어류병원성 연쇄구균의 생장을 억제하는 Bacillus pumilus CPB-St의 생물학적 특성 Biological Characters of Bacillus pumilus CPB-St Inhibiting the Growth of Fish Pathogenic Streptococci원문보기
어류병원성 연쇄상구균에 대하여 항 미생물 효과를 갖는 것으로 보고된 Bacillus sp. CPB-St를 수산용 probiotics로 개발하기 위한 기초 조사로서 미생물의 생물학적인 특성을 알아보았다. Bacillus sp. CPB-St는 16S rRNA 유전자 염기서열에 근거하여 Bacillus pumilus로 동정되었으며 B. pumilis CPB-St (이하 CPB-St)로 명명되었다. CPB-St를 배양 온도 및 배지의 종류에 따라 Streptococcus sp.에 대한 생장억제능력을 평가한 결과, $20^{\circ}C$(억제대: 11~29 mm)에서 배양하였을 때가 $30^{\circ}C$ (12~21 mm)에서 배양했을 때보다 생장억제효과가 높았고, NA (29 mm)와 TSA (29 mm)에서는 유사하였으나 BHIA (22 mm)에서는 낮게 나타났다. 또한 생장억제대의 크기는 pH 7.0에서 18 mm로 가장 높게 나타났고, 염분농도 0.5~3%에서는 동일하였다. 한편 CPB-St 의 생물학적 특성을 알아본 결과 $30^{\circ}C$에서 완만한 증식을 보였으며 배양 후 48시간에 최고 생장을 나타내었다. pH 4.0로 조정한 인공위액에서는 5시간까지 약간의 감소만 나타내었다. 넙치에서 채취 한 담즙에서 CPB-St는 농도에 관계없이 동일한 성장을 보였으며 deoxycholic acid가 첨가된 TSA배지에서 $300{\mu}g/ml$의 농도까지 증식 가능하였다. 또한 1%의 염분농도에서 최적의 성장을 보였으며 7%의 농도까지 증식에 큰 차이를 보이지는 않았고 저온 내성의 경우 $-20^{\circ}C$와 $-70^{\circ}C$에서는 45분경과 시점부터 대조군에 비해 성장 감소가 나타났으나 $4^{\circ}C$에서는 실온과 차이를 보이지 않았다. 따라서 CPB-St는 어류의 소화관 내에서의 생존가능성이 높으며 사료에 첨가하여 저온에 보관하여도 균수가 감소되지 않을 것으로 판단된다.
어류병원성 연쇄상구균에 대하여 항 미생물 효과를 갖는 것으로 보고된 Bacillus sp. CPB-St를 수산용 probiotics로 개발하기 위한 기초 조사로서 미생물의 생물학적인 특성을 알아보았다. Bacillus sp. CPB-St는 16S rRNA 유전자 염기서열에 근거하여 Bacillus pumilus로 동정되었으며 B. pumilis CPB-St (이하 CPB-St)로 명명되었다. CPB-St를 배양 온도 및 배지의 종류에 따라 Streptococcus sp.에 대한 생장억제능력을 평가한 결과, $20^{\circ}C$(억제대: 11~29 mm)에서 배양하였을 때가 $30^{\circ}C$ (12~21 mm)에서 배양했을 때보다 생장억제효과가 높았고, NA (29 mm)와 TSA (29 mm)에서는 유사하였으나 BHIA (22 mm)에서는 낮게 나타났다. 또한 생장억제대의 크기는 pH 7.0에서 18 mm로 가장 높게 나타났고, 염분농도 0.5~3%에서는 동일하였다. 한편 CPB-St 의 생물학적 특성을 알아본 결과 $30^{\circ}C$에서 완만한 증식을 보였으며 배양 후 48시간에 최고 생장을 나타내었다. pH 4.0로 조정한 인공위액에서는 5시간까지 약간의 감소만 나타내었다. 넙치에서 채취 한 담즙에서 CPB-St는 농도에 관계없이 동일한 성장을 보였으며 deoxycholic acid가 첨가된 TSA배지에서 $300{\mu}g/ml$의 농도까지 증식 가능하였다. 또한 1%의 염분농도에서 최적의 성장을 보였으며 7%의 농도까지 증식에 큰 차이를 보이지는 않았고 저온 내성의 경우 $-20^{\circ}C$와 $-70^{\circ}C$에서는 45분경과 시점부터 대조군에 비해 성장 감소가 나타났으나 $4^{\circ}C$에서는 실온과 차이를 보이지 않았다. 따라서 CPB-St는 어류의 소화관 내에서의 생존가능성이 높으며 사료에 첨가하여 저온에 보관하여도 균수가 감소되지 않을 것으로 판단된다.
