[논문]한국 여성의 질에서 분리한 유산균의 Gardnerella vaginalis에 대한 항균효과 및 특성 규명

김용경; 강창호; 신유진; 백남수; 소재성

doi:10.7841/ksbbj.2015.30.5.239

한국 여성의 질에서 분리한 유산균의 Gardnerella vaginalis에 대한 항균효과 및 특성 규명
Characterization and Antimicrobial Activity against Gardnerella vaginalis of Vaginal Lactobacillus spp. Isolated from Korean Women 원문보기

KSBB Journal, v.30 no.5, 2015년, pp.239 - 244

김용경 (인하대학교 생물공학과) , 강창호 (인하대학교 생물공학과) , 신유진 (인하대학교 생물공학과) , 백남수 ((주)메디오젠) , 소재성 (인하대학교 생물공학과)

Abstract ▼ AI-Helper

Bacterial vaginosis (BV) is caused by microbial imbalance of the vaginal ecosystem and overgrowth of anaerobic bacteria. The antibiotic treatment often results in very high recurrence of BV because it disturbs the vaginal ecosystem. The high recurrence rates suggest a need for alternative therapeutic methods and probiotics are being recognized as alternative or additional treatment method for BV. The purpose of this study was to investigate how human vaginal isolates of Lactobacillus spp. inhibit the BV-associated pathogen Gardnerella vaginalis. Results show that selected strains significantly reduced the viability of G. vaginalis. Among these selected strains KLB410 and KLB416 were further selected based on acid/bile tolerance and identified through 16S rRNA gene sequencing being Lactobacillus plantarum. Further studies are underway to demonstrate that the selected strain can be applied as potential probiotics for recovering vaginal ecosystem.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

문제 정의

따라서 본 연구는 세균성 질증의 치료 및 재발방지를 위한 대체방안의 일환으로 한국 여성의 질에서 분리한 유산균의 프로바이오틱스로의 가능성을 확인하고, 세균성 질증의 주요 원인균인 Gardnerella vaginalis에 대한 항균효과를 확인하였다. 또한 항균활성이 우수한 유산균주를 선별하여 산성과 담즙염에 대한 내성 및 autoaggregation 특성을 확인하여 프로바이오틱스로서의 기능 확인을 통해 관련 연구의 기초 자료로 사용하고자 한다.
일반적으로 프로바이오틱스에 사용되는 유산균은 섭취 시 위와 장을 거치며 생균력이 낮아지게 되므로 낮은 산도와 담즙염에 대한 내성능력은 유용 미생물로 사용하기 위하여 필수적으로 지녀야 하는 요소이다 [14]. 따라서 본 연구에서는 G. vaginalis에 대해 높은 항균 효과를 보인 9 균주에 대해서 산성 및 담즙염에 대한 내성을 확인하였다 (Table 1).
vaginalis는 biofilm 부착력이 뛰어나고 부착 후 다른 세균성 질증 균들의 부착을 증진시킨다고 보고 되고 있다 [13]. 따라서 본 연구에서는 국내 여성의 질에서 분리한 유산균주를 질증의 주요 원인균인 G. vaginalis를 대상으로 항균력 실험을 진행하였다. 분리된 유산균주 90종에 대한 G.
따라서 본 연구는 세균성 질증의 치료 및 재발방지를 위한 대체방안의 일환으로 한국 여성의 질에서 분리한 유산균의 프로바이오틱스로의 가능성을 확인하고, 세균성 질증의 주요 원인균인 Gardnerella vaginalis에 대한 항균효과를 확인하였다. 또한 항균활성이 우수한 유산균주를 선별하여 산성과 담즙염에 대한 내성 및 autoaggregation 특성을 확인하여 프로바이오틱스로서의 기능 확인을 통해 관련 연구의 기초 자료로 사용하고자 한다.
본 연구는 한국 여성 질에서 분리한 유산균을 통해 세균성 질 증의 치료 일환으로 주요 원인균인 Gardnerella vaginalis에 대해 항균효과를 확인하였다. 항균효과가 높은 9 균주의 G.

