 무화과 재배 특성을 고려한 방제법 개발이 필요할 것이라 사료된다. 본 조사결과들은 무화과원에서의 총채벌레 피해에 대한 문제인식을 불러일으킴은 물론, 향후 보다 정밀한 연구를 위한 기초자료로서 활용이 가능할 것으로 생각된다.
- 본 조사에서는 시설재배에 발생하는 총채벌레에 관한 발생 소장 및 피해에 관한 단편적인 자료를 제시하였으나, 우리나라 무화과 재배면적의 약 70%를 차지하는 노지 재배의 총채벌레 피해에 관한 자료는 제시하지 못하였다. 노지의 경우 무화과 재배지 주변의 기주식물에 따른 다양한 총채벌레가 발생 할 것이며 과실로에서의 피해도 지속적으로 발생할 것으로 생각된다.
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