The biological characteristics of Bacillus sp.CPB-St as a probiotic strain to control fish streptococcosis was determined. Based on 16S rRNA sequencing, Bacillus sp.CPB-St was identified as Bacillus pumilus and named B. pumilus CPB-St (Abbreviated as CPB-St). Growth inhibitory activity of CPB-St aga...
The biological characteristics of Bacillus sp.CPB-St as a probiotic strain to control fish streptococcosis was determined. Based on 16S rRNA sequencing, Bacillus sp.CPB-St was identified as Bacillus pumilus and named B. pumilus CPB-St (Abbreviated as CPB-St). Growth inhibitory activity of CPB-St against Streptococcus spp. was examined at three different incubation temperatures ($20^{\circ}C$, $25^{\circ}C$, and $30^{\circ}C$) and three culture media (NA, TSA, and BHIA) based on the diameter of inhibition zone. Its activity (inhibition zone of 11~29 mm) at $20^{\circ}C$ was higher than that (12~21 mm) at $30^{\circ}C$. Its activity (29 mm) in NA media was the same as that (29 mm) in TSA media. However, it was higher than that (22 mm) in BHIA media. The inhibitory activity of CPB-St against Streptococcus spp. was high at pH7. However, its activity was the same at salinity of 0.5% to 3%. CPB-St showed maximum growth after incubation at $25^{\circ}C$ for 48 h. To use CPB-St as probiotics, settlement studies in fish intestine and its efficacy through feeding are needed. CPB-St was highly resistant to gastric juice at pH4 and flounder's bile salt as well as deoxycholic acid at $300{\mu}g/ml$. CPB-St showed optimal viability in 1% NaCl. It showed similar growth in 0% to 7% NaCl. CPB-St could tolerate $-20^{\circ}C$ and $-70^{\circ}C$ for 45 min. There was no difference in the growth of the strain between room temperature and $4^{\circ}C$. Fish diet supplemented with CPB-St could be stored at low temperature without cell loss. Therefore, CPB-St might be used as probiotics to control streptococcosis of fish.
The biological characteristics of Bacillus sp.CPB-St as a probiotic strain to control fish streptococcosis was determined. Based on 16S rRNA sequencing, Bacillus sp.CPB-St was identified as Bacillus pumilus and named B. pumilus CPB-St (Abbreviated as CPB-St). Growth inhibitory activity of CPB-St against Streptococcus spp. was examined at three different incubation temperatures ($20^{\circ}C$, $25^{\circ}C$, and $30^{\circ}C$) and three culture media (NA, TSA, and BHIA) based on the diameter of inhibition zone. Its activity (inhibition zone of 11~29 mm) at $20^{\circ}C$ was higher than that (12~21 mm) at $30^{\circ}C$. Its activity (29 mm) in NA media was the same as that (29 mm) in TSA media. However, it was higher than that (22 mm) in BHIA media. The inhibitory activity of CPB-St against Streptococcus spp. was high at pH7. However, its activity was the same at salinity of 0.5% to 3%. CPB-St showed maximum growth after incubation at $25^{\circ}C$ for 48 h. To use CPB-St as probiotics, settlement studies in fish intestine and its efficacy through feeding are needed. CPB-St was highly resistant to gastric juice at pH4 and flounder's bile salt as well as deoxycholic acid at $300{\mu}g/ml$. CPB-St showed optimal viability in 1% NaCl. It showed similar growth in 0% to 7% NaCl. CPB-St could tolerate $-20^{\circ}C$ and $-70^{\circ}C$ for 45 min. There was no difference in the growth of the strain between room temperature and $4^{\circ}C$. Fish diet supplemented with CPB-St could be stored at low temperature without cell loss. Therefore, CPB-St might be used as probiotics to control streptococcosis of fish.
* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.
문제 정의
어류병원성 연쇄상구균에 대하여 항 미생물 효과를 갖는 것으로 보고된 Bacillus sp. CPB-St를 수산용 probiotics로 개발하기 위한 기초 조사로서 미생물의 생물학적인 특성을 알아보았다. Bacillus sp.
그러므로 본 연구에서는 Bacillus sp.CPB-St의 pH 및 담즙 내성을 포함한 다양한 생물학적인 특성을 알아보고자 하였다.
이전 연구에서 어류에 사용하는 probiotics의 인체에 대한 안전성을 고려하여, 사람이 날 것으로 섭취하는 패류로부터 유용세균을 분리하여 이의 probiotics로서의 이용가능성을 보고한 바 있다 (Lee and Kim, 2014). 본 연구는 이 세균을 유용세균으로 개발하기 위하여 필요한 기초조사로서 세균의 생물학적 특성들을 알아 보았다.
제안 방법
25℃에서 24시간 동안 배양하여 107 CFU/ml의 농도로 조정한 CPB-St 10 ㎕에 PBS (0, 10, 30, 60 μl)와 Bile (90, 80, 60, 30 ㎕)을 각각 섞어 최종량을 100 μl로 조정하였고, 25℃에서 1시간 배양한 후 TSA에 각각 도말하여 25℃에서 24시간 배양한 후 결과를 확인하였다.
, 1998). CPB-St는 TSB 배지에 24시간 배양한 후 원심분리 (8000 rpm, 15℃, 10 min)하여 cell을 회수하고 멸균 생리식염수 (0.65% NaCl) 로 2회 세척한 후, 생균수 106 CFU/ml 수준으로 인공위액에 접종한 후 25℃로 배양하면서 5시간동안 일정 간격으로 TSA 배지에 도말하여 생균수를 측정하였다. Control은 pH 7.
CPB-St를 105 CFU/ml으로 조정한 뒤 소형 tube에 1 ml씩 분주하여 실온 (25℃), 냉장 (4℃), 냉동(-20℃), 초저온냉동 (-70℃) 조건에 각각 넣은 후 15, 30, 45, 60, 90, 120, 180분 경과 후에 TSA 배지에 도말하여 25℃에 배양한 후 온도에 따른 시간대별 차이를 비교하였다.
양식산 굴로부터 분리되어 어류병원성 연쇄상구균에 대하여 생장억제효과가 있는 것으로 보고된 (Lee and Kim, 2014) Bacillus sp.CPB-St를 16S rRNA 유전자의 염기서열에 근거하여 동정하였다. Universal primer (fD1, AGAGTTTGATCCTGGC- TCAG: rP2, ACGGCTACCTTGTTACGACTT) 를 이용하여 polymerase chain reaction (PCR: Pre-denaturation, 95℃, 5 min, 1 cycle; Denaturation, 95℃, 30 sec ; Annealing, 55℃, 30 sec; Extension, 72℃, 90 sec, 30 cycles; Final extension, 72℃, 5 min, 1 cycle)을 실시하였다.
적정 시점에서의 균의 확보 및 다른 응용실험에 활용하기 위해서는 세균의 증식곡선을 알아보는 것이 필요하다. CPB-St의 생장곡선을 알아보기 위하여 흡광도를 측정하였다. 200 ml의 TSB에 105 CFU/ml의 CPB-St를 접종하고 30℃에서 90 rpm으로 48시간 동안 배양하면서 2시간 간격으로 600 nm에서 흡광도를 측정하여 생장곡선으로 나타내었다.
NaCl을 0.5~20% 함유한 TSA 배지에 105 CFU/ml 으로 조정한 CPB-St를 도말하여 25℃에서 48시간 배양한 후 colony 수와 크기 그리고 증식유무를 확인하였다.
