[논문]계작지모가우슬탕(桂芍知母加牛膝湯) 약침이 류마티스 관절염 생쥐에 미치는 영향

정순현; 조종관; 김소연; 김영일

계작지모가우슬탕(桂芍知母加牛膝湯) 약침이 류마티스 관절염 생쥐에 미치는 영향
A Study on the Effect and Mechanism of Gamikyejakjimogawusul-tang Herbal Acupuncture on Induced Rheumatoid Arthritis model of DBA/1 mice 원문보기

論文集 : 大田大學校韓醫學硏究所. 韓醫學編, v.24 no.2, 2016년, pp.35 - 57

정순현 , 조종관 , 김소연 () , 김영일 (대전대학교 부속 둔산한방병원 침구의학과)

Abstract ▼ AI-Helper

Objectives : The purpose of this study is to prove the effect and mechanism of Gamikyejakjimogawusul-tang(GKHA) herbal acupuncture on induced rheumatoid arthritis model of DBA/1 mice. Methods : We check effect of GKHA extract on the AST, ALT, Creatinine, BUN of serum and cell viability of GK extract in RAW 264.7 cells to test the stability of this study. In vitro, we measure total phenol contents, total flavonoid contents, DPPH free radical scavenging activity, ABTS cation radical scavenging activity of Gamikyejakjimogawusul-tang, effect of GK extract on ROS(Reactive Ooxygen Species) production to estimate a anti-oxidant capacity, and we also measure effect of GK extract on NO (Nitric Oxid), IL-$1{\beta}$, IL-6, IL-17, IL-21, TNF-${\alpha}$, MCP-1, GM-CSF production in RAW 264.7 cells to estimate a anti-inflammatory efficacy. In vivo, we compare a rheumatoid arthritis manifestation between control and experimental group and estimate a AI. Then we check effect of GKHA on the level of WBC, neutrophil, lympocyte, monocyte in the blood to see the effect of immune cells in blood. In addition we measure effect of GKHA on the level of hs-CRP, IgM, IgG, IL-$1{\beta}$, IL-6, IL-17, IL-21, TNF-${\alpha}$, MCP-1, GM-CSF in serum. We observe effects of GKHA on imaging of cartilage degeneration using micro CT-arthrography in paw hind. And we calculate effects of GKHA that reduced BV ratio, BS/BV ratio using 3D Micro-CT. Lastly we observe effects of GKHA histopathologic examination analysis. Results : 1. The toxicity on liver and kidney was disregardable and the cytotoxicity against RAW 264.7 cells was also disregardable. 1. Total phenol contents and total flavonoid contents in GK extract were in high level. 2. DPPH free radical scavenging activity and ABTS cation radical scavenging activity were increased according to concentration of GK extract 3. ROS production was significantly decreased in GK extract (at 10, $100{\mu}g/ml$). 4. NO, IL-6, TNF-${\alpha}$, MCP-1 production were significantly decreased in GK extract(at 10, $100{\mu}g/ml$). IL-17, GM-CSF production were significantly decreased in GK extract(at 1, 10, $100{\mu}g/ml$). IL-$1{\beta}$, IL-21 production were also decreased but there was no statistical significance. 5. 25x observation after H&E and M-T staining, infiltration of immune cells and subsidence of the cartilage and damage to the synovial cells were decreased. Conclusions : This study showed that GKHA extract had anti-oxidant capacity, anti-inflammatory efficacy. GKHA extract also had inhibiting effect on the process of rheumatoid arthritis and can protect joint and cartilage. So we expect that GKHA extract can be a meaningful treatment to rheumatoid arthritis patients.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

이에 저자는 桂芍知母湯에 기존 연구에서 골관절염에 효과가 있다고 증명된 牛膝^12-14)을 加한 桂芍知母牛膝湯의 약침 투여가 류마티스 관절염에 효과가 있는지를 규명하고자 In vitro에서 桂芍知母加牛膝湯 추출액의 항산화효능과 NO 및 IL-1β, IL-17, TNF-α 등의 사이토카인과 케모카인의 생성량을 측정하여 항염증효능을 측정하였고, 3D μCT를 통한 관절 상태, 골밀도, 관절염증 정도 측정과 병리조직학적 변화를 측정하여 유의한 결과를 얻었기에 보고하는 바이다.

