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NTIS 바로가기KSBB Journal, v.31 no.1, 2016년, pp.33 - 39
정승아 (인천대학교 생명공학부) , 이원종 (인천대학교 생명공학부)
Developing the method for the selection of animal cell line producing therapeutic monoclonal antibody (mAb) is invaluable as its market is rapidly growing. Although the quality of produced mAb is as important as quantity, however there is no method developed for the selective screening of cell lines...
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핵심어 | 질문 | 논문에서 추출한 답변 |
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경쇄와 중쇄 mRNA의 비율이 1.5이하인 경우 생산성에는 어떠한 변화가 나타나는가? | 이와 더불어 경쇄와 중쇄 mRNA의 비율이 1.5이하인 경우, 발현된 항체 단백질의 응집 (aggregation) 비율이 높아져 생산성이 떨어지게 됨을 확인하였다. 즉, 경쇄 (Light Chain)와 중쇄의 mRNA 양적 비율이 생산되는 단일클론항체의 양은 물론 품질 (Quality)을 결정하는 중요한 변수가 된다 [3-9]. | |
MB의 장점은 무엇인가? | 그러나 target mRNA가 존재하는 경우 MB loop 부분과 target이 상보적으로 결합하여 stem 부분이 열리게 되며, 이때 quencher와 fluorescence dye가 멀어지게 되어 형광을 나타낸다. 따라서 MB는 target mRNA의 존재 유무에 따라 on/off 신호를 줄 수 있기 때문에 살아 있는 세포 내에서 target mRNA와 결합하지 않은 MB를 분리할 필요가 없으며, 결합 특이성이 상당히 높기 때문에 살아 있는 세포에서의 mRNA 검출에 유용하게 사용될 수 있다 (Fig. 1) [10-21]. | |
단일클론항체의 양과 질을 기반으로 세포주를 선별 하는 기술을 위해 요구되는 해결책은 무엇인가? | 그러나 앞서 언급하였듯이 현재 세포에서 생산되는 단일클론항체의 양과 질을 기반으로 세포주를 선별 하는 기술은 존재하지 않는다. 이를 위해서는 살아 있는 세포 내부에서 경쇄와 중쇄의 mRNA를 동시에 검출하는 기술개발이 필요하다. 본 연구에서는 oligonucleotide probe인 molecular beacon (MB)을 이용하여 인간 단일클론항체의 경쇄와 중쇄 mRNA를 살아 있는 세포에서 검출하는 기술을 개발하였다. |
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