Universal primer (fD1, AGAGTTTGATCCTGGC- TCAG: rP2, ACGGCTACCTTGTTACGACTT) 를 이용하여 polymerase chain reaction (PCR: Pre-denaturation, 95℃, 5 min, 1 cycle; Denaturation, 95℃, 30 sec ; Annealing, 55℃, 30 sec; Extension, 72℃, 90 sec, 30 cycles; Final extension, 72℃, 5 min, 1 cycle)을 실시하였다. PCR 산물을 purification kit (AccuPrep, Bioneer)를 이용하여 정제한 후 sequencing 의뢰하여 얻은 염기 서열을 NCBI (National Center for Biotechnology Information, USA)의 Blast Search를 이용하여 기존의 보고된 세균종과 비교하였다.
CPB-St를 16S rRNA 유전자의 염기서열에 근거하여 동정하였다. Universal primer (fD1, AGAGTTTGATCCTGGC- TCAG: rP2, ACGGCTACCTTGTTACGACTT) 를 이용하여 polymerase chain reaction (PCR: Pre-denaturation, 95℃, 5 min, 1 cycle; Denaturation, 95℃, 30 sec ; Annealing, 55℃, 30 sec; Extension, 72℃, 90 sec, 30 cycles; Final extension, 72℃, 5 min, 1 cycle)을 실시하였다. PCR 산물을 purification kit (AccuPrep, Bioneer)를 이용하여 정제한 후 sequencing 의뢰하여 얻은 염기 서열을 NCBI (National Center for Biotechnology Information, USA)의 Blast Search를 이용하여 기존의 보고된 세균종과 비교하였다.
또한 deoxycholic acid (담즙산)를 0~500 μg/ml 농도별로 첨가하여 제작한 TSA 배지에 CPB-St를 105 CFU/ml로 조정한 것을 도말하여 25℃에서 48시간 배양하면서 증식유무를 확인하였다.
107 CFU/ml의 Streptococcus sp.를 함유한 0.7% soft agar (Bacto Agar, Difco)를 CPB-St plate에 중층 시켜 30℃에서 24시간 배양하여 생장 억제 정도를 측정하였다.
배지의 종류와 배양 온도 및 배양 시간이 항균력에 미치는 영향을 알아보기 위해서 NA, TSA 그리고 BHIA 배지에서 20℃, 25℃ 및 30℃로 배양하였으며, 배양 시간은 0∼120시간 까지 24시간 간격으로 조사하였다 ( Sugita et al., 1998; Avonts et al., 2004).
양식넙치 위(stomach)의 pH 측정결과를 토대로 인공위액에 대한 내성실험을 수행하였다. 1N HCl을 사용하여 pH 4.
한편 pH는 TSA 배지를 pH 4.0∼9.0의 6 단계로 조정하여 사용하였으며, 염분 농도는 TSA 배지에 NaCl의 농도를 0.5∼10%의 12 단계로 조정하였다.
이론/모형
다양한 조건에서 배양한 CPB-St가 Streptococcus sp.에 대하여 어느 정도 생장억제능력을 나타내는지 알아보기 위하여 double layer test (Sugita et al., 1996)를 실시하였다. CPB-St를 배지 중앙에 5 ㎕ 접종하여 25℃에서 3일간 배양한 후 chloroform으로 30분간 처리하여 CPB-St를 사균화 시켰다.
성능/효과
Bacillus sp.CPB-St의 16S rRNA 유전자의 염기서열을 NCBI의 Blast Search를 이용하여 기존의 보고된 세균종과 비교한 결과 Bacillus pumilus와 99%이상의 상동성을 보였으므로 본 균주를 B. pumilus CPB-St(이하 CPB-St)로 명명하였다.
CPB-St의 생장곡선을 알아보기 위하여 48시간 동안 배양하면서 흡광도를 조사한 결과 완만한 증가 경향을 보였으며, 48시간에 최고의 증식을 보였다 (Fig. 3).