제안 방법

5 로 조정하여 1% 접종하였다. 24시간 동안 혐기배양한 뒤 G. vaginalis의 생균수를 아래와 같이 측정하여 분리균주의 G. vaginalis에 대한 항균효과를 확인하였다.
G. vaginalis에 대한 항균 효과가 우수한 유산균주를 선별하여 장내 세포 내 부착능력을 간접적으로 확인하기 위하여 Kassa의 연구 [11]를 변형하여 autoaggregation 실험을 진행하였다. MRS 배지에 유산균을 전 배양한 배양액을 OD₆₀₀ 1.
, NY, USA)을 함유한 BHI 배지 (Difco, MI, USA)를사용하였으며, Anaer℃ultA (Merck, Germany)로 혐기상태로 37℃에서 24시간 정치배양하였다. G. vaginalis에 대한 항균 효과는 각각의 유산균주의 상등액을 10% 말 혈청이 포함된5 mL BHI 배지에 10% 첨가한 후, G. vaginalis를 OD₆₀₀ 0.5 로 조정하여 1% 접종하였다. 24시간 동안 혐기배양한 뒤 G.
최종 선별된 유산균은 pH 2에서 7까지 산성에 대한 내성을 확인하였다. 담즙염 내성은 1% oxgall (Difco, MI, USA)을 포함한 MRS 배지에 유산균 희석액을 1% 접종하고 37℃에 24시간 배양한 후 생균수를 확인하였다.
배양한 유산균은 원심분리 (4,000 × g, 4℃, 5분)한 후, PBS에 2번 세척하였고, OD600 1.0 (108-109 CFU/mL)으로 조정하여 균주 현탁액 5 mL을 10초간 진탕한 뒤 5시간 동안 방치하면서 autoaggregation을 확인하였다.
본 연구에서는 한국 여성의 질에서 분리한 유산균 90여종[9]을 사용하였으며, 액체배지 희석법을 이용해 세균성 질증의 주요 원인균인 Gardnerella vaginalis KCTC5096 (G. vaginalis)에 대한 항균력을 확인하였다. 유산균주의 배양은 MRS 배지 (Difco, MI, USA)를 사용하였으며, MRS 액체 배지에 24시간 정치배양한 배양액을 OD₆₀₀ 1.
0 (10⁸-10⁹ CFU/mL)으로 조정하여 각각 산성과 담즙염에 대한 내성 실험에 사용하였다. 산성에 대한 내성을 확인하기 위하여 유산균 희석액 1 mL를 9 mL PBS (pH 2와 7)에 첨가후 진탕한 뒤 37℃에서 3시간 배양한 후 생균수를 확인하였다. 최종 선별된 유산균은 pH 2에서 7까지 산성에 대한 내성을 확인하였다.
vaginalis에 대한 항균효과가 높은 유산균주를 선별한 뒤 장내 환경과 같은 산성 및 담즙염에 대한 생균력을 확인하기 위해 Guo의 방법 [10]으로 실험을 진행하였다. 선별된 유산균주를 MRS 배지에 24시간 전배양 한 뒤, OD₆₀₀1.0으로 조정하여 새로운 MRS 배지에 1% 접종하여 18시간 배양하였다. 배양액은 원심분리 (4,000 × g, 4℃, 5분)한 후, phosphate-buffer saline (PBS, pH 7)에 2번 세척하였고, OD₆₀₀1.
0 (10⁸-10⁹ CFU/mL)으로 조정하여 균주 현탁액 5 mL을 10초간 진탕한 뒤 5시간 동안 방치하면서 autoaggregation을 확인하였다. 실험 시작 직후 (A0)와 5시간 후 (A), 각각 0.1 mL의 상등액을 취해 0.9 mL PBS와 혼합한 뒤 600 nm에서 흡광도를 측정 (A0, A)하였고, 다음 계산식에 따라 autoaggregation 을 계산하였다.
Autoaggregation 능력은 세포 부착능을 간접적으로 확인할 수 있는 방법으로, Del [19]과 Kos[20]의 연구결과에 따르면, autoaggregation 능력이 높은 균주가 실제 세포 부착능력 또한 높다고 알려져 있다. 이에 G. vaginalis에 높은 항균능력을 보이는 9 균주를 대상으로 장내 부착성을 알아보기 위하여 autoaggregation 실험을 진행하였다(Fig. 3). 선별된 9 균주에 대한 autoaggregation 능력은 평균 50.