제안 방법

이에 본 연구에서는 안전성 검사를 위해 간 기능, 신장 기능, 세포독성을 측정하였고, In vitro에서 항산화 효능 측정을 위해 총 phenol 함량, 총 flavonoid 함량, DPPH radical 소거능, ABTS radical 소거능, ROS 생성량을 측정하였고, 항염증 효능 측정을 위해 NO 생성량, IL-1β, IL-6, IL-17, IL-21, TNF-α, MCP-1, GM-CSF의 생성량을 측정하였다. 관절에 미치는 영향을 확인하기 위해서 3D μCT를 통해 관절 상태, 골밀도, 관절 염증 정도를 측정하고 병리조직학적 검사를 시행하였다.

대상 데이터

본 실험에 사용한 桂芍知母加牛膝湯(Gamikyejakjimogawusul-tang 이하, GK로 표기)의 구성 약재들은 ㈜옴니허브에서 구입하였고 대전대학교 TBRC-RIC에서 구입하여 정선 후 사용하였고, 그 내용과 분량(1첩)은 다음과 같다(Table 1).
실험동물인 수컷 5주령의 DBA/1 생쥐 (16∼22 g)는 ㈜중앙실험동물에서 공급 받아 실험 당일까지 고형사료 (㈜퓨리나)와 물을 충분히 공급하고 온도 22 ± 2℃, 습도 55 ± 15%, 12시간-12시간(light-dark cycle)의 환경에서 2주간 적응시킨 후 실험에 사용하였다. 본 실험은 대전대 동물실험윤리 위원회의 승인(승인번호– DJUARB204-014)을 받아 동물윤리준칙에 의거하여 실험하였다.

데이터처리

실험 결과는 SPSS 11.0의 student's t-test 및 ANOVA를 사용하여 통계처리 하였으며 p<0.05, p<0.01 및 p<0.001 수준에서 유의성을 검정하였다.

성능/효과

이상의 실험 결과를 종합하면, 桂芍知母加牛膝湯이 RAW 264.7 세포에서 항산화 작용과 항염증 작용을 함을 알 수 있었고, 桂芍知母加牛膝湯의 약침 투여가 류마티스 관절염을 유발된 DBA/1 생쥐에서 혈청 내 사이토카인 및 케모카인의 생성과 유전자 발현을 억제하고, 류마티스 관절염의 증상 호전에 효과가 있음을 확인하였다. 또한 관절, 연골, 활막세포의 변형 및 손상을 억제시키고 골밀도를 증가시켜 관절을 보강하고 관절염의 진행을 저해하는 효과를 확인하였기에 桂芍知母加牛膝湯의 약침 투여가 류마티스 관절염의 치료법으로서 가능성이 있다고 사료된다.

후속연구

또한 관절, 연골, 활막세포의 변형 및 손상을 억제시키고 골밀도를 증가시켜 관절을 보강하고 관절염의 진행을 저해하는 효과를 확인하였기에 桂芍知母加牛膝湯의 약침 투여가 류마티스 관절염의 치료법으로서 가능성이 있다고 사료된다. 향후 이 치료법을 임상에 활용한 추가연구가 필요할 것으로 사료된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	류마티스 관절염이란?	류마티스 관절염은 관절 내 대식세포 및 T 세포 등 염증세포의 침윤 및 활막의 이상증식을 특징으로 하는 전신질환으로, 분비되는 염증성 사이토카인들이 중요한 인자로 작용하여 관절의 변형이 유발된다.1) 일반적으로 인구의 1%가 류마티스 관절염에 이환되고, 여성이 남성에 비해 2.
	염증성 사이토카인에 의해 어떠한 것이 유발되는가?	류마티스 관절염은 관절 내 대식세포 및 T 세포 등 염증세포의 침윤 및 활막의 이상증식을 특징으로 하는 전신질환으로, 분비되는 염증성 사이토카인들이 중요한 인자로 작용하여 관절의 변형이 유발된다.1) 일반적으로 인구의 1%가 류마티스 관절염에 이환되고, 여성이 남성에 비해 2.
	류마티스 관절염의 한의학적 치법은?	류마티스 관절염의 증상으로 볼 때 한의학에서는 이를 痺症과 歷節風의 범주에 포함시킬 수 있는데 痺症은 肢體, 關節의 疼痛, 酸楚, 麻木, 重着, 活動障碍 등의 증상을 보이며5), 歷節風은 관절이 붓고 심한 疼痛을 호소하며 관절이 屈伸不利하는 것을 특징으로 하는 병으로 紅腫, 下肢腫痛, 脚腫如脫, 手指變曲, 夜間痛甚 등의 증상이 나타난다.6) 食傷, 勞倦, 痰飮, 瘀血에 의해 氣血이 부족해지고 精氣가 허약해진 상태에서 風寒濕熱邪가 침입하여 발생하기 때문에 調補氣血, 補腎助陽, 滋陰養肝하는 치법을 사용한다.7)

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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