NA와 TSA 배지에 배양하였을 때 나타내는 증식 억제력은 유사하였지만, BHIA 배지에서는 2~7 mm정도 다소 낮게 나타났다 (Table 1). 또한 20℃와 25℃에서 배양하였을 때가 30℃에서 보다 시간대별 억제능력이 높게 나타났다.
NaCl이 함유된 TSA 배지에서 CPB-St의 성장을 확인한 결과, 1%의 농도에서 최적의 성장을 보였으며 7%의 농도까지는 80% 이상의 증식을 보였다 (Fig. 5).
pH 4.0~9.0의 범위에서 배양한 CPB-St가 나타내는 생장억제대의 크기를 배양 24시간 후에 비교한결과 (Fig. 1), pH 7.0에서 18 mm로 가장 높게 나타났고, 산 보다는 염기의 조건에서 다소 높은 항균력을 보였다. pH 4.
그러므로 CPB-St는 사료에 섞어 투여하였을 때 저온에 의한 균 손실이 없으며 어류의 장내환경에서도 안정할 것으로 판단되어 수산용 probiotic로 개발 가능하다고 판단된다.
또한 1%의 염분농도에서 최적의 성장을 보였으며 7%의 농도까지 증식에 큰 차이를 보이지는 않았고 저온 내성의 경우 -20℃와 -70℃에서는 45분경과 시점부터 대조군에 비해 성장 감소가 나타났으나 4℃에서는 실온과 차이를 보이지 않았다. 따라서 CPB-St는 어류의 소화관 내에서의 생존가능성이 높으며 사료에 첨가하여 저온에 보관하여도 균수가 감소되지 않을 것으로 판단된다.
넙치에서 채취한 담즙에서 CPB-St는 농도에 관계없이 동일한 성장을 보였으며 deoxycholic acid가 첨가된 TSA배지에서 300 ㎍/ml의 농도까지 증식 가능하였다. 또한 1%의 염분농도에서 최적의 성장을 보였으며 7%의 농도까지 증식에 큰 차이를 보이지는 않았고 저온 내성의 경우 -20℃와 -70℃에서는 45분경과 시점부터 대조군에 비해 성장 감소가 나타났으나 4℃에서는 실온과 차이를 보이지 않았다. 따라서 CPB-St는 어류의 소화관 내에서의 생존가능성이 높으며 사료에 첨가하여 저온에 보관하여도 균수가 감소되지 않을 것으로 판단된다.
NA와 TSA 배지에 배양하였을 때 나타내는 증식 억제력은 유사하였지만, BHIA 배지에서는 2~7 mm정도 다소 낮게 나타났다 (Table 1). 또한 20℃와 25℃에서 배양하였을 때가 30℃에서 보다 시간대별 억제능력이 높게 나타났다.
에 대한 생장억제능력을 평가한 결과, 20℃(억제대: 11~29 mm)에서 배양하였을 때가 30℃ (12~21 mm)에서 배양했을 때보다 생장억제효과가 높았고, NA (29 mm)와 TSA (29 mm)에서는 유사하였으나 BHIA (22 mm)에서는 낮게 나타났다. 또한 생장억제대의 크기는 pH 7.0에서 18 mm로 가장 높게 나타났고, 염분농도 0.5~3%에서는 동일하였다. 한편 CPB-St 의 생물학적 특성을 알아본 결과 30℃에서 완만한 증식을 보였으며 배양 후 48시간에 최고 생장을 나타내었다.
0을 나타내었다. 또한 양식 넙치 위의 pH를 근거로 하여 pH 4.0으로 조정한 인공위액에서의 CPB-St의 내성을 조사한 결과 (Fig. 4), 5시간이 경과한 시점까지 CPB-St는 조금씩 감소하는 변화를 보인 반면 대조구인 pH 7.0에서는 일반적인 균의 증식형태를 보였다.