대상 데이터

4). L. plantarum KLB410과 L. plantarum KLB416 균주는 각각 National Center of Biotechnology Information으로부터 accession number KM670024 (KLB416), KT236093 (KLB410)을 부여받았다. L.
vaginalis)에 대한 항균력을 확인하였다. 유산균주의 배양은 MRS 배지 (Difco, MI, USA)를 사용하였으며, MRS 액체 배지에 24시간 정치배양한 배양액을 OD₆₀₀ 1.0 (10⁸ ~10⁹ CFU/mL)으로 조정하여 새로운 MRS 배지에 1% 접종하였다. 18시간 동안 배양한 후, 원심분리 (4,000 × g, 4℃, 5분) 하여 0.

이론/모형

섭취하는 유산균이 질증 개선에 효과가 있었다는 연구 [8]에 기초하여, G. vaginalis에 대한 항균효과가 높은 유산균주를 선별한 뒤 장내 환경과 같은 산성 및 담즙염에 대한 생균력을 확인하기 위해 Guo의 방법 [10]으로 실험을 진행하였다. 선별된 유산균주를 MRS 배지에 24시간 전배양 한 뒤, OD₆₀₀1.

성능/효과

2)Bile-salts tolerance results are shown as the viable counts (log CFU/mL) of each isolate at MRS media with 0 % and 1 % Oxgall at 37℃ for 24 h.
17%의 생존률을 나타내었다. KLB416은 pH 7에서 pH 4까지 생균수에 변화가 없지만, pH가 낮아질수록 생균수가 감소하는 것을 확인할 수 있었다 (Fig. 2). Guo [10]와 Tasi [15]의 연구에서도 본 연구와 유사한 결과를 확인할 수 있었다.
3% 담즙염에서 유산균들의 생균수가 104 CFU/mL 이하로 담즙염에 민감하다고 알려져 있다. 그러나 본 연구에서 선별된 9 균주들은 1 % 담즙염 농도에서도 평균 8.03 log CFU/mL의 매우 높은 생균수를 보여, 담즙염에 대해 매우 우수한 내성을 보이는 것을 확인할 수 있다.
66 log CFU/mL) 균주를 제외한 7 균주에서는 10⁴ CFU/mL 이하의 생균수를 보이는 것을 확인할수 있었다. 또한 pH 7에서의 생균수 대비 pH 2에서의 생균수가 가장 높은 균주는 KLB416으로 0.17%의 생존률을 나타내었다. KLB416은 pH 7에서 pH 4까지 생균수에 변화가 없지만, pH가 낮아질수록 생균수가 감소하는 것을 확인할 수 있었다 (Fig.
본 연구에서 G. vaginalis에 높은 항균능력을 보인 9 균주 중, 산성 환경에서 내성이 우수한 KLB416 균주와 autoaggregation 능력이 우수한 KLB410 균주의 16S rRNA gene sequencing 결과, Lactobacillus plantarum으로 동정되었다 (Fig. 4). L.
vaginalis를 대상으로 항균력 실험을 진행하였다. 분리된 유산균주 90종에 대한 G. vaginalis의 항균 효과는 평균 45.02% 였으며 이중 높은 항균력을 나타내는 9 균주 (KLB403, KLB404, KLB407, KLB 408, KLB409, KLB410, KLB411, KLB413, KLB416)의 항균 효과는 평균 99.27%이었다 (Fig. 1). 유산균은 배양과정 중 젖산, 과산화수소, 박테리오신 등을 생산하며, 이를 통해 항균 효과를 보이는 것으로 알려져 있으며 [7], 1차 선별한 9 균주는 이러한 항균물질 생산능이 다른 분리균주보다 높은 균주로 사료되며 앞으로 정확한 항균물질에 대한 연구가 필요하다.
27%였으며, 항균효과가 우수한 균주를 대상으로 추가적인 특성 확인을 위해 산성및 담즙염에 대한 내성과 autoaggregation을 확인하였다. 산성 환경에서 내성이 가장 우수한 KLB416 균주와 autoaggregation 능력이 가장 우수한 KLB410 균주는 모두 Lactobacillus plantarum으로 동정되었으며, L. plantarum은 건강기능식품의 기준 및 규격에 등재되어 있는 균주로 그 안전성이 이미 입증되어 있다. 이에 최종 선별된 L.
산성에 대한 내성실험의 결과, pH 2에서 KLB413 (4.73 log CFU/mL)과 KLB416 (4.66 log CFU/mL) 균주를 제외한 7 균주에서는 10⁴ CFU/mL 이하의 생균수를 보이는 것을 확인할수 있었다. 또한 pH 7에서의 생균수 대비 pH 2에서의 생균수가 가장 높은 균주는 KLB416으로 0.
3). 선별된 9 균주에 대한 autoaggregation 능력은 평균 50.36%였으며 이 중 KLB410 균주가 71.82%로 가장 높은 autoaggregation 능력을 나타내었다. Malik의 연구결과 [21]에 따르면, L.
산성에 대한 내성을 확인하기 위하여 유산균 희석액 1 mL를 9 mL PBS (pH 2와 7)에 첨가후 진탕한 뒤 37℃에서 3시간 배양한 후 생균수를 확인하였다. 최종 선별된 유산균은 pH 2에서 7까지 산성에 대한 내성을 확인하였다. 담즙염 내성은 1% oxgall (Difco, MI, USA)을 포함한 MRS 배지에 유산균 희석액을 1% 접종하고 37℃에 24시간 배양한 후 생균수를 확인하였다.
본 연구는 한국 여성 질에서 분리한 유산균을 통해 세균성 질 증의 치료 일환으로 주요 원인균인 Gardnerella vaginalis에 대해 항균효과를 확인하였다. 항균효과가 높은 9 균주의 G. vaginalis에 대한 평균 항균효과는 99.27%였으며, 항균효과가 우수한 균주를 대상으로 추가적인 특성 확인을 위해 산성및 담즙염에 대한 내성과 autoaggregation을 확인하였다. 산성 환경에서 내성이 가장 우수한 KLB416 균주와 autoaggregation 능력이 가장 우수한 KLB410 균주는 모두 Lactobacillus plantarum으로 동정되었으며, L.

