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문제 정의
- 그러나 MAT 검사에 이용되는 킷트는 ELISA에 비하여 비용이 저렴하고, ELISA reader와 같은 기기를 필요로 하지 않기 때문에 많은 시료를 검사할 경우에는 매우 경제적이라 할 수 있다. 따라서 본 연구에서는 제주도 전역에서 수집된 돼지 혈청에 대하여 MAT 방법을 적용한 혈청검사를 통하여 제주도내 살모넬라증의 발생 상황을 파악하고자 하였다.
제안 방법
- MAT 항원을 모든 well에 50 μL씩 첨가한 후 밀봉하여 37℃에서 24시간 동안 배양하였다. 각각의 microplate에는 양성 및 음성 대조를 두어 결과 판독의 유효성 검증에 활용하였다. 배양 후 플레이트를 실온에서 15분간 정치시킨 후 밝고 평편한 장소에서 검은 종이 위에 플레이트를 놓고 응집여부를 판독하였다.
- 실험의 유효성 검정은 양성대조의 경우 응집역가가 160배 이상, 음성대조는 40배 미만인 것으로 판단하였다. 결과 판정은 응집반응이 억제된 마지막 희석배수를 가검 혈청의 역가로 판정하였으며, 40배 이상에서 응집반응을 보인 경우 양성으로 간주하였다.
- 각각의 microplate에는 양성 및 음성 대조를 두어 결과 판독의 유효성 검증에 활용하였다. 배양 후 플레이트를 실온에서 15분간 정치시킨 후 밝고 평편한 장소에서 검은 종이 위에 플레이트를 놓고 응집여부를 판독하였다. 실험의 유효성 검정은 양성대조의 경우 응집역가가 160배 이상, 음성대조는 40배 미만인 것으로 판단하였다.
- Typhimurium에 대한 항체검사를 실시하였다. 의뢰된 혈청 시료는 연도별, 연령별, 계절별 및 지역별로 구분하여 실험에 공여하였다. 연도별로는 2009년 2,890두, 2010년 2,745두, 2011년 4,690두, 2012년 2,560두가 의뢰되었다(Table 1).
- 혈청검사는 S. Typhimurium을 배양하여 불활화시킨 균체항원으로 제작된 ST MAT Reagent (MEDIAN Diagnostics Inc., Korea)를 사용하는 마이크로플레이트 응집반응을 이용하였다. 검사 전 각각의 돼지 혈청은 56℃ 항온수조에서 30분간 처리하여 비동화하였다.
대상 데이터
- 2009년부터 2012년까지 총 96개 농장으로부터 제주특별자치도 동물위생시험소에 의뢰된 12,885두의 돼지 혈청을 대상으로 S. Typhimurium에 대한 항체검사를 실시하였다. 의뢰된 혈청 시료는 연도별, 연령별, 계절별 및 지역별로 구분하여 실험에 공여하였다.
- 계절별로는 겨울철(12∼2월) 260두, 봄(3∼5월) 3,734두, 여름(6∼8월) 2,961두, 가을(9∼11월)에 5,930두가 의뢰되었다. 지역별로는 제주시 소재 66개 농장 및 서귀포시 30개 농장으로부터 각각 8,308두와 4,557두가 의뢰되었다.
성능/효과
- 6%로 나타나 큰 차이를 보이지는 않았다(Table 4). 검사 의뢰된 농장별로 제주시 66개 농장 및 서귀포시 30개 농장 모두 S. Typhimurium 항체 양성 농장으로 확인되었다.
- 3%의 순으로 낮아지고 있었다(Table 3). 검사한 모든 연령에서 겨울철에 가장 높은 항체 양성률을 보이다가 봄철에 현저하게 떨어진 뒤 여름철을 지난 후 다시 양성률이 증가하는 경향을 나타내었다. 지역별로 항체 양성률을 비교한 결과 서귀포시와 제주시가 각각 19.
- 0% 정도로 매년 비슷한 수준의 양성률을 나타내었다. 돼지의 연령별로 혈청검사 결과를 비교하였을 때 20일령에서 130일령까지의 자돈에서 양성률이 6.7%로 나타난 반면, 처녀돈을 포함한 모돈에서는 46.7%를 보이고 있어 약 7배 이상의 높은 항체 양성률을 나타내었다. 자돈에서는 20일령의 포유자돈에서 4.
- 7%)에 비해 약 7배정도 높은 수준을 보이는 것으로 확인되었다. 또한 같은 모돈이라 할지라도 산차가 높아질수록 항체 양성률은 증가하는 경향을 보이고 있었다. 이러한 결과는 본 균체에 오염되어 있는 돈사에서 오랜 기간 생육되어 질수록 균체에 노출될 가능성이 높기 때문에 나타난 현상으로 추정된다.
- 5배 높은 균 검출률을 나타내고 있었다. 또한 분리된 총 54균주 중 44균주(81.5%)가 S. Typhimurium으로 동정되어 살모넬라 항체는 대부분 본 균체의 감염에 의해 형성된 항체인 것으로 확인되었다. 그러나 제주도의 경우 최근까지 돼지 살모넬라증에 대한 발생 상황조차 제대로 조사 되어 있지 않은 상황이다.
- 이들 균체에 대하여 파 지형과 유전형을 분석한 결과 3개 농장에서 분리된 균체에서 동질성이 확인되었으며, 이는 환경에 오염 되어 있던 살모넬라 균체가 돼지로 감염될 수 있음을 시사하고 있다. 본 연구에서 처녀돈을 포함한 모돈(46.7%)에서의 S. Typhimurium에 대한 항체 양성률이 자돈(6.7%)에 비해 약 7배정도 높은 수준을 보이는 것으로 확인되었다. 또한 같은 모돈이라 할지라도 산차가 높아질수록 항체 양성률은 증가하는 경향을 보이고 있었다.