CPB-St를 배양 온도 및 배지의 종류에 따라 Streptococcus sp.에 대한 생장억제능력을 평가한 결과, 20℃(억제대: 11~29 mm)에서 배양하였을 때가 30℃ (12~21 mm)에서 배양했을 때보다 생장억제효과가 높았고, NA (29 mm)와 TSA (29 mm)에서는 유사하였으나 BHIA (22 mm)에서는 낮게 나타났다. 또한 생장억제대의 크기는 pH 7.
CPB-St의 배양 조건에 따라 병원성 Streptococ- cus sp.에 대한 항균력을 비교해 본 결과 고온 보다 저온 (20℃)에서, 고 영양배지 보다는 일반배지 (NA and TSA)에서 배양 하였을 때 높은 항균력을 보였다. 이는 Streptococcus sp.
저온에서의 생존력을 알아본 결과 –20℃와 –70℃에서는 45시간 경과 시점부터 대조군에 비해 성장 감소가 나타났다.
가 증식하지 않았기에 항균력을 관찰할 수 없었다. 하지만 확인 되어진 부분의 자료를 근거로 CPB-St가 pH 4.0과 염분농도 8% 이상에서도 항균력을 나타낼 수 있을 것으로 보인다.
5~3%에서는 동일하였다. 한편 CPB-St 의 생물학적 특성을 알아본 결과 30℃에서 완만한 증식을 보였으며 배양 후 48시간에 최고 생장을 나타내었다. pH 4.
한편 TSA 배지에 deoxycholic acid를 첨가하여 CPB-St를 배양한 결과 48시간을 기준으로 300 μg/ml의 농도까지 CPB-St의 증식이 확인되었다 (Table 2).
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
Lactobacillus rhamnosus는 어떤 효과가 있는가?
, 2013). 사람이나 가축으로부터 분리된 균주를 어류에 이용한 예로써 인간에게 유용한 효과를 발휘하는 것으로 알려진 Lactobacillus rhamnosus를 이용하여 무지개송어의 절창병 원인균인 Aeromonas salmonicida 의 생존억제 및 무지개송어의 면역 증강 효과에 관한 연구 (Nikoskelainen et al., 2001, 2003)와 L.
CPB-St의 배양 조건에 따라 병원성 Streptococ- cus sp.에 대한 항균력을 비교해 본 결과 고온 보다 저온 (20℃)에서, 고 영양배지 보다는 일반배지 (NA and TSA)에서 배양 하였을 때 높은 항균력을 보인 이유는?
에 대한 항균력을 비교해 본 결과 고온 보다 저온 (20℃)에서, 고 영양배지 보다는 일반배지 (NA and TSA)에서 배양 하였을 때 높은 항균력을 보였다. 이는 Streptococcus sp.가 생장 적온이 보다 높고 BHIA와 같은 특수영양분이 함유된 배지에서 잘 자라는 특성 때문인 것으로 보인다. pH 7.
Probiotics의 정의는?
Probiotics는 사람이나 동물에게 건조 세포나 발효 산물의 형태로 투여하여 숙주의 장내세균총을 개선하여 좋은 영향을 주는 단일 혹은 복합 형태의 생균제, 동물용 사료 첨가제로서의 생물체나 물질 그리고 살아있는 미생물 사료 첨가제 등으로 정의되어진다(Gatesoupe, 1999; Irianto and Austin, 2002). 양식 어류에 있어서도 질병 원인균의 과다 증식을 억제하고 어체의 건강을 유지시키기 위한 pro- biotics 개발에 관심이 집중되어 많은 연구들이 진행되어 왔다 (Verschuere et al.
참고문헌 (22)
Avonts, L., van Uytven, E. and de Vuyst, L.: Cell growth and bacteriocin production of probiotic Lactobacillus strains in different media. Int. Dairy J., 14: 947-955, 2004
Fernsndez, M.F., Boris, S. and Barbes, C. : Probiotic properties of human Lactobacilli strains to be used in the gastrointestinal tract. J. of App. Microbiol., 94: 449-455, 2003.
Gildberg, A., Mikkelsen, H., Sandaker, E. and Ringo, E. : Probiotic effect of lactic acid bacteria in the feed on growth and survival of fry of Atlantic cod (Gadus morhua). Hydrobiologia, 352: 279-285, 1997.