후속연구

plantarum CMPG5300의 in vitro 상의 autoaggregation이 약 70%로 나타났으며, in vivo 상인 질 상피세포에서의 부착능도 50%로 in vitro 상의 결과와 in vivo 상의 결과가 연관되어 진다고 보고되었다. 세포부착능이 뛰어난 균주는 세포에 자리를 잡아 병원균의 세포 부착을 막아 감염을 막는 특성을 가지는 것으로 알려져 있으며 [7], 본 연구에서 선별된 KLB410 균주 또한 질 내 세포에 높은 부착능력을 통해 추가적인 병원균 감염을 예방할 수 있을 것이라 사료된다.
1). 유산균은 배양과정 중 젖산, 과산화수소, 박테리오신 등을 생산하며, 이를 통해 항균 효과를 보이는 것으로 알려져 있으며 [7], 1차 선별한 9 균주는 이러한 항균물질 생산능이 다른 분리균주보다 높은 균주로 사료되며 앞으로 정확한 항균물질에 대한 연구가 필요하다.
plantarum은 건강기능식품의 기준 및 규격에 등재되어 있는 균주로 그 안전성이 이미 입증되어 있다. 이에 최종 선별된 L. plantarum KLB410 균주와 L. plantarum KLB416 균주는 향후 질 건강을 위한 프로바이오틱스 개발 분야에 주요한 소재자원으로 활용될 수 있을 것이라 기대된다. 추후 선별된 유산균주는 프로바이오틱스로 개발하기 위하여 위액과 장액에서의 안정성 실험 및 동결 건조 보호제 최적화 연구를 진행할 것이다.
plantarum KLB416 균주는 향후 질 건강을 위한 프로바이오틱스 개발 분야에 주요한 소재자원으로 활용될 수 있을 것이라 기대된다. 추후 선별된 유산균주는 프로바이오틱스로 개발하기 위하여 위액과 장액에서의 안정성 실험 및 동결 건조 보호제 최적화 연구를 진행할 것이다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	세균성 질증이란?	세균성 질증 (bacterial vaginosis)이란 질 내의 건강을 유지하는 유산균총이 감소하여 혐기성 병원균인 Gardnerella vaginalis, Mycoplasma hominis, Prevotella spp. 등이 질 내에서 증식하면서 발생하게 되는 질병이다 [1]. 질 내에서 혐기성 병원균이 증식하게 되면 질 내 휘발성 아민 화합물이 증가하며, 이는 세균성 질증 특유의 악취를 유발하게 된다 [2].
	질 내에서 혐기성 병원균이 증식하게 되면 어떤 현상이 나타나는가?	등이 질 내에서 증식하면서 발생하게 되는 질병이다 [1]. 질 내에서 혐기성 병원균이 증식하게 되면 질 내 휘발성 아민 화합물이 증가하며, 이는 세균성 질증 특유의 악취를 유발하게 된다 [2]. 또한 산성으로 유지되는 질 내 산도가 높아져 임신 관련 질병 및 성병 감염의 위험을 높인다고 알려져 있다 [3,4].
	질증의 치료를 위해 항생제를 복용 또는 주입하는 방법 대신에 사용할 수 있는 방법은?	이러한 세균성 질증의 치료는 주로 metronidazole, clindamycin 등의 항생제를 복용 또는 주입하는 방법이 사용되고 있지만, 지속적으로 재발하는 문제점이 있다 [5]. 따라서 기존의 항생제 사용의 보완방안으로 병원균의 제거뿐만 아니라 질 내 환경을 개선하여 세균성 질증이 재발하는 것을 방지하는 방안 등이 연구되고 있으며, 그 대안 방안으로 살아 있는 생균제인 프로바이오틱스를 사용하는 방법이 주목을 받고 있다 [6]. 건강한 여성의 질에는 다양한 유산균들이 존재하는데, 이러한 유산균들은 젖산을 생성하고 아민 화합물을 분해하여 질 내 산도를 낮추며, 과산화수소, 박테리오신 등의 항균물질을 생산하여 병원균 감염을 막고 질 내 환경을 건강하게 유지시킨다 [7].