- 국내에서 Lim 등(2011)은 16개 돼지 농장을 대상으로 돼지 분변과 퇴비, 돈사 내 칸막이, 돈사 바닥 등의 환경시료로부터 살모넬라균을 분리하고 분리된 균체에 대한 유전적 상관성을 조사하였다. 살모넬라균체는 6개 각기 다른 농장에서 총 36개 균주가 분리되었으며 대부분 S. Typhimurium으로 동정되었고, 시료별로 돼지 분변 및 환경시료에서 각각 18점씩 검출되었다. 균체가 분리된 분변 시료는 이유자돈과 육성-비육돈 분변 시료가 각각 16점 및 2점으로 확인되었다.
- 배양 후 플레이트를 실온에서 15분간 정치시킨 후 밝고 평편한 장소에서 검은 종이 위에 플레이트를 놓고 응집여부를 판독하였다. 실험의 유효성 검정은 양성대조의 경우 응집역가가 160배 이상, 음성대조는 40배 미만인 것으로 판단하였다. 결과 판정은 응집반응이 억제된 마지막 희석배수를 가검 혈청의 역가로 판정하였으며, 40배 이상에서 응집반응을 보인 경우 양성으로 간주하였다.
- 응집반응에서 S. Typhimurium 항체 양성으로 판명된 개체는 총 2,418두(18.8%)로 나타났으며, 연도별로는 2009년에 31.5%로 가장 높은 항체 양성률을 보이고 있었다(Table 2). 2010년 이후에는 14.
- 환경시료에서 분리된 살모넬라 균주는 총 18주로 슬러지 및 퇴비에서 5주, 칸막이 6주, 돈사 바닥 2주, 환기장치 1주, 물과 닛뿔 2주, 사료 1주 및 농장 종사자의 손에서 1주가 분리되었다. 이들 균체에 대하여 파 지형과 유전형을 분석한 결과 3개 농장에서 분리된 균체에서 동질성이 확인되었으며, 이는 환경에 오염 되어 있던 살모넬라 균체가 돼지로 감염될 수 있음을 시사하고 있다. 본 연구에서 처녀돈을 포함한 모돈(46.
- 모돈으로부터 초유를 통하여 포유자돈으로 이행되는 모체이행항체(immunoglobulin A)는 포유기에 감염되는 각종 질병에 대한 저항성을 가지게 하는 중요한 방어 기전이며, 돼지의 연령이 증가하면서 점차 소실된다(Offit과 Clark, 1985). 이번 연구에서 자돈의 연령별로 S. Typhimurium에 대한 항체 양성률을 비교 분석한 결과 20일령에서는 4.4%를 보인 후 이유자돈 시기인 40일령에서 가장 낮은 3.0%를 나타내었고, 이후 연령이 증가할수록 점차 양성률은 증가하는 추세를 보이고 있었다. 이러한 결과는 모체이행 항체가 거의 소실되는 이유 시기가 지난 후 살모넬라 균체에 노출되어 감염이 이루어져 항체 양성률을 증가시키고 있기 때문인 것으로 판단된다.
- 9%로 나타났다. 이에 비하여 제주도 돼지를 대상으로 혈청검사를 실시한 본 연구에서는 S. Typhimurium에 대한 항체 양성률은 18.8%를 나타내어 국내 다른 지역보다 비교적 낮은 수준을 보이고 있었다. 또한 본 연구에서 계절별 항체 양성률은 겨울철에 가장 높은 반면 여름에 가장 낮아 Kim 등(2010)의 보고와 일치하였다.
- 7%를 보이고 있어 약 7배 이상의 높은 항체 양성률을 나타내었다. 자돈에서는 20일령의 포유자돈에서 4.4%의 양성 률을 나타낸 후 이유자돈 시기인 40일령에서 가장 낮은 3.0%로 떨어진 다음 점차 연령이 증가할수록 항체 양성률이 증가하는 추세를 보이고 있었다. 모돈에서는 처녀돈 32.
- 제주도 내에서 돼지 살모넬라증의 발생양상을 파악하기 위하여 돼지 혈청에 대한 항체 검사를 실시하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 제주도 돼지에서 응집반응을 통한 S. Typhimurium 항체 양성률은 18.8%(2,418/12,885두)로 나타났으며, 돼지 연령별로 자돈에서는 6.7%로 나타난 반면, 모돈에서는 46.7%를 보이고 있어 약 7배 이상의 높은 항체 양성률을 나타내었다. 이유 후 40일령에서 가장 낮은 항체 양성률을 나타내었는데, 이는 모체 이행 항체의 소실과 관련이 있을 것으로 추정된다.
- 균체가 분리된 분변 시료는 이유자돈과 육성-비육돈 분변 시료가 각각 16점 및 2점으로 확인되었다. 환경시료에서 분리된 살모넬라 균주는 총 18주로 슬러지 및 퇴비에서 5주, 칸막이 6주, 돈사 바닥 2주, 환기장치 1주, 물과 닛뿔 2주, 사료 1주 및 농장 종사자의 손에서 1주가 분리되었다. 이들 균체에 대하여 파 지형과 유전형을 분석한 결과 3개 농장에서 분리된 균체에서 동질성이 확인되었으며, 이는 환경에 오염 되어 있던 살모넬라 균체가 돼지로 감염될 수 있음을 시사하고 있다.
후속연구
- 그러므로 혈중 항체 양성률을 근거로 살모넬라증의 발생을 파악하기에는 다소 문제점이 있을 것으로 사료된다. 따라서 실험실 검사의 정확한 진단을 위해서는 혈청검사와 세균배양 등 살모넬라균체에 대한 검사가 병행되어야 할 것으로 판단된다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.