Gomez-Gil, B., Roque, A. and Turnbull, J. F. : The use and selection of probiotic bacteria for use in the culture of larval aquatic organisms. Aquaculture, 191: 259-270, 2000.
Irianto, A. and Austin, B. : Use of probiotics to control furunculosis in rainbow trout, Oncorhynchus mykiss (Walbaum). J. of Fish Diseases, 25: 333-342. 2002b.
Kesarcodi-Watson, A., Kaspar, H., Lategan, M.J., Gibson, L. : Probiotics in aquaculture: The need, principles and mechanisms of action and screening processes. Aquaculture, 274: 1-14, 2008.
Lee, J.K., Kim, W.T. and Lee, J.H. : Isolation and identification of lactic acid bacteria for preparation of probiotics. Kor. J. Appl. Microbiol. Biotechnol., 19: 429-432. 1991.
Lee, M. and Kim, E. : Inhibitory effects of candidate probiotic bacteria on the growth of fish pathogenic bacteria, Streptococcus sp.. J. Fish. Pathol., 27: 107-114, 2014.
Macey, B.M and Coyne, V.E. : Improved growth rate and disease resistance in farmed Haliotis midae through probiotic treatment. Aquaculture, 245: 249-261, 2004.
Nikoskelainen, S., Ouwehand, A.C., Bylund, G. and Salminen, S. : Protection of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) from furunculosis by Lactobacillus rhamnosus. Aquaculture, 198: 229-236, 2001.
Nikoskelainen, S., Ouwehand, A. C. Bylund, G., Salminen, S. and Lilius, E-M. : Immune enhancement in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) by potential probiotic bacteria (Lactobacillus rhamnosus). Fish Shellfish Immunol., 15: 443-452, 2003.
Panigrahi, A., Kiron, V., Kobayashi, T., Puangkaew, J., Satoh, S. and Sugita, H. : Immune responses in rainbow trout Oncorhynchus mykiss induced by a potential probiotic bacteria Lactobacillus rhamnosus JCM 1136. Vet. Immunol. and Immunopathol., 102: 379-388, 2004.
Park, C.J., Pyeon, J.S., Cho, Y. K., Hong, S. S. and Lee, H. S.: Characteristics of Enterococcus sp. isolated from animal intestine and powder. Kor. J. Appl. Microbiol. Biotechnol., 24: 393-398, 1996.
Park, H.S., Lee, S. H. and Uhm, T. B. : Selection of microorganisms for probiotics and their characterization. J. Korean Soc. Food Sci. Nutr., 27: 433-440, 1998.
Robertson, P.A.W., O'Dowd, C., Burrells, C., Williams, P. and Austin, B. : Use of Carnobacterium sp. as a probiotic for Atlantic salmon (Salmo salar L.) and rainbow trout (Oncorhynchus mykiss, Walbaum). Aquaculture, 185: 235-243, 2000.
Ruangpan, L., Na-anan, P. and Direkbusarakom, S. : Inhibitory effect of Vibrio alginolyticus on the Growth of V. harveyi. Fish Pathol., 33: 293-296, 1998.
Sugita, H., Shibuya, K., Shimooka. H. and Dehuchi, Y. : Antibacterial abilities of intestinal bacteria in freshwater cultured fish. Aquaculture, 145 : 195-203, 1996.
Sugita, H., Hirose, Y., Matsuo, N. and Deguchi, Y. : Production of the antibacterial substance by Bacillus sp. strain NM 12, an intestinal bacterium of Japanese coastal fish. Aquaculture, 165 : 269-280, 1998.
Tuan, T.N., Duc, P.M. and Hatai, K.: Overview of the use of probiotics in aquaculture. Int. J. of Res. in Fish. and Aquculture, 3: 89-97, 2013.
Verschuere, L., Rombaut, G., Sorgeloos, P. and Verstraete, W. : Probiotic bacteria as biological control agents in aquaculture. Microbiol. and Mol. Biol. reviews, 64: 655-671. 2000.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.