참고문헌 (23)

Mastromarino, P., B. Vitali, and L. Mosca (2013) Bacterial vaginosis: A review on clinical trials with probiotics. New Microbiologica 36: 229-238.

상세보기
Chen, K. C., P. S. Forsyth, T. M. Buchanan, and K. K. Holmes (1979) Amine content of vaginal fluid from untreated and treated patients with nonspecific vaginitis. J. Clin. Invest. 63: 826-835.
Verstraelena, H., and A. C Senok (2005) Vaginal lactobacilli, probiotics, and IVF. Reprod. Biomed. Online 11: 674-675.

상세보기
Wiesenfeld, H. C, S. L. Hillier, M. A. Krohn, D. V. Landers, and R. L. Sweet (2003) Bacterial vaginosis is a strong predictor of Neisseria gonorrhoeae and Chlamydia trachomatis infection. Clin. Infect. Dis. 36: 663-668.

상세보기
Bradshaw, C. S., A. N. Morton, J. Hocking, S. M. Garland, M. B. Morris, L. M. Moss, L. B. Horvath, I. Kuzevska, and C. K. Fairley (2006) High recurrence rates of bacterial vaginosis over the course of 12 months after oral metronidazole therapy and factors associated with recurrence. J. Infect. Dis. 193: 1478-1486.

상세보기
Falagas, M. E., G. I. Betsi, and S. Athanasiou (2007) Probiotics for the treatment of women with bacterial vaginosis. Clin. Microbiol. Infect. 13: 657-664.

상세보기
Borge, S., J. Silva, and P. Teixeira (2013) The role of lactobacilli and probiotics in maintaining vaginal health. Arch. Gynecol. Obstet. 289: 479-489.
Bastani, P., A. Homayouni, S. Ziyadi, and V. G. Tabrizian (2012) Dairy Probiotic Foods and Bacterial Vaginosis: A Review on Mechanism of Action. pp. 445-456. In: Probiotics, Rigobelo, E. C. (Ed.), Intech., USA.
Chang, C. E., S. I. Pavlova, L. Tao, E. Kim, S. C. Kim, H. S. Yun and J. S. So (2002) Molecular Identification of Vaginal Lactobacillus spp. Isolated from Korean Women. J. Microbiol. Biotechnol. 12: 312-317.

상세보기
Guo, X. H., J. M. Kim, H. M. Nam, S. Y. Park and J. M. Kim (2010) Screening lactic acid bacteria from swine origins for multistrain probiotics based on in vitro functional properties. Anaerobe 16: 321-326.

상세보기
Kassa, I. A., M. Hamze, D. Hober, N. E. Chihib and D. Drider (2014) Identification of Vaginal Lactobacilli with Potential Probiotic Propertied Isolated from Women in North Lebanon. Microb. Ecol. 67: 722-734.

상세보기
Borchardt, K. A., B. S. Adly, R. F. Smith, J. Eapen, and C. B. Beal (1989) Importance of Gardnerella vaginalis as an aetiological agent in bacterial vaginosis. Genitourin. Med. 65: 285.
Machado, A., K. K. Jefferson, and N. Cerca (2013) Interactions between Lactobacillus crispatus and Bacterial Vaginosis (BV)-associated bacterial species in initial attachment and biofilm formation. Int. J. Mol. Sci. 14: 12004-12012.

상세보기
Dunne, C., L. O'Mahony, L. Murphy, G. Thornton, D. Morrissey, S. O'Halloran, M. Feeney, S. Flynn, G. Fitzgerald, C. Daly, B. Kiely, G. C. O'Sullivan, F. Shanahan, and J K. Collins (2001) In vitro selection criteria for probiotic bacteria of human origin: Correlation with in vivo findings. Am. J. Clin. Nutr. 73: 386S-392S.

상세보기
Tasi, C. C., H. Y. Hsih, H. H. Chiu, Y. Y. Lai, J. H. Liu, B. Yu (2005) Antagonistic activity against Salmonella infection in vitro and in vivo for two Lactobacillus strains from swine and poultry. Int. J. Food Microbiol. 102: 185-194.

상세보기
Mishra, V., and D. N. Prasad (2005) Application of in vitro methods for selection of Lactobacillus casei strains as potential probiotics. Int. J. Food Microbiol. 103: 109-115.

상세보기
Gilliland, S. E., T. E. Staley, and L. J. Bush (1984) Importance of bile tolerance of Lactobacillus acidophilus used as a dietary adjunct. J. Dairy Sci. 67: 3045-5301.

상세보기
Lin, W. H., C. F. Hwangb, L. W. Chenc, and H. Y. Tsen (2006) Viable counts, characteristic evaluation for commercial lactic acid bacteria products. Food Microbiol. 23: 74-81.

상세보기
Del, R. B. Sgorbati, M. Moglioli and D. Palenzona (2000) Adhesion, autoaggregation and hydrophobicity of 13 strains of bafidobacterium longum. Lett. Appl. Microbiol. 31:438-442.

상세보기
Kos, B., J. Suskoviae, S. Vukoviae, M. Simpraga, J. Frece and S. Matosiae (2003) Adhesion and aggregation ability of probiotic strain Lactobacillus acidophilus M92. J. Appl. Microbiol. 94: 981-987.

상세보기
Malik, S., M. I. Petrova, I. J. J. Claes, T. L. A. Verhoeven, P. Busschaert, M. Vaneechoutte, B. Lievens, I. Lambrichts, R. J. Siezen, J. Balzarini, J. Vanderleyden and S. Lebeer (2013) The highly autoaggregative and adhesive phenotype of the vaginal Lactobacillus plantarum strain CMPG5300 is sortase dependent. Appl. Environ. Microbiol. 79: 4576-4585.

상세보기
Kleerebezem, M., J. Boekhorst, R. van Kranenburg, D. Molenaar, O. P. Kuipers, R. Leer, R. Tarchini, S. A. Peters, H. M. Sandbrink, M. W. E. J. Fiers, W. Stiekema, R. M. K. Lankhorst, P. A. Bron, S. M. Hoffer, M. N. N. Groot, R. Kerkhoven, M. de Vries, B. Ursing, W. M. de Vos, and R. J. Siezen (2003) Complete genome sequence of Lactobacillus plantarum WCFS1. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 100: 1990-1995.

상세보기
Ministry of Food and Drug Safety, The standard for health functional food. http://www.mfds.go.kr. (2014).

저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증